微生物学习.docx

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微生物学习

绪论

1．生物包括人类、动物、植物、微生物。

微生物是指个体微小，通常需要借助显微镜才能看见的生物类群。

2．重要人物及其事迹

1676年荷兰人吕文虎克（AntonyvanLeeuwenhoek）用自制的放大200倍的显微镜，首次观察到微生物。

1861年法国学者巴斯德（Pasteur）以弯颈瓶实验证明自然发生论是荒谬的。

证明曲颈瓶内肉汤变坏源于空气中微生物“种子”。

巴斯德的功绩：

彻底否定了自然发生学说；证实发酵由微生物引起；发现免疫学现象，预防接种；发明巴氏消毒法。

科赫的功绩：

发明培养基并用其纯化微生物；证实炭疽病因——炭疽杆菌，发现结核病原菌——结核杆菌；科赫法则。

3．

微生物的分类（按核的类型&个体形态）

原核微生物个体为单细胞，含DNA&RNA，DNA分子在细胞质中未成形的细胞核结构

包括细菌、螺旋体、支原体、衣原体、蓝藻类

微生物真核微生物个体为单细胞或多细胞，含DNA&RNA，DNA分子在完整的细胞核内

包括真菌、大多数藻类、原生动物

非细胞型微生物个体不呈细胞结构，仅含一种核酸（DNA或RNA），需在寄主细胞增值

包括病毒、亚病毒因子

第一篇总论

第一章原核微生物

原核微生物仅有原始的类核，无核膜&核仁，不进行有丝分裂，无细胞器。

包括细菌、放线菌、螺旋体、支原体、衣原体&立克次体等。

第一节细菌

细菌是一类个体微小、形态简单、结构略分化、以二分裂法繁殖的单细胞原核微生物。

一、细菌的大小、形态&结构

测定细菌大小的单位通常是微米（μm）。

球菌的大小以直径表示，杆菌&螺旋菌的大小用长&宽表示。

细菌的外形有球状、杆状、螺旋状3种，因此将细菌分为球菌、杆菌、螺旋状菌（弧菌&螺菌）3类。

二、细菌结构

1．基本结构——细胞壁、细胞膜、细胞质、核体。

细胞壁——★革兰氏染色法

.由于细菌细胞壁结构和成分的不同，用革兰氏染色可将其分为革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌两大类，革兰氏阳性菌被染成紫色，革兰氏阴性菌被染成红色。

现象分析：

革兰氏阴性菌细胞壁含脂类较多，当以95％乙醇脱色时，脂类被溶去，而肽聚糖少且疏松，不易收缩，形成较大的孔隙，结晶紫-碘复合物极易被脱出，最后被红色染料（石碳酸复红）复染成红色。

