高考生物大一轮复习 第十章 现代生物科技专题学案.docx

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高考生物大一轮复习第十章现代生物科技专题学案

高考生物大一轮复习第十章现代生物科技专题学案

1、基因工程的诞生（Ⅰ）　

2、基因工程的原理及技术（Ⅱ）　

3、基因工程的应用（Ⅱ）　

4、蛋白质工程（Ⅰ）考点一　基因工程的操作工具

1、基因工程的概念理解

（1）供体：

提供目的基因。

（2）操作环境：

体外。

（3）操作水平：

分子水平。

（4）原理：

基因重组。

（5）受体：

表达目的基因。

（6）本质：

目的基因在受体体内表达。

（7）优点①与杂交育种相比：

克服了远缘杂交不亲和的障碍。

②与诱变育种相比：

定向改造生物遗传性状。

2、DNA重组技术的基本工具

（1）限制性核酸内切酶（简称：

限制酶）①来源：

主要是从原核生物中分离纯化出来的。

②作用：

识别特定的核苷酸序列并切开相应两个核苷酸之间的磷酸二酯键。

③结果：

产生黏性末端或平末端。

（2）DNA连接酶①种类：

按来源可分为EcoliDNA连接酶和T4DNA连接酶。

②作用：

在两个核苷酸之间形成磷酸二酯键以连接两段DNA片段。

（3）载体①种类：

质粒、λ噬菌体的衍生物、动植物病毒等。

②质粒特点[深度思考]

（1）限制酶与DNA连接酶的关系。

提示：

①限制酶和DNA连接酶的作用部位都是磷酸二酯键。

②限制酶不切割自身DNA的原因：

原核生物中不存在该酶的识别序列或识别序列已经被修饰。

（2）载体所具备条件的目的性。

提示：

条件目的性稳定并能复制目的基因稳定存在且数量可扩大有一个至多个限制酶切割位点可携带多个或多种外源基因具有特殊的标记基因便于重组DNA的鉴定和选择（3）几种酶的比较。

提示：

比较项目限制酶DNA连接酶DNA聚合酶解旋酶作用底物DNA分子DNA分子片段脱氧核苷酸DNA分子作用部位磷酸二酯键磷酸二酯键磷酸二酯键碱基对间的氢键模板不需要不需要需要不需要作用结果形成黏性末端或平末端形成重组DNA分子形成新的DNA分子形成单链DNA分子题组一　考点诊断

（1）切割质粒的限制性核酸内切酶均特异性地识别6个核苷酸序列。

（xx高考江苏卷）（

）

（2）载体质粒通常采用抗生素合成基因作为筛选标记基因。

（xx高考江苏卷）（

）（3）限制酶只能用于切割目的基因。

（

）（4）DNA连接酶能将两碱基间通过形成氢键连接起来。

（

）（5）EcoliDNA连接酶既可连接平末端，又可连接黏性末端。

（

）（6）质粒是小型环状DNA分子，是基因工程常用的载体。

（

）答案：

（1）（）　

（2）（）　（3）（）　（4）（）　（5）（）　（6）（√）题组二　基因工程操作工具的分析

1、若要利用某目的基因（见图甲）和P1噬菌体载体（见图乙）构建重组DNA（见图丙），限制性核酸内切酶的酶切位点分别是BglⅡ（A↓GATCT）、EcoRⅠ（G↓AATTC）和Sau3AⅠ（↓GATC）。

下列分析合理的是（

）

A、用EcoRⅠ切割目的基因和P1噬菌体载体

B、用BglⅡ和EcoRⅠ切割目的基因和P1噬菌体载体

C、用BglⅡ和Sau3AⅠ切割目的基因和P1噬菌体载体

D、用EcoRⅠ和Sau3AⅠ切割目的基因和P1噬菌体载体解析：

选D。

解答本题的关键是要看清切割后目的基因插入的方向，只有用EcoRⅠ和Sau3AⅠ切割目的基因和P1噬菌体载体，构建的重组DNA中RNA聚合酶在插入的目的基因上的移动方向才一定与图丙相同。

