分子生物学名词解释 2Word文档下载推荐.docx

1、只针对单一抗原决定簇起作用的抗体。15考斯质粒：是经过人工构建的一种外源DNA载体，保留噬菌体两端的COS区，与质粒连接构成。16蓝-白斑筛选：含LacZ基因（编码半乳糖苷酶）该酶能分解生色底物X-gal（5-溴-4-氯-3-吲哚-D-半乳糖苷）产生蓝色，从而使菌株变蓝。当外源DNA插入后，LacZ基因不能表达，菌株呈白色，以此来筛选重组细菌。称之为蓝-白斑筛选。17顺式作用元件：在DNA中一段特殊的碱基序列，对基因的表达起到调控作用的基因元件。18Klenow酶：DNA聚合酶I大片段，只是从DNA聚合酶I全酶中去除了5 3外切酶活性19锚定PCR：用于扩增已知一端序列的目的DNA。在未知序列

2、一端加上一段多聚dG的尾巴，然后分别用多聚dC和已知的序列作为引物进行PCR扩增。20融合蛋白：真核蛋白的基因与外源基因连接，同时表达翻译出的原基因蛋白与外源蛋白结合在一起所组成的蛋白质。二、填 空1 DNA的物理图谱是DNA分子的（ ）片段的排列顺序。2 RNA酶的剪切分为（ ）、（ ）两种类型。3原核生物中有三种起始因子分别是（ ）、（ ）和（ ）。4蛋白质的跨膜需要（ ）的引导，蛋白伴侣的作用是（ ）。5启动子中的元件通常可以分为两种：（ ）和（ ）。6分子生物学的研究内容主要包含（ ）、（ ）、（ ）三部分。7证明DNA是遗传物质的两个关键性实验是（ ）、（ ）这两个实验中主要的论点证

3、据是：（ ）。8hnRNA与mRNA之间的差别主要有两点：（ ）、（ ）。9蛋白质多亚基形式的优点是（ ）、（ ）、（ ）。10蛋白质折叠机制首先成核理论的主要内容包括（ ）、（ ）、（ ）。 11半乳糖对细菌有双重作用；一方面（ ）；另一方面（ ）。所以需要一个不依赖于cAMPCRP的启动子S2进行本底水平的永久型合成；同时需要一个依赖于cAMPCRP的启动子S1对高水平合成进行调节。有G时转录从（ ）开始，无G时转录从（ ）开始。12DNA重组技术也称为（ ）或（ ）。最终目的是（ 典型的DNA重组实验通常包含以下几个步骤：提取供体生物的目的基因（或称外源基因），酶接连接到另一DNA分子上

4、（克隆载体），形成一个新的重组DNA分子。将这个重组DNA分子转入受体细胞并在受体细胞中复制保存，这个过程称为转化。对那些吸收了重组DNA的受体细胞进行筛选和鉴定。对含有重组DNA的细胞进行大量培养，检测外援基因是否表达。13、质粒的复制类型有两种：受到宿主细胞蛋白质合成的严格控制的称为（ ），不受宿主细胞蛋白质合成的严格控制称为（ ）。14PCR的反应体系要具有以下条件：a、 b、 c、 d、 15PCR的基本反应过程包括：（ ）、（ ）、（ ）三个阶段。16、转基因动物的基本过程通常包括：将克隆的外源基因导入到一个受精卵或胚胎干细胞的细胞核中；接种后的受精卵或胚胎干细胞移植到雌性的子宫；完

5、成胚胎发育，生长为后代并带有外源基因；利用这些能产生外源蛋白的动物作为种畜，培育新的纯合系。17杂交瘤细胞系的产生是由（ ）细胞与（ ）细胞杂交产生的，由于（ ）可以利用次黄嘌呤，（ ）提供细胞分裂功能，所以能在HAT培养基中生长。18随着研究的深入第一代抗体称为（ ）、第二代（ ）、第三代（ ）。19目前对昆虫病毒的基因工程改造主要集中于杆状病毒，表现在引入（ ）；（ ）；（ ）。20哺乳类RNA聚合酶启动子中常见的元件TATA、GC、CAAT所对应的反式作用蛋白因子分别是（ ）、（ ）和（ ）。21RNA聚合酶的基本转录因子有、TF-A、TF-B、TFII-D、TF-E他们的结合顺序是：

