陕西省高职院校技能大赛选拔赛鸡新城疫抗体水平测定赛项竞赛规程.docx

1、陕西省高职院校技能大赛选拔赛鸡新城疫抗体水平测定赛项竞赛规程2021年陕西省高职院校技能大赛选拔赛“鸡新城疫抗体水平测定”赛项竞赛规程一、竞赛名称赛项名称：鸡新城疫抗体水平测定赛项组别：高职组竞赛形式：团体赛赛项专业大类：农林牧渔二、竞赛目的本赛项考核的核心技能是鸡的采血方法，1%鸡红细胞悬液配制，血凝试验操作，四单位病毒配制，血凝抑制试验操作，抗体滴度报告，检测结果分析等技能。本赛项考核的核心知识是动物微生物与免疫 学、动物传染病等专业课程理论知识。赛项由学校、行业共设，通过技能竞赛，能有效促进全省高职院 校畜牧兽医类专业之间的交流，引领专业建设与课程改革；能进一步 深化学校与企业之间的合作

2、交流，加大行业人才队伍建设力度，提升 行业产业发展水平。同时，通过本赛项的资源转化，可以向社会展示 畜牧兽医类专业的师生风采和建设成果，提高专业的教学水平，提升 人才培养质量。三、竞赛内容赛项分别设置理论考核和技能考核2个考评点。理论考核占总成绩的30%，竞赛时长2小时，选手根据赛项提供的理论试卷（填空题、单项选择题、多项选择题、判断题、简答题、分析题）作答，主要考参赛选手的知识应用能力、分析问题和解决问题能力；技能考核占总成绩的70%，为鸡新城疫抗体检测，竞赛时长3小时，主要考核选手临床采血技术、实验规范操作能力、结果的判断能力及操作的执行能力等。赛项技能考核为鸡新城疫抗体水平测定（微量法）

3、，测定方法按 新城疫诊断技术（GB/T16550-2008）标准，竞赛时间为3小时。 具体步骤及其分值如下： （一）试验器材准备（占总成绩的8%） 按照操作规程进行器材准备，要求器材选择正确，摆放有序，物 品标识合理，桌面整洁等。 （二）配制1%鸡红细胞悬液（占总成绩的13%） 按照操作规程进行采血、离心、洗涤、配制1%鸡红细胞悬液， 要求采血规范、熟练、采血量适量、离心机使用规范、洗涤次数及洗 涤时间适宜、配制过程规范、1%鸡红细胞量适宜等。 （三）血凝试验（占总成绩的20%） 按照操作规程，用微量移液器在96孔V型血凝反应板1-12孔滴加稀释液、新城疫标准抗原，充分混匀，倍比稀释后，再次滴

4、加稀释 液，再添加1%鸡红细胞悬液，充分振荡混匀，静置感作适当时间后，正确判定抗原的血凝效价。要求微量移液器使用规范、倍比稀释操作 规范、结果判定正确等。（四）配制四单位病毒（占总成绩的10%）根据血凝试验结果，按照操作规程配制四单位病毒。要求稀释倍 数计算正确，稀释液体积加入得当、四单位病毒配制量适宜等。（五）血凝抑制试验（占总成绩的20%）按照操作规程，对20个被检血清进行血凝抑制试验操作，并设新城疫标准阳性血清对照、阴性血清对照；正确读取标准阴性血清、标准阳性血清及被检血清的结果，确定抗体滴度，完成报告。要求移 液器使用规范、反应板各孔的稀释正确、感作时间得当、对照成立、结果判断正确等。

5、（六）抗体滴度报告（占总成绩的24%）按照操作规程，正确判定抗体滴度，完成报告。要求抗体滴度判 读正确、报告方式正确、结果误差符合要求及场地整洁等。（七）结果分析（占总成绩的5%）对检测结果进行分析。四、竞赛方式 1. 本赛项为团体赛，每组参赛队队员为2名，理论竞赛部分，选手单独完成；技能竞赛部分由2名选手配合完成，参赛选手均为高职院校在籍学生。2. 比赛由陕西省教育厅统一组织。省内各院校推荐本校1-2队选手参赛。3. 技能竞赛安排在上午、理论竞赛安排在下午（容纳60人教室），技能竞赛场工位号由选手抽签决定，竞赛用设备、材料及实验动物与工位号对应。4. 本赛项不邀请省外及境外代表队参赛。 五、