革兰氏阳性菌的细胞壁含脂类少，肽聚糖多且紧密，95％乙醇作用后肽聚糖收缩，胞壁孔隙缩小，结晶紫-碘复合物不能脱出，经红色染料复染后仍为紫色。

b.革兰氏阳性菌细胞壁较厚，化学成分主要是肽聚糖，形成15~50层的聚合体，此外还有磷壁酸（是革兰氏阳性菌特有成分、特异的表面抗原）、多糖&蛋白质等。

革兰氏阴性菌细胞壁较薄，由外膜&周质间隙组成，无磷壁酸。

c.革兰氏染色法步骤：

草酸铵结晶紫染色碘溶液助染酒精脱色碱性复红液复染油镜观察

d.革兰氏染色法的应用：

细菌鉴别&抗菌药物选择

PS.细胞壁的功能——保持细菌一定的外形；阻挡有害物质进入菌体，维持渗透压平衡；与细菌的致病性、抗原性、药物敏感性及革兰氏染色特性等密切相关。

细胞膜核蛋白体：

是细菌合成蛋白质的场所，作用与真核细胞的核糖体相同

细胞质内含物

质粒：

包含一些细菌生命非必要的基因，具有调控菌毛、毒素、耐药性&细菌素等遗传性状的功能；可自我复制遗传；基因重组的载体

核体（拟核）——细菌是原核微生物，无核膜、核仁；核体含细菌的遗传基因，控制细菌的遗传与变异。

★2．特殊结构——除基本结构外，有的细菌还有荚膜、鞭毛、菌毛、芽孢等特殊结构。

荚膜

某些细菌可在细胞外周产生一种粘液样的物质，包围整个菌体，称为荚膜。

当多个细菌的荚膜融合形成一大的胶状物，内含多个细菌细胞时，则称为菌胶团。

荚膜普通染色不易着色，须用特殊的荚膜染色法。

细菌荚膜的产生具有种的特异性（可用于鉴定），还与环境条件有关。

如炭疽杆菌，在动物组织中能形成荚膜，在人工培养基中，不易形成荚膜。

不同细菌荚膜成分不同——主要成分是多糖或多肽。

荚膜有保护细菌的功能。

抵抗吞噬和抗体作用，与侵袭力和致病性有关；保护细菌免受干燥和其他有害环境因素的影响。

荚膜也常是营养物质的贮藏所和废物的排出之处。

鞭毛

鞭毛具有抗原性，称为鞭毛抗原（H抗原），具有型特异性，常作为血清学鉴定的依据之一。

据鞭毛数量和排列将细菌分为：

一端单毛菌、两端单毛菌、丛毛菌和周毛菌4类。

细菌是否产生鞭毛，以及鞭毛的数目和排列方式，都具有种的特征，可作为鉴定细菌的依据之一。

鞭毛是细菌的运动器官，鞭毛有规律的收缩，引起细菌运动。

将细菌穿刺接种在半固体营养培养基中，培养后观察，若在穿刺线周围混浊扩散，表明该菌有鞭毛，具有运动力；若穿刺线周围仍透明，不混浊，则表明该菌无鞭毛。

菌毛

菌毛比鞭毛细、短、直、多。

菌毛具有良好的抗原性。

菌毛分为普通菌毛（细短多）&性菌毛（粗长少），都是一种空心的蛋白质管，电镜下才可见。

普通菌毛具有粘附作用，能使细菌牢固地附着于动物消化道、呼吸道和泌尿生殖道的粘膜上皮细胞上，是细菌的毒力因子；性菌毛又称F因子，与细菌的接合传递质粒有关。

芽孢

某些革兰氏阳性菌，在一定条件下，可在菌体内形成一个圆形或卵圆形的内生孢子，称为芽胞。

未形成芽胞的菌体称为繁殖体或营养体。

芽胞的形状、大小、位置因细菌而异，具有鉴别意义。

芽孢用普通染色法不易着色，用芽胞染色法才能着色。

芽胞的抵抗力很强，可耐受药物、辐射、干燥、高温等。

一般繁殖体经100℃煮沸30min可杀死，但芽胞可耐受100℃数小时。

杀灭芽胞采用干热灭菌或高压蒸气灭菌。

芽胞的本质：

细菌一般在营养不足时，终止繁殖体的代谢，形成芽胞。

芽胞不能分裂繁殖，是细菌抵抗外界不良环境，保存生命的一种休眠状态。

当恢复适宜的条件时，芽胞开始萌发成新的繁殖体。

三、细菌的观察方法

（一）观察细菌常用的显微镜种类

1．普通光学显微镜

细菌细胞微小、无色、半透明，经染色后才能在普通光学显微镜下观察。

细菌染色的方法很多，有单染色法、复染色法，还有鞭毛、芽孢、荚膜等特殊染色法。

最常用的是革兰氏染色法（一种复染色法）。

2．暗视野显微镜——便于观察活菌

3．荧光显微镜——免疫学中观察抗原抗体反应

4．电子显微镜——不能观察活的细菌

（二）细菌的生长&培养性状观察

1．液体培养性状

2．菌落

四、细菌的生长代谢&繁殖

（一）细菌的化学组成——水（结合水&非结合水），无机物，有机物

（二）细菌的营养需要

1．水

2．碳素——提供碳源的物质；如有机碳（糖、有机酸、脂等）和无机碳（CO2、碳酸盐）；由于各种细菌的分解与合成能力不同，对碳素的利用有选择性；碳素也是细菌的能源物质。

