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1、 随机效应（stochastic effect）：随机效应是指在放射防护中，发生几率与剂量大小有关的效应。 非随机效应（non-stochastic effect）：非随讥效应是指效应的严重程度随剂量变化的生物学效应。这种效应可能存在剂量阈值。7、 闪烁计数器（scintillation counter）：闪烁计数器是利用光电倍增管收集带电粒子激发原子产生荧光的探测器。这是体外放射免疫分析使用的主要探测仪器。8、 流计涨落：在每个单位时间内放射性核素衰变的原子数不会完全相同，而是围绕着一个均数变化，这种各单位时间内计数的统计学差异，即放射性计数的统计学误差，称为放射性衰变的统计涨落。9、 国际

2、参考品（international reference）：国际参考品是由WHO 指定的实验室制备，并与有关国家的一定机构联系（在我国是卫生部药品与生物制品检定所），被国际公认为最高级别的标准品。 国家级标准品：国家级标准品是由国家的有关权威机构，用高化学纯和高免疫纯、低交叉反应的纯品制备的，供国家内部使用。 实验室标准：实验室标准是由实验室自己，或由生产厂家制备的标准品，又称二级标准品。10、 质量控制QC：用现代化科学管理技术和方法，使测定结果达到最优水平。是监视全过程，排除误差，防止变化，维持标准化现状的一个管理过程。这一过程是通过一个反馈环路进行的。11、 比活性 （Specific a

3、ctivity, SA）：比活性又称比放射性，是指单位质量的放射性物质所含的放射性强度。12、 剂量反应曲线（Dose response curve）：用已知浓度的校准品（标准品）及其所得的反应变量之间的关系，即为剂量反应曲线，是放射免疫分析的定量依据。13、 精密度（precision）是指同一物质用同一实验系统进行多次重复测定的测量值之间彼此的符合程度, 即实验的重复性（或称再现性）。14、 准确度（accuracy）是指测量值与真值的接近程度, 与真值的差越小越准确。准确度是评价系统误差的主要指标。15、 灵敏度Sensitivity：指能测出的具有统计学意义的最小值，通常指“0”标准管

4、结合率减两个标准差的相应剂量。16、 特异性（specificity）是指其测定结果不受交叉反应物质, 或其他非竞争性物质, 或其他反应因素影响的程度。17、 健全性（validity）是指标准品与待测样品的同质性的程度。放射免疫分析方法要求标准品与待测物质的免疫化学的性质相同, 只有这样才能通过标准品的剂量反应曲线, 准确的测定待测物的量。18、 稳定性（stability）主要是指批间的重复性，通常以剂量反应曲线的稳定性来验证方法的稳定性。简答问答一、 放射免疫的特点和局限性特点：高特异性、高灵敏、良好重复性和操作简易型；局限性：免疫活性检测、有效基团数目、只能测定一定浓度范围的物质、存在

5、放射性污染、商品化试剂盒难以进行标准化。二、 计数器的质量指标与检测造成计数误差的原因和意义造成计数误差的原因：1 放射性衰变的统计涨落：放射性核素的衰变是随机的，但在一定的时间内其衰变在总体上有一定的规律。即在每个单位时间内其衰变的原子数不会完全相同，而是围绕着一个均数变化。这种各单位时间内计数的统计学差异，即放射性计数的统计学误差，称放射性衰变的统计涨落。这种计数误差是无法纠正的。2测量仪器的性能不稳定。3测量仪器未调至最佳的工作状态。4外界环境的影响：如离心机、冰箱等造成对仪器的干扰等。造成计数误差的意义:1. 放射性衰变的统计涨落造成的计数变化不是由于仪器的不稳定所致，但仪器不稳定可与

6、统计涨落一起造成计数的变化。2. 测量的精密度与测量的总计数率有关，总既数率越高其测量的精密度也越高。因此，为减少计数的统计误差，应使样品保持一定的计数率，以保证计数误差不致影响测量结果。三、 放射免疫竞争分析的条件具备标记抗原，待测抗原以及抗体待测抗原和标记抗原的免疫活性相同抗体的量待测抗原或标记抗原的量，但两者量之和，具有已知浓度的抗原标准品待测抗原与标记抗原-抗体复合物成反比四、 放射免疫分析RIA与免疫放射分析IRMA的比较放射免疫分析免疫放射分析机制竞争性反应非竞争性反应标志物抗原抗体抗体剂量抗体限量抗体过量待测物标记抗原抗体与待测物呈负相关，小分子物质测定标记抗原抗体与待测物正相关