6、（ ）。其中TFII-D的功能是（ ）。22与DNA结合的转录因子大多以二聚体形式起作用，转录因子与DNA结合的功能域常见有以下几种（ ）、（ ）、（ ）。23限制性内切酶的切割方式有三种类型分别是（ ）、（在对称轴3 侧切割产生3 粘端（在对称轴处切割产生平段）。24质粒DNA具有三种不同的构型分别是：（ ）、（ ）、（ ）。在电泳中最前面的是（ ）。25外源基因表达系统，主要有（ ）、（ ）、（ ）和（ ）。26转基因动物常用的方法有：三、简 答1 分别说出5种以上RNA的功能？转运RNA tRNA 转运氨基酸 核蛋白体RNA rRNA 核蛋白体组成成 信使RNA mRNA 蛋白质合成模板

7、 不均一核RNA hnRNA 成熟mRNA的前体 小核RNA snRNA 参与hnRNA的剪接小胞浆RNA scRNA/7SL-RNA 蛋白质内质网定位合成的信号识别体的组成成分反义RNA anRNA/micRNA 对基因的表达起调节作用核 酶 Ribozyme RNA 有酶活性的RNA2原核生物与真核生物启动子的主要差别？原核生物TTGACA - TATAAT-起始位点 -35 -10真核生物增强子-GC -CAAT-TATAA5mGpp起始位点 -110 -70 -253对天然质粒的人工构建主要表现在哪些方面？天然质粒往往存在着缺陷，因而不适合用作基因工程的载体，必须对之进行改造构建：a、

8、加入合适的选择标记基因，如两个以上，易于用作选择,通常是抗生素基因。b、增加或减少合适的酶切位点，便于重组。c、缩短长度，切去不必要的片段，提高导入效率，增加装载量。d、改变复制子，变严紧为松弛，变少拷贝为多拷贝。e、根据基因工程的特殊要求加装特殊的基因元件 4举例说明差示筛选组织特异cDNA的方法？制备两种细胞群体，目的基因在其中一种细胞中表达或高表达，在另一种细胞中不表达或低表达，然后通过杂交对比找到目的基因。例如：在肿瘤发生和发展过程中，肿瘤细胞会呈现与正常细胞表达水平不同的mRNA，因此，可以通过差示杂交筛选出与肿瘤相关的基因。也可利用诱导的方法，筛选出诱导表达的基因。5杂交瘤细胞系的

9、产生与筛选？脾B细胞+骨髓瘤细胞，加聚乙二醇（PEG）促进细胞融合，HAT培养基中培养（内含次黄嘌呤、氨基蝶呤、T）生长出来的脾B-骨髓瘤融合细胞继续扩大培养。细胞融合物中包含：脾-脾融合细胞：不能生长，脾细胞不能体外培养。骨-骨融合细胞：不能利用次黄嘌呤，但可通过第二途 径利用叶酸还原酶合成嘌呤。氨基蝶呤对叶酸还原酶有抑制作用，因此不能生长。骨-脾融合细胞：在HAT中能生长，脾细胞可以利用次黄嘌呤，骨细胞提供细胞分裂功能。6、利用双脱氧末端终止法（Sanger法）测定DNA一级结构的原理与方法？原理是采用核苷酸链终止剂2，3，-双脱氧核苷酸终止DNA的延长。由于它缺少形成3/5/磷酸二脂键所

10、需要的3-OH，一旦参入到DNA链中，此DNA链就不能进一步延长。根据碱基配对原则，每当DNA聚合酶需要dNMP参入到正常延长的DNA链中时，就有两种可能性，一是参入ddNTP,结果导致脱氧核苷酸链延长的终止；二是参入dNTP,使DNA链仍可继续延长，直至参入下一个ddNTP。根据这一方法，就可得到一组以ddNTP结尾的长短不一的DNA片段。方法是分成四组分别为ddAMP、ddGMP、ddCMP、ddTMP反应后，聚丙烯酰胺凝胶电泳按泳带可读出DNA序列。7、激活蛋白（CAP）对转录的正调控作用？环腺苷酸（cAMP）受体蛋白CRP（cAMP receptor protein），cAMP与CRP

