公共卫生微生物采样检测方法总结Word下载.docx

1、（一）细菌总数1、生理盐水的制法：将氯化钠（8.5g）溶解于蒸馏水（1000mL）中，分装到试管内，每管10mL，121高压灭菌20min。2、采样：棉拭子湿润生理盐水，在茶具内、外缘涂抹50cm2，即口唇接触处一圈（11.5cm），用灭菌剪刀剪去棉签手接触处，将棉拭子放入10mL生理盐水中，4h内送检。3、检验程序：检样各1mL加入两块灭菌平皿（若污染严重，可十倍递增稀释）37，48h培养菌落计数报告4、单位：cfu/cm2。（2）大肠菌群2、培养基：乳糖胆盐发酵培养液（双料的，每管10mL，115高压灭菌15min）3、检测方法：发酵法（具体内容课本11页）4、检样（测定细菌总数余下的样品

2、）5、革兰氏染色过程：（阳性菌显紫色，阴性菌显红色）（1）初染：1min，水洗；（2）碘染：（3）脱色：30s，水洗；（4）复染：1min，水洗，待干，镜检。5、结果报告：凡乳糖发酵管最终产酸产气，革兰氏染色为阴性的无芽孢杆菌，即可报告检出大肠菌群。三、毛巾、床上卧具微生物检测方法1.采样（1）毛巾、枕巾：对折后两面的中央各25cm2；（2）床单、被单：在上下两部中央25cm2来回涂抹；2、检测程序同茶具细菌总数检测3.计算单位：cfu/25cm2。（二）大肠菌群（检测程序同茶具大肠菌群检测）1.涂抹法：（用测定细菌总数时采集的样品）四、理发用具微生物检验方法（一）大肠菌群1、采样推子：在推子

3、前部上下部分均匀各涂抹三次；理发刀、剪和修脚工具：在使用的刀、剪面的两侧各涂抹一次采样；两个刀或者两个剪为一份样品。2、检样5mL倒入双料乳糖胆盐发酵管，37，24h培养；3、分离培养：接种伊红美蓝平板，做革兰氏染色镜检；4、证实试验：接种乳糖发酵管37，24h培养，观察产气情况。乳糖管最终产酸产气、革兰氏染色为阴性的无芽孢杆菌，可报告为大肠菌群阳性。（2）金黄色葡萄球菌（3）培养基：7.5%的氯化钠肉汤或胰酪胨大豆肉汤培养基（4）步骤：（1）做大肠菌群剩余的5mL倒入培养基中，37，24h培养；（2）接种血平板，37，24h培养；观察形状：圆形、金黄色、凸起、表面光滑、周围有溶血圈；（3）挑

4、菌落做镜检：革兰氏阳性（红色），葡萄状排列；（4）甘露醇发酵试验：接种到甘露醇发酵培养基中，37，24h培养，观察是否产酸；（5）血浆凝固酶试验玻片法：在干净的玻片两边，一端滴一滴生理盐水，一端滴一滴血浆，接种环挑菌落分别与它们混合。5min后均无凝固现象的为阴性；若血浆中出现颗粒状凝块而生理盐水中没有，则为阳性。5、拖鞋微生物检验方法霉菌与酵母菌（生理盐水中要加入玻璃珠）2.培养基：霉菌培养基、（虎红）孟加拉红培养基、马铃薯葡萄糖琼脂培养基（PDA）3.取样：有棉拭子在每只拖鞋鞋面与脚趾接触处的5cm5cm面积上均匀涂抹3次，一双拖鞋为一份样品；4.将盛有棉拭子的试管在手心用力振荡100次，

5、使霉菌孢子分开；5.培养：在霉菌培养箱中2528，培养观察一周。6.单位是cfu/50cm2。6、浴盆、脸（脚）盆微生物检测（3）细菌总数无菌生理盐水：分装125mL/瓶供浴盆采样；50mL供脸（脚）盆采样。采样部位：在盆内侧二分之一到三分之一高度；布点：浴盆梅花布点；脸（脚）盆相对两侧壁布点；方法：涂抹法（与茶具方法一致）单位：（4）大肠菌群（同茶具）七、游泳池水微生物检测（1）、细菌总数1.采样瓶：无酸、无碱、无毒的玻璃容器。2.灭菌前要加入足量的10%的硫代硫酸钠溶液，一般125mL水样加0.1mL。3.采样游泳池水面积，儿童池成人池天然游泳池1000100025002500采样点数12235注：在水面下30cm处取水样450mL4.操作步骤（与茶具细菌总数一样）