猪蓝耳病及其防控策略-王和平PPT文档格式.ppt

1、不耐热，56处理15-20分钟，37处理10-24小时，20 放置6天，病毒滴度下降10倍。56处理45分钟，37处理48小时，病毒彻底灭活。潮湿的环境有助于PRRSV 存活，低温下保存的PRRSV具有较好的稳定性，而干燥的环境中则迅速失活。PRRSV只在一个很窄的pH值范围保持稳定，pH小于5或大于7的情况下，其感染力下降90%以上。,理化特性,PRRSV基因组为不分节段、单股正链RNA病毒，其基因组长约15kb,含有8个开放阅读框（ORF），病毒基因组的每个ORF与相邻的ORF发生部分重叠。,ORF1编码病毒RNA的复制酶和聚合酶。ORF2-7分别编码病毒的GP2、GP3、GP4、GP5、

2、M和N蛋白。,分子生物学,ORF2,ORF3,ORF4,ORF5,ORF6,ORF7,An,ORF1ab,An,15.1kb,GP2 GP3 GP4 GP5 M N,771bp 765bp 537bp 603bp 525bp 372bp,AnAnAnAnAnAnAn,mRNA1234567,PRRSV VR2332,PRRSV基因组,ORF1编码病毒RNA的复制酶和聚合酶。由ORF5编码的GP5蛋白为囊膜糖蛋白，可诱导细胞凋亡，这可能与疾病的发生有关。ORF6编码的M蛋白是基质蛋白，M蛋白不仅可诱导产生中和抗体，还能够诱发很强的特异性细胞免疫应答。N蛋白即核衣壳蛋白，由ORF7编码，N蛋白在病

3、毒粒子中含量较高，免疫原性极强，是PRRS诊断中具有诊断意义的结构蛋白之一，但其产生抗体无中和活性和保护性免疫反应。,基因及其编码蛋白,蓝耳病的四个特点,1、抗体依赖性病毒增殖效应（ADE）ADE是指在一定抗体存在下可介导和加强病毒的感染力。在肺泡巨噬细胞中加入一定滴毒的PRRSV抗体，可以使PRRSV滴度提高10-100倍。,早期诱导产生的抗体能够促进病毒在机体内的复制，促进蓝耳病临床症状的形成,非中和抗体,中和抗体,蓝耳病的四个特点,、强烈的免疫抑制破坏非特异免疫的巨噬细胞（PAM）系统使猪丧失了抗感染能力、对疫苗的反应能力和对药物治疗的支持能力极易引起混合感染或继发感染,巨噬细胞的作用,

4、健康的猪巨噬细胞吞噬病源微生物-机体健康 的保障,蓝耳病致病机理,蓝耳病毒强毒导致巨噬细胞死亡,由蓝耳病引起的混合感染和继发感染是使被感染猪群死亡率高的主要原因,继发感染,免疫抑制猪瘟疫苗免疫抗体上不去,促进PCV2繁殖和扩散能力,蓝耳病病毒感染对猪瘟疫苗免疫的影响,猪蓝耳病感染与猪瘟疫苗免疫应答的关系（后备猪）,注：1.各组的S/P值范围分别是3.0以上、2.52.0、2.01.5、1.51.0、1.0以下；2.共102头后备母猪，猪瘟疫苗已免疫3次。,结果表明，免疫后猪瘟抗体水平的高低与蓝耳病毒感染有很强的负相关性。蓝耳病毒感染越严重，其瘟猪抗体水平越低；,临床检测一,猪蓝耳病感染与猪瘟疫

5、苗免疫应答的关系（经产母猪）,注：1.各组的S/P值范围分别是2.5以上、2.52.0、2.01.0、1.00.4、0.4以下；2.共67头经产母猪。,结果同样表明，经产母猪免疫后猪瘟抗体水平的高低与蓝耳病毒感染也有很强的负相关性。蓝耳病毒感染越严重，其抗体水平越低；,临床检测二,PCV感染与蓝耳感染关系,注：为两者之间的感染相关性直观些，表中的数据进行了处理,结论：猪群蓝耳病毒感染可强烈干扰了猪瘟疫苗的免疫应答，是目前猪瘟免疫不合格的一个重要原因。猪群感染圆环病毒（PCV2）后可加重蓝耳病毒的感染强度，间接干扰母猪群对猪瘟疫苗的免疫应答。办法：选择合格的高效价的疫苗；加强管理提高猪体自身抵抗

