微生物的培养与利用一轮复习.docx

1、微生物的培养与利用一轮复习 微生物的培养与利用一、微生物的类群微生物的类群细胞类型代类型举例细菌蓝藻蓝细菌、硝化细菌醋酸杆菌乳酸菌真菌酵母菌霉菌青霉、曲霉、毛霉等原生生物草履虫、变形虫、疟原虫病毒烟草花叶病毒、HIV、噬菌体二、在实验室如何培养微生物1、细菌、真菌：培养基培养； 2、单细胞动、植物：培养液培养； 3、病毒：培养 4、在实验室培养微生物，一方面需要为培养的微生物提供，另一方面需要确保无处不在的其他微生物。三、微生物需要的营养物质与功能微生物需要的五大类营养要素物质是：1.碳源 2.氮源 3.水 4.无机盐 5.1.微生物的碳源.概念：但凡能为微生物提供所需碳元素的营养物质。.来源

2、碳源：CO2；NaHCO3等型微生物能利用碳源：糖类、脂肪酸、花生粉饼、石油等型微生物能利用.作用：构成和一些有机碳源是异养微生物的2.微生物的氮源.概念：是能够为微生物提供N元素的营养物质。.来源无机氮源： N2：能利用 NH3： (能利用 NO3-、NH4+：能利用有机氮源：尿素、牛肉膏、蛋白胨、氨基酸等.作用：要用于合成、与含N的代产物。3.水4.无机盐5.生长因子(有的微生物能自身合成,有的不能需要额外添加.概念：微生物生长不可缺少的。.作用：和的组成成分。.常见的生长因子：维生素、氨基酸、嘌呤、嘧啶等。四、培养基 1、培养基的概念：人们按照微生物对的不同需求，配制出专供微生物的营养基

3、质2.培养基的成分：一般都含有、等营养物质，另外还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以与氧气等的要求。例如：培养乳酸菌需参加，假设培养霉菌PH呈，假设培养细菌PH呈，培养厌氧微生物时那么需要提供。3.培养基的类型和用途划分标准培养基种类特点用途物理性质液体培养基工业生产半固体培养基观察微生物的运动、分类鉴定固体培养基微生物别离、鉴定、活菌计数、保藏菌种化学成分天然物质工业生产培养基成清楚确分类、鉴定用途LB液体固体培养基在培养基中参加或缺少某种化学物质,以抑制不需要的微生物的生长,促进所需要的微生物的生长培养、别离出特定微生物在培养基中参加某种指示剂或化学药品,用以鉴别不同种类的微生物鉴别

4、不同种类微生物五、无菌技术1. 获得纯洁培养物的关键是2. 无菌技术的目的：一是防止实验室的培养物，二是防止操作者3.消毒与灭菌的比拟定义常用方法微生物培养和组培的应用消毒使用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体外表或部一局部对人体有害的微生物不包括芽孢和孢子，不伤与活组织。玻璃仪器一些不耐高温的液体牛奶手、外植体实验室、操作台、衣物灭菌使用强烈的理化学方法杀死物体外所有的微生物包括芽孢和孢子接种环、涂布器玻璃器皿、培养基、棉塞等玻璃器皿六、实验操作：纯化大肠杆菌1、制备牛肉膏蛋白胨培养基1计算； 2称量3溶化、分装4灭菌: 用法 5倒平板:待培养基冷却到50 左右时，在倒平板，冷却后。2、纯化

5、大肠杆菌微生物的接种的常用接种方法有：和注意：1在操作的第一步以与每次划线之前都要灼烧接种环，在划线操作完毕时，仍然需要灼烧接种环。 2在灼烧接种环之后，要等其冷却后再进展划线。 3在作第二次以与其后的划线操作时，要从上一次划线的末端开场划线。 4无菌操作是微生物实验的关键环节，为防止周围环境中微生物的污染，实验操作应在进展。3、使用后的培养基应，以免。4、微生物的恒温培养：接种后的培养皿放入培养。5、菌种的保存.临时保藏：上4保存，菌种易被污染或产生变异.长期保存：20甘油管在中保藏6、观察菌落1细菌的繁殖：。为抵抗不良环境可形成细菌的休眠体2细菌的菌落1定义：单个或者少数细菌在固体培养基上

