肠易激综合征患者肠黏膜超微结构改变的电镜观看.docx

1、肠易激综合征患者肠黏膜超微结构改变的电镜观看肠易激综合征患者肠黏膜超微结构改变的电镜观看【摘要】 目的 观看肠易激综合征(IBS)患者小肠和结肠黏膜杯状细胞、浆细胞、神经内分泌细胞和肥大细胞超微结构的转变，探讨它们在IBS发病机制中的作用。方式 用活检钳别离钳取IBS患者腹泻型、便秘型和对照组各10例回肠结尾及升结肠黏膜，在透射电镜下观看肠黏膜杯状细胞、浆细胞、神经内分泌细胞和肥大细胞超微结构的转变。结果 与正常组比较，两型IBS患者结肠和小肠黏膜上皮都可见到杯状细胞内粘液泡和融合的粘液分泌泡明显增多；神经内分泌细胞和肥大细胞超微结构有改变，呈现功能活跃状态。4例发病前有急性感染性腹泻病史的腹

2、泻型IBS，肠黏膜中浆细胞多见，并有超微结构的改变。结论 小肠和结肠黏膜内杯状细胞、浆细胞、神经内分泌细胞、肥大细胞等超微结构的改变，可能在IBS病症发生的神经免疫、内脏感觉过敏等机制中有必然的作用。 【关键词】 肠易激综合征 肠黏膜 超微结构ABSTRACT: Objective To study the ultrastructural changes including chalice cell, plasma cell neuroendocrine cell and mast cell in the intestinal mucosa of patients with irritable

3、 bowel syndrome (IBS), and elucidate their possible effects on the pathogenesis of IBS. Methods Of 10 normal controls, 10 constipation predominant IBS (IBS C) and 10 diarrhea predominant IBS(IBS D), biopsies were taken from the terminal ileum and ascending colon. Under electron microscope, we observ

4、ed the ultrastructural changes including chalice cell, plasma cell, neuroendocrine cell and mast cell of the intestinal mucosa. Results In both colonic mucosa and small intestinal mucosa of patients with IBS, mucocysts and fused mucocysts were obviously increased in the chalice cells, of which the s

5、ecretion was abundant. The neuroendocrine cells and mast cells were also observed in the mucosa of colon and small intestine, which were accompanied with ultrastructural changes. In 4 IBS D patients with history of acute infectious diarrhea, more plasma cells with ultrastructural changes were found

6、in the intestinal mucosa. Conclusion The ultrastructural changes of chalice cell, plasma cell, neuroendocrine cell and mast cell may have a potential effect on neuro immunologic mechanism and visceral hypersensitivity of IBS.KEY WORDS: irritable bowel disease; intestinal mucosa; ultrastructure肠易激综合征

7、(irritable bowel disease, IBS)由于病症的特殊性和医治上的困难，常常给患者的日常生活带来较多的麻烦。迄今为止，关于IBS的病因和发病机制尚不完全清楚。近几年研究以为可能与精神心理因素、内脏感觉过敏、胃肠动力紊乱及肠道感染等多种因素有关1。本研究观看了IBS患者小肠和结肠黏膜杯状细胞、浆细胞、神经内分泌细胞和肥大细胞超微结构的转变，以便探讨它们在肠易激综合征发病机制中的作用。1 材料与方式 患者的选择和分组 严格依照罗马标准2(本组病例取材于2006年6月至2006年9月，与最新发布的罗马标准比较，也符合其标准3)，分IBS实验组及对照组。实验组又分为腹泻型和便秘型，

8、腹泻型IBS 10例：年龄19-68岁，平均岁，男4例，女6例，病程1-10年，其中4例发病前有急性感染性腹泻病史；便秘型IBS 10例：年龄18-65岁，平均岁，男4例，女6例，病程1-10年；对照组10例部份为结肠息肉或息肉内镜下医治后复查的患者，另一部份系便后滴血经结肠镜检查诊断为内痔出血者：年龄17-71岁，平均岁，男6例，女4例。这些患者无任何腹部不适，无便秘或腹泻病症。各组患者的年龄、性别等方面比较均具有可比性。所有入选对象如实告知实验目的，并经患者同意。 标本搜集 对所选病例别离进行电子结肠镜检查，并进入回肠结尾，用活检钳别离钳取回肠结尾及升结肠黏膜各2块，对照组标本一样取自于回

