猪病样本采集手册.docx

1、猪病样本采集手册猪的神经紊乱样本收集动物选择1 有典型症状且实施安乐死的猪只；2 刚刚死亡的猪（如果可能）。3 固定的样本（福尔马林）：1 脑小心地沿中线将脑纵向切开，大的一半放入福尔马林中浸泡；（分离大脑半球后三分之一以保证良好的固定）2 脊髓如果有脊髓炎的临床症状，在腰骶处取5cm脊髓样本；3 心脏取4cm3（2cm2cm1cm）样本；4 肺取4cm3（2cm2cm1cm）样本，最好包含有完整的病灶；5 肝脏取2cm3（2cm2cm0.5cm）样本；6 肾脏-0.5mm 切片，包括皮质和髓质；7 淋巴结如果淋巴结已肿大。注：如果怀疑是水肿病，将完整的骨髓和中脑样本放入福尔马林。冷藏（非冷冻

2、）样本：1 血清5ml；2 脑膜棉拭子，深入大脑半球脑室的棉拭子；3 脑小脑；4 肺125 cm3（5cm5cm5cm）样本；5 肝64 cm3（4cm4cm4cm）样本；6 脾5cm样本；7 肾半个肾脏；8 淋巴结2到3个样本；9 回肠10cm片断；10. 扁桃体。猪 神 经 紊 乱实验程序病原/疾病实验（室）程序1水肿病组织切片、回肠细菌学培养2增生性肠炎组织切片（带状）、病毒中和3大肠杆菌性脑膜炎组织切片、细菌学培养4乙型脑炎组织切片、病毒中和5副猪嗜血杆菌病组织切片、细菌学培养6蓝耳病病毒组织切片、病毒中和、PCR、血清学7伪狂犬病毒组织切片、扁桃体荧光抗体、病毒中和8链球菌病组织切片

3、、细菌学培养9脱水组织切片流 产样本采集A最适宜的样本，冷冻、非结冰1 2或者3个完整的胎儿和胎盘（包括新鲜的胎儿）注：如果有木乃伊胎，则收集大、中、小三个木乃伊胎。2 母猪血清（5ml）B预备的样本 福尔马林浸泡1 肺2 肝脏3 肾脏4 心脏5 甲状腺（肿大）6 胎盘冷藏非冷冻的样本1 头（2）2 胸腔液（2ml）3 胃内容物（3ml）4 肺（2）5 肝脏（2）6 肾脏（2）7 脾（2）8 胎盘9 3个完整的木乃伊（如果条件允许）猪的流产实验程序1 组织病理学2 细菌培养a 肺b 胃的内容物c 肝脏d +/-胎盘3 荧光抗体a 组织匀浆螺旋体 sp.b 肺细小病毒（仅木乃伊胎）4 免疫学a

4、胸腔液体IgG/M5 血清学（母猪血清）a 螺旋体 sp.b 细小病毒c 蓝耳病病毒d 伪狂犬病毒6 PCR和病毒隔离a 肺b 胸腺c 心腔血液d 脾e 母猪血清猪的痢疾大于等于1月龄样本采集动物选择1 有典型症状且自然死亡的猪；2 刚刚死亡的猪，如果条件允许。福尔马林固定的样本1 包含胰腺的十二指肠（2cm片断）2 空肠1个片断（2cm）3 回肠2个片断（2cm）4 螺旋的大肠2个片断（2cm）5 肝脏取2cm3（2cm2cm0.5cm）样本6 肾取一中间部位切片（0.5cm厚）7 肺取4cm3（2cm2cm1cm）样本8 淋巴结9 脑取1/2（注：将肠片断浸泡15分钟）冷藏非冷冻的样本1

5、血清（5ml）2 回肠的棉签样本3 盲肠或者大肠管壁内容物（10ml）4 空肠15cm5 回肠15cm6 旋转的大肠2个片断，各位10cm长；保持大肠与小肠分开7 肺取64cm3（4cm4cm4cm）样本8 肝取64cm3（4cm4cm4cm）样本9 肾取1/210. 脾取1/411. 肠系膜的淋巴结注：检查食道中胃溃疡的部分和盲肠中鞭虫的总数量。猪的痢疾大于等于1月龄实验程序致病因子实验程序二联等孢子球虫组织隐孢子虫属组织大肠杆菌组织、细菌学、荧光抗体、PCR散沫华属细胞内组织、PCR、IHC轮状病毒组织、电子显微镜、IHC沙门氏菌种组织、细菌学传染性胃肠炎病毒组织、IHC、电子显微镜耶尔森