6、大量繁殖时，会形成一个肉眼可见的、具有一定形态结构的子细胞群体，叫做菌落。2特征：大小、形状、光泽度、颜色、硬度、透明度等。3功能：每种细菌在一定条件下所形成的菌落，可以作为的重要依据七、土壤中分解尿素的细菌的别离与计数一课题背景1、尿素的利用：尿素不能直接被农作物吸收。土壤中的细菌将尿素分解成氨之后才能被植物利用。2、细菌利用尿素的原因：土壤中的细菌分解尿素是因为它们能合成。二课题目的1、 从土壤中别离出能够分解尿素的细菌2、 统计每克土壤样品中终究含有多少这样的细菌三实验思路1、筛选菌株：利用以为唯一的培养基筛选菌株。2、统计菌落数目：1：利用血球计数板，在显微镜下计算一定容积里样品中微生

7、物的数量。缺点：不能区分死菌与活菌；不适于对运动细菌的计数；需要相对高的细菌浓度；个体小的细菌在显微镜下难以观察2活菌计数法原理：在稀释度足够高时，微生物在固体培养基上所形成的一个菌落是由一个单细胞繁殖而成的，即一个菌落代表原先的一个单细胞。计算公式：每克样品中的菌落数其中，C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，V代表涂布平板时所用的稀释液的体积(ml)，M代表稀释倍数。考前须知为了保证结果准确，一般选择菌落数在的平板上进展计数。为使结果接近真实值可将同一稀释度加到的平皿中，经涂布，培养计算出菌落平均数。统计的菌落往往比活菌的实际数目低。其原因是3、设置对照：主要目的是排除实验组中非测试因

8、素对实验结果的影响，提高实验结果的可信度。四实验的具体操作土壤取样 制备培养基 样品的稀释 取样涂布 微生物的培养与观察 计数五课外延伸1、鉴定分解尿素的细菌：在以为唯一氮源的培养基中参加指示剂。培养某种细菌后，如果PH升高，指示剂将变，说明该细菌能够分解尿素。2、测定饮水肠杆菌数量的方法：将一定体积的水用过滤后，将滤膜放到 培养基上培养，大肠杆菌菌落呈现，通过记数得出水样肠杆菌的数量。八、土壤中分解纤维素的细菌的别离一根底知识1、纤维素酶纤维素酶是一种复合酶，一般认为它至少包括三种组分，即C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶 C1酶、CX酶 葡萄糖苷酶纤维素 纤维二糖 葡萄糖2、纤维素分解菌的筛选：刚

9、果红染色法。刚果红是一种染料，它可以与纤维素形成色复合物，但并不和纤维二糖、葡萄糖发生这种反响，当纤维素被纤维素酶分解后，红色复合物无法形成，出现以纤维素分解菌为中心的，我们可以通过菌落是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。 二实验操作土壤取样 选择培养 梯度稀释 将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上 挑选产生透明圈的菌落三课题延伸进一步鉴定纤维素分解菌1、为确定得到的是纤维素分解菌，还需要进展的实验. 2、纤维素酶的测定方法一般是对纤维素酶分解滤纸等纤维素后所产生的进展的测定。九、果酒与果醋的制作一根底知识与实验原理 1、酵母菌是生物，其代类型是，生殖方式主要是。在条件下，酵母菌进展有氧呼吸，

10、反响式为在条件下，酵母菌进展，反响式为2、醋酸菌是生物，其代类型是，生殖方式是。当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸。假设缺少糖源，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。二制作果酒和果醋流程示意图 挑选葡萄 冲洗 榨汁 酒精发酵 醋酸发酵 无氧,18-25,10-12d 需氧,30-35,7-8d 果酒 果醋三发酵装置注意： 1、假设用带盖的瓶子制葡萄酒，在发酵过程中，每隔12h左右将瓶盖拧松一次不翻开瓶盖，以放出CO2。2、图1-4b的装置的排气口：用来排出酒精发酵时产生的二氧化碳；排气口要通过一个长而弯曲的胶管与瓶身连接的目的：充气口：用于醋酸发酵时充入氧气；出料口：用于

