安全手册1.docx

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安全手册1

内蒙古医科大学附院皮肤科

文件编号：

NMCDC/ZY-XA-019

第1版

第2次修改

第1页

共14页

标题：

实验室生物安全操作手册

发布日期

2014.11.26

编写人：

高娃

审核人:

罗夏

批准人:

实验室生物安全操作手册

2015年10月

一、实验室使用和操作技术规程

1.目的

规范生物安全二级实验室的使用和管理，保证操作人员，实验对象和环境安全，确保检测结果准确可靠。

2.适用范围

适用于生物安全二级实验室安全运转及在此环境下的检测工作。

3.职责

进入生物安全二级实验室从事检测工作的所有人员严格按照本规定执行。

4.具体要求：

4.1概述

4.1.1生物安全二级实验室用于对检验者和环境有中度潜在危险样品的各项实验，必须符合下列规定：

4.1.1.1具备操作资质的人员可在生物安全二级实验室内工作，其他任何人未经许可禁止进入实验室。

4.1.1.2在实验室内的一切活动，必须遵照生物安全手册的规定进行。

4.1.1.3实验室内污染的空气需通过高效过滤器后方能排出室外。

4.1.1.4实验室内产生的污水，必须经过消毒后方可进入公共污水系统。

4.1.1.5实验室的所有废弃品，必须通过高压灭菌后才能处理和清洗。

必须携出实验室的中间实验材料、更换维修的仪器设备、也只有在确保无病原微生物污染的条件下，才能携出实验室。

4.1.1.6实验室内准备二级全排式生物安全柜，所有可能造成污染的能够置于生物安全柜内的实验操作，置其内进行，以保证实验室内空间的安全。

4.1.2实验室运行的安全性要求

本手册规定的各项要求，首先是为了保证实验室的安全运行，包括防止实验室工作人员的感染、防止实验室操作的病原微生物对环境的污染、防止检测样品的污染，保证实验结果的准确可靠。

4.1.3实验室工作的质量要求本手册规定的各项要求，同时也是为了保证实验室的工作质量，即：

实验产生的各项结果和数据，必须准确可靠：

实验室出具的检验报告，必须明确完整。

4.2组织管理与职责

4.2.1组织框架图    

                单位法人{或授权}负责人

                        ↓

                    实验室负责人

                        ↓  

                    生物安全员

                        ↓

                    实验室工作人员

4.2.2职责

4.2.2.1单位法人{或授权}负责人

（1）负责组织生物安全实验室的立项、选址，施工队的资质验证。

（2）组所成立生物安全委员会负责生物安全，制定管理制度，监督有关法规和操作规程的执行情况。

（3）负责组织对造成外环境污染、实验室污染、人身伤害事故的调查与处理。

4.2.2.2实验室负责人

（1）组织制定安全手册、操作规程等文件。

（2）按照上述文件要求组织实验室的各项工作，保证实验室运行的安全和实验室工作质量的准确可靠。

（3）组织进入生物安全二级实验室的人员进行业务培训，保证工作人员熟知微生物的操作规程和技术，掌握实验室设备的特殊要求并熟练操作，对培训的结果进行考核，决定进入实验室工作人员的资格。