11、结合后所形成的复合物称激活蛋白CAP（cAMPactivated protein ）。当大肠杆菌生长在缺乏葡萄糖的培养基中时，CAP合成量增加，CAP具有激活乳糖（Lac）等启动子的功能。一些依赖于CRP的启动子缺乏一般启动子所具有的典型的-35区序列特征（TTGACA）。因此RNA聚合酶难以与其结合。CAP的存在（功能）：能显著提高酶与启动子结合常数。主要表现以下二方面：CAP通过改变启动子的构象以及与酶的相互作用帮助酶分子正确定向,以便与-10区结合，起到取代-35区功能的作用。CAP还能抑制RNA聚合酶与DNA中其它位点的结合，从而提高与其特定启动子结合的概率。8、典型的DNA重组实验通

12、常包括哪些步骤？a、提取供体生物的目的基因（或称外源基因），酶接连接到另一DNA分子上（克隆载体），形成一个新的重组DNA分子。b、将这个重组DNA分子转入受体细胞并在受体细胞中复制保存，这个过程称为转化。c、对那些吸收了重组DNA的受体细胞进行筛选和鉴定。d、对含有重组DNA的细胞进行大量培养，检测外援基因是否表达。9、基因文库的构建对重组子的筛选举出3种方法并简述过程。抗生素抗性筛选、抗性的插入失活、兰-白斑筛选 或PCR筛选、差式筛选、DNA探针 多数克隆载体均带有抗生素抗性基因（抗氨苄青霉素、四环素）。当质粒转入大肠杆菌中后，该菌便获得抗性，没有转入的不具有抗性。但不能区分是否已重组。

13、在含有两个抗性基因的载体中，如果外源DNA片段插入其中一个基因并导致该基因失活，就可用两个分别含不同药物的平板对照筛选阳性重组子。 如pUC质粒含LacZ基因（编码半乳糖苷酶）该酶能分解生色底物X-gal（5-溴-4-氯-3-吲哚-D-半乳糖苷）产生蓝色，从而使菌株变蓝。10、说明通过胚胎干细胞获得转基因动物的基本过程？胚胎干细胞（embryonic stem cell,ES）：是胚胎发育期的胚细胞，可以人工培养增殖并具有分化成其它类型细胞的功能。ES细胞的培养：分离胚泡的内层细胞团进行培养。ES在无饲养层中培养时会分化为肌细胞、N细胞等多种功能细胞，在含有成纤维细胞中培养时ES将保持分化功能

14、。可以对ES进行基因操作，不影响它的分化功能可以定点整合，解决了随机整合的问题。向胚胎干细胞导入外源基因，然后植入到待孕雌鼠子宫，发育成幼鼠，杂交获得纯合鼠。一）名词解释 1翻译 2密码子 3密码的简并性 4同义密码子 5变偶假说 6移码突变 7同功受体 8多核糖体 二）问答题 1参与蛋白质生物合成体系的组分有哪些?它们具有什么功能? 2遗传密码是如何破译的? 3遗传密码有什么特点? 4简述三种RNA在蛋白质生物合成中的作用。 5简述核糖体的活性中心的二位点模型及三位点模型的内容。 6氨基酸在蛋白质合成过程中是怎样被活化的? 7简述蛋白质生物合成过程。 8蛋白质合成中如何保证其翻译的正确性?

15、9原核细胞和真核细胞在合成蛋白质的起始过程有什么区别。 10蛋白质合成后的加工修饰有哪些内容? 11蛋白质的高级结构是怎样形成的?12真核细胞与原核细胞核糖体组成有什么不同?如何证明核糖体是蛋白质的合成场所?13. 已知一种突变的噬菌体蛋白是由于单个核苷酸插入引起的移码突变的，将正常的蛋白质和突变体蛋白质用胰蛋白酶消化后，进行指纹图分析。结果发现只有一个肽段的差异，测得其基酸顺序如下： 正常肽段 Met-Val-Cys-Val-Arg 突变体肽段 Met-Ala-Met-Arg （1）什么核苷酸插入到什么地方导致了氨基酸顺序的改变？（2）推导出编码正常肽段和突变体肽段的核苷酸序列. 提示：有关