11、取样四酒精的检测：在条件下，重铬酸钾与酒精反响呈现。十、腐乳的制作一根底知识与实验原理 毛霉是生物，其代类型是，生殖方式是。毛霉等微生物产生的酶，能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸； 酶可将脂肪水解为甘油和脂肪酸。二实验流程示意图让豆腐长出毛霉 加盐腌制 加卤汤装瓶 密封腌制 三豆腐中水分测定方法：称取样品 烘干 称重 再烘干 直至所称重量不变为止样品水分含量%计算公式：(烘干前容器和样品质量 - 烘干后容器和样品质量) / 烘干前样品质量十一、制作泡菜并检测亚硝酸盐含量一根底知识与实验原理 1、乳酸菌是生物，其代类型是，生殖方式是。在条件下，将葡萄糖分解成，反响式： 2、亚硝酸盐的危

12、害：1在膳食中普遍存在，在人体以“过客的形式随尿排出，但摄入总量较多时，可引起中毒或死亡。2在适宜的pH、温度和一定的微生物作用下亚硝酸盐会转化为致癌、致畸、致突变的亚硝胺。二实验流程三测定亚硝酸盐含量1、原理：在条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反响后，再与N-1萘基乙二胺盐酸盐结合生成 色溶液。将经过反响显色后的待测样品与标准液比色，即可计算出样品中的亚硝酸盐含量。 2、测定方法： 3、测定步骤：配置溶液 制备标准显色液 制备样品处理液 比色浓度越高，颜色越深 4、亚硝酸盐含量的变化：4-8天最高，10天下降，20天后根本消失十二、制作果酒、果醋、腐乳、泡菜的比拟果酒果醋腐乳泡菜菌种

13、细胞类型繁殖方式代类型反响原理发酵的氧气条件发酵温度检测方法 微生物培养与利用的练习1.海淀1模以下生物学实验操作，能够顺利到达实验目的的是A.在固体培养基上涂布稀释的大肠杆菌培养液获得单菌落B.在接种酵母菌的新鲜葡萄汁入无菌空气制作果酒C.土壤浸出液接种于牛肉膏蛋白胨培养基上筛选分解尿素的细菌D.将切下的胡萝卜外植体直接接种在培养基上获得愈伤组织2.东城2模淀粉酶可通过微生物发酵生产获得，生产菌株在含有淀粉的固体培养基上可释放淀粉酶分解淀粉，在菌落周围形成透明圈。为了提高酶的产量，研究人员欲利用诱变育种的方法获得能产生较多淀粉酶的菌株。以下实验步骤中不正确的选项是A将生产菌株分为两组，实验组

14、用一定剂量的诱变剂处理，对照组不做处理B制备含水、淀粉、氮源和无机盐等成分的固体培养基，并进展灭菌处理C把实验组的菌株接种于多个配制好的培养基中，同时接种对照组，一样条件下培养D观察两组菌株的菌落周围是否出现透明圈，选出有透明圈的菌株即为所需菌株32模以下关于高中生物学实验的原理、方法或选材的表达，正确的选项是A制作果醋时，通氧缺乏或温度过低会使发酵受影响B利用稀释涂布平板法对细菌计数时需借助于显微镜C只要生物材料中含丰富的葡萄糖和果糖，就可直接用于复原糖的鉴定D利用二苯胺试剂鉴定细胞提取物，假设产生蓝色变化即说明有RNA存在4、一模1以下各项与直接培养微生物无关的是A制作果醋需将环境温度保持

15、在3035 B将土壤稀释液涂布于选择培养基上培养 C将样品显色液与标准显色液比拟，测定样品中亚硝酸盐含量 D制作腐乳时，需先将豆腐在适宜温度、湿度条件下放置5天5、海淀二模1制作果酒、果醋和泡菜三个实验的共同点是 A.菌种为异养原核生物 B.将原料灭菌后再发酵 C.保证无氧环境下发酵 D.发酵液最终呈现酸性6、二模5关于生物工程和技术的说确是A从某生物cDNA文库中获取的目的基因，不含基因中的启动子B单倍体育种需要细胞分裂素、生长素、秋水仙素等激素的参与C动物细胞培养过程中，培养箱中需含5%的CO2刺激细胞呼吸D为统计某水样中活菌的数目，可采用平板划线法进展接种7、丰台二模5以下有关实验的表达

