0805《园艺植物生物技术》网上作业题及答案.docx

1、0805园艺植物生物技术网上作业题及答案（0805）园艺植物生物技术网上作业题及答案1：第一批作业2：第二批作业3：第三批作业4：第四批作业5：第五批作业6：第六批作业1：论述题5、如何对转入植物基因组中的外源目的基因进行检测？参考答案：答：（1）对转入的目的基因序列片段进行检测。包括两种手段：一是PCR方法检测外源基因；二是用Southern杂交方法，以目的基因DNA为探针，检测植物基因组中与其同源的部分。常见有Southern斑点杂交和Southern印迹杂交两种。（2）转入目的基因的RNA转录水平检测。包括两种方式：一是Northern杂交, 通过总RNA或mRNA与探针的杂交来分析；二

2、是RT-PCR，以植物总RNA或mRNA为模板进行反转录，然后经PCR扩增目的基因特异条带。（3）外源基因表达蛋白的检测。外源基因编码蛋白在转基因植物中能够正常表达并表现出应有的功能乃是植物基因转化的最终目的。外源基因表达蛋白检测主要利用免疫学原理，主要采用ELISA检测、Western杂交检测。ELISA检测程序包括抗体制备、抗体或抗原的包被、免疫反应及检出三个阶段。Western杂交程序包括转基因植株蛋白提取、SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分离蛋白质、蛋白质条带印迹、探针制备、杂交检出五个步骤。2：论述题4、分子标记主要在园艺植物哪些方面应用？参考答案：答：（1）种质资源的遗传多样性分析及亲缘

3、关系研究。采用比较植物学特征并结合细胞学、孢粉学和同工酶学等方法进行评价和分类都有其局限性。近十多年来发展起来的分子标记技术为种质资源的遗传多样性分析及亲缘关系研究开辟了广阔的前景。（2）遗传图的构建和基因定位。遗传图谱是遗传研究的重要内容，又是种质资源、育种及基因克隆等许多应用研究的理论依据和基础。分子标记为构建高饱和度的连锁图提供了有力的工具。（3）分子标记辅助选择育种，提高育种效率。（4）核心种质筛选。分子标记可以在DNA水平上直接反映种质资源的基因型和遗传结构，具有受环境影响较小、检测快速、多态性高等优点，在园艺植物核心种质构建中得到了越来越多的应用。（5）品种鉴定与纯度分析。分子标记

4、是在基因水平上的品种鉴定和种子纯度检验无组织器官特异性，不受环境的影响，准确度高、重复性好。3：论述题3、一个完整的组织培养室由哪些部分所构成？参考答案：答：（1）洗涤室。洗涤室用于组织培养用的玻璃器皿、塑料器皿和其他实验用具清洗。（2）储存室。用于各类器皿和用具的存放与保管。配备各种规格的货架、货柜、塑料框等。（3）培养基配制室。培养基配制室主要用来完成培养基配制的各个环节的工作，如药品的称量、溶解，培养基的配制和分装等。（4）灭菌室。灭菌室用于培养基、玻璃器皿及接种工具的灭菌。（5）接种室。（6）培养室。培养室要求卫生清洁、保温和隔热效果要好。窗户用双层玻璃，以利于隔热保温，还可防止灰尘、

5、昆虫及微生物的进入，达到清洁效果。（7）研究室。 研究室用于对培养材料及培养结果进行观察、鉴定、记录和分析。（8）温室或苗圃。 温室用来对培养的再生植株的驯化和移栽。4：论述题2、cDNA文库的构建包括哪些步骤？参考答案：答：（1）、RNA提取及mRNA分离和纯化。首先进行总RNA的提取，该步骤关键的因素是要抑制RNA酶的活性，建立一个无RNA酶的环境和抑制材料内部RNA酶的活性对于制备优质RNA十分重要。总RNA的提取后进行mRNA分离和纯化，通过亲和层析的方法将mRNA同其他的RNA分离开来。（2）、cDNA合成。cDNA第一链合成可用人工合成的2-20个核苷酸长的oligo(dT)为引物