4.2.2.3生物安全员

（1）对技术方法、化学品、材料与设备定期进行内部安全检查，确保其符合国家和地方的有关安全与卫生政策与标准。

一旦发现不安全因素，立即停止工作并上报实验室负责人。

（2）与有关人员讨论研究安全政策的问题。

（3）确认所有工作人员都具有进入实验室工作的资格。

（4）为所有人员提供连续性的安全要教育与指导。

（5）针对操作程序、技术方法和各种条件要求的变更，以及新设备的引进，为全体工作人员提供最新的安全文献和信息资料。

（6）定期检查实验室的各项技术参数，组织对实验室装备的常规保养。

（7）所有可能涉及潜在传染性或有毒物质泄露的意外事件与事故，即使没有人员受伤或暴露，也要予以调查，并向实验室负责人员和安全委员会报告调查结果和提出建议。

（8）当任何实验室工作人员的疾病或缺勤与工作有关，并被记录为可能的实验室获得性感染时，协助随访调查其疾病或缺勤情况。

（9）确保在发生传染性物质溅洒其他事件时，监督消毒净化程序得到正确执行；并对这类意外事件和事故进行详细的书面记录。

（10）确保任何需要修理和维护的仪器设备在消毒与净化之后方可运出实验室。

生物安全员由主管检验师以上的人员承担，必须具备如下资质：

具有实际工作的经验；对操作的微生物有全面、完整的了解；具有组织实验室工作的能力；对工作有高度的责任心。

4.2.2.4实验室工作人员

（1）生物安全二级实验室，只允许进行实验室目的规定的操作，与此无关的活动一律不得进行。

（2）必须按规定进行个人防护，方得进入实验室。

（3）保持实验室环境的整洁，每项工作完成之后，必须清理和清洁台面，离开实验室

（4）注意个人的健康状况，出现身体不适情况，应及时向实验室负责人报告。

（5）实验室内禁止饮食、吸烟、访客和喧哗。

实验室工作人员的技术要求

（1）必须了解实验室安全原理，熟悉本手册的各项规定，熟记紧急情况下的正确应对措施。

（2）掌握病原微生物操作的基本要求，正确、安全地实用标本，避免污染，以获得准确、可靠的实验结果。

（3）必须熟悉相关实验的国家标准，能够完成标准所规定的任务。

（4）一旦发生意外，立即向生物安全员汇报。

4.2.3实验室工作人员的培训

新工作人员进入实验室前，必须经过培训，取得进入实验室工作的资格。

培训由实验室负责人组织进行，并指定熟悉实验室工作的人员担任辅导。

培训内容包括：

（1）相关检验的国家诊断标准、处理原则以及本手册内容。

（2）实验室所有设备的使用方法。

（3）个人防护方法。

（4）实验室基本技术。

（5）实验室消毒净化的方法。

4.2.4实验室工作人员的资格考试

新工作人员经过培训后，由实验室负责人组织考核。

通过考核后，还须与有资格的工作人员一同工作3个月，才能获得独立进行实验室操作的正式资格。

4.2.5实验室工作人员的适合工作状态

实验室工作人员必须在身体状况良好的情况下，才能进入实验室工作。

出现下列情况，不应进入实验室：

身体出现开放性损伤：

患发热性疾病：

感冒、上呼吸道感染；其他导致抵抗力下降的状况：

妊娠：

已经在实验室内连续工作4小时以上或其他原因造成的疲劳状态。

4.3生物安全实验室操作规程

4.3.1启动实验室

开始工作前半小时。

开启实验室主电源，使实验室及生物安全柜投入运行。

开启顺序：

①开启屋顶风机②开启全排风③开启空调④开启安全柜⑤打开房间紫外线灯。

4.3.2个人防护

工作人员按照下列要求进行个人防护，才能进入实验室区域：

（1）在更衣室中换穿工作服和工作鞋。

（2）在清洁区内，根据实验要求做好防护。

（3）实验中需使用腐蚀性试剂时，在胶乳手套外加带一次性塑料手套；需要进行可能造成污染材料飞溅的操作时，需加戴防护面罩。

4.3.3进入实验室

4.3.3.1工作人员进入实验室时，每进入一道门，应将此门关好，再开启下一道门。

4.3.3.2进入实验室后，关闭房间紫外线灯。

4.3.3.3检查实验室运转是否正常。

4.3.3.4做好开始实验的各项准备。

4.3.4启用标本、试剂

一切准备工作就绪后，才将标本和试剂从冰箱中取出，直接放入生物安全柜中。

用完立即归位，使其在冰箱外停留的时间尽可能短。

4.3.5操作

4.3.5.1严格按照试剂使用说明进行操作。

洗涤时避免液体材料飞溅。

吸取、稀释液体时，将吸管插入试管底部，用吸球缓慢吸取，避免产生汽泡或汽溶胶。

4.3.5.2离心时，应使用双盖封闭式离心机和全封闭试管，每管离心液总量低于最高容量1个刻度单位：

平衡时不得有液体渗陋到管套中，离心机使用后立即用消毒液擦洗消毒。

4.3.6观察结果

不打开容器的观察允许在生物安全柜外进行，否则，必须在生物安全柜内观察结果。

4.3.7准予携出实验室的材料

确保不含感染性的实验材料，才可以从实验室携出。

容器表面应用75%乙醇消毒。

4.3.8实验室清洁

每一实验步骤完成后，均应清理台面。

所有用过的试剂均应归还原位；使过的吸管等长形器材放入储存污物的盒内；锋利品放入专用的污物盒；纸巾软物品放入污物袋；在台面上喷洒75%乙醇，保持20分钟，然后以纸巾擦干。