7、，分子量较大的物质测定NSB影响高剂量区影响低剂量区灵敏度受抗体亲和力影响较大受抗体亲和力影响较小特异性取决于抗体的特异性取决于俩中抗体的特异性反应速度较慢较快测量范围灵敏度和测量范围不可兼得保证灵敏度的前提下，可获得较大的测量范围五、 人工抗原的鉴定方法【放射性示踪法】在偶联的反应液中加入一定量的放射性标记半抗原。偶联反应后经充分透析，测量透析袋中的放射性计数，并计算结合到载体上的放射性百分数。这个百分数指示有同样百分比的非标记半抗原联接到载体上。结合抗原中半抗原与蛋白质的分子比可用下列公式计算：Pm1 / MW1 / m2 / MW2 其中：P = 放射性百分数；m1 = 半抗原投入量；M

8、W1 = 半抗原的分子量；m2 = 蛋白质的投入量； MW2 = 蛋白质的分子量。六、 标准品的制备1、 基质的制备；2、 标准物纯品的选择：高化学纯、高免疫纯、无与被测物发生交叉反应的物质；3、 标准品的制备：先用零值血清制备高浓度标准品，然后按要求用零值血清稀释标准品，获得不同浓度组成的系列标准品。4、 标准品的鉴定：免疫活性的鉴定、浓度的标定、标准品的计量5、 分装、保存。七、 抗血清的鉴定（指标） 1、抗体的滴度（Titer） 抗体滴度是指结合50%标记抗原时的抗血清稀释度。可用连续稀释法确定，得到剂量反应曲线后，B/T=30%50%时抗体的稀释倍数即为最佳的抗体稀释度，抗体过多可使试

9、验的灵敏度下降，而抗体过少时试验的灵敏度虽高但重复性和准确度较差，抗体的最佳稀释度越高（即抗体的滴度），抗体的质量越好。2、抗体亲和力（affinity）的测定 抗体亲和力抗原抗体结合的牢固程度。a、和曲线法：取定量的一定稀释度的抗体，分别加入到逐渐增加的抗原里，可使抗体的结合达到饱和，求出饱和程度50%时游离抗原浓度，其倒数即为该抗体在此稀释度下的亲和常数。b、Adrion法：K=8/3I50-TI50=标准B/B0% （50%抗原浓度）T=标记抗原量。亲和常数K的单位是L/M,其意义是1克分子抗体需要稀释多少升能够达到50%的结合率。 3、抗体的特异性（specificity） 抗体的特异

10、性以交叉反应率表示，计算方法：交叉反应率=（待测抗原50%结合的浓度）/（待鉴定类似物50%结合时的浓度） *100%八、 放射性标记物的质量标准（一）比活性1定义：2.意义：标记的被测抗原的比活性可直接影响竞争性分析的灵敏度。标记抗原的化学量越小，反应系统的灵敏度越高，要求标记抗原有较大的比活性。然而，要获得高比活性，就需要在被标记的抗原分子上结合较多的放射性核素。但若比活性过高，即在被标记的抗原分子上带有更多的放射性核素时，过多的放射性核素本身的辐射作用可使被标记的抗原损伤，并使 其免疫活性损伤和加速解离。所以，标记抗原的比活性要适当。一般认为标记抗原的比活性为50Ci /g150Ci /

11、g 时，（二）纯度1标记物纯度的指标：标记物的化学纯度、标记化合物的放射化学纯度、放射性核纯度；2标记物放化纯度的意义：放化纯度是指在标记物中结合在抗原上的放射活性占该标记物总放射活性的百分比，而结合在抗原上的部分才是直接参与抗原抗体反应的部分。因此，标记物的放化纯度的高低，可直接影响试验系统的反应的方式。如放化纯度不够，则在反应完成并分离后，游离部分的放射活性增加，而结合部分的放射活性降低。这方面125I标记物较3H标记物的问题更大。放射性标记物的放化纯度取决于标记后的纯化方法。标记物在保存过程中可以产生放射性杂质，包括脱落的放射性核素和因辐射损伤产生的变性标记抗原，从而使该标记物的放化纯度