2、下列关于载体的叙述中，错误的是（

）

A、载体与目的基因结合后，实质上就是一个重组DNA分子

B、对某种限制酶而言，载体最好只有一个切点，但还要有其他多种酶的切点

C、目前常用的载体有质粒、λ噬菌体的衍生物和动植物病毒

D、载体具有某些标记基因，便于对其进行切割解析：

选D。

标记基因的作用是便于筛选出重组载体，不是便于对其切割。

3、如图为DNA分子在不同酶的作用下所发生的变化，图中依次表示限制酶、DNA聚合酶、DNA连接酶、解旋酶作用的正确顺序是（

）

A、①②③④　

B、①②④③

C、①④②③

D、①④③②解析：

选C。

限制酶可在特定位点对DNA分子进行切割；DNA聚合酶在DNA分子复制时将脱氧核苷酸连接成脱氧核苷酸链；DNA连接酶可将限制酶切开的磷酸二酯键连接在一起；解旋酶的作用是将DNA双链解开螺旋，为复制或转录提供模板。

1、限制酶是一类酶，而不是一种酶。

2、限制酶切割位点所处的位置必须是在所需的标记基因之外，这样才能保证标记基因的完整性，有利于对目的基因的检测。

3、为使目的基因与载体形成相同的DNA片段末端连接，通常使用同一种限制酶将二者切割，但如果不同的限制酶切割DNA分子所产生的末端也存在互补关系时，则两末端也可连接。

考点二　基因工程的操作过程及其应用

1、基因工程的操作程序

（1）基因工程的操作步骤①组成③抗体杂交技术目的基因是否翻译生物性状的表达与否目的基因是否表达个体水平,题组一　考点诊断

（1）抗虫基因即使成功地插入到植物细胞染色体上也未必能正常表达。

（xx高考江苏卷）（

）

（2）应用DNA探针技术，可以检测转基因抗冻番茄植株中目的基因的存在及其完全表达。

（xx高考四川卷）（

）（3）将人的干扰素基因重组到质粒后导入大肠杆菌，获得能产生人干扰素的菌株。

（

）（4）利用乳腺生物反应器能够获得一些重要的医药产品，如人的血清白蛋白，这是因为将人的血清白蛋白基因导入了动物的乳腺细胞中。

（

）（5）为培育抗除草剂的作物新品种，导入抗除草剂基因时只能以受精卵为受体。

（

）答案：

（1）（√）　

（2）（）　（3）（√）　（4）（）　（5）（）题组二　基因工程的操作过程及应用分析

1、（xx高考广东卷）（多选）利用基因工程技术生产羧酸酯酶（CarE）制剂的流程如下图所示，下列叙述正确的是（

）

A、过程①需使用逆转录酶

B、过程②需使用解旋酶和PCR获取目的基因

C、过程③使用的感受态细胞可用NaCl溶液制备

D、过程④可利用DNA分子杂交鉴定目的基因是否已导入受体细胞解析：

选AD。

本题考查基因工程。

由mRNA获得DNA的过程是逆转录，需要逆转录酶，A项正确。

过程②表示用PCR扩增目的基因，此过程不需要解旋酶，通过控制温度达到解旋的目的，B项错误。

过程③感受态的大肠杆菌是使用CaCl2处理的，C项错误。

鉴定目的基因是否导入受体细胞，可以采用DNA分子杂交技术，D项正确。

2、（xx高考新课标全国Ⅱ卷）植物甲具有极强的耐旱性，其耐旱性与某个基因有关。

若从该植物中获得该耐旱基因，并将其转移到耐旱性低的植物乙中，有可能提高后者的耐旱性。

回答下列问题：

（1）理论上，基因组文库含有生物的________基因；而cDNA文库中含有生物的________基因。

（2）若要从植物甲中获得耐旱基因，可首先建立该植物的基因组文库，再从中________出所需的耐旱基因。

（3）将耐旱基因导入农杆菌，并通过农杆菌转化法将其导入植物________的体细胞中，经过一系列的过程得到再生植株。

要确认该耐旱基因是否在再生植株中正确表达，应检测此再生植株中该基因的________，如果检测结果呈阳性，再在田间试验中检测植株的________是否得到提高。

（4）假如用得到的二倍体转基因耐旱植株自交，子代中耐旱与不耐旱植株的数量比为3∶1时，则可推测该耐旱基因整合到了________________（填“同源染色体的一条上”或“同源染色体的两条上”）。

解析：

（1）基因组文库包含某种生物的全部基因，cDNA文库又称为部分基因文库，含有生物的部分基因。

（2）植物甲基因组文库中有该种植物的全部基因，从中可筛选出耐旱基因。

（3）植物乙的耐旱性低，所以植物乙体细胞作为受体细胞；要确定耐旱基因是否正确表达，应检测该基因的表达产物，对于个体水平的检测，应在干旱的田间进行试验，检测植物乙耐旱性是否得到了提高。