实验室的其他表面，也应经常用75%乙醇擦拭。

4.3.9污染物品处理

放置污染物品的容器装满时，应更换新的容器。

实验结束后，对用过的污染物品进行高压消毒。

4.3.10更换工作服。

工作完毕的更衣顺序是，先用消毒液浸泡手套5分钟，然后依次除去口罩、防护服、鞋套，放入高压消毒袋内，再次浸泡手套后除去手套，用75%酒精棉球擦面部裸露部位。

4.3.11实验室消毒

每次工作完毕，生物安全柜内用75%酒精擦拭台面，消毒液消毒地面，开启紫外线灯照射1小时后，逐一关闭实验室送风和通风设备{关闭顺序与开启顺序相反}。

4.4实验记录与实验报告

4.4.1实验记录

在实验室内，实验记录应使用铅笔书写。

记录内容应简明扼要，包括实验日期，实验目的和实验的基本条件等提示记忆的内容，并较详细地记载观察到的实际现象及数据结果。

要求字迹应清晰，数字成行成列，以避免录入错误。

4.4.2实验记录带出实验室

将上述记录在纸张上的实验记录应用80ml/m3福尔马林，密闭熏蒸消毒6小时后方可带出实验室。

或阁着实验室玻璃窗由清洁区工作人员抄录一份。

4.4.3实验记录录入计算机

实验记录必须在实验结束后24小时内录入计算机。

记录准确的实验报告和录入时间。

再按照由实验室带出的书写记录，准确地记载实验结果和数据。

录入后，书写记录保存1周，以备查验。

实验记录录入后，一般不得修改。

因数据记录错误，录入错误，或实际观察到的实验结果改变，必须更改记录时，不要删除已经录入的描述和数据，而应录入新的描写和数据，并注明更改原因。

4.4.4实验室记录备份

每月一次，将上月计算机的实验记录做出备份，备份的实验记录不得修改。

实验室负责人应定期检查实验记录，核对备份与原始的实验记录，对记录中的缺陷提出修改意见。

4.4.5实验记录的保存年限

实验记录保存一年。

已使用的实验记录（出具报告，发表论文，或以其他方式引用），在使用后再保存一年。

如无特殊必要，备份的实验记录一般永久保存。

4.4.6出具实验报告

在需要出具正式实验报告的场合，报告由实验者填写署名，交实验室负责人记录核对后签字，再由单位签发人签字并加盖公章发出。

4.5标本保管规则

4.5.1标本进入实验室

4.5.1.1出实验室采集的标本，本实验室统一登记编号，能反映出标本的来源、种类、性质、目的等相关信息。

4.5.1.2有关单位送检的标本由实验室统一登记编号，注明送检单位、送检时间、种类、性质、实验目的等相关信息。

4.5.2标本的保管

根据标本的性质、目的进行保存，每份标本分两份，一份检测时使用，另一份备用。

标本因各种原因损失时，启用后备标本，并重新备份。

4.5.3标本的销毁

确定不用的标本，采用高压灭菌后焚烧的方式销毁。

4.6实验室装备保养

4.6.1实验室定期保养

实验室的定期保养按照提供实验室设备厂商的规定进行，主要是对机械和电器部分进行维护。

4.6.2实验室仪器设备的保养和维护

实验室内的仪器设备的保养由实验室工作人员进行。

维护有专业人员进行。

生物安全柜的滤器必须按说明书规定的时间定期由专业人员更换，其它仪器设备也应根据实际需要清洁保养。

4.6.3实验室仪器设备的维修更换

仪器设备需要更新，需要离开实验室进行维修，或损坏需要更换，以及必须临时进入实验室使用，使用完毕后必须撤出实验室的贵重仪器，在撤出实验室之前必须以恰当的方式严格消毒，方可处理或重新投入使用。

