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分子生物学试题库汇总汇编Word文件下载.docx

1、碱基丢失 D.形成共价连接的嘧啶二聚体4.自然界中以DNA为遗传物质的大多数生物DNA的复制方式(C)A.环式 B.D环式 C.半保留 D.全保留5.原核生物基因组中没有(A)A.内含子 B.外显子 C.转录因子 D.插入序列 6.关于组蛋白下列说法正确的是(D)A.为中性蛋白 B.为酸性蛋白 C.进化上不具保守性 D.染色体结合蛋白7.DNA聚合酶(C)A.是复制酶,但不是修复酶 B.没有模板依赖性 C.有53外切酶活性D. 53聚合酶活性极强简述DNA复制的过程 DNA的复制过程可被分为3个阶段,即复制的起始、延伸和终止。每个DNA复制的独立单元主要包括复制起始位点和终止位点。 DNA复制

2、的起始包括预引发和引发两个阶段。在预引发阶段,DNA解旋解链,形成复制叉,引发体组装;在引发阶段,在引发酶的催化下以DNA链为模板合成一段短的RNA引物。复制时DNA链的延伸由DNA聚合酶催化,以亲代DNA链为模板,引发体移动,从53方向聚合子代DNA链。当子链延伸到达终止位点是,DNA复制就终止了,切除RNA引物,填补缺口,在DNA连接酶的催化下将相邻的冈崎片段连接起来形成完整的DNA长链。试述真原核生物的DNA复制的特点的不同之处真核生物染色体有多个复制起点,多复制眼,呈双向复制,多复制子。原核生物的染色体只有一个复制起点,单复制子也呈双向复制。 真核生物冈崎片段长约200bp比原核生物略

3、短。真核生物DNA复制速度比原核慢,速度为10003000bp/min(仅为原核生物的1/201/50)。真核生物复制的终止在端粒处,原核生物的复制叉相遇时即终止。真核生物染色体在全部复制完之前起点不再重新开始复制;而在快速生长的原核生物染色体DNA复制中,起点可以连续发动复制。真核生物快速生长时,往往采用更多的复制起点。 真核生物有多种DNA聚合酶,DNA聚合酶是真正的复制酶,在PCNA存在下有持续的合成能力。PCNA称为增殖细胞核抗原,相当于大肠杆菌DNA聚合酶的-夹子,RFC蛋白相当于夹子装配器。原核生物的DNA聚合酶有三种DNA聚合酶DNA的真正复制酶:多亚基酶,含十种亚基,该酶DNA

4、合成的持续能力强。真核生物线性染色体两端有端粒结构,它是由许多成串的重短复序列组成,端粒功能是稳定染色体末段结构,防止染色体间的末端连接,并可补偿滞后链5-末段在消除RNA引物后造成的空缺,使染色体保持一定长度。端粒酶是含一段RNA的逆转录酶。RPA:真核生物的单链结合蛋白;RNaseH1和MF-1切除RNA引物,DNA聚合酶填补缺口。简述半保留复制的生物学意义DNA的复制过程(以大肠杆菌为例)复制起始:(1)、拓扑异构酶解开超螺旋。(2)、Dna A蛋白识别并在ATP存在下结合于四个9bp的重复序列。(3)、在类组蛋白(HU、ATP参与下, Dan A蛋白变性13个bp的重复序列,形成开链复

5、合物。(4) 、Dna B借助于水解ATP产生的能量在Dna C的帮助下沿5 3 方向移动,解开DNA双链,形成前引发复合物。(5)、单链结合蛋白结合于单链。(6)、引物合成酶(Dna G蛋白)开始合成RNA引物。 链的延长(冈崎片段的合成):在DNA聚合酶的催化下,以四种5 -脱氧核苷三磷酸为底物,在RNA引物的3端以磷酸二酯键连接上脱氧核糖核苷酸并释放出焦磷酸。DNA链的延伸同时进行前导链和滞后链的合成。两条链方向相反。6、PCR的基本原理?PCR是在试管中进行的DNA复制反应,基本原理是依据细胞内DNA半保留复制的机理,以及体外DNA分子于不同温度下双链和单链可以互相转变的性质,人为地控