6、竞赛流程 1. 竞赛时间安排 拟安排在 4月26-27日进行举行。 2. 竞赛日程 表1 项目竞赛日程安排表时间主要工作第1天（4月26日）14:00-15:00选手报到15:00-16:30参赛选手熟悉考场16:30-17:30领队会议18:00专家检查场地，封闭赛场时间主要工作第2天（4月27日）7:30全体参赛选手比赛检录及参赛编号抽签开始7:40技能竞赛工位号抽签，选手进入比赛场，按工位号就位7:50技能裁判组成员进入比赛场8:0011:00选手技能竞赛操作，裁判评分11:0013:00裁判组评分汇总13:3015:30选手理论竞赛15:3017:30裁判组批阅试卷17:3018:00

7、成绩汇总具体比赛时间可能会根据报名情况进行调整，请留意大赛通知。六、竞赛规则1. 参赛选手须为高职院校全日制在籍专科学生；本科院校中高职类全日制在籍学生；五年制高职四、五年级学生。参赛选手必须持本人身份证和参赛证参加比赛。参赛选手年龄须不超过25周岁，年龄计算时间截止2021年5月1日。凡在往届全国职业院校技能大赛中获一等奖的选手，不能再参加本项目的比赛。2. 参赛选手和指导教师报名获得确认后不得随意更换。如比赛前参赛选手和指导教师因故无法参赛，须由省级教育行政部门于本赛项开赛10个工作日之前出具书面说明，经大赛执委会办公室核实后予以更换。竞赛开始后，参赛队不得更换参赛队员。3. 技能竞赛时参

8、赛选手出场顺序、位置、比赛所用器材等均由抽签决定，不得擅自变更、调整。4. 参赛选手提前30分钟检录进入赛场，按照抽签工位号参加比赛，竞赛开始后迟到15分钟以上者取消比赛资格；开赛30分钟后，选手方可离开赛场。5. 选手进入赛场后须检查实验用品是否齐全，如有疑问向裁判询问。选手在竞赛过程中不得擅自离开赛场，如有特殊情况，需经裁判同意，选手若需休息、饮水或去洗手间等，耗用时间计算在比赛时 间内。6. 选手应在竞赛试卷或实物标签上填写工位号。试卷（或实物 标签）上不得有任何暗示选手身份的记号和符号，否则取消成绩。技 能比赛过程中如果动物出现死亡等意外情况，举手示意，可更换实验 动物。各参赛选手要按

9、照规定做好详细记录；判定试验结果时要举手 示意裁判。7. 竞赛在规定时间结束时，选手应立即停止操作，不得以任何理由拖延。选手若提前完成操作，需举手示意，由裁判员记录结束时 间，确认后方可离开比赛现场。 七、技术平台 仪器设备按新城疫诊断技术（GB/T16550-2008）标准要求配 置。本赛项所用的仪器与材料见表2。表 2项目竞赛用仪器与材料序号器材或设备名称数量规格1托盘天平1台500g2离心机1台最高转速: 4000rpm 容量: 1215mL3微型振荡器1台4微量移液器1支0.0050.05 mL5微量移液器1支0.11 mL6微量移液器1支210 mL7微量移液器吸头150个0.005

10、0.05 mL20个0.11 mL10个210 mL8微量移液器吸头盒2个0.0050.05 mL1个0.11 mL1个110mL9板式微量移液器架1个1096孔V型血凝反应板5块11烧杯5个50 mL2个500 mL12禽用采血器2支5 mL2支10mL13具盖塑料离心管6支15 mL14指型离心管6支1.5 mL15试管架1个16指型离心管架1个17细记号笔1支18医用白大褂2件190.9%生理盐水（或0.9%氯化钠注射液）500 mL203.8%枸橼酸钠溶液20 mL21鸡新城疫标准抗原1份22被检血清样本20个23鸡新城疫标准阳性血清1份24鸡新城疫标准阴性血清1份2575%酒精棉球若

11、干26干棉球若干27非免疫公鸡1只28灭菌橡胶外科手套4副29医用防护口罩2只 30实验报告单1张31标签纸若干33A4纸2张34签字笔2支八、成绩评定成绩评定按照公平、公正、客观的原则进行。（一）裁判组成项目组设裁判员7名，其中裁判长1名，评分裁判6名。（二）评分方法1. 本赛项理论竞赛采用参赛团队成员2人的平均值。2. 本赛项技能竞赛采取过程评分的方式评分，结果评定采用百分制。竞赛现场每位裁判对每一组选手分别打分，由项目裁判组统一评分，去掉一个最高分，去掉一个最低分，其余得分的算术平均值作为参赛队伍的技能竞赛得分。各裁判员首先审核选手原始打分成绩，并签名；赛项裁判长对所有裁判员的打分成绩进