（4）将耐旱基因看作A，不耐旱基因看作a，AaAa→耐旱与不耐旱数量比为3∶1，则耐旱基因整合到了同源染色体的一条上。

答案：

（1）全部　部分

（2）筛选（3）乙　表达产物　耐旱性（4）同源染色体的一条上基因工程操作程序易错点剖析

1、基因表达载体≠载体：

基因表达载体与载体相比增加了目的基因。

2、目的基因的插入位点不是随意的：

基因表达需要启动子与终止子的调控，所以目的基因应插入启动子与终止子之间的部位，若目的基因插入启动子内部，启动子将失去原功能。

3、启动子≠起始密码子，终止子≠终止密码子：

启动子和终止子位于DNA片段上，分别控制转录过程的启动和终止；起始密码子和终止密码子位于mRNA上，分别控制翻译的启动和终止。

4、切割目的基因和载体并非只能用同一种限制酶。

如果用两种不同限制酶切割后形成的黏性末端相同时，在DNA连接酶的作用下目的基因与载体也可以连接起来。

5、基因工程操作过程中只有第三步没有碱基互补配对现象：

第一步存在逆转录法获得DNA，第二步存在黏性末端连接现象，第四步存在检测分子水平杂交。

考点三　蛋白质工程及其与基因工程的关系

1、流程图写出流程图中字母代表的含义：

A、转录，

B、翻译，

C、分子设计，

D、多肽链，E、预期功能。

2、结果：

改造了现有蛋白质或制造出新的蛋白质。

3、应用：

主要集中应用于对现有蛋白质进行改造，改良生物性状。

[深度思考]蛋白质工程与基因工程的关系项目区别与联系蛋白质工程基因工程区别过程预期蛋白质功能→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到相对应的脱氧核苷酸序列获取目的基因→构建基因表达载体→将目的基因导入受体细胞→目的基因的检测与鉴定实质定向改造或生产人类所需的蛋白质定向改造生物的遗传特性，以获得人类所需的生物类型或生物产品结果可生产自然界没有的蛋白质只能生产自然界已有的蛋白质联系①蛋白质工程是在基因工程基础上延伸出来的第二代基因工程②基因工程中所利用的某些酶需要通过蛋白质工程进行修饰、改造题组一　蛋白质工程的分析

1、（xx高考广东卷）从某海洋动物中获得一基因，其表达产物为一种抗菌性和溶血性均较强的多肽P1。

目前在P1的基础上研发抗菌性强但溶血性弱的多肽药物，首先要做的是（

）

A、合成编码目的肽的DNA片段

B、构建含目的肽DNA片段的表达载体

C、依据P1氨基酸序列设计多条模拟肽

D、筛选出具有优良活性的模拟肽作为目的肽解析：

选C。

由题中信息“在P1的基础上研发抗菌性强但溶血性弱的多肽药物”可推知本题考查蛋白质工程的相关知识。

根据蛋白质工程的基本途径：

从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到相对应的脱氧核苷酸序列（基因），可推知答案为C。

2、（xx湖南师大附中月考）干扰素是动物体内合成的一种蛋白质，可以用于治疗病毒感染和癌症，但体外保存相当困难，如果将其分子上的一个半胱氨酸变成丝氨酸，就可在－70℃条件下保存半年，请根据以上信息回答下列问题：

（1）蛋白质的合成是受基因控制的，因此获得能够控制合成“可以保存的干扰素”的基因是生产的关键，依据蛋白质工程原理，设计实验流程，让动物生产“可以保存的干扰素”。

写出下列方框中相应实验步骤。

①____________________，②____________________，③____________________，④____________________。

（2）基因工程与蛋白质工程相比较，基因工程在原则上只能生产__________的蛋白质，不一定符合__________需要。

而蛋白质工程是以蛋白质分子的结构规律及其与生物功能的关系作为基础，通过__________或________，对现有蛋白质进行__________，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活需要。