4.7实验室安全性检测

实验室内，每2个月以细菌培养的方式进行安全性检测。

生物安全柜内放置平板培养基2个，实验室4角和中间各放置1个，半污染区放置2个。

将平皿敞开5分钟，然后盖上，每平板菌落数平均不得超过2个，超过标准，需要对实验室或污染部位进行甲醛熏蒸消毒。

4.8意外情况处理

4.8.1实验室意外事件的处理原则

4.8.1.1造成或可能造成实验室污染，但未造成人身伤害的实验室报告，由实验室负责人处理。

例如实验过程中。

由于标本、试剂益处溅落造成操作台或地面的污染等，应立即喷洒消毒液并覆盖浸透消毒液的纸巾，待消毒液彻底浸泡30分钟后，对污染的物品进行清理。

清理后的物品高压灭菌。

并填写生物安全2级实验室意外情况登记与处理记录表，实验室负责人应指导这些处理活动，并检查处理效果。

4.8.1.2实验室事故可能造成气溶胶污染，如压力容器或管道破裂、离心机事故等，应立即关闭实验室，张贴禁止入内的标识。

用消毒液喷雾和紫外线照射污染的区域，24小时再进行终末消毒，实验室负责人除立即采取对应措施外，应向上级部门报告，并填写意外情况登记与处理记录表。

4.8.1.3实验室工作人员在没有强毒微生物时，在实验室内受到意外伤害，如割伤、烧伤、烫伤等，在实验室内昏倒或发生身体严重不适，也有实验室负责人处理。

令受到伤害的人员立即停止工作，用消毒液清洗未破损的表面，伤口以碘伏消毒，眼睛用无菌生理盐水冲洗。

由在同一实验室内人员或派人迅速着装进入实验室，清除造成伤害的原因，清理实验材料，帮助受伤人员紧急处理并撤离实验室。

受到伤害的人员应进行治疗并休息，在身体状况未恢复之前，不得重新进入实验室工作。

实验室在经过整理，消除了造成伤害的故障之后，方可重新使用。

4.8.1.4伤害事故可能导致被强毒微生物感染，例如针头刺破、锐器割伤、黏膜暴露等途径接触到感染性液体，或在操作过程中发生培养物、污染材料溅落身体表面，意外接种等情况，首先进行局部处理，用肥皂和水清洗污染的皮肤，挤压伤口尽可能挤出损伤处的血液，用肥皂和清水冲洗，用消毒液浸泡或涂抹消毒，并包扎伤口。