16、氨基酸的简并密码分别为 Val: GUU GUC GUA GUG Arg: CGU CGC CGA CG AGA AGG Cys: UGU UGC Ala : GCU GCC GCA CGC 14. 试列表比较核酸与蛋白质的结构。15. 试比较原核生物与真核生物的翻译。（三）填空题 1蛋白质的生物合成是以_为模板，以_为原料直接供体，以_为合成杨所。 2生物界共有_个密码子，其中_个为氨基酸编码，起始密码子为_；终止密码子为_、_、_。 3原核生物的起始tRNA以_表示，真核生物的起始tRNA以_表示，延伸中的甲硫氨酰tRNA以_表示。 4植物细胞中蛋白质生物合成可在_、_和_三种细胞器内进行

17、。 5延长因子T由Tu和Ts两个亚基组成，Tu为对热_蛋白质，Ts为对热_蛋白质。 6原核生物中的释放因子有三种，其中RF-1识别终止密码子_、_；RF-2识别_、_；真核中的释放因子只有_一种。 7氨酰-tRNA合成酶对_和相应的_有高度的选择性。 8原核细胞的起始氨基酸是_，起始氨酰-tRNA是_。 9原核细胞核糖体的_亚基上的 _协助辨认起始密码子。 l0每形成一个肽键要消耗_个高能磷酸键，但在合成起始时还需多消耗_个高能磷酸键。 11肽基转移酶在蛋白质生物合成中的作用是催化_形成和_的水解。 12肽链合成终止时，_进人“A”位，识别出_，同时终止因子使_的催化作用转变为_。13原核生物

18、的核糖体由_小亚基和_大亚基组成，真核生物核糖体由_小亚基和_大亚基组成。14. 蛋白质中可进行磷酸化修饰的氨基酸残基主要为_、_、_。（四）选择题 1蛋白质生物合成的方向是（ ）。 从CN端 定点双向进行 从N端、C端同时进行 从NC端 2不能合成蛋白质的细胞器是（ ）。 线粒体 叶绿体 高尔基体 核糖体 3真核生物的延伸因子是（ ）。 EFTu EF一2 EF-G EF一1 4真核生物的释放因子是（ ）。 RFRF一1 RF一2 RF一3 5能与tRNA反密码子中的I碱基配对的是（ ）。 A、G C、U U U、C、A 6蛋白质合成所需能量来自（ ）。 ATP GTP ATP、GTP GT

19、P 7tRNA的作用是（ ）。 将一个氨基酸连接到另一个氨基酸上 把氨基酸带到mRNA位置上 将mRNA接到核糖体上 增加氨基酸的有效浓度 8关于核糖体的移位，叙述正确的是（ ）。 空载tRNA的脱落发生在“A”位上 核糖体沿mRNA的35方向相对移动 核糖体沿mRNA的53方向相对移动 核糖体在mRNA上一次移动的距离相当于二个核苷酸的长度 9在蛋白质合成中，下列哪一步不需要消耗高能磷酸键（ ）。 肽基转移酶形成肽键 氨酰一tRNA与核糖体的“A，位点结合 核糖体沿mRNA移动 fMettRNAf与mRNA的起始密码子结合以及与大、小亚基的结合 10在真核细胞中肽链合成的终止原因是（ ）。

20、已达到mRNA分子的尽头 具有特异的tRNA识别终止密码子 终止密码子本身具有酯酶作用，可水解肽酰与tRNA之是的酯键 终止密码子被终止因子（RF）所识别 11蛋白质生物合成中的终止密码是（ ）。 UAA UAU UAC UAGUGA 12根据摆动假说，当tRNA反密码子第1位碱基是I时，能够识别哪几种密码子（ ） A C G T U 13下列哪些因子是真核生物蛋白质合成的起始因子（ ）。 IF1 IF2 eIF2 eIF4 elF4A 14蛋白质生物合成具有下列哪些特征（ ）。 氨基酸必须活化 需要消耗能量 每延长一个氨基酸必须经过进位、转肽、移位、税落四个步骤 合成肽链由C端向N端不断延长