（3）蛋白质工程实施的难度很大，原因是蛋白质具有分复杂的__________结构。

解析：

蛋白质工程的操作流程是：

预期蛋白质的功能→预期蛋白质结构→推测氨基酸序列→确定相对应的脱氧核苷酸序列。

基因工程只能生产自然界已存在的蛋白质，而蛋白质工程却可以生产自然界不存在的蛋白质。

蛋白质工程直接操作的对象是基因。

答案：

（1）预期蛋白质的功能　预期的蛋白质结构　应有的氨基酸序列　相对应的脱氧核苷酸序列（基因）

（2）自然界已存在　人类生产和生活　基因修饰　基因合成　改造　（3）空间（或高级）题组二　蛋白质工程与基因工程的关系分析

3、（xx高考全国Ⅱ卷）已知生物体内有一种蛋白质（P），该蛋白质是一种转运蛋白，由305个氨基酸组成。

如果将P分子中158位的丝氨酸变成亮氨酸，240位的谷氨酰胺变成苯丙氨酸，改变后的蛋白质（P1）不但保留P的功能，而且具有了酶的催化活性。

回答下列问题：

（1）从上述资料可知，若要改变蛋白质的功能，可以考虑对蛋白质的________进行改造。

（2）以P基因序列为基础，获得P1基因的途径有修饰________基因或合成________基因。

所获得的基因表达时是遵循中心法则的，中心法则的全部内容包括________的复制，以及遗传信息在不同分子之间的流动，即：

________。

（3）蛋白质工程也被称为第二代基因工程，其基本途径是从预期蛋白质功能出发，通过________和________，进而确定相对应的脱氧核苷酸序列，据此获得基因，再经表达、纯化获得蛋白质，之后还需要对蛋白质的生物________进行鉴定。

解析：

（1）从题中所述资料可知，将P分子中158位的丝氨酸变成亮氨酸，240位的谷氨酰胺变成苯丙氨酸后，该蛋白质的功能发生了改变，此过程是通过对构成蛋白质的氨基酸的排列顺序进行改造，进而改变了蛋白质的结构，从而改变了蛋白质的功能。

（2）在蛋白质工程中，目的基因可以以P基因序列为基础，对生物体内原有P基因进行修饰，也可以通过人工合成法合成新的P1基因。

中心法则的内容如下图所示：

由图可知，中心法则的全部内容包括：

DNA以自身为模板进行的复制，DNA通过转录将遗传信息传递给RNA，最后RNA通过翻译将遗传信息表达成蛋白质；在某些病毒中RNA可自我复制（如烟草花叶病毒等），在某些病毒中能以RNA为模板逆转录合成DNA（如HIV），这是对中心法则的补充。

（3）蛋白质工程的基本途径是预期蛋白质功能→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→合成DNA→表达出蛋白质，经过该过程得到的蛋白质，需要对其生物功能进行鉴定，以保证其发挥正常作用。

答案：

（1）氨基酸序列（或结构）

（2）P　P1　DNA和RNA（或遗传物质）　DNA→RN

A、RNA→DN

A、RNA→蛋白质（或转录、逆转录、翻译）（3）设计蛋白质的结构　推测氨基酸序列　功能

1、（xx高考新课标全国卷）根据基因工程的有关知识，回答下列问题：

（1）限制性内切酶切割DNA分子后产生的片段，其末端类型有________和________。

（2）质粒运载体用EcoRⅠ切割后产生的片段如下：

AATTC……GG……CTTAA为使运载体与目的基因相连，含有目的基因的DNA除可用EcoRⅠ切割外，还可用另一种限制性内切酶切割，该酶必须具有的特点是_______________________________________________。

（3）按其来源不同，基因工程中所使用的DNA连接酶有两类，即________DNA连接酶和________DNA连接酶。

（4）反转录作用的模板是________，产物是________。

若要在体外获得大量反转录产物，常采用________技术。

（5）基因工程中除质粒外，________和________也可作为运载体。

（6）若用重组质粒转化大肠杆菌，一般情况下，不能直接用未处理的大肠杆菌作为受体细胞，原因是______________________________________________________________________________________________。