3．氮素——提供氮源的物质，如蛋白质及其降解产物、铵盐、硝酸盐等；主要用于合成细菌的蛋白质等，一般不作为能源；培养基中常用的氮源有蛋白胨、牛肉膏、酵母浸膏、牛肉汁等；细菌对氮源也有选择性。

4．无机盐——细菌对无机盐的需要量很少，但无机盐对细菌的作用却十分重要，如参与细胞组成、能量转移、维持细胞质胶体状态、调节渗透压、参与酶的组成或起激活酶的作用；分为常量元素&微量元素。

5．生长因子——有些细菌的生长还需要少量的生长因子，如维生素类（特别是B族维生素）和一些有机酸、嘌呤、嘧啶等；这些生长因子多半是辅基或辅酶的主要成分，对细菌的生命活动至关重要；充足的生长因子可使细菌生长加快数百倍；各种细菌对生长因子的需要情况有所不同。

（三）细菌的营养类型——根据细菌对碳素利用能力的不同而分类

1．自养菌——有些细菌有高度的合成能力，利用CO2或碳酸盐类作为唯一碳源，利用氨、氨盐、硝酸盐或亚硝酸盐等作为氮源。

又分为化能自养菌和光能自养菌。

2．异养菌——这类细菌对无机物的利用能力较差，需要有较复杂的有机化合物，如糖类、醇类和有机酸等作为碳源才能生长。

又分为化能异养菌和光能异养菌。

（四）细菌的酶——胞内酶&胞外酶

（五）细菌对营养物质的摄取

1．单纯扩散——靠细胞膜两侧浓度差，不消耗能量

2．促进扩散——物质先与载体蛋白特异结合再被转运到细胞内，不需要消耗能量，转运速率也取决于浓度差

3．主动运输（细菌吸收营养物质的主要方式）——物质先与载体蛋白特异结合，逆浓度差运输，消耗能量

4．基团转位（协同扩散）——消耗能量，逆浓度差运输，物质在运输过程中发生化学变化

（六）细菌的呼吸

有氧呼吸——需氧菌；无氧呼吸——厌氧菌；碱性呼吸——兼性厌氧菌

（七）细菌的代谢★&产物（用于鉴别细菌）

1.碳水化合物的代谢及其产物

糖发酵试验：

葡、乳、麦、甘、蔗

MR试验：

葡萄糖分解产生丙酮酸

VP试验：

丙酮酸脱羧→乙酰甲基甲醇→二乙酰

2.含氮化合物的代谢及其产物

吲哚试验：

分解色氨酸，产生吲哚

H2S试验：

分解含硫氨基酸，产生H2S

3.细菌的其他代谢产物

（1）无机酸、有机酸和氨基酸无机酸，如硫酸和硝酸等；有机酸，如乳酸、醋酸、丙酸、丁酸等；氨基酸，如谷氨酸和赖氨酸。

（2）醇类、酯类和其他芳香物质这类物质与工业生产和农、畜产品加工利用有关。

如乙醇、丁醇等。

用于酿酒、乳品加工、饲料加工等。

（3）气体细菌能产生的气体有：

CO2、H2、

CH4（沼气）、NH3、Cl2、H2S等。

常应用于细菌鉴定。

（4）维生素及其他生长刺激素有些微生物能产生大量的维生素（B族维生素）和一些复杂的生长刺激素，可用于畜牧业和工业生产中。

（5）抗菌素抗菌素是某种微生物产生的用以拮抗另一些微生物的物质，它能抑制一定种类微生物的生长发育。

可用于防治某些动物疾病、刺激动物生长。

（6）毒素某些动物病原菌，能产生对动物有毒的物质，使其发生一定症状的疾病，这类物质称为毒素。

可分为外毒素与内毒素。

（7）热细菌在呼吸作用中所产生的能量，只有一小部分（5-10％）被用于生命活动，大部分能量，常转化为热放出。

堆肥和发酵饲料（可达70℃以上）。

