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1、卡那霉素抗性基因（kanr）常作为标记基因，只有含卡那霉素抗性基因的细胞才能在卡那霉素培养基上生长。下列叙述正确的是（ ）A.构建重组质粒过程中需要限制性核酸内切酶和DNA连接酶B.愈伤组织的分化产生了不同基因型的植株C.卡那霉素抗性基因（kanr）中有该过程所利用的限制性核酸内切酶的识别位点D.抗虫棉有性生殖后代能保持抗虫性状的稳定遗传5.上海医学研究所成功培育出第一头携带人白蛋白基因的转基因牛。他们还研究出一种可大大提高基因表达水平的新方法，使转基因动物乳汁中的药物蛋白含量提高30多倍，以下与此有关的叙述中正确的是（ ）A.“转基因动物”是指体细胞中出现了新基因的动物B.“提高基因表达水平

2、”是指设法使牛的乳腺细胞中含有更多的人白蛋白基因C.只有从转基因牛乳汁中才能获取人白蛋白，是因为人白蛋白基因只在牛乳腺细胞中含有D.转基因牛的肌肉细胞中也有人白蛋白基因，但不发生转录、翻译，不能合成人白蛋白6.下列关于蛋白质工程和基因工程的比较，不合理的是（ ）A.基因工程原则上只能生产自然界已存在的蛋白质，而蛋白质工程可以对现有蛋白质进行改造，从而制造一种新的蛋白质B.蛋白质工程是在基因工程的基础上发展起来的，蛋白质工程最终还是要通过基因修饰或基因合成来完成C.当得到可以在-70条件下保存半年的干扰素后，在相关酶、氨基酸和适宜的温度、pH条件下，干扰素可以大量自我合成D.基因工程和蛋白质工程

3、产生的变异都是可遗传的7.基因工程是在DNA分子水平上进行设计施工的，在基因操作的基本步骤中，不进行碱基互补配对的步骤是（ ）A人工合成基因 B制备重组DNA分子C把目的基因导入受体细胞D目的基因的检测和表达8.已知一双链DNA分子，用限制酶切割得到长度为120 kb（kb：千碱基对）片段；用限制酶切割得到40 kb和80 kb两个片段；同时用限制酶和限制酶切割时，得到10 kb、80 kb和30 kb 3个片段，据此分析该双链DNA分子结构及酶切位点情况为（ ）9据图所示，有关工具酶功能的叙述不正确的是（ ）A限制性核酸内切酶可以切断a处，DNA连接酶可以连接a处BDNA聚合酶可以连接a处C

4、解旋酶可以使b处解开D连接c处的酶可以为DNA连接酶10.采用基因工程技术将人凝血因子基因导入山羊受精卵，培育出了转基因羊。但是，人凝血因子只存在于该转基因羊的乳汁中。以下有关叙述，正确的是（ ）A如果人凝血因子基因的核苷酸序列已知，可用人工合成的方法获得该目的基因B人体细胞中凝血因子基因进入羊受精卵细胞后，其传递和表达不再遵循中心法则C在该转基因羊体内，人凝血因子基因存在于乳腺细胞中，而不存在于其他体细胞中D人凝血因子基因开始转录后，DNA聚合酶以DNA分子的一条链为模板合成mRNA11.科学家利用生物技术将人的生长激素基因导入小鼠受精卵的细胞核中，经培育获得一种转基因小鼠，其膀胱上皮细胞可

5、以合成人的生长激素并分泌到尿液中，在医学研究及相关疾病治疗方面都具有重要意义。下列有关叙述错误的是（ ）A选择受精卵作为外源基因的受体细胞是因为这种细胞具有全能性B采用DNA分子杂交技术可检测外源基因在小鼠细胞内是否成功表达C人的生长激素基因能在小鼠细胞内表达，说明遗传密码在不同种生物中可以通用D转基因小鼠的肝细胞含有人的生长激素基因12某研究所的研究人员将生长激素基因通过质粒介导进入大肠杆菌细胞内，来表达产生生长激素。已知质粒中存在两个抗性基因：A是抗链霉素基因，B是抗氨苄青霉素基因，且目的基因要插入到基因B中，而大肠杆菌不带有任何抗性基因。下列叙述正确的是 （ ）A导入大肠杆菌的质粒一定为

6、重组质粒BRNA聚合酶是构建该重组质粒必需的工具酶C可用含氨苄青霉素的培养基检测大肠杆菌中是否导入了重组质粒D在含氨苄青霉素培养基中不能生长，但在含链霉素培养基中能生长的可能是符合生产要求的大肠杆菌班： 姓名：选择题答案:题号123456789101112答案二、非选择题：13.如图是培育表达人乳铁蛋白的乳腺生物反应器的技术路线。图中tetR表示四环素抗性基因，ampR表示氨苄青霉素抗性基因，BamH、Hind、Sma直线所示为三种限制酶的酶切位点。据图回答：（1）图中将人乳铁蛋白基因插入载体，需用_限制酶同时酶切载体和人乳铁蛋白基因。筛选含有重组载体的大肠杆菌首先需要在含_的培养基上进行。（

