GCMS法中饱和脂肪酸与不饱和脂肪酸测定与计算的探讨.docx

1、GCMS法中饱和脂肪酸与不饱和脂肪酸测定与计算的探讨GCMS法中饱和脂肪酸与不饱和脂肪酸测定与计算的探讨口温度220度，柱温箱初温150度保持15分钟后以3度每分钟的到220度保持3分钟。柱流速我采用的是恒流模试1ml/min。MS从第8分钟后才打开。也许在些会有很多人在想我为什么要以这个程序，我在些说明一下，每个方法的建立跟操作者是一定的关系，由于本人的一贯的做法都是以节俭时间为主，因脂肪酸在150度才会出峰，所以我会把最低温度设成150度，而脂肪酸基本上在220度就完全出完了，所以最我的温度也只设到220度。哈哈，人懒就是那样的，还有一定会有人在想为什么要用3度每分钟做为升温速率而不用2度

2、或4度每分钟呢？先说一下用4度每分钟时C18：2中顺反异构体基本上有一半重合在一齐了。如果用2度每分钟时C18里的好几个峰基本上也是重合在一齐了，因为升温速率高了各组分的出峰时间都快了，所以会导致沸点相近的物质就会一齐出来了，而升温速率低的会由于溶易出现拖尾从而导致峰从叠。有点一须要注意的是我们做样品时跟我们进标液并不一样，标液浓度的比例基本一致，所以我们选择进样时就不会因为某一样品浓度大而把其它的浓度小的物质峰所掩盖了，而样品却并不是34种脂肪酸都会出现，也有可能会出现34种以外的物质的峰，有些物质的其C18：1油酸的峰非常大经常在色谱图上看其保留时间与C18：1反油酸的时间最接近，而自然界

3、中反式脂肪酸是不可能存在的，但由于些峰的保留时间与C18：1反油酸是最接近的你怎么去判断其是油酸还是反油酸呢？在此之前我用过质谱图来判断但是由于油酸与反油酸均是C18：1那他的质谱图可以说是完全一样的，那么这样用色谱和质谱均无法判断其是顺的还是反的呢？最后想到了把样品稀释到与标准溶液相接进的浓度时发现该物质的保留时间往回靠了一点，正好与油酸的保留时间相重叠，这样就可以判断其是顺式还是反式，到这里就会有很多人说竟然这样就可以判断了为什么还要用质谱做，而不用色谱做呢？大家想过没有脂肪酸总共有多少种呢？无计其数，如果我们用色谱图做的话那么就有可能把一些不是脂肪酸的物质当做脂肪酸计算进去了，而是脂肪酸

4、的却没有计算进去，那么我们的测试就会有很大的结果差异，虽然说质谱是一个半定量的一种检测器，但我个人觉得只要不出现很大的干扰质谱的定量还是非常的准确的。以下的色谱图大家可以看看这个是我所用的条件分出来的34种物质的峰，分得还可以吧，我所用的GCMS是Agilent 6890N-5975, CP-Sil 88 VARIAN 100m的柱子,但是大家使用时也不一定要按我这个条件选择啊，这个图只是跟我的仪器还用我使用的色谱柱有关，如果色谱柱已经用了很久的话可能用这条件走出来的峰就会很差的哦。各组份为丁酸甲酯(C4:0)Methyl Butyrate623-42-7己酸甲酯(C6:0)Methyl Ca

5、proate106-70-7辛酸甲酯(C8:0)Methyl Caprylate111-11-5癸酸甲酯(C10:0)Methyl Pelargonate110-42-9十一烷酸甲酯(C11:0)Methyl Hendecanoate1731-86-8十二烷酸甲酯(C12:0)/月桂酸甲酯Methyl Laurate111-82-0十三烷酸甲酯(C13:0)Methyl Tridecanoate1731-88-0十四烷酸甲酯(C14:0)/豆蔻酸甲酯Methyl Myristate124-10-7十五烷酸甲酯(C15:0)Methyl Pentadecanoate7132-64-1十六烷酸甲酯