6、或长度为6-10核苷酸，由4种碱基随机组成的DNA片段(混合物)，作为合成第一链cDNA的引物。cDNA第二链合成可利用cDNA第一链末端(3端)常常出现发夹环的特征进行第二链的合成或用大肠杆菌RNaseH(核糖核酸酶H)降解取代法。（3）、将cDNA装配到载体上。用于构建cDNA文库的载体主要有质粒、噬菌体和柯斯质粒，其中质粒载体可插入片段较小，而噬菌体和柯斯质粒可以插入较大的外源DNA片段。（4）、文库滴度测定和扩增。噬菌体文库在建成后要进行库容量检测和进一步扩增保存。1个完整的cDNA文库至少应含有1106个克隆才能保证其中含有每一个单拷贝的mRNA。文库扩增便于多次使用或相互交流。5：

7、论述题1、植物培养基由哪些成分构成，具有何作用？参考答案：（1）、无机营养成分。主要包括氮、磷、硫、钾、钙、镁、铁、锰、铜、锌、硼、钼及碳、氢、氧等大量元素与微量元素。（2）、有机成分。为了不同的培养目的往往要加入一些有机物如维生素类和氨基酸类等有机成分，以利培养材料的快速生长。离体培养的植物材料常用的碳源是蔗糖。（3）、生长激素。 植物组织培养细胞分裂的启动、愈伤组织的生长以及根、芽的分化或胚状体的发育等必须辅以适当种类和适当浓度的植物激素。生长素的生理作用主要是促进细胞伸长和分裂。在组织培养中常用于诱导根的分化和细胞分裂，与一定量的细胞分裂素配合使用，可诱导不定芽的分化、侧芽萌发与生长以及

8、诱导胚状体产生。细胞分裂素主要是促进细胞分裂，诱导愈伤组织，促进器官分化不定芽及解除顶端优势促进腋芽萌发。(4) 琼脂、pH及其他成分。 琼脂是一种由海藻获得的多糖类物质，是固体培养最好的固化剂，本身并不提供任何营养。离体培养的植物材料大多数要求弱酸性的环境，需要的pH在 50-60之间。 在培养基中往往因培养目的不同、植物材料不同，而加入一些成分，较常见的有活性炭、抗氧化剂、抗生素、诱变剂等。1：论述题1、园艺植物组织培养的作用体现在哪些方面？参考答案：答：（1）、快速繁殖。离体培养方法已成为一些园艺植物良种繁育的一种有力手段，可产生了明显的经济效益。（2）、脱毒种苗培养。（3）、提高育种效

9、率，改良品种。A、培育单倍体；B、胚与胚乳培养；C、与常规育种技术相结合，提高育种成效。（4）、种质资源保存。（5）、进行生理生化，细胞学，遗传学等领域的基础研究。2：论述题2、理想的遗传标记应具备的特点？参考答案：答： （1）、 多态性高，标记数目多，提供的信息量大。（2）、共显性遗传，能区分纯合基因型与杂合基因型。（3）、呈现中性，不影响目标性状表达，与不良性状无必然连锁。（4） 、表现稳定，不受植株内外环境的影响。（5）、经济方便，易于观察记载。3：论述题3、转基因沉默的原因及对策？参考答案：答：转基因在受体植物中往往不能稳定表达，有时甚至完全不表达，出现转基因沉默现象。转基因沉默的原因

10、是多方面的，根据外源基因失活或沉默的分子机制，可将其分为三类：位置效应、转录水平的基因沉默（TGS)和转录后水平的基因沉默(PTGS)。防止基因沉默的对策主要从以下方面实现：（1）转化载体中应尽量避免使用相同的启动子及重复序列并保证载体上的构建序列在同一个方向阅读以免产生异常或反义RNA，尽量使用植物偏爱密码子。（2） 使用去甲基化试剂。（3）转基因的侧翼接上核基质结合序列(MAR)会在一定程度上避免位置效应，提高基因表达。（4）将外源DNA整合到染色体的特定位点上。4：论述题4、在植物病毒检测中将涉及到单克隆抗体的制备，简述制备的基本步骤？参考答案：答：（1）免疫注射。 用病毒抗原免疫注射实