6、氏菌种组织、细菌学猪的呼吸紊乱样本采集动物选择1 1头或者2头自然死亡的猪（有早期临床症状）2 1头死亡一段时间的猪（如果条件允许）福尔马林固定组织1 鼻甲部位组织（1cm 厚）2 气管（胸腔入口部位）2cm3 肺损坏中心部位取2块（2 X 2 X 1 cms）；再从损坏部位的边缘取1片4 淋巴结5 肝脏（2 X 2 X 0.5 cm）6 肾取一中间部位切片（0.5cm厚）7 心脏（2 X 2 X 1 cm，包括左右心室和隔膜）冷藏非冷冻的样本1 血清（5ml）2 棉签样本a 鼻道尾部取样b 较深部的气管或者支气管3 扁桃体4 肺（6 X 6 X 6 cm）5 淋巴腺6 脾7 肝（5 X 5

7、X 5 cm）猪的呼吸紊乱实验程序致病因子/病原实验程序1放线杆菌属胸膜肺炎群组织、细菌学2放线杆菌属本身组织、细菌学3蛔虫幼虫组织4支气管败血性博代菌组织5衣原体组织、ELISA6细胞巨化病毒（鼻粘膜内容物）组织（PCR）7大肠杆菌组织、细菌学8肺中灰尘杂质组织9副猪嗜血菌组织、细菌学10猪肺炎霉形体组织、PCR、血清学11出血败血性巴斯德菌组织、细菌学12猪呼吸冠状病毒组织、血清（PCR）13蓝耳病病毒组织、PCR、毒力、血清学、IHC14伪狂犬病毒组织、扁桃体荧光抗体、毒力、血清学15沙门氏菌属组织、血清、IHC16链球菌组织、细菌学17流感病毒组织、PCR、毒力、IHC、ELISA猪的

8、痢疾（出生到4周龄）样本采集动物选择1 1头或者2头自然死亡的猪（无治疗）2 1头刚刚死亡的新鲜猪（如果条件允许）福尔马林固定组织1 空肠2段，每段2cm，没有打开的空肠2 回肠2段，每段2cm，没有打开的空肠3 螺旋状大肠整个大肠的1/4到1/34 肺5 肝6 肾7 脑8 淋巴结（注：将肠片断浸泡15分钟）冷藏非冷冻的样本1 血清4ml2 回肠10cm3 盲肠或大肠的内容物4 空肠10cm5 螺旋状大肠用袋子单独包装6 肺7 肝8 肾9 脾10. 肠系膜的淋巴结猪的痢疾（出生到4周龄）实验程序致病因子实验程序腺病毒组织、电子显微镜产气荚膜梭状芽孢杆菌组织、厌氧培养、PCR艰难梭状芽孢杆菌组织

9、、ELISA隐孢子虫属组织病理学、寄生虫学肠球菌durans组织、细菌学大肠杆菌组织、细菌学、荧光抗体、PCR球虫目组织、寄生虫学轮状病毒组织、电子显微镜、IHC传染性胃肠炎病毒组织、电子显微镜、IHC沙门氏菌属组织、细菌学、IHC生长发育不良的小猪（wasting）1 肠道和呼吸紊乱的组织用福尔马林固定和冷藏2 附加事项a 无凝结的全血进行CBC、RBC形态学检测的无凝结全血b 化学性状辨析的血清猪的桑葚心福尔马林固定组织1 心脏包括心肌2 肺(2 X 2 X 1 cm)3 肝(2 X 2 X 0.5 cm)冷藏非冷冻的样本1 肝(4 X 4 X 4 cm)细菌学、病毒学2 肺(4 X 4

10、X 4 cm)细菌学猪的皮肤症状福尔马林固定组织1 几片猪的皮肤，包括病变皮肤的边缘，(2 X 2 cm)2 其它包括全部病变区域的器官冷藏非冷冻的样本1 皮肤几片（3 X 3 cm）注：如果皮肤上带有粪等污点，清洗并烘干后方可使用2 肝(4 X 4 X 4 cm)病毒学3 表皮的淋巴结4 其它包含病变的组织气管，肾，肺注：如果怀疑是疥螨，取其外耳道猪的关节病样本采集a 小猪：完整的关节，包装前彻底清洗b 大猪： 关节棉签：用棉签在骨液里搅动。如果没有化脓，则提交一个样本进行支原体检测。 将滑膜放入福尔马林中注：检查断裂的肋骨，检查关节表面的病变点。猪的细菌性败血病（放线杆菌属本身、大肠杆菌、丹毒、副猪嗜血菌、沙门氏菌种和链球菌）福尔马林固定组织1 肺2 肝3 肾4 脾5 1/2脑6 淋巴结7 心脏，注：猪感染链球菌死亡时，常常发生剧烈的脑膜炎，但是在胸腔和内脏里看不到完整的病变。冷藏非冷冻的样品1 肺2 肝3 肾4 脾5 脑棉签6 脑7 心外膜棉签8 关节棉签9 关节周围组织（滑膜）