溶液配制参考.docx

1、溶液配制参考一、常用溶液的配制 （一）溶液配制注意事项1药品要有较好的质量 试剂分为优级纯（保证试剂，Guaranteed reagent，GR）、分析试剂（Antalytical reagent，AR）化学纯（Chemical pure，CP）和实验试剂（Laboratory reagent，LR）等等。工业用的化学试剂，杂质较多，只在个别情况下应用，如配洗液用的硫酸、配干燥剂的氯化钙等。2药品称量要精确。3配制试剂用水应用新鲜的去离子水或双蒸馏水，比电阻值在50万欧姆以上，pH在之间才可应用，在组织培养等特殊用途时应注意此项要求，配制一般化验用溶液只要求用双蒸馏水或去离子水。配好后的溶液，

2、应立即除菌处理（如高压灭菌、抽滤或加抑菌物质），以防杂菌生长。（二）（1/15）Mol/L磷酸缓冲液11/15Mol/L磷酸二氢钾溶液的配制：称取磷酸二氢钾（KH2PO4，AR）9.08g，用蒸馏水溶解后，倾入1 000ml容量瓶内，再稀释至刻度（1 000ml）。2/15Mol/L磷酸氢二钠溶液的配制：称取无水磷酸氢二钠（Na2HPO4，.）9.47g（或者Na2HPO42H2O 11.87g）用蒸馏水溶解后，放入1 000ml容量瓶内，再加蒸馏水稀释至刻度（1 000ml）。3按附表的比例，配制成不同pH值的缓冲溶液。附表1 磷酸盐缓冲液配制法（单位：毫升）pH1/15Mol/L Na2H

3、PO41/15Mol/L KH2PO4pH1/15Mol/L Na2HPO41/15Mol/L KH2PO4（三）L PB液附表2 LPB液配制法pHL Na2HPO4（ml）L NaH2PO4（ml）Na2HPO42H2O分子量= L溶液含26.3g/L。Na2HPO412H2O分子量= L溶液含53.7g/L。NaH2PO4H2O分子量= L溶液含20.7g/L。NaH2PO42H2O分子量= L溶液含23.4g/L。（四）L PB缓冲液附表3 L PB缓冲液配制法pH Mol/L Na2HPO4（ml）L NaH2PO4（ml） L Na2HPO42 H2O溶液35.1g/L Na2HP

4、O412 H2O溶液含71.64g/L LNaH2PO4H2O溶液含27.60g/L NaH2PO42 H2O溶液含31.21g/L欲配L PB缓冲液则在L PB缓冲液的基础上加H2O稀释1倍即可。欲配制PBS液时，则在溶液中加的NaCl溶液即可。（五）无钙镁离子磷酸缓冲盐水（PBS）（L PH ） NaCl 8.0g KCl 0.2g Na2HPO4 1.15g （如为Na2HPO412H2O，则为2.89g） KH2PO4 0.2g将上述试剂依次溶于1 000ml去离子水中，完全溶解后，115高压灭菌10min15min，存在4冰箱中备用。此液可用于配制和稀释细胞分散剂以及洗涤细胞培养物。

5、（六）硼酸盐缓冲液（Borate saline buffer）1硼酸（3BO3）L硼酸：硼酸12.37g加水至1 000ml。2硼砂（Na2B4O7）L硼砂：硼砂19.07g加水至1 000ml。附表4 不同pH的L硼酸缓冲液配制法pHL硼砂（ml）L硼酸（ml）pHL硼砂（ml）L硼酸（ml）（七）巴比妥缓冲液1离子强度L巴比妥缓冲液 巴比妥钠 47.6g 蒸馏水 3 000ml HCl （ N HCl=193ml浓HCl加1 807ml蒸馏水） 将4.76g巴比妥钠溶于3 000ml蒸馏水。 加 N HCl 55ml。 用HCl调节pH到，并加蒸馏水至4 265ml。 2 L巴比妥缓冲液

6、巴比妥 1.84g 巴比妥钠 10.30g 加蒸馏水至 1 3 L巴比妥缓冲液 巴比妥 1.66g 巴比妥钠 12.76g 加蒸馏水 1 （八）L醋酸盐缓冲液 见表附表5附表5 L醋酸盐缓冲液配制法pHLTris（ml）LHCl（ml）pHLTris（ml）LHCl（ml）2337233725525252525252525252525252525（九）三羟甲基甲烷盐酸缓冲液（TrisHCl缓冲液）不同pH，LL三羟甲基氨基甲烷加，加水稀释至100ml（见下表）附表6 TrisHCl缓冲液配制法 pHLTris(ml)(ml) pHLTris(ml)(ml)2337233725525252525

7、25252525252525252525252525三羟甲基氨基甲烷（Tris） 分子量= L三羟甲基氨基甲烷：Tris24.23g，加水至1 000ml。 ：取，加水至1 000ml。（十）L 碳酸盐缓冲液 NaHCO3 3.70g Na2CO3 0.60g溶于蒸馏水中即得。不用时塞紧瓶塞，以免吸收空气中二氧化碳使PH下降。最好小量配制。（十一）甘油磷酸缓冲液1配制磷酸缓冲液 L Na2HPO4 NaH2PO4 混合即可29份甘油与1份磷酸缓冲液混合，即为甘油磷酸缓冲液。 用途：用于免疫荧光试验。（十二）Hanks液1贮存液 NaCl 80.00g KCl 4.00g Na2HPO412 H