6、力。,蓝耳病的四个特点,3、容易变异蓝耳病病毒是所有检测到的RNA病毒里进化速度最快的病毒。高致病性PRRSV 是NsP2基因533-561位连续缺失29个氨基酸和481位氨基酸的缺失毒株，使之表达的E蛋白也发生了改变，毒力显著增强。猪可以被两种或两种以上类型的蓝耳病病毒感染,蓝耳病的四个特点,4、持续感染猪感染后23周内出现病毒血症，且可以持续67周。蓝耳病毒可以在感染猪体内存在数月，感染猪能排毒80-100天（最长357天）并感染同群猪。持续性感染的后果：亚健康母猪存在，保育猪易感染。,蓝耳病的特征之一是其能够长时间在感染猪群及猪体内存在，形成持续性感染,主要传播方式,1.通过初乳和乳汁将

7、病毒传给哺乳仔猪2.通过精液传给配种母猪；3.母猪若在怀孕晚期感染PRRSV，则可发生经胎盘感染妊娠胎儿 疫病传入的主要方式是引种,蓝耳病当前主要症状,母猪没有流产或偶尔出现；死胎、木乃伊可能比较多或根本没有；产弱仔多，八字腿多；部分仔猪眼睑水肿；母猪返情率很高；尤其配种后24-40天；44-61天返情；第一胎母猪返情率比较高；保育或中大猪呼吸道病很严重。喘气、发烧比例20%以上。保育猪眼睑肿胀、皮肤发白、毛粗硬、甚至腹部出现紫色出血点，耳朵发紫。,PRRS-母猪繁殖障碍,表现形式：1、怀孕后期感染，流产，产新鲜死胎，并且产活仔猪在断奶前死亡率升高。2、母猪产前短时发热或厌食，分娩时间延长，产

8、后无乳。3、母猪出现病毒血症，背腹部或耳部出现针尖状出血点。,PRRS-仔猪呼吸障碍,表现形式：食欲不振，厌食，四肢皮肤出现“斑点”样充血或发绀；高热，呼吸困难、腹式呼吸，犬坐；流泪，眼睑水肿并形成“泪斑”,1、发热或不发热，厌食，流感样症状；2、难于控制的腹泻；3、外表正常猪注射其他疫苗后即发病。,PRRS-仔猪隐性感染,PRRS-继发感染,皮肤发红，发热，减食，继发细菌感染，副猪、链球菌、传胸。造成病毒病免疫失败，各种疾病混合感染。育肥猪发育迟缓，生长速度缓慢。保育阶段损失20-30%,防控措施,控制蓝耳病的三个基本点：,合格、优质的弱毒苗免疫最基本的猪场生物安全措施必要的、适时的药物保健

9、措施,蓝耳病疫苗,目前国内现有灭活疫苗：传统型灭活疫苗高致病性变异株灭活疫苗弱毒疫苗：传统型毒株致弱活疫苗高致病性变异株致弱活疫苗自然弱毒株疫苗,国内猪繁殖与呼吸综合征（PRRS）疫苗株,活疫苗经典PRRS疫苗 VR2332株CH-1RR98株高致病性PRRS活疫苗湖南株（HuN4-F112株）江西株（JXA1-R株）天津株（TJM-F92）,蓝耳病疫苗,R98株 中岸，瑞普，南农高科 3个厂猪繁殖与呼吸综合征活疫苗（VR2332株）德国 1个厂猪繁殖与呼吸综合征活疫苗（Ch-1R株）哈尔滨维科、上海海利、大北农、成都天邦、普莱柯、诺倍威、南京乾元浩、华派和易邦 9个厂高致病性PRRSV活疫苗

10、（JXA1-R株）9个厂高致病性PRRSV活疫苗（HuN4-F112株）4个厂高致病性PRRSV活疫苗（TJM-F92株）5个厂猪繁殖与呼吸综合征灭活疫苗（Ch-1a株）哈尔滨高致病性PRRSV灭活疫苗（JXA-1）19个厂 蓝耳病活疫苗列表（31个厂）,目前的蓝耳病疫苗,自然弱毒和人工弱毒的区别,自然弱毒：本身不致病，在猪体内天然存在，不会对猪产生任何影响（致病），但是又具有良好的免疫原性，即接种后能有效的预防蓝耳病的发生。人工弱毒：本是强毒，能够引起猪发病，但经过人工方法致弱后，暂时不对猪产生致病性，接种后也能够预防蓝耳病的发生，但后遗症是若干代后存在毒力返强的可能，也就是说接种这种疫苗可