21、 新生肽链需加工才能成为活性蛋白质 15下列哪些内容属于蛋白质合成后的加工、修饰（ ）。切除内含子，连接外显子 切除信号肽 切除N-端Met 形成二硫键 氨的侧链修饰 16蛋白质生物合成过程中，下列哪些步骤需要消耗能量（ ）。 氨基酸分子的活化 70S起始复合物的形成 氨酰tRNA进入核糖体A位 肽键形成 核糖体移位 17原核生物的肽链延伸过程有下列哪些物质参与（ ）。肽基转移酶 鸟苷三磷酸 mRNA 甲酰甲硫氨酰-tRNA EF-Tu、EF-Ts、 EF-G 18.Shine-Dalgarno顺序（SD-顺序）是指: （ ） 在mRNA分子的起始码上游8-13个核苷酸处的顺序在DNA分子上转

22、录起始点前8-13个核苷酸处的顺序16srRNA3端富含嘧啶的互补顺序 启动基因的顺序特征 以上都正确 19. 在研究蛋白合成中,可利用嘌呤霉素,这是因为它:使大小亚基解聚 使肽链提前释放 抑制氨基酰-tRNA合成酶活性 防止多核糖体形成 以上都正确 20. 氨基酸活化酶：（ ） 活化氨基酸的氨基 利用GTP作为活化氨基酸的能量来源催化在tRNA的5磷酸与相应氨基酸间形成酯键每一种酶特异地作用于一种氨基酸及相应的tRNA 以上都不正确 （五）是非题 1DNA不仅决定遗传性状，而且还直接表现遗传性状。（ ） 2密码子在mRNA上的阅读方向为5 3。 3每种氨基酸都有两种以上密码子。 4一种tRN

23、A只能识别一种密码子。 5线粒体和叶绿体的核糖体的亚基组成与原核生物类似。 6大肠杆菌的核糖体的小亚基必须在大亚基存在时，才能与mRNA结合。 7大肠杆菌的核糖体的大亚基必须在小亚存在时，才能与mRNA结合。 8在大肠杆菌中，一种氨基酸只对应于一种氨酰-tRNA合成酶。 9氨基酸活化时，在氨酰-tRNA合成酶的催化下，由ATP供能，消耗个高能磷酸键。 10线粒体和叶绿体内的蛋白质生物合成起始与原核生物相同。 11每种氨基酸只能有一种特定的tRNA与之对应。 12AUG既可作为fMet-tRNAf和Met-tRNAi的密码子，又可作为肽链内部Met的密码子。 13构成密码子和反密码子的碱基都只是

24、A、U、C、G。 14核糖体大小亚基的结合和分离与Mg2+，的浓度有关。15核糖体的活性中心“A”位和“P”位都主要在大亚基上。16. E.coli中，DnaA与复制起始区DNA结合，决定复制的起始。二、参考答案 （一）名词解释 1翻译（translation）：以mRNA为模板，氨酰-tRNA为原料直接供体，在多种蛋白质因子和酶的参与下，在核糖体上将mRNA分子上的核苷酸顺序表达为有特定氨基酸顺序的蛋白质的过程。 2密码子（codon）：mRNA中碱基顺序与蛋白质中氨基酸顺序的对应关系是通过密码实现的， mRNA中每三个相邻的碱基决定一个氨基酸，这三个相邻的碱基称为一个密码子。 3密码的简并

25、性（degeneracy）：个氨基酸具有两个以上密码子的现象。 4同义密码子（synonym codon）：为同种氨基酸编码的各个密码子，称为同义密码了。 5变偶假说（wobble hypothesis）：指反密码子的前两个碱基（3-端）按照标准与密码子的前两个碱基（5-端）配对，而反密码子中的第三个碱墓则有某种程度的变动，使其有可能与几种不同的碱基配对。 6移码突变（frame-shift mutation）：在mRNA中，若插入或删去一个核苷酸，就会使读码发错误，称为移码，由于移码而造成的突变、称移码突变。 7，同功受体（isoacceptor）：转运同一种氨基酸的几种tRNA称为同功受体。 8反密码子（anticodon）：指tRNA反密码子环中的三个核苷酸的序列，在蛋白质合成过程中通过碱基配对，识别并结合到mRNA的特殊密码上。 9多核糖体（polysome）：mRNA同时与若干个核糖体结合形成的念珠状结构，称为多核糖体。（二）问答题 1mRNA：蛋白质合成的