暴露的黏膜应尽快用生理盐水或清水冲洗干净。

实验室负责人应向上级部门报告，对受伤害者进行隔离观察，同时根据情况预防性用药，并写出职业暴露后预防感染的评价和处理方案。

4.8.2实验室人员的隔离观察

发生可疑的实验室感染事故时，应对被感染的人员进行隔离观察。

如果判定为法定的传染病感染，应按[传染病防治法]的规定报告，同时给予有效的隔离治疗。

二、实验室高压消毒安全操作程序

1.目的

规范高压锅的使用和安全操作程序，保证达到灭菌效果和操作安全的目的。

2.适用范围

适用于实验室废物的高压消毒。

3.职责

所有操作人员严格按照本程序执行。

4.具体方法：

4.1高压锅的使用

4.1.1使用前应了解并掌握高压锅的原理及操作规则，以及不正确使用而导致的灾难性后果。

4.1.2按照操作规程使用高压锅

4.1.2.1接通电源，合上高压灭菌器电源开关。

4.1.2.2操作参照高压锅操作说明。

4.1.2.3当灭菌程序执行完成，灭菌程序自动停止运行。

4.1.2.4在确认压力表的显示压力降到0刻度时，打开高压灭菌器顶盖，取出灭菌样品。

4.1.3高压锅操作人员在使用高压锅时不得离开岗位；在日常使用过程中，必须严格按照操作规程执行，并按照规定进行设备的维护。

每1年保养一次，每月检测一次消毒效果。

4.1.4高压锅的物品不得放的过满，否则影响灭菌效果。

放好被消毒灭菌的物品后，高压锅的盖子或门必须拧紧。

4.1.5定期检查高压锅，以确保其正常工作，防止意外事故发生，保证消毒灭菌效果。

4.2高压灭菌安全操作步骤

4.2.1实验产生的所有废物应该及时就地灭菌处理。

如果灭菌器正在使用或由于其它原因不能马上使用，则废物必须放在灭菌袋内捆好并放在实验室内，在存放期间确保袋子无损坏。

4.2.2当高压锅消毒灭菌到时间后，取出物品放在废物收集处。

4.2.3当开始灭菌时必须确信灭菌锅内水量合适，高压温度和时间设置正确。

灭菌应保持在121℃30分钟，时间和温度不得超过设定值。

三、废弃物处理程序

1.目的

规范废弃物处理

2.适用范围

尖锐器具和其他废弃物的处理。

3.具体方法：

3.1尖锐器具的处理

3.1.1尖锐器具，如针、注射器等，除特殊情况外，禁止在实验室使用，尽可能用塑料器材代替玻璃器材。

3.1.2注射和吸取感染性材料时，尽可能使用一次性注射器。

用过的针头禁止折段、剪段、折段、重新盖帽或从注射器上取下，禁止用手直接操作。

用过的针头、注射器直接放入防刺破的盛废弃锐器的容器中。

非一次性锐器必须放置在坚壁容器中，进行高压消毒处理。

3.1.3尽可能使用带针头套的的注射器、无针头的系统和其他安全装置。

3.1.4打碎的玻璃器具，禁止用手直接清理，必须使用其他工具，如扫把、簸箕、夹子或镊子等。

盛污染针、锐器及碎玻璃的容器在丢弃前必须彻底消毒。

3.2废弃物的处理

3.2.1实验后的废弃物如不及时处置则会污染环境，从而对人造成危害，因此有关人员必须严格按照规定执行。

3.2.2实验样本在处理和进行实验室检测时产生的废弃物，如一次性针头、离心管、平皿等应放入适当的容器和严格防漏的高压袋内，待实验结束后立即就地高压消毒。

3.2.3实验过程中产生的污染性液体物质、废弃的液体标本等放在盛有消毒液的严格防渗漏的专用容器中，并及时加盖。

3.2.4进行实验所必须使用的容器，如针头、一次性注射器、玻璃器具、手术刀片等，放入专用的坚壁容器内，加盖密封。

3.2.5以上所有盛装废弃物的容器，在每次实验结束后，就地高压消毒。

3.2.6高压锅应有专人负责，严格按使用说明操作，确保在121条件下，高压30分钟，以达到消毒要求。

所有实验产生的废弃物，必须经严格高压消毒后方能运出实验区，并送至指定地点集中焚烧处理。

四、实验室消毒隔离规程

1.目的

规范微生物实验室和生物安全二级实验室的消毒隔离工作。

2.适用范围

微生物实验室和生物安全二级实验室。

3.职责

所有工作人员都有遵从本规程。

4.具体步骤

4.1实验室基本要求

4.1.1实验室相对独立，实验室核心区包括实验间及缓冲间，明确划分清洁区、半污染区和污染区，并有明显标识。

4.1.2实验室内所有物品应专用，须带出时必须严格消毒。

4.1.3实验人员进入实验室应穿戴好个人防护用品，实验服、手套等。

实验过程中注意自身防护，并防止操纵过程中的交叉污染。

4.1.4培养基、组织、体液等必须放在防漏密闭的容器中储运。

4.1.6血清学试验、样品的处理和分装应在BSL-2安全柜内进行。

4.1.7样品离心使用密封的离心杯，以防溅出。

4.1.8实验过程中使用的器材、实验废弃物均应按废弃物处理程序进行消毒处理。