6、制体外合成系统的温度,以促使双链DNA变成单链,单链DNA与人工合成的引物退火,然后耐热DNA聚合酶以dNTP为原料使引物沿着单链模板延伸为双链DNA。PCR全过程每一步的转换是通过温度的改变来控制的。需要重复进行DNA模板解链、引物与模板DNA结合、DNA聚合酶催化新生DNA的合成,即高温变性、低温退火、中温延伸个步骤构成PCR反应的一个循环,此循环的反复进行,就可使目的DNA得以迅速扩增。DNA模板变性:模板双链DNA?单链DNA,94。退火:引物单链DNA?杂交链,引物的Tm值。引物的延伸:温度至70 左右, Taq DNA聚合酶以种dNTP为原料,以目的DNA为模板,催化以引物末端为起

7、点的53DNA链延伸反应,形成新生DNA链。新合成的引物延伸链经过变性后又可作为下一轮循环反应的模板PCR,就是如此反复循环,使目的DNA得到高效快速扩增。第三章启动子:是一段位于结构基因5,端上游区的DNA序列,能活化RNA聚合酶,使之与模板DNA准确地相结合并具有转录起始的特异性。指RNA聚合酶识别、结合和开始转录的一段特定的DNA序列。增强子:能强化转录起始的序列称为增强子。转录:以DNA为模板,按照碱基配对原则合成RNA,即将DNA所含的遗传信息传给RNA,形成一条与DNA链互补的RNA的过程。RNA的编辑:是某些RNA,特别是mRNA的一种加工方式,它导致了DNA所编码的遗传信息的改

8、变。外显子(Exon) :真核细胞基因DNA中的编码序 列,这些序列被转录成RNA并进而翻译为蛋白质。内含子(Intron) :真核细胞基因DNA中的间插序列,这些序列被转录成RNA,但随即被剪除而不翻译。复制子:生物体的复制单位称为复制子(replicon) ,是在同一个复制起点控制下的一段DNA序列。转录单元:是一段启动子开始至终止子结束的DNA序列。转录起点:是与新生RNA链的第一个核苷酸相对应的DNA链上的碱基,通常为一个嘌呤。转录开始时模板上的第一个碱基,在原核中常为A或G,而且位置固定。填空1转录的基本过程包括:模板识别,转录起始,转录的延伸,转录的终止。2基因表达包括:转录和翻译

9、 两个阶段。3RNA的编辑方式:碱基突变,尿甘酸的缺失和添加。4在原核生物中,-35区与-10区之间的距离大约是1619bp5帽子结构的功能:1在翻译中起识别作用2使mRNA免遭核苷酸的破坏6原核生物只有一种RNA聚合酶而真核生物有三种,每一种都有其特定的功能。聚合酶合成rRNA,聚合酶合成mRNA,聚合酶合成tRNA和5s rRNA。三种聚合酶都是具有多亚基的大的蛋白复合体。7 转录因子通常具有两个独立的结构域:一个结合DNA,一个激活转录。8 在真核细胞mRNA的修饰中,“帽子”结构由甲基组成,“尾”由多聚腺嘌呤组成。9原核生物的绝大部分起启动子都存在共同的序列,即位于-10bp处的 区和

10、-35bp处的 区,他们都是RNA聚合酶与启动子结合的位点,能与因子相互识别而具高度亲和性。真核生物中,在转录起始位点上游-25-35bp处有 区和位于-70-80bp处 的 区。1因子的结合依靠(A)A对启动子共有序列的长度和间隔的识别B与核心酶的相互作用C翻译起始密码子的距离D转录单位的长度2下列哪一项是对三元转录复合物的正确描述(C)A因子、核心酶和双链DNA在启动子形成的复合物B全酶、TFI和解链DNA双链形成的复合物C全酶、模板DNA和新生RNA形成的复合物D三个全酶在转录起始位点形成的复合物3因子和DNA之间相互的最佳描述是(C)A游离和与DNA结合的因子的数量是一样的,而且因子合

11、成的越多,转录起始的机会越大B因子通常与DNA结合,且沿着DNA搜寻,直到在启动子碰到核心酶,他与DNA的结合不需要依靠核心酶C因子通常与DNA结合,且沿着DNA搜寻,直到碰到启动子,再有核心酶存在时与之结合D因子加入三元复合物而启动RNA合成4 因子专一性表现在(B)A因子修饰酶催化因子变构,使其成为可识别应激启动子的因子B不同基因编码识别不同启动子的因子C不同细菌产生可互换的因子D因子参与起始依靠特定的核心酶5在大肠杆菌的热激反应中,某些蛋白质表达的开启和关闭的机制是(C)A温度升高使特定阻抑蛋白失活B编码热敏感蛋白的基因的启动子区域在较高温度下发生变形C在高温时合成新的因子,调节热激基因