解析：

此题考查基因工程应用的相关知识。

（1）DNA分子经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有黏性末端和平末端两种类型。

（2）为使运载体与目的基因相连，应使二者被切割后产生的末端相同，故用另一种限制酶切割产生的末端必须与EcoRⅠ切割产生的末端相同。

（3）根据酶的来源不同，DNA连接酶分为EcoliDNA连接酶和T4DNA连接酶。

（4）以RNA为模板，合成DNA的过程称为逆转录，若要体外获得大量DNA分子，可以使用PCR技术。

（5）在基因工程中，通常利用质粒作为运载体，另外噬菌体和动植物病毒也可作为运载体。

（6）大肠杆菌作为受体细胞时，常用Ca2＋处理，使之成为能吸收周围环境中DNA分子的感受态细胞。

答案：

（1）黏性末端　平末端

（2）切割产生的DNA片段末端与EcoRⅠ切割产生的相同（其他合理答案也可）（3）大肠杆菌　T4（4）mRNA（或RNA）　cDNA（或DNA）　PCR（5）噬菌体　动植物病毒（其他合理答案也可）（6）未处理的大肠杆菌吸收质粒（外源DNA）的能力极弱（其他合理答案也可）

2、（xx高考海南卷）在体内，人胰岛素基因表达可合成出一条称为前胰岛素原的肽链，此肽链在内质网中经酶甲切割掉氨基端一段短肽后成为胰岛素原，进入高尔基体的胰岛素原经酶乙切割去除中间片段C后，产生

A、B两条肽链，再经酶丙作用生成由51个氨基酸残基组成的胰岛素。

目前，利用基因工程技术可大量生产胰岛素。

回答下列问题：

（1）人体内合成前胰岛素原的细胞是________，合成胰高血糖素的细胞是________。

（2）可根据胰岛素原的氨基酸序列，设计并合成编码胰岛素原的________序列，用该序列与质粒表达载体构建胰岛素原基因重组表达载体，再经过细菌转化、筛选及鉴定，即可建立能稳定合成________的基因工程菌。

（3）用胰岛素原抗体检测该工程菌的培养物时，培养液无抗原抗体反应，菌体有抗原抗体反应，则用该工程菌进行工业发酵时，应从________中分离、纯化胰岛素原。

胰岛素原经酶处理便可转变为胰岛素。

解析：

（1）人体合成前胰岛素原的细胞是胰岛B细胞，合成胰高血糖素的细胞是胰岛A细胞。

（2）蛋白质工程生产胰岛素时，需根据胰岛素原的氨基酸序列，设计并合成编码胰岛素原的脱氧核苷酸序列（目的基因），然后再构建胰岛素原基因重组表达载体，导入细菌细胞内，再经过细菌转化、筛选及鉴定，即可建立能稳定合成胰岛素原的工程菌。