7、2）能使人乳铁蛋白基因在乳腺细胞中特异性表达的调控序列是_ （填字母代号）。A.启动子 B.tetR C.复制原点 D.ampR（3）过程可采用的操作方法是_ （填字母代号）。A.农杆菌转化 B.大肠杆菌转化 C.显微注射 D.细胞融合（4）过程可采用的生物技术是_。（5）对早期胚胎进行切割，经过程可获得多个新个体。这利用了细胞的_性。（6）为检测人乳铁蛋白是否成功表达，可采用_ （填字母代号）技术。A.核酸分子杂交 B.基因序列分析 C.抗原抗体杂交 D.PCR14.科学家将人的生长激素基因与大肠杆菌的DNA分子进行重组，并成功地在大肠杆菌中得以表达。但在进行基因工程的操作过程中，需使用特定

8、的限制酶切割目的基因和质粒，便于重组和筛选。已知限制酶的识别序列和切点是GGATCC，限制酶的识别序列和切点是GATC，据图回答：（1）过程表示的是采取_的方法来获取目的基因。（2）根据图示分析，在构建基因表达载体过程中，应用限制酶_切割质粒，用限制酶_切割目的基因。用限制酶切割目的基因和运载体后形成的黏性末端通过_原则进行连接。（3）人体的生长激素基因能在细菌体内成功表达是因为_。写出目的基因导入细菌中表达的过程_。（4）将得到的大肠杆菌B涂布在一个含有氨苄青霉素的培养基上，能够生长，说明大肠杆菌B已导入了_，反之则没有导入。答案解析1.【解析】选B。A、C、D为原核细胞，不具有内质网和高尔

9、基体，不能进行肽链的折叠和加工。2.【解析】选C。DNA连接酶连接的是脱氧核苷酸之间的磷酸二酯键，不是氢键；目的基因导入受体细胞后，受体细胞即发生基因重组，不是基因突变；大肠杆菌不能作为基因工程的载体。3.【解题指南】1.知识储备：（1）基因突变对生物性状的影响；（2）目的基因成功表达的标志。2.解题关键：（1）明确碱基替换可能并不会改变蛋白质中氨基酸的种类，也不会改变蛋白质的性质。（2）抗生素抗性基因往往作为标记基因而不是目的基因。【解析】选D。抗生素抗性基因往往作为基因工程中的标记基因，用来检测目的基因是否导入，而不能用来确定目的基因是否表达。检测转基因抗虫棉是否具有抗虫特性可以让害虫取食

10、棉花叶片，观察害虫是否死亡。4.【解析】选A。质粒与目的基因结合时需要用同一种限制性核酸内切酶切割，用DNA连接酶连接；愈伤组织由相同细胞分裂形成，分化后产生相同基因型的植株；卡那霉素抗性基因作为标记基因不能有限制性核酸内切酶的切割位点；抗虫棉有性生殖后代可能会发生性状分离，抗虫性状不一定能稳定遗传。【误区警示】本题易错选D项，误认为导入目的基因的植株为纯合子，实际上目的基因进入受体细胞后，可能只整合到同源染色体中的一条中，而另一条染色体没有，形成杂合子，不能稳定遗传。5.【解析】选D。转基因动物是指以实验方法导入外源基因，在染色体组内稳定整合并能遗传给后代的一类动物；体细胞中出现了新基因的动

11、物不一定是转基因动物，基因突变也可能出现新基因，这样的动物不能称为转基因动物。“提高基因表达水平”是指设法使牛乳腺细胞中的人白蛋白基因更好地转录、翻译成更多的人白蛋白。人白蛋白基因导入的是牛的受精卵，随着受精卵的分裂、分化，存在于牛的每个细胞中，但是只有在牛的乳腺细胞中人白蛋白基因才能表达。6.【解析】选C。基因工程原则上只能生产自然界已存在的蛋白质，而蛋白质工程可以对现有蛋白质进行改造，从而制造一种新的蛋白质；蛋白质工程是在基因工程的基础上发展起来的，蛋白质工程最终还是要通过基因修饰或基因合成来完成，这样产生的改变才能遗传下去；蛋白质不是遗传物质，不可能自我复制；由于基因工程和蛋白质工程都是