4.1.9当传染性标本溢出或溅出后，应有专业人员立即消毒和清理。

4.1.10实验完毕，先消毒物体表面，再进行空气消毒。

4.1.11离开实验室前，必须按有关规定消毒双手。

4.2消毒方法

4.2.1仪器等表面消毒：

工作结束后，用含有效氯1000的消毒液或75%乙醇溶液擦拭消毒，作用20分钟以上。

4.2.2实验器材的分类消毒：

将使用后的锐器方入防刺破、防渗漏的密闭专用锐器处置盒内，121℃高压消毒30分钟。

其他器材方入有效氯为2000mg/L的含氯消毒液内浸泡1小时以上。

处理时应避免皮肤损伤。

4.2.3工作台等物体表面消毒：

工作完毕，用含有效氯2000mg/L的消毒液或75％乙醇溶液擦拭消毒，作用20分钟以上。

4.2.4个人防护用品消毒：

实验结束，将隔离衣、口罩、帽子、手套、鞋套等121℃高压消毒30分钟。

防护镜浸泡在75％乙醇或有效氯为1000mg/L的含氯消毒剂中，作用30-60分钟。

4.2.5手的消毒：

用典伏或75％的乙醇擦拭，作用1-3分钟。

4.2.6空气消毒：

每次实验前后用紫外灯照射消毒，每次不少于1小时，每立方米空间安装紫外灯瓦数≥1.5W，距紫外灯1米处照射强度≥70W/㎡。

4.2.7纸张消毒：

应用80ml/m3福尔马林，密闭熏蒸消毒6小时后方可带出。

4.2.8地面消毒：

工作结束，应用含有有效2000mg/L的消毒液喷洒拖地。

4.2.9废弃物的处理：

实验的废弃物应放入适当的容器内，就地121℃高压消毒30分钟，消毒后的废弃物集中收集、焚烧处理。

五、生物安全柜的使用

1.目的

用来保护操作者本人、实验室环境以及实验材料，使其避免暴露于上述操作过程中可能产生的感染性气溶胶和溅出物而设计的。

2.适用范围

在应用细胞和组织培养物来进行病毒繁殖或其他培养时，就不能让未经灭菌的房间空气通过工作台面了。

二级生物安全柜在设计上不但能提供个体防护，而且能保护工作台面的物品不受房间空气的污染。

二级A型生物安全柜，内置风机将房间空气经前面的开口引入安全柜内并并进入前面的进风格栅。

在进风口处的空气流入速度至少应该达0.38m/s。

然后，供气先通过供风HEPA过滤器，在向下流动通过工作台面。

空气在向下流动到达工作台面时会扩散为大约6~18cm，其中的一半会通过前面的排风格栅，而另一半则通过后面的排风格栅排出。

所有在工作台面形成的气溶胶立刻被这样向下的气流带走，并经两组排风格栅排出，从而为实验对象提供最高级别的保护。

气流接着通过后面的压力通风系统到达位于安全柜顶部、介于供风和排风过滤器之间的空间。

由于过滤器大小不同，大约70%的空气将经过供风HEPA过滤器重新返回到生物安全柜内的操作区域，而剩余的30%则经过排风过滤器进入房间内或被排到外面。

3.具体步骤

六、实验室管理制度

1.目的

为了确保生物安全二级实验室的正常运行、实验人员、物品和环境的安全，特制定此管理制度。

2.适应范围

适应于生物安全二级实验室。

3.职责

进入生物安全二级实验室工作的所有工作人员严格遵照本管理制度执行。

4.基本制度

4.1在主实验室设置清洁区、半污染区和污染区。

入口处贴有醒目的生物危险标志。

4.2非实验室有关人员和物品不得进入。

4.3实验室内不得进食和饮水，或者进行其他与实验无关的活动。

4.4实验室工作人员、外来合作者、进修和学习人员在进入实验室及其岗位之前必须经过实验室负责人的批准。

4.5实验过程中，严格按有关操作程序操作，降低减除和气溶胶的产生。

4.6用移液器吸取液体，严禁口吸。

4.7实验室的工作人员必须是经受过专业培训的技术人员。

在独立进行工作前还需在中高级实验室技术人员指导下进行上岗培训，达到合格标准，方可开始工作。

4.8实验室的工作人员必须被告知实验室工作的潜在危险并接受实验室安全教育，自愿从事实验室工作。

4.9实验室的工作人员必须遵守实验室的所有制度、规定和操作规程。

4.10实验室的工作人员在开始工作前必须留本底血清进行有关的检测，以后定期复检。

如有疫苗必须进行免疫注射。

4.11所有培养物、废弃物在运出实验室前必须经可行的消毒方法进行消毒。

4.12工作前应消毒，活性物质溅出后要随时消毒。

5.实验室特殊管理制度

5.1进行感染性实验室时，应禁止他人进入实验室，或必须经实验室负责人同意方可入内，免疫耐受或正在使用免疫抑制剂的人员不许进入实验室，或必须经实验室负责同意方可入内。

5.2实验室人员进入实验室前必须进行有效的培养和模拟训练。

掌握预防暴露和暴露后的消毒处理程序。

5.3实验室人员应接受必要的免疫接种和相应的抗体水品测定。

5.4实验室事故处理：

工作人员在操作过程中发生意外，如针刺和切伤、皮肤污染