1、 北京雷根生物技术有限公司 EDTA 脱钙液 产品简介:一些组织内含有骨质或钙化灶时,含钙的组织不宜直接用石蜡包埋切片。这是因为钙和石蜡之间的密度不同,较难切除完整的切片。对含钙组织最好固定之后,再进行脱钙或二者同时进行。然后进行下游的实验,如脱水、透明、浸蜡、包埋、切片。用于脱钙的试剂很多,脱钙剂包括有机酸、无机酸、乙二胺四乙酸(EDTA)以及电解法脱钙。EDTA 是一种相对较好的螯合脱钙剂,对组织结构影响最小,可以较好的保存组织的某些酶类,经 EDTA 脱钙后的组织可以进行免疫组化和原位杂交染色。但是该法脱钙速度太慢,一般脱需要数周至数月。Leagene EDTA 脱钙液优点:经 EDTA
2、 脱钙的组织染色结果好;对组织的结构损害小;用化学方法测试可以确定脱钙的终点。Leagene EDTA 脱钙液缺点:脱钙速度很慢,不适合常规标本脱钙使用;脱钙后组织会稍微变硬。产品组成:主要成分:主要由 EDTA、磷酸盐等组成,用 NaOH 溶液调 pH 值为 7.2。自备材料:1、PBS 2、蒸馏水 3、加热装置或微波炉 操作步骤(仅供参考):1、骨组织脱钙时,取材不易过厚,一般大约 5mm。2、组织固定后,用 PBS 清洗 3 次,每次 20min。3、组织用蒸馏水洗清洗 3 次,每次 20min。4、组织转移至 2030 倍体积的 EDTA 脱钙液中,脱钙 1030 天或更长时间。如果想
3、加快脱钙速度,可以置于 37进行脱钙。如果必要,更换新的 EDTA 脱钙液继续脱钙,多数组织脱钙 2 周3 个月即可,每周更换一次,直至终点。亦可采用微波快速脱钙法:编号 名称 DD0002 DD0002 Storage EDTA 脱钙液 100ml 500ml RT 使用说明书 1 份 北京雷根生物技术有限公司 微波炉设在 200W 左右的档位,每次加热 5min,依据组织厚度和密度重复 35min,中间间隔 35min。5、用蒸馏水冲洗数次。6、常规脱水、包埋。注意事项:1、厚度 5mm 的骨组织块脱钙时间一般脱钙 1030 天即可。2、适当加温能加快脱钙的速度,一般不应超过 3740,温
4、度过高容易使骨组织造成松散解体,尤其不可大于 60。3、脱钙应彻底,防止脱钙不足或过度。脱钙程度应控制在不影响组织切片的同时尽量缩短脱钙时间,以免脱钙过长引起组织损害。4、脱钙用具避免使用金属容器,尽量使用玻璃容器。5、骨组织脱钙应先固定后脱钙或脱钙固定同时进行,不应先脱钙后固定,以便减少组织的损伤程度。6、每隔一段时间检测一次脱钙程度,避免脱钙过度,脱钙过度会增加组织的损伤程度,影响染色结果。7、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。有效期:12 个月有效。附录:脱钙终点的测定(物理法):采用针刺、手掐、钳夹等方法,当骨组织变软或针刺时没有阻力感即可终止脱钙。物理检测法会对组织结构有一定的损害,尽量避免用力过大或反复检测。相关产品:产品编号 产品名称 DD0012 甲酸脱钙液 DD0020 电解脱钙液(2.5%甲酸)DD0028 脱钙后碱处理液 DZ0029 硫酸钠水溶液(5%)DH0006 苏木素伊红(HE)染色液试剂盒 DZ0209 脱钙终点检测试剂盒(化学法)