11、验用小白鼠。（2）细胞融合。取免疫小白鼠的脾细胞与骨髓瘤细胞进行共培养，使两者融合，获得杂交瘤细胞。（3）克隆化。 采用稀释法，取单细胞在培养板中进行培养。（4）、 筛选。采用血清学方法，用已知的抗原病毒对单细胞培养液中的抗体进行检测，保留抗体分泌阳性的单细胞系。（5）抗体生产。可用一定浓度的杂交瘤细胞注射小白鼠腹腔，使其产生腹水，取腹水离心后获得含抗体的腹水。或将所获的杂交瘤细胞株在盛有培养液的培养瓶中进行培养，获得含单克隆抗体的培养液。5：论述题5、简述热处理脱病毒的原理和方法。参考答案：答：热处理脱毒的原理是利用病毒类病原与植物的耐热性不同，将植物材料在高于正常温度的环境条件下处理一定的

12、时间，使植物体内的病原失去活性或钝化病毒，使病毒在植物体内的增殖和扩散速度减缓，而植物的生长受到较小的影响或在高温下生长加快，这样植物的新生部分不带病毒，取该无病毒组织培育即可获得无病毒植株。热处理的方法包括（1）温汤浸渍处理。温汤浸渍处理(或热水处理)是将带病毒的植物材料置于一定温度的热水中浸泡一定的时间(通常不少于30 min)，直接杀死病原菌，适合于休眠器官及接穗等的处理。（2）高温空气处理。一般将待处理品种嫁接在较耐高温的砧木上，在37左右条件下进行一定时间的处理。高温空气处理后植株新梢顶端不带病毒，但是这种处理不能使病毒完全失活，停止处理一段时间，病毒即可扩散至整个植株。因此，处理后

13、应立即取新梢嫁接才可获得脱病毒植株。6：论述题6、转基因食品评价的内容包括哪些方面？参考答案：答： (1)、有毒物质。转基因食品不应比其他同种可食食物含有更多的毒素，必须确保转入外源基因或基因产物对人畜无毒。 (2)、过敏源。主要分析基因的来源、目标蛋白与已知过敏源的序列同源性、目标蛋白与已知过敏患者血清中IgE能否发生免疫反应，另外还要考虑营养物质和抗营养因子的含量等。（3）营养问题。外源基因可能对食品的营养价值产生无法预期的改变，其中有些营养降低而另一些营养增加。（4）对抗生素的抵抗作用。遗传工程体中引入的抗生素抗性基因是否有可能转移到胃肠道的微生物或上皮细胞中，并成功地结合和表达，从而对

14、抗生素产生抗性，影响到人或动物的安全。1：判断题1、pUC质粒载体可以容忍插入比噬菌体载体更长的外源DNA片段。参考答案：错误2：判断题2、RAPD标记是指简单重复序列标记，主要检测真核生物的基因组中普遍存在着二核苷酸、三核苷酸或四核苷酸的简单串联重复序列尤其是(CA)重复序列。参考答案：错误3：判断题3、原生质体分离所使用的各种酶液配好后应进行高温高压灭菌处理。参考答案：错误4：判断题4、Western杂交是针对转基因生物外源目的基因RNA转录水平的检测。参考答案：错误5：判断题5、White首先建立了世界上第一例人工合成培养基。参考答案：正确6：判断题6、分子标记是遗传标记的一种形式。参考

15、答案：正确7：判断题7、花粉培养可以获得单倍体植株。参考答案：正确8：判断题8、基因组文库和cDNA文库的概念是等同的。参考答案：错误9：判断题9、抗体与抗原的结合是特异性的，一种抗体分子只能与其对应的抗原结合。参考答案：正确10：判断题10、培养基进行灭菌处理时，其灭菌效果取决于压力的大小。参考答案：错误11：判断题11、生物安全概念实际上就是指的转基因生物安全。参考答案：错误12：判断题12、世界上第一例植物人工合成培养基是由Murashige和Skoog建立的。参考答案：错误13：判断题13、双子叶植物的基因转化一般用含Ti质粒的农杆菌转化法进行。参考答案：正确14：判断题14、荧光素双