16、不正确的选项是A用于筛选杂交瘤细胞的培养基属于鉴别培养基B诱导外植体脱分化需要用含有蔗糖的培养基避光培养C平板划线法和稀释涂布平板法均可用于别离纯化菌种D用稀释涂布平板法统计的菌落数往往比活菌实际数目低8、顺义二模5以下高中生物学实验中必须使用无菌水的是A将大肠杆菌培养液进展系列梯度稀释 B破碎鸡血细胞获得含有D NA的滤液 C配制培养大肠杆菌的固体培养基 D冲洗葡萄榨取制作果酒的葡萄汁9. 延庆5在家庭中用鲜葡萄制作果酒时，正确的操作是A. 给发酵装置适时排气 B. 让发酵装置承受光照C. 葡萄汁装满发酵瓶保证无氧D. 酵母菌装置放在40处102012丰台区一模人们常用醋酸杆菌来酿造果醋，以

17、下说确的是A醋酸杆菌在线粒体进展有氧呼吸第三阶段氧与H结合时释放的能量最多B酿造过程中，当缺少糖源的时候，醋酸杆菌将乙醇变为乙醛，再变为醋酸C酿造过程中在补充氧气的同时，要定时释放气体以排出细胞呼吸产生的CO2D 在参加酒精和CaCO3的固体培养基中培养醋酸菌，可观察抑菌圈大小选出高产菌11. 31，节选从某地别离到能分泌纤维素酶的枯草杆菌，对此菌进展诱变，利用染色法筛选纤维素酶产量高的菌体。染色法：染料和培养基中的纤维素发生颜色反响，当纤维素被菌体水解，培养基中会出现以菌落为中心的透明圈1实验材料：菌体悬液，紫外灯，添加_为碳源的选择培养基，培养皿等 2实验过程与结果预期：a将菌体悬液稀释至

18、适当浓度，平均分成甲、乙两组。b甲组用_的紫外线照射一定时间，乙组不做处理。c_接种至选择培养基上。d观察并测量_的直径与相应菌落直径e假设甲组中出现了纤维素酶产量高的菌体，其形成的菌落表现为_比乙组相应值的平均值大。1216分西城1模赤霉病是由雪瘸镰刀菌等真菌感染引起的，广泛发生在小麦等粮食作物上。雪腐镰刀菌代产生的脱氧雪腐镰刀菌烯醇DON，分子式为C15H20O6严重影响禽畜生产和人体安康。请分析答复以下问题：1以下微生物与雪腐镰刀菌的细胞结构类似的是选填选项前的符号。 a酵母菌 b醋酸杆菌 c毛霉 d乳酸菌 e大肠杆菌 2为探究DON的致畸性是否与细胞的染色体变异有关，可向动物细胞培养液

19、中参加一定剂量的DON，在培养箱中保温培养一段时间后，在显微镜下观察染色体的。3某同学为筛选专一降解DON的菌，配制了以下培养基，在适宜条件下培养：为实现筛选目的，步骤I所使用的培养基配方中，应去除并参加。为实现目的菌的别离和计数，步骤II所使用的培养基中还应参加制成平板，采用的接种方法是。 步骤III的目的是_。132012石景山区一模15分恒化器是微生物连续培养时使用的大型容器，容器中一局部旧的培养基以一定的速度流出，同时不断有等量的新鲜培养基流入以保证微生物对营养物质的需要。研究人员将大肠杆菌JA122菌株接种到葡萄糖含量受到限制的培养基中，在恒化器连续培养773代，然后取样分析其中存在