12、行审核，并签名。3. 最后成绩评定：技能竞赛得分0.7 + 2位选手理论赛成绩的平均值0.3。（三）成绩审核为保障成绩评判的准确性，监督组将对赛项总成绩排名前30%的所有参赛队伍（选手）的成绩进行复核；对其余成绩进行抽检复核，抽检覆盖率不得低于15%。如发现成绩错误以书面方式及时告知裁判长，由裁判长更正成绩并签字确认。复核、抽检错误率超过5%的，裁判组将对所有成绩进行复核。（四）成绩公布记分员将解密后的各参赛队理论竞赛成绩（30%）和技能竞赛成绩（70%）汇总成最终成绩单，经裁判长、监督仲裁组组长签字后，在指定地点、以纸质形式进行公示，公示时间为2小时。成绩公示无异议后，由监督仲裁组长在成绩单

13、上签字。项目技能竞赛评分标准见表3。表3 项目技能竞赛评分标准序号考核内容考核要点分值评分标准一试验器材准备（8分）仪器与材料准备2仪器正确准备，1分；材料准备到位，1分。参考评分要点：未检查清点仪器材料，仪器使用不正确，材料准备不到位，口罩、灭菌橡胶外科手套穿戴不规范，酌情扣分。物品标识4标识合理，2分；标识清晰，2分。参考评分要点：使用的烧杯、离心管（包括管盖）和血凝反应板均要标记；标识遗漏或标识不清，酌情扣分，不标识不得分。桌面整洁度2摆放合理，2分；参考评分要点：试验器材无序摆放，不得分。二配制1%鸡红细胞悬液（13分）采血方法和采血量5抗凝剂适量，1分；采血方法规范、熟练， 2分；采

14、血量控制在24mL之间，2分。参考评分要点：鸡正确保定；血液与抗凝剂比例4:1；采血时，鸡放置于鸡笼上保定；采血部位宜首选翅静脉；采血部位合理消毒；采血时一针见血；采血量控制在24mL之间用干棉球按压止血；采血后采血局部未见明显血肿；采血未成功的，该项不得分。*以上细节未规范操作，酌情扣分，累加扣完5分为止。离心机使用2离心机使用规范，2分。参考评分要点：离心前做好平衡，对称放入离心机中；规范使用天平，应“左物右码”；*以上细节未规范操作，酌情扣分，累加扣完2分为止。红细胞悬液配制方法6稀释液倍数正确，2分；离心机转数、离心时间正确，2分；红细胞洗涤次数适宜，1分；压积红细胞吸取正确，1分。参

15、考评分要点：红细胞洗涤时，用34倍体积的灭菌生理盐水进行稀释，稀释后离心管中液体体积最大不可超过12 mL；红细胞洗涤时灭菌生理盐水与红细胞充分混匀；离心参数设定：2000 r/min，510 min/次；红细胞洗涤时吸除血浆和白细胞等杂质；红细胞洗涤应35次；最后配制1%红细胞悬液为1020 mL；*以上细节未规范操作，酌情扣分，累加扣完6分为止。三血凝试验（20分）器材使用4微量移液器使用规范，2分；吸头更换操作符合规范，2分。参考评分要点：更换吸头时操作规范，不可用力撞击吸头盒；微量移液器量程设置准确；微量移液器吸取和打出液体操作规范，移液器垂直加样为规范，倾斜角度不要过大；微量移液器用

16、完后应置于移液器架，不得随意放于桌面；* 以上细节未规范操作，酌情扣分，累加扣完4分为止。操作程序6吸取试剂更换吸头，2分；加样顺序正确，1分；倍比稀释操作规范，2分；振荡及感作时间得当，1分。参考评分要点：稀释液加样完成后，在吸取待检样品前需更换吸头；1%红细胞悬液加之前应充分混匀；边滴加边震荡混匀，按由病毒低浓度往高浓度的方向加样；倍比稀释时不产生气泡；倍比稀释时混匀充分，移液正确；加样时，吸头与液面、孔壁不接触；试剂不滴加到孔外；可以使用振荡器，以液体不振出来为准；固、液废弃物分开放置。*以上细节未规范操作，酌情扣分，累加扣完6分为止。结果判定准确10能依据生理盐水对照孔的RBC呈明显钮