11、能会导致以后蓝耳病的爆发。在科研中，自然弱毒株的疫苗是天然的疫苗，是可遇不可求的毒株，很多研究人员一辈子都得不到。,37,蓝耳病弱毒苗免疫后的好处,疾病状态下缩短排毒时间缩短病毒血症和持续感染时间减轻肺组织的病变缩短病毒在脏器的存留时间预防情况下提高猪群免疫力杜绝了流产风暴，减轻PRDC的病情降低保育猪的发病率和死亡率、发病时疾病的可控程度显著提高减少混合感染和继发感染：可以降低圆环病毒感染对养殖场的影响,影响PRRS疫苗质量的关键因素,免疫佐剂,快速提升免疫力，增强免疫效果,兰芷优-中国第1个蓝耳病自然弱毒活疫苗,兰芷优的优势,自然弱毒株，安全稳定不变异免疫原性好，经典变异均保护抗原含量高，

12、纯净高效无应激进口稀释液，快速提升免疫力滴鼻和肌注，适用于任何猪群,一、自然弱毒株，毒力不返强，安全稳定不变异,毒力返强试验：R98株分离自蓝耳抗体阳性而临床健康的猪群，为美洲型自然弱毒株，高度安全稳定。疫苗种毒在细胞上连续传100代，猪体连续回归10代，毒力稳定，不返强。疫苗种毒体内外连续传30代，病毒基因序列未发生变异，遗传稳定性好。,兰芷优种毒不同代次病毒接种仔猪无致病性（1-100代不返强）,兰芷优种毒不同代次病毒接种母猪无致病性试验（F1-F100）,不同免疫剂量的安全性试验：分别以单剂量和10倍剂量免疫1日龄仔猪、14日龄仔猪和不同日龄妊娠母猪（配种前21天后备母猪，妊娠30天经产

13、母猪，妊娠60天经产母猪及妊娠90天经产母猪）。免疫仔猪及母猪精神、食欲、体温均正常，无任何不良反应，母猪在预产期顺利产仔，对各组所产仔猪进行RT-PCR检测，均未检测到蓝耳病毒。结果表明：该疫苗对猪是高度安全的。,母猪安全性试验,注：各免疫每头肌肉注射10头份“兰芷优”，对照组肌肉注射生理盐水。免疫后观察猪体温、采食量、增重情况，产仔情况及仔猪成活率等指标，并且对所有仔猪进行蓝耳病毒PT-PCR检测。“检测仔猪带毒*”：分母代表检测数，分子代表阳性数。,仔猪安全性试验,注：评价指标为：观察免疫猪体温、采食量、增重情况；“*”：,兰芷优,10个使用剂量注射后观察21天，猪的体温、精神、食欲没变

14、化,5头份疫苗各注射0.2ml 观察10天全部存活,兰芷优疫苗安全检验,二、免疫原性好，经典变异均保护,R98株与美洲型经典毒株VR2332株同源性高达99.5%以上，免疫后能有效刺激机体快速产生保护性抗体、细胞免疫和粘膜免疫，对蓝耳病经典毒株和变异毒株均能提供有效保护。对不同的蓝耳病病毒攻击，均有良好的交叉保护，对普通蓝耳病临床保护95.4%以上，对高致病蓝耳病保护率为80%以上。完全可代替进口蓝耳病活疫苗。,兰芷优对变异株蓝耳病毒的攻毒保护试验,用2830日龄PRRSV抗体阴性健康仔猪5头，每头颈部肌肉注射1头份兰芷优，同时设同龄PRRSV抗体阴性健康仔猪5头作为对照。接种后30日，分别用