（8）热原质许多细菌，特别是革兰氏阴性菌，能产生一种多糖物质，注入人或动物体内，可以引起发热反应，称为热原质。

（9）色素多种微生物能产生色素，颜色有红、橙、黄、绿、青、蓝、紫、黑等，可用于细菌鉴定、食品、化妆品等。

（10）光少数细菌能借发光以散发部分产生的能量。

（八）细菌的生长繁殖

细菌细胞的生长繁殖，体现在个体和群体两方面。

1.细菌个体的生长繁殖

条件：

营养成分、温度、pH、渗透压、气体

方式：

二分裂法进行无性繁殖

★2.细菌群体的生长繁殖

将细菌接种在液体培养基并置于适宜的温度中，定时取样检查活菌数，了解其生长过程的规律。

以时间为横坐标，以活菌数的对数为纵坐标，可得出细菌生长曲线。

细菌生长繁殖可分为4个时期：

迟缓期是细菌初到新环境的适应期。

此时菌体增大、代谢活跃、合成增加。

此时细菌数量并不增加，碱性染色反应较好，对消毒剂和其他有害物高度敏感。

l-4h。

对数期细菌迅速分裂繁殖，细菌数以几何级数增长。

该期病原菌致病力最强，其形态、染色反应均较典型，对理化因素和抗菌药物敏感。

6-10h。

稳定期因营养消耗、代谢产物蓄积等，此时新繁殖的活菌与死菌平衡，活菌数最多。

该期形态染色及生理性状不特异（不适宜染色）。

产生毒素等代谢产物。

一般8h。

衰亡期细菌死亡速度加大，繁殖速度变小。

如不移植到新培养基，最终可全部死亡。

此期菌体变形或自溶，染色不典型。

★（九）细菌的人工培养——细菌培养是微生物学研究和实践的重要技术。

以此可培养、鉴定和利用细菌。

培养细菌，需为其提供适宜的营养物质、酸碱度、温度及气体环境等。

1.培养基是人工配制的含有细菌生长繁殖所需营养的基质。

培养基经灭菌后才能使用。

制备培养基的营养物质由牛肉浸膏、蛋白胨、NaCl、磷酸盐、葡萄糖、血液、血清等提供。

培养基可分为基础培养基和营养培养基；固体、半固体及液体培养基（形态）；鉴别、选择及厌氧培养基（用途）等。

2.酸碱度每种细菌均有可适pH范围及最适pH。

大多数细菌可在pH6-8之间以生长，但多数细菌的最适pH为7.2-7.6。

3.温度不同细菌适应的温度范围不同——嗜温菌&嗜热菌，细菌有各自的可适温度范围即最适温度。

病原菌均为嗜温菌，最适温度为37℃。

4.气体环境根据细菌对氧的需要，将其分为厌氧菌、需氧菌及兼性厌氧菌。

需氧菌须在有一定浓度的游离氧的条件下才能生长繁殖；厌氧菌须在无游离氧的条件下才能存活生长；兼性厌氧菌在有、无氧的环境均能生长，通常在有氧条件比无氧环境生长更好。

有些细菌生长还需一定浓度的N2或CO2环境。

五、细菌的分类&命名

拉丁双名法：

属名+种名中文译名：

种名+属名

第二节其他原核微生物

一、螺旋体——介于细菌&原虫之间的单细胞原核微生物

二、支原体——介于细菌&病毒之间的单细胞原核微生物

三、立克次体——介于细菌&病毒之间的单细胞原核微生物

四、衣原体——介于立克次体&病毒之间的原核微生物

课本P25~本章小结！

小结：

细菌的鉴别：

1.革兰氏染色法2.菌毛3.鞭毛4.芽孢

名词解释：

1.间体：

是胞膜凹入胞质内形成的一种囊状、管状或层状的结构。

5．荚膜：

某些细菌可在细胞外周产生一种粘液样的物质，包围整个菌体，称为荚膜。

6．菌胶团：