12、的表达D高温时,已存在的聚合酶因子与启动子的结合能力强6 真核生物中rRNA包括(D)A 28s,23s,5s rRNA B 23s,16s,5s rRNAC 23s,16s,5.8s rRNA D 28s,23s,5.8s,5s rRNA7 内含子的剪切位点具有的特征(A)A 5,GU,3,AG B 5,AG,3,GUC 5,GA,3,UG D 5,UG,3,GA8 部分原核基因的转录终止子在终止位点前均有(A)A 回文序列 B 多聚T序列 C TATA序列 D 多聚A序列9 mRNA5,端帽子结构为(C)A pppmG B GpppG C m7GpppG D GpppmG简答题1增强子的特

13、点1有远距离效应2无方向性3顺势调节4无物种和基因的特异性5具有组织的特异性6有相位性,其作用与DNA的构象有关7有的增强子可以对外部信号产生反应。2比较DNA复制和转录的异同点相同点:都以DNA链作为模板,合成方向均为5,端到3,端,聚合反应均遵循碱基配对原则,通过核苷酸之间形成的3,5,磷酸二酯键使核苷酸键延长。不同点:复制转录模板两条链均被复制模板链转录(不对称转录)原料DntpNTP酶DNA聚合酶RNA聚合酶产物子代双链DNA(半保留复制)mRNA tRNA rRNA配对方式A-T G-CA-U A-T G-C引物RNA引物不需要引物DNA复制与转录的异同 都需要模板 都以三磷酸核苷酸

14、为底物(NTP或dNTP) 合成方向都是53不同点转录不需引物;只转录DNA分子中的一个片段(称为转录单位或操纵子,operon);双链DNA中只有一条链具有转录活性(称为模板链);哪个基因被转录与特定的时间、空间、生理状态有关。RNA聚合酶无校对功能。原核生物与真核生物mRNA的比较(1)、原核生物mRNA的半衰期短;(2)、许多原核生物mRNA以多顺反子形式存在;(3)、原核生物5端无帽子结构,3或只有短的poly(A)。(4)、真核生物mRNA5端有帽子结构,(5)、绝大多数真核生物mRNA3具有poly(A)尾巴,是转录后加上的,是mRNA从核到质转移所必需的形式,提高mRNA的稳定性

15、。大肠杆菌的转录过程:(1)、识别阶段:RNA聚合酶在亚基的引导下结合于启动子上;(2)、DNA双链局部解开;(3)、起始阶段:在模板链上通过碱基配对合成最初RNA链;(4)、延伸阶段:核心酶向前移动,RNA链不断生长;(5)、终止阶段:RNA聚合酶到达终止子;(6)、RNA和RNA聚合酶从DNA上脱落。论述题1 真核生物转录的前体hnRNA如何加工为成熟的mRNA?真核生物mRNA的结构组成:5,端存在帽子结构,3,端通常具有poly(A)尾巴,无内含子,部分碱基发生甲基化。5,端加帽:当RNA聚合酶聚合的转录产物达到25碱基长时,在其5,端加上一个以5,3,方向相连的7甲基鸟苷帽,防止5,

16、核苷酸外切酶的攻击,有利于剪接、转运和翻译的进行;3,端加尾:很多真核生物的hnRNA的3,端经过剪切后再加上多聚A残基即poly(A)尾巴,这有助于整个分子的稳定;剪接:在真核生物的mRNA加工过程中,内含子序列被切除,两侧的外显子片段连接。剪接反应在核内进行,需要内含子有5,GU,AU3,以及一段分支点序列。其过程是:内含子先以一个具尾的环状分子或套索状分子形式被删除,然后被降解,剪接包括snRNP与保守序列结合,形成剪接体,在其内发生剪接与连接反应;编辑;甲基化修饰:当序列为5,RRACX3,时会在第6位N原子位置发生甲基化。2概括细菌细胞的转录过程转录是通过RNA聚合酶的作用,以一条D

17、NA链为模板产生一条单链RNA过程。步骤如下:与RNA聚合酶全酶的结合:一个RNA聚合酶全酶分子与待转录的DNA编码序列上游的启动子序列松弛的结合。起始:RNA聚合酶往下游移动了几个核苷酸到达启动子的另一段短序列Pribnow框,紧密地与DNA结合。DNA上的启动子区域解链,RNA便从Pribnow框下游的几个核苷酸处开始合成,通常是DNA的反义链作为模板,合成几个核苷酸后,因子被释放并循环使用,以下步骤不再需要因子。延伸:RNA聚合酶核心酶沿着DNA模板移动,使DNA解链,与DNA模板的下一碱基互补核苷三磷酸聚合到链上。RNA聚合酶继续在DNA上移动,RNA链从模板链被释放出来,DNA双螺旋