12、降低。（三）免疫活性意义：抗原被标记后其免疫活性不应改变。九、 碘标记物的鉴定 （1）放射比活度的测定：自身取代法 直线作图法（2）放化纯度的测定层析法：薄层层析或纸层析法（最简单实用） 电泳法：常用纸电泳法游离碘的测定：纯化过的点标记物的游离碘率不超过5%10%抗体结合的测定：NSB/T5%，B0/T应80%十、 3H、125I标记的优缺点3H优点：半衰期长、货架寿命长、不改变化学结构、对物质免疫活性影响小、适于半抗原标记； 缺点：标记比活性低、反应系统灵敏度差、测量效率低、操作复杂、所需设备昂贵、废弃物处理困难。125I优点：标记比活性较高、测量效率高、半衰期适当、有一定的效期、废弃物易于

13、处理； 缺点：标记改变化学结构，免疫活性容易发生改变、容易发生辐射损伤，抗原容易变性、货架期较短。十一、 碘标记物损伤的原因及表现损伤原因：1、碘化反应损伤：结构损伤、辐射损伤、氧化还原损伤、其他（反应条件）；2、保存损伤：放射辐射、保存条件不当。损伤表现：碘标记物损伤的主要表现是，非特异性结合（NSB / T）增加，而最大结合力（B0 / T）下降。十二、 数据拟合评价-意义1、 剂量反应曲线拟合程度的高低，只代表数学模型拟合程度，与检测准确度无关；2、 不同反应体系，选择拟合曲线不同；3、 同一数据，选用不同的拟合曲线，趋势一样，结果不同；4、 拟合模型不能将不好的数据变成好的数据。十三、

14、 常用分离方法的原理及优缺点1、 吸附分离法：原理：特殊处理的吸附剂吸附小分子游离部分，离心后游离部分随吸附剂沉淀，结合部分留在上清液中。分为活性炭法和离子交换树脂法。 优点：活性炭法：反应迅速、不受体积限制、来源方便、廉价 缺点：重复性差、对反应液中总蛋白变化敏感、对标记物作用不详；离子交换树脂法：处理较为复杂。2、 化学沉淀法：为盐析法，原理：蛋白质分子表面具有电荷层和水化层，故不发生沉 淀。当条件改变，使其水化层破坏，则部分蛋白质可聚合成大分子而沉淀。 优点：操作简便、来源方便、廉价；受温度、PH等影响、不稳定。3、 双抗体法及双抗体-PEG法：可能与破坏蛋白质水化层相关。快速、不受反应

15、体积限制、来源方便、廉价。受温度、PH等影响、非特异性结合高、沉淀牢固性差。十四、 质量控制的目的 （一）保证测定结果的可靠性和准确性，控制测定误差至最小限度。（二）通过质量控制监督测量结果，并决定测量结果的取舍。（三）通过质量控制选择好的实验方法，淘汰操作复杂而不准确的方法。十五、 质控血清的要求：最好为人血清 血清中被测物的浓度应在系统有效工作范围内， 并应涉及剂量反应曲线高中低三个区域。 每批质控血清应足量，无传染性 适当条件下保存稳定，不含防腐剂十六、 商品化试剂盒的方法学评价 检查的内容包括：剂量反应曲线的稳定性：用于观察的指标包括。非特异性结合率，最大结合率，剂量反应曲线的截距，斜

16、率，和相关系数，以及有效剂量等。最大结合率至少25%30%，非特异性结合率对双抗体法（或双抗体-PEG法）应10）应100）, 计算真阳性率、假阳性率、真阴性率、和假阴性率, 以判断临床的有效性。17、 异常剂量反应曲线的原因：斜率增加、斜率减少、钩变（hook）现象、不规则曲线。18、 批内误差：加样误差、分离误差、计数误差、计算误差、处理误差19、 批间误差：试验系统不稳定、试验条件未标准化、计算误差、批内误差控制20、 质控图判定方法：（1）三个质控血清，一个大于或小于X3SD（2）三个质控血清两个大于或小于X2SD，且在同一方向（3）三个质控血清全部大于或小于XSD ，且在同一方向超过剂量反应曲线范围的结果处理：（1）超过有效剂量范围的结果不可靠（2）报告应以“最小可测量数据”或“最大可测量数据”形式报告（3）如果超出者，可稀释样本重做。6