当多个细菌的荚膜融合形成一大的胶状物，内含多个细菌细胞时，则称为菌胶团。

7．芽孢：

某些革兰氏阳性菌，在一定条件下，可在菌体内形成一个圆形或卵圆形的内生孢子，称为芽胞。

8．繁殖体（营养体）：

未形成芽胞的菌体称为繁殖体或营养体。

第二章真核微生物

真核微生物是一大类细胞具有细胞核，能进行有丝分裂，细胞质中有线粒体或叶绿体等细胞器的微生物，包括真菌、藻类&原生动物。

第一节真菌

真菌是一大类真核微生物，不含叶绿素，无根、茎、叶，营腐生或寄生生活，仅少数类群为单细胞，其余为多细胞，大多数呈分支或不分支的丝状体，能进行有性和无性繁殖。

从形态上分为酵母菌、霉菌和担子菌。

一、酵母菌

结构简单，多为单细胞的一类真菌。

1.形态结构

比细菌大，有典型的细胞结构（真核微生物），细胞壁很厚

2.生长&繁殖

以无性繁殖为主，主要有芽殖、裂殖（横分裂）和子囊孢子形成。

在无性繁殖中，又以出芽生殖（芽殖）为主。

3.酵母菌菌落特征

单独的酵母菌细胞无色，固体培养基上形成的菌落多数是乳白色，少数是黄色或红色。

二、霉菌

1.形态&结构

霉菌菌丝按功能可分为：

营养菌丝（基质菌丝）、气生菌丝&繁殖菌丝。

霉菌菌丝按结构分为无隔菌丝&有隔菌丝两种。

2.菌落特征

在营养基质上，能形成绒毛状、蛛网状或絮状菌丝体的真菌。

霉菌的菌落比细菌、酵母菌的要大。

3.繁殖方式

霉菌以无性繁殖&有性繁殖进行，以无性繁殖为主。

无性繁殖是不经过两性细胞的结合而形成新个体的过程。

无性孢子包括芽孢子、节孢子、厚垣孢子、孢子囊孢子、分生孢子。

有性繁殖是经两性细胞的质配与核配后，产生有性孢子来实现的。

有性孢子包括卵孢子、接合孢子、子囊孢子和担孢子等。

三、真菌生长繁殖的条件

1.营养需要真菌大多数为异养菌，但它们的碳素利用能力强，不仅能利用单糖和双糖，而且也能利用淀粉、纤维素、木质素等多糖。

真菌对氮素营养要求不严，除氨基酸、蛋白质外，还可利用尿素、铵盐，亚硝酸盐、硝酸盐作为氮源。

2.温度属嗜温菌，最适生长温度的范围为20-30℃。

动物病原真菌最适温度为37℃。

3.pH真菌在pH1.5-10.0之间可生长，最适pH为3-6，属微酸性环境。

4.湿度喜湿耐干。

在高湿（多数在湿度95％-100％）条件下生长良好。

5.光线可见光对孢子的形成和释放有重要作用，紫外光可使真菌发生变异和损伤。

6.气体多数真菌为需氧菌，少数为兼性或严格厌氧。

四、真菌的分离&培养

1.真菌的分离方法可分为菌丝分离法、孢子分离法和组织分离法三类。

2.真菌的培养

固体培养进行菌种分离繁殖，用琼脂斜面、平板作固体培养，形成菌落，观察和分离。

液体培养一般有浅层培养和深层培养两类。

第二节藻类

第三节原生动物

课本P40本章小结

第三章非细胞型微生物——病毒

病毒（Virus）：

指一类具有一定形态、结构，只含有一种核酸（或DNA，或RNA），必须在活的宿主细胞内以复制方式增殖的非细胞微生物。

特点：

非细胞结构；以复制方式增殖；非常小显微镜才能观察到；每种病毒只含一种核酸（或DNA或RNA）；只能在活的宿主细胞内复制成新的子代病毒；抗生素对病毒的作用都不大；干扰素可抑制多数病毒的复制。