12、对基因进行操作，因此，基因工程和蛋白质工程产生的变异都是可遗传的。7.【解析】选C。制备重组DNA分子时目的基因与载体的黏性末端通过碱基互补配对进行连接；目的基因的检测可以通过分子杂交的方法，目的基因的表达需要通过转录和翻译过程。8.【解析】选D。本题主要考查基因工程的原理。根据题意，该DNA用限制酶切割后长度不变，故为环状DNA，根据两酶的作用特点，可知酶切图谱为D。9【解析】选D。限制性核酸内切酶能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。DNA连接酶能够将双链DNA片段缝合起来，恢复被限制性核酸内切酶切开的两个核苷酸之间的磷酸二酯

13、键。因此，限制性核酸内切酶可以切断a处，DNA连接酶可以连接a处；DNA聚合酶是在DNA复制时，连接DNA分子的单链，可以连接a处；解旋酶可以破坏碱基对之间的氢键，即在b处解开；c处是同一个核苷酸内部脱氧核糖和磷酸之间形成的键，不能用DNA连接酶连接。10.【解析】选A。人体细胞中凝血因子基因进入羊受精卵细胞后，其传递和表达仍遵循中心法则；在该转基因羊体内，人凝血因子基因存在于所有体细胞中；合成mRNA需要RNA聚合酶，而不是DNA聚合酶。11.【解析】选B。采用DNA分子杂交技术可以检测外源基因是否进入受体细胞以及外源基因在小鼠细胞内是否转录，但表达必须合成相应的蛋白质。转基因小鼠的所有细胞

14、均由受精卵经有丝分裂而来，但生长激素基因仅在其膀胱上皮细胞中选择性表达。【误区警示】不能正确理解目的基因表达的含义和分子水平的检测方法。目的基因的表达需经过转录和翻译两个过程，DNA分子杂交只能检测目的基因是否插入并转录，而检测外源基因在受体细胞是否成功表达，可以采用抗原-抗体杂交技术。12.【解析】选D。本题考查基因工程的操作工具和有关过程，属于对理解、应用层次的考查。熟记并理解基因操作的各个过程、抓住“目的基因要插入到基因B中”这一关键信息是正确解答该题的前提。基因操作过程中，用同一种限制性核酸内切酶分别切割生长激素基因所在的DNA分子和质粒后，会产生相同的黏性末端，黏性末端连接时，目的基

15、因和目的基因、目的基因和质粒、质粒和质粒都可能连接，导入大肠杆菌的质粒不一定为重组质粒。构建该重组质粒必需的工具酶是限制性核酸内切酶和DNA连接酶。目的基因插入到基因B中后形成的重组质粒，抗氨苄青霉素基因被破坏，导入了重组质粒的大肠杆菌对氨苄青霉素不具有抗性，对链霉素仍具有抗性。13.【解析】本题主要考查用转基因动物生产药物的过程。（1）据图，因质粒上没有Sma的切割位点,所以只能选择BamH和Hind同时切割。当人乳铁蛋白基因和质粒连接成重组质粒后，tetR基因被人乳铁蛋白基因隔开，不是完整的，而ampR基因是完整的，所以筛选含有重组载体的大肠杆菌首先需要在含氨苄青霉素的培养基上进行。（2）

16、人乳铁蛋白基因前面的启动子中含有调控该基因表达的核苷酸序列，能启动人乳铁蛋白基因的转录过程。（3）将重组质粒导入动物细胞中，常采用显微注射的方法。（4）过程的左侧是早期胚胎，右侧是代孕牛，所以是将早期胚胎移植到受体牛子宫中的过程，采用的生物技术是胚胎移植技术。（5）对早期胚胎进行切割，每一部分细胞都能培养为个体，这是利用了细胞的全能性。（6）检测目的基因在受体细胞中是否表达，也就是检测是否产生了人乳铁蛋白，鉴定蛋白质常采用抗原-抗体杂交技术。答案：（1）Hind和BamH 氨苄青霉素（2）A （3）C （4）胚胎移植技术 （5）全能 （6）C14.【解析】（1）由人生长激素基因的mRNA获取人生长激素基因的方法是反转录法。（2）由题干知限制酶与限制酶切割后留下的黏性末端能黏合在一起；由图示知质粒上有限制酶和限制酶两种酶的识别序列，形成重组质粒后，Gene完整，那么切割质粒的切点应在Gene处，即用限制酶在Gene处将质粒切开。（3）所有的生物共用一套密码子，是人体的生长激素基因在细菌体内成功表达的基础。（4）质粒上有抗氨苄青霉素基因，若大肠杆菌B能在含氨苄青霉素的培养基上生长，则说明大肠杆菌内导入了质粒。（1）反转录（人工合成）（2） 碱基互补配对（3）共用一套密码子（4）普通质粒或重组质粒14