16、醋酸酯(FDA)检测原生质体活性时，具有活力的原生质体在紫外线照射下发出绿色荧光。参考答案：正确15：判断题15、植物病毒都可通过嫁接传染。参考答案：正确1：填空题填空题1、我国首例商品化生产的转基因园艺植物是 .参考答案：番茄-百日鲜2：填空题填空题2、通过花粉培养可以获得 植株，在植物育种中具有重要价值。参考答案：单倍体3：填空题填空题3、通过花粉培养可以获得 植株，在植物育种中具有重要价值。参考答案：单倍体4：填空题填空题4、对培养基的灭菌一般采用湿热高温高压灭菌法，灭菌的温度为 。参考答案：1215：填空题填空题5、植物原生质体是指不含 的植物细胞。参考答案：细胞壁6：填空题填空题6、

17、原生质体主要的培养方法有三种：液体浅层培养法、固体培养法和 。参考答案：固液双层培养法7：填空题填空题7、血清学检测病毒的原理是 。参考答案：抗原-抗体反应8：填空题填空题8、热处理脱毒的原理是利用病毒类病原与植物的 不同。参考答案：耐热性9：填空题填空题9、图位克隆法需要对目的基因进行定位，定位的主要途径是通过 技术。参考答案：分子标记10：填空题填空题10、基因文库主要包括基因组文库和 两种。参考答案：cDNA文库11：填空题填空题11、用农杆菌转化植物时，需要在植物再生培养基中添加 ，防止细菌过度生长而产生污染。参考答案：抑菌性抗生素12：填空题填空题12、Ti质粒和Ri质粒上存在一个特

18、定的被称为 区段，它能共价的插入并整合到植物染色体组中。参考答案：T- DNA13：填空题填空题13、我国颁布的第一部与转基因植物有关的条例是 。参考答案：基因工程安全管理办法14：填空题填空题14、原生质体诱发融合包括NaNO3法、高pH-高钙法、PEG法、 及微融合。参考答案：电融合15：填空题填空题15、噬菌体载体有两种类型，即 和置换型。参考答案：插入型16：填空题填空题16、最早记载的植物病毒是 。参考答案：郁金香杂色病17：填空题填空题17、病毒抗血清是用纯化的 注射免疫动物获得的。参考答案：病毒抗原18：填空题填空题18、热处理脱毒的原理是利用病毒类病原与植物的 不同。参考答案：

19、耐热性19：填空题填空题19、常用于琼脂糖凝胶电泳DNA显色的物质是 。参考答案：溴化乙锭20：填空题填空题20、世界上首例转座子是在玉米中发现的 。参考答案：Ac/Ds 转座子1：填空题填空题20、经济发展合作组织(OECD)1993年提出了食品安全性评价的 原则。参考答案：实质等同性2：填空题填空题19、农杆菌介导的植物遗传转化主要使用来源于 和发根农杆菌的工程载体。参考答案：根癌农杆菌3：填空题填空题18、 年，世界首例转基因植物培育成功。参考答案：1983年4：填空题填空题17、常见用于分子连锁遗传图谱构建的作图群体有临时群体和永久群体，其中的DH群体属于 。参考答案：永久群体5：填空

20、题填空题16、SSR标记是 （显性/共显性）标记。参考答案：共显性6：填空题填空题15、PCR技术中常用的DNA聚合酶是 。参考答案：Taq DNA聚合酶7：填空题填空题14、茎尖培养脱病毒的原理是病毒在植物体内分布不均匀，在顶端生长点的 病毒浓度低，大部分细胞不带病毒。参考答案：分生组织8：填空题填空题13、由免疫动物的单细胞系所产生的抗体称为 。参考答案：单克隆抗体9：填空题填空题12、1953年，美国分子生物学家沃森（Watson）和英国分子生物学家克里克（Crick）根据X射线衍射分析提出了著名的 。参考答案：DNA右手双螺旋结构模型10：填空题填空题11、目前植物离体培养中最常用和使