病毒按化学结构&组成分为病毒&亚病毒。

按感染对象的不同分为动物病毒、植物病毒、细菌病毒（噬菌体）三大类。

第一节

病毒的形态、大小和结构

一、病毒的形态&大小

病毒颗粒的形态有球状、杆状、丝状、子弹状、砖块状（痘病毒）或多形性（如副黏病毒）。

病毒颗粒极其微小，测量单位用纳米（nm）。

【PS.细菌用微米（μm）】大多数细菌能通过细菌滤器。

二、病毒的结构

完整的病毒颗粒主要由核酸和蛋白质组成。

病毒颗粒的基本结构如右图所示：

中心为一团核酸，称为芯髓，它含有病毒的基因组&遗传信息；核酸的外周包有蛋白质外壳，称为衣壳。

衣壳由一定数量的壳粒构成。

不同病毒衣壳所含的壳粒数目不同，壳粒排列形式&数目可作为病毒鉴别分类的依据之一。

核酸&衣壳统称核衣壳。

仅有核衣壳的病毒称为裸病毒。

有的病毒核衣壳外还包有一层或几层外膜，称为囊膜，此类病毒称为囊膜病毒。

1.核酸芯髓核酸构成病毒的基因组，是病毒复制、遗传和变异等的遗传信息载体，一种病毒只含一种核酸。

（下图）

2.衣壳指核酸的外周包有的蛋白质外壳，由一定数量的壳粒排列而成。

（下图）

功能：

①保护病毒核酸；②介导病毒核酸进入宿主细胞；③具有抗原性，能引起免疫应答。

3.囊膜有些病毒在核衣壳外面还有囊膜。

囊膜是病毒在成熟过程中从宿主细胞获得的，含有宿主细胞膜或核膜的成分。

有的囊膜表面有突起，称为纤突或膜粒。

囊膜与纤突构成病毒颗粒的表面抗原，与宿主细胞嗜性、致病性和免疫原性有密切关系。

有囊膜的病毒称为囊膜病毒，无囊膜的病毒称裸露病毒。

（上图）

第二节病毒的化学组成

裸病毒由核酸&蛋白质组成，囊膜病毒除核酸&蛋白质外，还含有脂类&糖类等。

一、核酸

1.核酸类型病毒的核酸包括DNA或RNA。

核酸可分单股或双股、线状或环状、分节段或不分节段。

DNA病毒多数为双股线状，RNA病毒多数为单股线状。

2.病毒的基因组——较小

最小的DNA病毒圆环病毒的基因组仅1.7kb，最大的DNA病毒痘病毒为275kb。

一般RNA病毒的基因组较小，仅1.7kb-27kb。

3.感染性核酸

将某些病毒的核酸注入易感细胞内即能引起感染，并产生完整的病毒颗粒。

这样的核酸称为感染性核酸。

二、蛋白质

1.结构蛋白指组成病毒成分的蛋白，约占30%-70%，包括衣壳蛋白、囊膜蛋白、（基质蛋白）和酶。

2.非结构蛋白指病毒组分之外的蛋白，在病毒复制过程中的某些中间产物，具有酶的活性或其他功能。

三、脂类

均来自宿主细胞，脂类主要存在于囊膜，主要是磷脂（50%-60%），其次是胆固醇（20%-30%）。

用脂溶剂（如氯仿、乙醚）可去除囊膜中的脂类，使病毒灭活。

四、糖类

核酸中有核糖或脱氧核糖。

嚢膜中的糖类一般以糖蛋白的形式存在，是某些病毒纤突的成分。

如流感病毒的血凝素和神经氨酸酶。

第三节病毒的抵抗力

病毒对外界因素的抵抗力一般比细菌小。

病毒喜冷怕热，高温（60-65℃20～30min）即可杀死，一般用低温冰箱（-20℃～-80℃）或液氮罐（-196℃）保存病毒。

紫外线、消毒剂（碱类、70%乙醇、石碳酸等）易将病毒杀死。

囊膜含有类脂质，有囊膜病毒对有机溶剂（脂溶剂）如乙醚等敏感。

病毒对甘油、抗生素抵抗力强，因此常用50%甘油生理盐水保存病毒。

用抗菌素抑杀病毒材料中污染的细菌。

★第四节病毒的增殖与人工培养

一、病毒的增殖

病毒只在活细胞内进行复制。