20、的新菌株。请答复以下问题：1用于连续培养JA122大肠杆菌的培养基属于 。培养基中除了含葡萄糖作为外，还应该含有。14、课标卷39生物选修1：生物技术实践15分为了调查某河流的水质状况，某研究小组测定了该河流水样中的细菌含量，并进展了细菌的别离等工作。答复以下问题：1该小组采用稀释涂布平板法检测水样中的细菌含量。在涂布接种前，随机取假设干灭菌后的空平板先行培养了一段时间，这样做的目的是；然后，将1mL水样稀释100倍，在3个平板上用涂布法分别接入0.1mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为39、38和37。据此可得出每升水样中的活菌数为。2该小组采用平板划线法别离水样中的细菌。操作

21、时，接种环通过灭菌，在第二次与以后划线时，总是从上一次的末端开场划线。这样做的目的是。3示意图A和B中，表示的是用稀释涂布平板法接种培养后得到的结果。4该小组将得到的菌株接种到液体培养基中并混匀，一局部进展静置培养，另一局部进展振荡培养。结果发现：振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快。分析其原因是：振荡培养能提高培养液的的含量，同时可以使菌体与培养液充分接触，提高的利用率。15、课标卷39.生物选修1：生物技术实验15分植物秸秆中的纤维素可被某些微生物分解。答复以下问题:1分解秸秆中纤维素的微生物能分泌纤维素酶，该酶是由3种组分组成的复合酶，其中的葡萄糖苷酶可将分解成。2在含纤维素的培养基

22、中参加刚果红CR时，CR可与纤维素形成色复合物。用含有CR的该种培养基培养纤维素分解菌时，培养基上会出现以该菌的菌落为中心的。 3为从富含纤维素的土壤中别离获得纤维素分解菌的单菌落，某同学设计了甲、乙两种培养基成分见下表：酵母膏无机盐淀粉纤维素粉琼脂CR溶液水培养基甲+-+培养基乙+-+注：“+表示有，“表示无。据表判断，培养基甲 填“能或“不能用于别离和鉴别纤维素分解菌，原因是；培养基乙填“能或“不能用于别离和鉴别纤维素分解菌，原因是；16、卷10.有机农药苯磺隆是一种除草剂，长期使用会污染环境。研究发现，苯磺隆能被土壤中某些微生物降解。别离降解苯磺隆的菌株和探索其降解机制的实验过程如图甲、

23、乙所示。1微生物生长繁殖所需的主要营养物质有碳源、水、_四类，该实验所用的选择培养基只能以苯磺隆作为唯一碳源，其原因是_。2与微生物培养基相比，植物组织培养的培养基常需添加生长素和_，这些植物激素一般需要事先单独配置成_保存备用。3纯化菌株时，通常使用的划线工具是_。划线的某个平板培养后，第一划线区域的划线上都不连续地长满了菌，第二划线区域的第一条线上无菌落，其它划线上有菌落。造成划线无菌落可能的操作失误有_。4为探究苯磺隆的降解机制，将该菌种的培养液过滤离心，取上清液做图乙所示实验。该实验的假设是_，该实验设计是否合理？为什么？_。 答案1A 2D 3A 4C 5D 6A 7A 8A 9A

24、10B11、(1) 纤维素(2) b. 适当剂量(强度)c. 将等量甲乙两组菌液 d透明圈e透明圈的直径与相应菌落直径比值12.1a、c 2CO2 数目和形态 3葡萄糖 DON 琼脂 稀释涂布法使分解DON的真菌数量增加13、1液体培养基 碳源 氮源、无机盐、水2基因突变 基因突变的不定向性14、【答案】1检测培养基平板灭菌是否合格 3.81072灼烧； 将聚集的菌体逐步稀释以便获得单个菌落3B 、溶解氧 营养物质15、【答案】1纤维二糖 葡萄糖 2红色 透明圈 3不能 液体培养基不能别离单菌落 不能 乙培养基中没有纤维素，不会形成CR-纤维素红色复合物，即使出现单菌落也不能确定其为纤维素分解菌16、【答案】1氮源和无机盐 只有能利用苯磺隆的微生物能正常生长和繁殖2细胞分裂素 母液3接种环 接种环灼烧后未冷却；划线未从第一区域末端开场4目的菌株能分泌降解苯磺隆的蛋白质。 不合理，缺少空白对照