（3）运用抗原抗体杂交法。

答案：

（1）人工合成　

（2）限制性核酸内切酶　DNA连接酶　（3）标记基因　（4）转化作用　染色体DNA　抗原G↓GATCC—。

请画出质粒被限制性核酸内切酶Ⅰ切割后所形成的黏性末端：

________。

DNA连接酶对所连接的DNA两端碱基序列是否有专一性要求？

________（填“是”或“否”）。

（4）若将含有新的胰岛素基因的表达载体导入植物细胞中，最常用的方法是________。

（5）若要利用大肠杆菌生产速效胰岛素，需用到的生物工程有________、________和发酵工程。

解析：

（1）构建新的胰岛素模型的主要依据是蛋白质的预期功能。

（2）根据蛋白质的预期功能，推测新的胰岛素中氨基酸的序列，进而推断基因中的脱氧核苷酸序列来合成新的胰岛素基因。

（3）将目的基因导入植物细胞中，最常用的转化方法是农杆菌转化法。

（4）限制性核酸内切酶识别特定的核苷酸序列，产生特定的黏性末端或平口末端，而DNA连接酶对所连接的DNA两端碱基序列却没有专一性要求。

（5）生产自然界中本来没有的蛋白质需要用到蛋白质工程、基因工程等技术。

答案：

（1）蛋白质的预期功能　

（2）根据新的胰岛素中氨基酸的序列，推测出其基因中的脱氧核苷酸序列，然后利用DNA合成仪来合成新的胰岛素基因（3）

否　（4）农杆菌转化法（5）蛋白质工程　基因工程

4、（xx河北唐山一中期中）如图是从酵母菌获取某植物需要的某种酶基因的流程，结合所学知识及相关信息回答下列问题：

（1）图中cDNA文库__________基因组文库（填“大于”“等于”或者“小于”）。

（2）①过程提取的DNA需要__________的切割，B过程是__________。

（3）为在短时间内大量获得目的基因，可用__________扩增的方法。

目的基因获取之后，需要进行________，其组成必须有________________以及标记基因等，此步骤是基因工程的核心。

（4）将该目的基因导入某双子叶植物细胞，常采用的方法是__________，其能否在此植物体内稳定遗传可以用________技术进行检测。

解析：

（1）cDNA文库小于基因组文库。

（2）提取目的基因需要限制酶，逆转录法获得目的基因需要逆转录酶。

（3）短时间内大量获得目的基因，可用PCR技术扩增的方法。

基因表达载体的组成必须有目的基因、标记基因、启动子和终止子，基因表达载体的构建是基因工程的核心。

（4）将目的基因导入某双子叶植物细胞常采用的方法是农杆菌转化法，目的基因只有整合到植物细胞的染色体上才能在植物体内稳定遗传，可通过DNA分子杂交的方法对目的基因是否整合到染色体上进行检测。

答案：

（1）小于

（2）限制酶　反转录（或逆转录）（3）PCR技术　基因表达载体的构建　启动子、终止子、目的基因（4）农杆菌转化法　DNA分子杂交

5、（xx福建普高毕业班质检）为探究SHH基因与角化囊肿发生的相关性，科研人员利用SHH基因的非模板链转录合成的RNA作为探针，进行分子杂交实验，以检测SHH基因在角化囊肿中的表达情况。

其基本流程如下图：

（Amp表示氨苄青霉素抗性基因；LacZ基因被SHH基因插入后不表达）请回答：

（1）重组载体中SHH基因转录合成RNA探针时，________（需要/不需要）启动子。

（2）步骤②中，用Ca2＋处理大肠杆菌，使之成为________细胞，然后导入重组载体。

实验中，用添加氨苄青霉素的培养基培养大肠杆菌，未导入质粒的细菌将会死亡，原因是这些细菌不含有__________基因。

（3）能表达LacZ基因的大肠杆菌在含有IPTG和X－gal的培养基上会形成蓝色菌落，易于识别。

根据上述原理可以初步判断________（蓝色/白色）菌落中的大肠杆菌为重组菌。

（4）将制备的探针加入角化囊肿切片中，探针将与____________形成杂交带，进而判断SHH基因的转录情况。

解析：

（1）重组载体中SHH基因表达需要启动子。

（2）大肠杆菌细胞用Ca2＋处理后就成为感受态细胞；能在添加氨苄青霉素的培养基上生存的细菌含有氨苄青霉素抗性基因，没有氨苄青霉素抗性基因的细菌将会死亡。

（3）能表达LacZ基因的大肠杆菌在含有IPTG和X－gal的培养基上会形成蓝色菌落，重组菌中LacZ基因被SHH基因插入后不表达，重组菌在含有IPTG和X－gal的培养基上会形成白色菌落。

（4）判断SHH基因的转录情况，也就是判断SHH基因是否转录出mRNA。

答案：

（1）需要

（2）感受态　Amp（或氨苄青霉素抗性或抗性）（3）白色（4）SHH转录的mRNA（只写mRNA不给分）

6、（xx高考天津卷）嗜热土壤芽孢杆菌产生的β－葡萄糖苷酶（BglB）是一种耐热纤维素酶，为使其在工业生产中更好地应用，开展了利用大肠杆菌表达BglB酶的试验：

（1）PCR扩增bglB基因时，选用__________基因组DNA作模板。

（2）右图为质粒限制酶酶切图谱。

bglB基因不含图中限制酶识别序列。

为使PCR扩增的bglB基因重组进该质粒，扩增的bglB基因两端需分别引入________和________不同限制酶的识别序列。

注：

图中限制酶的识别序列及切割形成的黏性末端均不相同。

（3）大肠杆菌不能降解纤维素，但转入上述构建好的表达载体后则获得了降解纤维素的能力，这是因为________________。

解析：

本题考查了基因工程及影响酶活性的因素。

（1）bglB基因存在于嗜热土壤芽孢杆菌中，所以为扩增bglB基因，应选用嗜热土壤芽孢杆菌基因组DNA做模板。

（2）用限制酶切割时，不能破坏质粒中的复制原点、启动子、终止子及标记基因（如抗生素抗性基因），而且要将目的基因插入启动子和终止子之间，NdeⅠ、XbaⅠ、BamHⅠ符合条件，而XbaⅠ的酶切位点在质粒中有两处，这样会影响目的基因插入的准确性，所以应选择NdeⅠ和BamHⅠ。

目的基因