6、(C16:0)/棕榈酸甲酯Methyl Palmitate112-39-0十七烷酸甲酯(C15:0)Methyl Margarate十八烷酸甲酯(C18:0)/硬脂酸甲酯Methyl Stearate112-61-8二十烷酸甲酯(C20:0)/花生酸甲酯Methyl Arachidate1120-28-1二十二烷酸甲酯(C22:0)/山嵛酸甲酯Methyl Behenate929-77-1十四碳烯酸甲酯(C14:1,顺-9)Methyl Myristoleate56219-06-8十五碳烯酸甲酯(C15:1,顺-10)Methyl Cis-10-Pentadecenoate十六碳烯酸甲酯(C1

7、6:1,顺-9)/棕榈油酸甲酯Methyl Palmitoleate1120-25-8十七碳烯酸甲酯(C17:1,顺-10)Methyl Cis-10-Heptadecenoate十八碳烯酸甲酯(C18:1,顺-9)/油酸甲酯Methyl Oleate112-62-9十八碳烯酸甲酯(C18:1T,反-9)/反油酸甲酯Methyl Elaidate2462-84-2十八碳二烯酸甲酯(C18:2,顺-9,12)/亚油酸甲酯Methyl Linoleate112-63-0十八碳三烯酸甲酯(C18:3,顺-9,12,15)/-亚麻酸甲酯Methyl Alpha-Linolenate十八碳三烯酸甲酯(C

8、18:3,顺-6,9,12)/-亚麻酸甲酯Methyl Gamma-Linolenate二十碳烯酸甲酯(C20:1T,反-11)Methyl Trans-11-Eicosenoate二十碳烯酸甲酯(C20:1,顺-11)/花生一烯酸甲酯Methyl Cis-11-Eicosenoate二十碳二烯酸甲酯(C20:2,顺-11,14)Methyl Cis-11,14-Eicosadienoate二十碳三烯酸甲酯(C20:3,顺-8,11,14)Methyl Homo-Gamma-Linolenate二十碳三烯酸甲酯(C20:3,顺-11,14,17)Methyl Cis-11,14,17-Eico

9、satrienoate二十碳四烯酸甲酯(C20:4,顺-5,8,11,14)/花生四烯酸甲酯(ARA-M)Methyl Cis-5,8,11,14-Eicosatetraenoate二十二碳烯酸甲酯(C22:1,顺-13)/顺芥子酸甲酯Methyl Erucate1120-34-9二十二碳烯酸甲酯(C22:1T,反-13)Methyl Brassidate二十二碳二烯酸甲酯(C22:2,顺-13,16)Methyl Cis-13,16-Docosadienoate二十二碳六烯酸甲酯(顺-4,7,10,13,16,19)(DHA-M)Methyl Cis-4,7,10,13,16,19-Doco

10、sahexaenoate(Dha-M)二十四碳烯酸甲酯(C24:1,顺-15)/神经酸甲酯Methyl Nervonate2733-88-2结果的计算现在行业当中有两种计算方法其一是面积归一化法，那就是用百分比来计算的。别一种是内标法计算，个人觉得内标法更准确一点所以在些把内标法的计数公式列出来大家看看： 脂肪酸甲酯响应因子Ri 式中：Ri脂肪酸甲酯i的响应因子Psi混标中各脂肪酸甲酯i的峰面积PsC11:0十一碳酸甲酯的峰面积Wi脂肪酸甲酯i的质量WC11:0混标中十一碳酸甲酯的质量甘油三酯重量 式中： WFAMEi脂肪酸甲酯i的重量 WtC11:0内标物十一碳酸甲酯的重量 Pti脂肪酸甲酯

11、i的峰面积 PtC11:0内标物十一碳酸甲酯的峰面积 Ri脂肪酸甲酯i响应因子 1.0067十一碳酸甘油三酯转换成十一碳酸甲酯的转换系数 fTGi脂肪酸甲酯i转换成脂肪酸甘油三酯的系数样品中总脂肪的含量 式中： Total fat,%样品中总脂肪的含量，% Wtest portion测试样品重量单个脂肪酸重量 式中： fFAi脂肪酸甲酯转换成脂肪酸转换系数饱和脂肪含量 式中： Saturated Wi饱和脂肪重量单不饱和脂肪和多不饱和脂肪的含量 式中： monounsaturated Wi单不饱和脂肪重量 polyunsaturated Wi多不饱和脂肪重量如果大家在计算当明有什么问题可以随时给我发站短，我会一一给你们解答，也欢迎大家来探讨一下。谢谢