21、用范围最广的一种培养基是 。参考答案：MS培养基11：填空题填空题10、德国植物生理学家Haberlandt（哈布兰特）提出了 学说。参考答案：植物细胞全能性12：填空题填空题9、离体培养的植物材料常用的碳源是 。参考答案：蔗糖13：填空题填空题8、对维生素、蛋白质、多肽、生长因子等无法用高温高压灭菌的物质，一般用过滤的方式灭菌，过滤器所使用滤膜的孔径为 的滤膜可以除去细菌和霉菌。参考答案：0.22m14：填空题填空题7、净化工作台无菌风送风方式主要有垂直送风和 。参考答案：水平送风15：填空题填空题6、世界上第一例通过植物花药培养获得单倍体植株是由印度科学家培养 植物花药得以实现。参考答案：

22、曼陀罗16：填空题填空题5、从生物技术角度看，园艺作物种苗的生产中利用最为广泛的技术是 。参考答案：茎尖病毒脱除技术17：填空题填空题4、发根农杆菌侵染植物后，会诱使植物细胞产生许多 。参考答案：发状根18：填空题填空题3、世界上转基因植物种植面积最大的国家是 。参考答案：美国19：填空题填空题2、与pBR322等环状质粒不同，噬菌体为 双链DNA分子。参考答案：线状20：填空题填空题1、RNA提取过程中的关键是抑制 的活性。参考答案：RNA酶1：填空题名词解释13、继代培养参考答案：对来自于外植体所增殖的培养物(包括细胞、组织或其切段)通过更换新鲜培养基及不断切割或分离，进行连续多代的培养，

23、就称为继代培养。2：填空题名词解释12、cDNA文库参考答案：指将某生物某一发育时期所转录的mRNA经反转录形成的DNA片段与某种载体连接而形成的克隆的集合。3：填空题名词解释11、分子标记参考答案：直接反映DNA核苷酸序列多态性的标记，属于遗传标记的一种。4：填空题名词解释10、抗体参考答案：指在抗原物质刺激下，免疫动物机体内所产生的可与该抗原物质发生特异性结合反应的免疫球蛋白。5：填空题名词解释9、原生质体融合参考答案：也称体细胞杂交，是指不同种类的原生质体不经过有性阶段，在一定条件下融合创造杂种的过程。6：填空题名词解释8、植物组织培养参考答案：指通过无菌操作，把植物体的器官、组织、细胞

24、甚至原生质体，接种于人工配制的培养基上，在人工控制的环境条件下进行培养，使之生长、繁殖或长出完整植株的技术和方法。7：填空题名词解释7、转基因植物参考答案：指通过基因转移技术，将有益基因转移到植物细胞内，改变其遗传组成，使之获得有益的生物特征而培育出来的高产、优质、多抗的植物新品种。8：填空题名词解释6、转基因生物安全参考答案：是指防范由转基因生物技术的开发和应用对人类、动植物、微生物以及生态环境构成的危险或潜在风险。9：填空题名词解释5、基因芯片参考答案：把大量基因探针或基因片段按特定的排列方式固定在硅片、玻璃、塑料或尼龙膜等载体上，形成致密、有序的DNA分子点阵，并可利用核酸杂交原理来检测未知分子。10：填空题名词解释4、核心种质参考答案：用一定的方法选择整个种质资源的一部分，以最小的资源数量名词解释和遗传重复最大限度地代表整个遗传资源的多样性。11：填空题名词解释3、原生质体参考答案：指采用机械或酶解法去掉了细胞壁的裸露的且具有活力的细胞。12：填空题名词解释2、鉴别寄主参考答案：植物病毒具有有一定的寄主范围，并在某些寄主植物上表现特定的症状，这种能鉴别某种病毒的植物称为鉴别寄主。13：填空题名词解释1、愈伤组织参考答案：在人工培养基上由外植体上形成的一团无序生长状态的薄壁细胞。