15、变异毒株JXA1株（105.0TCID50/ml）攻击，滴鼻2ml/头，连续观察4周，根据体温、临床表现和转归情况进行判定。疫苗免疫组发病率降低80%，死亡率降低40%。试验证明：“兰芷优”对变异株蓝耳病有很好的免疫保护作用。见下表：,兰芷优对变异株蓝耳病毒的攻毒保护试验,注：试验中攻毒毒株为猪繁殖与呼吸综合征变异毒株JXA1株；临床表现*：-无明显临床异常表现，+表示临床症状严重程度；归宿*：-没有死亡，剖杀，+死亡。,三、抗原含量高，纯净高效无应激,采用细胞工厂替换原有转瓶生产工艺，同时采用病毒复种技术，在提高了病毒产量的同时，确保疫苗批内一致，批间稳定；采用超声破碎收毒工艺，规避传统工艺

16、对病毒免疫原性和效价的影响，确保每头份疫苗抗原含量106.0TCID50（国标105.0TCID50），病毒含量高，免疫无需加量，一次免疫仅需1头份，即可产生较好的免疫保护。采用低温连续流离心纯化技术，快速有效地去除细胞培养液中细胞碎片等杂蛋白，疫苗纯净无应激。,细胞工厂,细胞工厂（Cell Factory）是一种设计精巧的细胞培养装置，在有限的空间内利用了最大限度的培养表面，从而节省了大量的厂房空间，无需进行任何厂房改造即可实现扩大产能的目的。采用世界最先进的丹麦NUNC公司生产的NUNC细胞工厂系统培养疫苗。目前有1，2，10和40层的规格的设备。低污染风险，节省空间，培养表面经测试保证最

17、有利于细胞贴附和生长。特有的专利设计能有效的保证操作的无菌性，最大限度降低批间差异，提高病毒产量，实现操作规程化。,细胞工厂培养设备,病毒复种,细胞长满单层，接种病毒后，在培养液中再接种一层细胞，提高细胞密度，提高病毒产量，减少批间差异。,连续流管式分离机,低温连续流离心纯化技术 Continuous centrifugation technique,1、去除杂蛋白等，降低疫苗副反应2、低温环境，快速离心，保持良好的抗原性,四、进口专用稀释液，快速提升免疫力,中岸生物采用法国进口免疫增强剂，调节免疫功能，特别是提高细胞免疫效力，可有效提升疫苗的免疫效果。免疫后7天产生抗体，14天即可产生有效保

18、护，一次免疫有效抗体水平可维持140天。用于紧急免疫，效果显著。,五、滴鼻和肌注，适用于任何猪群,兰芷优可滴鼻免疫，蓝耳病主要是经呼吸道传播感染的，模拟自然感染途径，滴鼻接种可快速产生局部粘膜免疫，形成蓝耳病的第一道防疫屏障，再结合注射免疫对蓝耳病的防控效果更好。,兰芷优滴鼻蓝耳病免疫新突破,参考免疫方法,1、蓝耳病阴性猪场，不推荐免疫接种疫苗，或仅免疫灭活疫苗（目前几乎没有阴性猪场）。2、蓝耳病阳性猪场，根据猪场蓝耳病毒情况、抗体情况安排免疫，建议用专用稀释液稀释成每头份2ml，肌肉注射。经产母猪 首次应用疫苗，全群普免一次，1头份/头，以后实行跟胎免疫；或每45个月免疫一次，1头份/头。后

19、备母猪 配种前36周，1头份/头；未免蓝耳病疫苗的外购后备母猪进入隔离舍35天后免疫一次，1头份/头。仔 猪 对未曾用过蓝耳病疫苗的猪场，首次免疫对产房和保育舍的所有小猪全群免疫，1头份/头；以后对产房内未免疫仔猪，24周龄免疫一次，1头份/头。3、蓝耳病发病猪场 全群紧急免疫，母猪2头份/头、仔猪1头份/头，30天后同样头份加强免疫一次。,自然弱毒，安全稳定不变异：高致病毒株、CH-1R株株安全有效：研发时间十年，5年大量临床应用，未发现基因重组，高度安全（数据展示），对高致病毒株有很好保护力（数据展示）（猪场使用情况展示）高致病毒株不安全：研发时间短、不建议打母猪、打后发病CH-1R株不安全：已发生变异（资料展示）、打后发病效果确切，性价比高：勃林格 同源性在.以上，效果与勃林格的相当，但价格优势对经典毒株和高致病毒株均有良好保护 对普通蓝耳病临床保护95.4%以上，对高致病蓝耳病保护率为80%以上,兰芷优与其它疫苗比较,谢谢!祝：大家新年快乐！阖家欢乐！2014年业绩飙升！马到功成！,