利用宿主细胞的酶系统，在病毒基因组控制下合成病毒核酸和蛋白质，并装配成成熟的子代病毒，释放到细胞外，再感染其他易感细胞的过程称复制。

病毒复制周期，包括吸附、侵入、脱壳、生物合成、装配和释放5个连续的阶段。

（一）吸附（adsorption）

吸附易感细胞是病毒复制的第一步。

这一过程包含两步：

①静电吸附：

细胞及病毒颗粒表面都带负电荷，Ca2+、Mg2+等阳离子能降低负电荷，促进静电吸附，是可逆的，非特异的。

②特异性吸附：

病毒颗粒的表面分子与细胞膜上的受体结合，是不可逆的，特异的。

抗病毒治疗

（二）侵入（penetration）

最早了解的是某些噬菌体的侵入与脱壳，它们依靠尾端的溶菌酶在细菌细胞壁开一小孔，尾鞘收缩，尾髓刺入，注入头部的核酸，衣壳则留在细胞外。

动物病毒侵入宿主细胞并脱壳的过程有所不同，可发生在胞浆膜、内吞小体及核膜。

整病毒穿过细胞膜的方式如：

呼肠孤病毒

②病毒囊膜与细胞质膜的融合如：

疱疹病毒

③细胞的内吞功能如：

牛痘病毒

（三）脱壳

病毒进入细胞后迅速在蛋白水解酶的作用下脱掉衣壳，释放出核酸，称为脱壳。

（四）生物合成（biosynthesis）

在病毒感染细胞之后的一个短时间内，病毒完全消失，甚至在细胞内也找不到传染性的病毒颗粒，直至感染数小时后子代病毒出现为止，这阶段称为隐蔽期，一般持续2-12h。

部位：

一般DNA病毒在胞核中复制，RNA病毒在胞浆中复制。

生物合成即在病毒遗传信息的控制下合成病毒的各种组成成分。

早期:

病毒特异性酶的合成

病毒核酸的复制

病毒结构蛋白质的合成

各类病毒生物合成的基本步骤：

由亲代病毒早期转录mRNA由早期mRNA翻译“早期蛋白”（复制所需蛋白）亲代病毒核酸复制子代病毒核酸子代核酸晚期转录mRNA，翻译为“晚期蛋白”

（五）装配和释放（assemblyandrelease）

新合成的核酸和蛋白质在宿主细胞内合成感染性病毒颗粒称为装配，又称成熟。

DNA病毒在核内，RNA病毒在胞浆内装配。

成熟病毒从宿主细胞游离出来称为释放。

释放包括①破胞释放（无囊膜病毒）②出芽释放。

二、病毒的人工培养鸡胚培养法

三大培养方法组织培养法

实验动物培养法（以下三部分内容阅读为主）

（一）鸡胚培养

1、接种途径：

尿囊腔、羊膜腔、卵黄囊、绒毛尿囊膜

2、培养数天后，观察鸡胚情况或取培养物进一步鉴定

（二）组织培养（最常用细胞培养）

1、优点：

（1）可直接观察细胞变化（如细胞出现病变）；

（2）可对病毒的复制进行基础性研究；

（3）可进行空斑纯化病毒克隆；（4）可滴定病毒含量。

2、细胞种类：

（1）原代细胞：

无菌取动物组织磨碎，用胰蛋白酶消化成分散的单个细胞，加培养液在细胞瓶内培养所获得的单层贴壁细胞。

（2）二倍体细胞：

原代细胞消化、重新分装并培养所得细胞，其染色体仍为二倍体。

（3）传代细胞系：

能在体外持续增殖传代的细胞系，多由癌细胞或二倍体细胞突变而成。

（三）实验动物培养

1、不同的病毒，易感动物不同，常用动物有：

小鼠、大鼠、豚鼠、兔、猴等；

2、接种的途径也有多种：

皮下、皮内、脑内、腹腔、静脉等接种；

3、病毒→动物→动物出现感染症状，据症状鉴定病毒或取病变组织进一步检查。

第五节病毒的致病作用与干扰现象

一、病毒的致病作用

不同病毒对易感动物所起的致病作用不同

（一）对宿主组织和器官的直接损伤——某些杀细胞性病毒对细胞直接损伤引起机体的临床症状和病理变化。

1.对呼吸道上皮的损伤：