9、肠结尾和升结肠。标本不小于。 标本的制备和观看 样品掏出后切成1mm3的小方块，当即置于25g/L戊二醛固定液中4 2h以上(固定液内含有L磷酸缓冲液、40g/L的多聚甲醛)，L磷酸缓冲液浸洗30min，10g/L四氧化锇固定液4后固定2h(固定液内含有L磷酸缓冲液)，L磷酸缓冲液浸洗1min，乙醇梯度脱水：300mL/L乙醇10min，500mL/L乙醇10min，700mL/L乙醇10min；700mL/L乙醇醋酸双氧铀快染2h或留宿；900mL/L乙醇10min2；无水乙醇10min3；环氧丙烷置换10min；环氧树脂Epon812渗透、包埋，聚合后做半薄切片1m，美兰染色后光学显微镜下

10、定位，瑞典LKB V型超薄切片机进行超薄切片70nm，醋酸铀、柠檬酸铅染色后，日今日立H 600投射式电子显微镜下观看、拍照。2 结果 IBS患者肠黏膜杯状细胞和浆细胞的改变 H 600型透射电镜观看发觉：与正常组比较，两型IBS患者结肠和小肠黏膜上皮都可见到杯状细胞内粘液泡和融合的粘液分泌泡明显增多，呈分泌旺盛状态(图1A)。4例发病前有急性感染性腹泻病史的腹泻型IBS，肠黏膜中浆细胞较多，浆细胞胞质内粗面内质网发达并有扩张，线粒体增多，便秘型患者未见明显的浆细胞及结构改变(图1B)。 IBS患者肠黏膜神经内分泌细胞的改变 正常对照组小肠和结肠黏膜上皮中较少观看到神经内分泌细胞，细胞质中内分

11、泌颗粒少，无明显的空泡改变(图2A)。两型IBS患者小肠和结肠黏膜上皮细胞中可观看到神经内分泌细胞，呈锥形、上大下小、细胞核在上端、细胞质在下端、细胞质中充满高密度的内分泌颗粒，有的呈空泡状(图2B)。 IBS患者肠黏膜肥大细胞的改变 正常人小肠和结肠黏膜基质中较少观看到肥大细胞，胞质中颗粒密度较低，无空泡(图3A)。两型IBS患者小肠和结肠黏膜基质中肥大细胞胞质中充满高密度的颗粒和一些空泡，呈现活跃的脱颗粒状态(图3B)。图1 IBS患者肠黏膜杯状细胞的超微结构改变(A)和IBS D患者浆细胞的改变(B)（略） Chalice cells in patients with IBS (A) a

12、nd plasma cell in IBS D patients with history of acute infectious diarrhea (B) (4000)图2 正常人肠黏膜的神经内分泌细胞(A)和IBS患者肠黏膜中的神经内分泌细胞(B)（略） Neuroendocrine cell in normal people (A) and neuroendocrine cell in patients with IBS (B) (4000)图3 正常人肠黏膜中的肥大细胞(A)和IBS患者肠黏膜中的肥大细胞(B)（略） Mast cell in normal people (A) and

13、 mast cell in patients with IBS (B)3 讨论 近几年关于IBS患者肠黏膜细胞超微结构的改变有很多报导。国外的研究以为IBS患者直肠黏膜神经内分泌细胞、T淋巴细胞表达增加4。Kostiukovich等5报导，在激惹性结肠征患者的直肠，初期内分泌细胞增加，慢性期减少。国内邹多武等6报导了IBS患者结肠黏膜肥大细胞数量及超微结构的改变，并以为这种改变与IBS患者的肠道高灵敏性有关。虞功清7报导了IBS患者结肠黏膜浆细胞、神经内分泌细胞及肥大细胞的转变。同时，以为与IBS患者的发病机制有关。可是，他们没有观看IBS亚型的不同。另外，小肠黏膜是不是有这种改变国内外报导较