18、重新形成。当所有编码序列被转录后,RNA聚合酶移动一个终止序列,即终止子。转录复合体解体,RNA聚合酶和新形成的RNA从DNA模板上脱落下来。3、复杂转录单位的原始转录产物的加工方式有几种?分别是什么?(1)剪、利用多个5端转录起始为点或接位点产生不同的蛋白质。(2)、利用多个加poly(A)位点和不同的剪接方式产生不同的蛋白质。(3)、虽无剪接,但有多个转录起始位点或加poly(A)位点的基因。第四章.SD序列:在原核生物mRNA起始密码AUG上游,存在49个富含嘌呤碱的一致性序列,如-AGGAGG-,称为S-D序列。位于原核生物起始密码子上游7-12个核苷酸处的保守区,该序列与16SrRN

19、A3端反向互补。又称为核蛋白体结合位点(ribosomal binding site,RBS)正转录调控:负转录调控:1tRNA的种类有:起始tRNA和延伸tRNA,同工tRNA,校正tRNA。2. tRNA的二级结构为三叶草型,三级结构为倒L型。tRNA结构3.原核生物蛋白质合成的起始tRNA是甲酰甲硫氨酰tRNA(fMet-tRNA fMet),它携带的氨基酸是甲酰甲硫氨酸(fMet),而真核生物蛋白质合成的起始tRNA是甲硫氨酰tRNA(Met-tRNA Met),它携带的氨基酸是甲硫氨酸(Met)。4新生肽链每增加一个氨基酸单位都要经过AA-tRNA与核糖体的结合,肽键形成,移位三步反

20、应。5. 核糖体的作用位点有:A位点、P位点、E位点。5在真核生物中蛋白质合成起始时先形成起始因子和起始tRNA复合物,再和40S亚基形成40S起始复合物。6氨酰tRNA合成酶既能识别氨基酸,又能识别相应的tRNA。7多肽合成的起始密码子是AUG,而UAA,UAG,UGA是终止密码子。8遗传密码的特点包括连续性,简并性,摆动性,普遍性与特殊性。9核酸复制时,DNA聚合酶沿模板链35方向移动;转录时,RNA聚合酶沿模板链35方向移动;翻译时,核糖体沿模板链5 3方向移动。10原核生物蛋白质合成形成起始复合物时,其mRNA先与核糖体的30S亚基结合,然后再与结合起始因子和GTP的甲酰甲硫氨酰tRN

21、A结合,形成30S起始复合物,然后再与50S形成70S起始复合物。1在蛋白质合成中催化肽键合成的是(D)A延长因子EF-Ts B. 延长因子EF-Tu C. 启动因子IF3 D.转肽酶2翻译后加工过程的产物是(B)A一条多肽链 B. 一条多肽链或一条以上的多肽链C多条多肽链 D. 多肽链的降解产物3.已知某蛋白质多肽链编码序列为GGA,则其mRNA转录本(A)A 以5 GGA3为模板,沿转录本5 3方向延长B. 以5 GGA3为模板,沿转录本3 5方向延长C. 以3GGA5为模板,沿转录本5 3方向延长D. 以3GGA5为模板,沿转录本3 5方向延长4.细菌核糖体RNA中大亚基由以下物质组成(

22、C)A5S rRNA , 18S rRNA, 5.8S rRNA和49种蛋白质 B. 5S rRNA , 28S rRNA, 5.8S rRNA和49种蛋白质C5S rRNA , 23S rRNA和34种蛋白质 D. 5S rRNA , 16S rRNA和34种蛋白质5.肽链生物合成时信号肽序列(B)A决定糖类残基的附着点 B.将新生肽链导入内质网C.控制蛋白质分子的最终构象 D.具有疏水性6.真核生物的翻译起始复合物在何处形成(B)A. 起始密码子AUG处 B. 5端的帽子结构CTATA框 D.CAAT框7.蛋白质生物合成的终止信号由(D)AtRNA识别 B.EF识别 C.IF(或eIF )