17、扣状沉到孔底时判定结果，4分；对照孔结果正确时，能确定完全凝集的新城疫标准抗原最高稀释倍数为病毒的血凝价，4分；能把完全凝集的病毒的最高稀释倍数作为1个血凝单位，2分。参考评分要点：判定血凝价时机不正确扣4分（必须是完全凝集）；结果判定不正确扣4分；对照孔凝集扣4分；HA重复3排，少做1排扣1分；未做记录扣2分；读数时，结果有跳孔现象的，每跳1孔扣2分。*以上细节累计扣完10分为止。四配制4个血凝单位病毒溶液（10分）器材选择4器材选择合理，2分；使用规范、熟练，2分。参考评分要点：加吸头时操作规范，不可用力撞击吸头盒；选择合适量程微量移液器移取样品；微量移液器吸取和打出液体操作规范；*以上细

18、节未规范操作，酌情扣分，累加扣完4分为止。配制方法4稀释倍数计算正确，2分；稀释液加入得当、操作规范，2分。参考评分要点：计算错误扣2分微量移液器选择适宜，设置准确，未规范操作酌情扣分。配制量适宜2配制量适宜，2分；参考评分要点：配置量1020 mL为适量，每超过10 mL扣1分，最多扣2分。五血凝抑制试验（20分）器材使用4器材使用规范、熟练，4分；参考评分要点：加吸头时操作规范，不可用力撞击吸头盒；微量移液器量程设置准确；微量移液器吸取和打出液体操作规范，移液器垂直加样为规范，倾斜角度不要过大；*以上细节未规范操作，酌情扣分，累加扣完4分为止。操作程序6加样顺序正确，2分；倍比稀释操作规范

19、，2分；感作时间得当，1分；吸头更换正确，1分。参考评分要点：参照国标，对照设立完整，每缺一个对照扣1分；稀释液加样完成后，在吸取待检样品前需更换吸头；倍比稀释时不产生气泡；加样时，吸头与液面不接触；试剂不滴加到孔外；加1%红细胞时边滴加边振荡混匀，加样顺序正确；感作时间正确；固、液废弃物分开放置。*以上细节未规范操作，酌情扣分，累加扣完6分为止。结果判定准确10能在对照孔红细胞呈明显钮扣状沉淀到孔底时判定结果，2分；在对照孔结果正确情况下，能从背侧观察RBC有无呈泪珠样流淌，2分；能把完全不凝集（RBC完全流下）被检血清的最高稀释倍数作为该血清的HI滴度，3分；阴性血清与标准抗原对照的HI滴

20、度不大于2log2，阳性血清与标准抗原对照的HI滴度与已知滴度相差在1个稀释度范围内，3分。参考评分要点：阴性血清与标准抗原对照的HI滴度大于2log2或/和阳性血清与标准抗原对照的HI滴度与已知滴度大于1扣3分；结果有跳孔现象的，每跳1孔扣2分。判断血清HI滴度，做好记录；判读不准扣1分，未做记录扣分2分；*以上细节累计扣完10分为止。六抗体滴度报告（24分）抗体滴度报告2抗体滴度报告方式正确，1分；试验记录清晰，1分参考评分要点：抗体滴度用log2表示；试验记录和报告书写整洁，不乱涂改。* 以上细节未规范书写，酌情扣分，累加扣完2分为止。结果误差20每个样本1分，共20个样本参考评分要点：

21、结果误差1，得1分；误差超过1，0分。场地整洁度2场地整洁，2分参考评分要点：移液枪未调到最大量程；其他仪器和器皿未复位；采血器、残留红细胞泥离心管等未放入固废缸等。* 以上细节未规范操作，每错1项扣1分，累加扣完2分为止。七结果分析（5分）总分100九、申诉与仲裁本赛项在比赛过程中若出现有失公正或有关人员违规等现象，代表队领队可在比赛结束后2小时之内向仲裁组提出书面申诉。书面申诉应对申诉事件的现象、发生时间、涉及人员、申诉依据等进行充分、实事求是的叙述，并由领队亲笔签名。非书面申诉不予受理。赛项仲裁工作组在接到申诉后的2小时内组织复议，并及时反馈复议结果。十、大赛违规处理规定1. 因参赛队伍原因造成重大安全事故的，取消其获奖资格。2. 参赛队伍有发生重大安全事故隐患，经赛场工作人员提示、 警告无效的，可取消其继续比赛的资格。3. 赛事工作人员违规的，按照相应的制度追究责任。情节恶劣 并造成重大安全事故的，由司法机关追究相应法律责任。