14、少。咱们观看了便秘型和腹泻型IBS患者小肠黏膜和结肠黏膜杯状细胞、浆细胞、神经内分泌细胞和肥大细胞的超微结构转变，因结肠镜取材范围有限，小肠标本多取于盲肠以上20-35cm左右的回肠结尾黏膜。 因活检钳取材容易破坏表面黏膜结构，咱们的实验未观看肠黏膜的上皮细胞、绒毛及隐窝结构。可是，虞功清等7在透射电镜下观看发觉IBS结肠黏膜的上皮细胞排列整齐、形态正常、膜完整、细胞间隙紧密，但有上皮细胞微绒毛散布不规整、密度低而不均、长短方向不一等转变。 咱们研究发觉：与正常组比较，不管腹泻型仍是便秘型IBS，患者结肠和小肠黏膜上皮都可见到杯状细胞内粘液泡和融合的粘液分泌泡明显增多，呈分泌旺盛状态。这种现象

15、提示肠黏膜腺细胞功能处于活跃状态。肠道杯状细胞分泌的粘液具有很强的细胞爱惜功能，可明显减轻多种损伤因子介导的肠黏膜损害，肠道杯状细胞在受到炎性介质的刺激下，分泌明显增加8。本实验结果提示两型IBS患者肠黏膜可能存在某些不明缘故的炎性损伤。 4例有感染性腹泻病史的腹泻型IBS患者，结肠和小肠黏膜中浆细胞多见，浆细胞胞质内粗面内质网发达并有扩张，线粒体增多。提示部份腹泻型患者胃肠免疫系统呈激活状态，感染后的免疫持续可能为要紧缘故。许多临床研究说明肠道病毒、细菌、寄生虫感染的患者，即便病原体被清除及黏膜炎症消退后，仍然显现肠运动和分泌功能紊乱，即IBS病症9。其发病机制有多种观点，其中肠道感染损伤肠

16、黏膜上皮屏障致使肠功能紊乱的观点占多数，部份IBS患者在发病前有肠道感染史，如细菌性痢疾，并有肠道菌群失调的表现9。咱们的研究结果与国内外的报导相一致。本研究结果提示肠道感染持续的免疫激活，损伤肠黏膜上皮屏障可能是IBS发生的缘故之一。 咱们研究发觉两型IBS患者小肠和结肠黏膜上皮细胞中有较多神经内分泌细胞，呈锥形，上大下小，细胞核在上端近基底部或近腔面，细胞质在下端，细胞质中充满高密度的内分泌颗粒，有的呈空泡状；IBS患者结肠和小肠黏膜电镜下见肥大细胞呈活跃的脱颗粒状态，并见较多脱颗粒后的空泡，显示肥大细胞功能活跃及分泌活性物质增多，与国内外报导一致5 7。肠神经内分泌细胞如肠嗜铬细胞可分泌

17、5 羟色胺(5 HT)，5 HT的增加可通过脑肠轴的调剂，最终可能阻碍胃肠道动力和内脏感觉1。另外，肠内分泌细胞还可分泌胆囊收缩素、胃动素、血管活性肠肽、生长抑素、P物质和内源性阿片肽等胃肠激素。胃肠激素除对胃肠动力、内脏灵敏性有必然的阻碍外，对胃肠道的免疫反映也有必然的阻碍10。肥大细胞是一种重要的肠道炎性细胞，肠道肥大细胞表面具有胃肠激素受体，某些胃肠激素可剌激肥大细胞增殖及分泌前列腺素、组胺、5 HT、肝素和白三烯等物质。这些物质具有不同程度的致痛作用, 可能与IBS患者胃肠道痛觉灵敏性增高有关10。 本研究发觉IBS患者肠黏膜中杯状细胞、肥大细胞、浆细胞、神经内分泌细胞超微结构的转变。

18、显示它们均处于高度功能活跃和分泌旺盛状态。提示神经 免疫 内分泌系统可能在IBS发病中发挥着重要的作用。【参考文献】 1孙怡宁，罗金燕，兰莉，等. 替加色罗对结肠炎大鼠内脏灵敏性的阻碍及其与结肠内P物质和降钙素基因相关肽表达的关系 J. 西安交通大学学报(医学版), 2007, 28(5):506 510.2Thompson WG, Longstreth GF, Drossman DA, et al. Functional bowel disorders and functional abdominal pain J. Gut, 1999, 45(suppl):43 47.3Longstret

19、h G, Thonpson WG, Chey WD, et al. Functional bowel diseases J. Gastroenterology, 2006, 130(5):1480 1491.4Somek RC, Menkins D, Hhornley JP, et al. Increased rectal mucosal enteroendocrine cells, T lymphocytes and increased gut permeability following acute campylobacter enteritis and in post dysenteri

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