23、识别 D.RF识别8.能编码多肽链的最小DNA单位是(A)A顺反子 B.操纵子 C .启动子 D.复制子9.参与原核生物肽链延长的因子是(C)AIF1 B. IF2 C.EF-Tu D.RF110. 参与真核生物肽链延长的因子是(D)A eRF B. eIF1 C.EF-Tu D.eEF1简答题:1简述核糖体的结构及功能特点:答:核糖体的结构:真核生物:由60S大亚基和40S小亚基组成的80S的核糖体;原核生物:由50S大亚基和30S小亚基组成的70S的核糖体功能特点:合成蛋白质 。在单个核糖体上,包括至少5个功能活性中心,在蛋白质合成过程中,各有专一的识别作用和功能:mRNA的结合部位小亚基

24、 ,结合或接受AA-tRNA的部位大亚基A位,结合或接受肽基tRNA部位大亚基,肽基转移部位大亚基P位,形成肽键部位(转肽酶中心)大亚基E位。2.简述氨基酸的活化过程游离的氨基酸必须经过活化以获得能量,才能参与蛋白质的合成,活化反应由氨酰tRNA合成酶催化。活化分两步:活化:aa + ATP+ E氨基酰-AMP释放出 PPi 转移:氨基酰-AMP转移到 tRNA 并释放出 AMP。3、论述蛋白质的翻译过程。蛋白质的翻译即合成过程可分为四个阶段:氨基酸的活化、肽链合成的起始、延伸和终止。1 氨基酸的活化:游离的氨基酸必须经过活化以获得能量,才能参与蛋白质的合成,活化反应由氨酰tRNA合成酶催化,

25、最终氨基酸连接在tRNA的3端合成氨酰- tRNA。2 肽链合成的起始:核蛋白体大小亚基分离 ,mRNA在小亚基上定位结合,起始氨基酰tRNA与小亚基结合,核蛋白体大亚基结合。肽链的延伸:肽链的延长是在核蛋白体上连续性循环式进行,每次循环增加一个氨基酸,分为以下三步:(一)进位:根据mRNA下一组遗传密码指导,使相应氨基酰-tRNA进入核蛋白体A位。(二)成肽:肽酰转移酶将相邻的两个氨基酸相连形成肽键,该过程不需要能量的输入;(三)转位:移位酶利用GTP水解释放的能量使核糖体沿mRNA移动一个密码子,释放出空载的tRNA并将新生肽链运至P位点。3 肽链合成的的终止与释放:释放因子识别并与终止密

26、码子结合,水解P位上多肽链与tRNA之间的二脂键,接着,新生肽链和tRNA从核糖体上释放,核糖体大、小亚基解体,蛋白质合成结束。4、原核生物翻译的起始过程(1)核糖体大小亚基分离(2)30s小亚基通过SD序列与mRNA模板相结合(3)在IF-2和GTP的帮助下fMet-tRNAfMet进入小亚基的P位,tRNA的反密码子与mRNA上密码子配对。(4)带有tRNA、mRNA和三个翻译起始因子的小亚基起始复合物与50s的大亚基结合,GTP水解释放翻译起始因子。5、以大肠杆菌为例简述蛋白质合成的过程从以下四个方面详细论述(1)氨基酸的活化:(2)肽链合成的起始:(3)肽链的延生:(4)肽链合成的终止

27、:第六章乳糖操纵子模型内容(1)Z、Y、A基因产物由同一条多顺反子mRNA分子所编码。(2)乳糖操纵子mRNA分子的启动区(P)位于阻遏基因(I)与操纵区(O)之间,不能单独起始半乳糖苷酶和透过酶基因的高效表达。(3)乳糖操纵子的操纵区是DNA上的一小段序列(仅为26bp),是阻遏物的结合位点。(4)当阻遏物与操纵区相结合时,lacmRNA的转录起始受到抑制。(5)诱导物通过与阻遏物结合,改变其三维构象,使之不能与操纵区相结合,诱发lac mRNA的合成。色氨酸操纵子转录水平上的调控通过核糖体与mRNA前导序列结合,对转录终止进行调控。 Attenuator(衰减子): 是位于转录单位开始区的一种内部终止子,由核糖体在mRNA上的位置决定该终止发夹是否形成。若不形成发夹,RNA聚合酶通读终止子,基因得以表达。当缺乏色氨酸时,核糖体在trp密码子上暂停,此密码子是1区的一部分。所以1区被核糖体隔离,不能与2区碱基配对,这意味着在4区转录之前2区已和3区配对,迫使4区保持单链

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