8、2O 1.52g KH2PO4 0.60g 葡萄糖 4.00g 酚红液 双馏水加至 115高压灭菌15min，冰冻保存。2工作液 贮存液 1份 双馏水 9份 115高压灭菌15min。临用时用灭菌的NaHCO3液调pH值至左右（溶液呈橙红色）。（十三）萘（钠）氏试剂（Nesslers reagent）配方1：氯化汞 6.0g 碘化钾 12.4g 20NaOH 30ml 加蒸馏水至 100ml配方2：碘化汞 11.5g 碘化钾 8g 蒸馏水 50ml （完全溶解后）过滤，加20NaOH 50ml。 用途：检测溶液中氨离子。（十四）阿氏（Alsevers）液 葡萄糖 2.05g 柠檬酸钠 0.80

9、g 氯化钠 0.42g 蒸馏水 100ml 溶解后，以10%柠檬酸调节pH至，过滤，分装，10磅10min灭菌，4保存。（十五）青、链霉素混合液（简称SP液或双抗液） 青霉素（40万U） 5支 链霉素（200万g） 1支 分别溶于100ml灭菌无离子水中或共同溶于200ml灭菌无离子水中，混合后分装小瓶，置-10-20冰箱保存备用（1万单位g/ml）。 临用时，按1%的量加入营养液或其他溶液中，最后浓度是青霉素100U/ml，链霉素100ug/ml。（十六）洗液（清洁液）配方1：重铬酸钾 150g 蒸馏水 300ml 浓硫酸 3 000ml将重铬酸钾加入蒸馏水中，使之自然溶解或水浴溶解，亦可在

10、大坩埚中加热溶解，然后慢慢加入浓硫酸，边加边搅拌，见发热过剧则稍停，冷却后再继续加。此为强洗液。盛清洁液的容器要坚固，上加厚玻璃盖，操作时要穿橡皮围裙、长统胶靴、戴上眼镜和厚胶皮手套，以保安全。洗液一旦变绿，表示铬酸已经还原，失去了氧化能力，不宜再用。如将这样洗液加热，再加适量重铬酸钾，又可重新使用。配方2：浓硫酸 50% 蒸馏水 50% 重铬酸钾 5%此为中等强度洗液。配方3：重铬酸钾 100g 蒸馏水 1 000ml 加热溶解，冷却后缓慢加入 工业硫酸 100ml此液为弱洗液，为棕红色。使用此液时，必须预先用热肥皂水将玻璃器皿洗净，经自来水冲洗，沥干然后才能浸入，否则该洗液很快失效。二、常

11、用化合物的分子量及当量附表7 常用化合物的分子量及当量化合物分子式分子量当量盐酸HCl氢氧化钠NaOH氢氧化钾KOH草酸H2C2O4氯化钠NaCl氯化钾KCl硫酸H2SO4醋酸CH3COOH磷酸H3PO4磷酸二氢钠NaH2PO4磷酸氢二钠Na2HPO4磷酸二氢钾KH2PO4磷酸氢二钾K2HPO4二乙胺四乙酸二钠（EDTANa2）C10H14N2O8Na2硝酸HNO3碘I2碘化钾KI硼酸H3BO3碳酸氢钠NaHCO3碳酸钠Na2CO3硼砂Na2B4O7四、克分子浓度用1L（1 000ml）溶液中所含溶质的克分子数表示溶液的浓度叫做克分子浓度。通常用字母M表示。物质的量用做单位来表示，在数值上与物

12、质的分子量相同，这个量叫做克分子。例如氯化钠的分子量为，则1个克分子氯化钠的重量是58.44g。将58.44g氯化钠溶解于水，配制成1L溶液，就是1Mol/L氯化钠溶液。NaH2PO4H2O的分子量为,则其1个克分子的重量是138.0克。将H2O溶解于水，配制成1L溶液，就是L磷酸二氢钠溶液。五、离心机与离心力习惯上把每分钟4，000转的离心机称为低速离心机，每分钟20，000转的离心机称为高速离心机，这类离心机有冷冻装置。每分钟20，000以上的离心机称为超速离心机，为了减少空气的摩擦阻力，它的转头是在真空中运转的。由于许多样品（如病毒等）都是极小的颗粒或溶质，它们在重力场中沉降速度极慢，同时还存在扩散作用，只有超速离心所产生的强大的离心力场，才有可能它们彼此分离开。过去的资料中，所用离心条件多用转数表达，现在国际资料中已经改用相对离心力（Relative Centrifugal Force，RCF）表示，因为离心力不仅为转速的函数，也是离心半径的函数。转速相同时，离心半径越长，离心力越大，故仅以转速表达离心力是不科学的。相对离心力的单位用重力加速度Gravity，简写为“g”表示。G=9.8米/秒2