仪器分析实验讲义已改.docx
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仪器分析实验讲义已改
仪器分析实验讲义--已改
仪器分析实验讲义
编撰：
王军锋聂迎春肖正凤
陕西学前师范学院
2016年更新化学与化工系-1-
实验一水样的pH值测定
一、实验目的
1.学习pHS-3C型酸度计的使用方法。
2.了解电位法测定水的pH值的原理和方法。
二实验原理
在日常生活和工农业生产中，所用水的质量都有一定标准。
在进行水质检验中，水的pH值是重要检验项目之一，如生活饮用水pH要求为6.5~8.5。
低压锅炉水要求pH为10~12。
电子工业、实验试剂配制则需要中性的高纯水。
现在测量水的pH值比较精确的方法是电位法，该法是将玻璃电极（指示电极）、饱和甘汞电极（参比电极）与待测试液组成原电池，用酸度计（一种精密电位差计）测量其电势。
原电池用下式表示：
Ag|AgCl（s）|HCl（0.1mol·L-1）|玻璃膜|试液溶液（xmol·L-1）║KCl（饱合）|Hg2Cl2（s）|Hg玻璃电极被测溶液甘汞电极
玻璃电极为负极，饱和甘汞电极为正极。
在一定条件下，电池的电动势E与pH为直线函数关系（推导过程从略）。
E电池?
K'?
2.303RTpH试F
由上式看出，求出E电池和K，即可知道试液的pH值。
E电池可通过测量求得，而K’是由内外参比电极及难于计算的不对称电位和液接电位所决定的常数，很难求得。
在实际测量时，选用和待测试液pH值相似的、已知pH值的标准缓冲溶液在pH计上进行校正（这个过程叫定位），即测量pH是采用相对方法：
pHx?
F（Ex?
Es）?
pHs2.303RT
通过以上步骤，可在酸度计上直接读出试液的pH值。
玻璃电极的响应斜率与温度有关，在一定的温度下应该是定值，25℃时玻璃电极的理论响应斜率为0.0591。
但是玻璃电极由于制作工艺等的差异，每个pH玻璃电极其斜率可能不同，须用实验方法来测定。
一支电极应使用两种不同pH值的标准pH缓冲溶液进行校正，两种缓冲溶液定位的pH值误差应在0.05之内。
三仪器及试剂
1.仪器
pHS-3C酸度计一台，
E-201-C9型复合pH电极一支，（或231型玻璃电极和232型饱和甘汞电极各一支），50mL烧杯7只。
2.试剂
①pH=4.00标准缓冲溶液（20℃）：
称取115±5℃下烘干2～3小时的一级纯邻苯二甲酸氢钾（KHC8H4O4）10.12g溶于不含CO2的蒸馏水中，在容量瓶中稀释至1000mL，贮于塑料瓶中。
2016年更新化学与化工系-2-
②pH＝6.86标准缓冲溶液（20℃）：
称取一级纯磷酸二氢钾（KH2PO4）3.39g和磷酸氢二钠（Na2HPO4）3.53g，将它们溶于不含CO2的蒸馏水中，在容量瓶中稀释至1000mL，贮于塑料瓶中。
③pH=9.18标准缓冲溶液（20℃）：
称取一级纯硼砂（Na2B4O7·10H2O）3.80g，将它溶于不含CO2的蒸馏水中，在容量瓶中稀释至1000mL，贮于塑料瓶中。
以上标准溶液也可用市售袋装缓冲溶液试剂直接配制。
它们能稳定两个月，其pH值随温度不同稍有差异，见表1-2。
四实验步骤
按照pHS-3C酸度计使用说明书进行操作。
1.酸度计的校正
（1）选用仪器的“pH”档；调节温度补偿，达到溶液温度值；
（2）把用蒸馏水清洗过的电极插入pH=6.86标准缓冲溶液中；
（3）调节定位，使仪器显示读数与该缓冲溶液当时温度下的pH相一致；
（4）用蒸馏水清洗电极，用滤纸吸干，再插入pH=4.00的标准缓冲溶液（若待测液是酸性）或pH=9.18的标准缓冲溶液（若待测液是碱性）中，
（5）调节使仪器显示读数与该缓冲液当时温度下的pH一致，仪器完成校正。
2．溶液pH的测定。
当被测溶液与标定溶液温度相同时，用蒸馏水缓缓淋洗两电极3~5次，再用滤纸吸干，然后将它们插入装有25~50mL被测溶液的烧杯中，电极浸入水中，摇动烧杯、使溶液均匀，待读数稳定后．读取pH；用蒸馏水清洗电极，滤纸吸干。
3.测量水样：
分别测定4个不同水样的pH，每个水样应重复测定三次。
（注意，应根据水样的pH，选择相应的标准pH缓冲溶液对仪器定位）
4.测量完毕后，放开测量开关，关上电源开关，拔掉电源，清洗电极，复合电极用3mol·L-1KCl溶液浸泡。
五数据处理
记录数据，填入下表中
表1-1实验数据记录表
六思考题
1.电位法测定水样的pH值的原理是什么?
2.酸度计为什么要用已知pH值的标准缓冲溶液校正？
校正时应注意哪些问题?
3.何谓指示电极、参比电极?
2016年更新化学与化工系
-3-
实验二离子选择性电极测定饮用水中的氟
一、实验目的
掌握直接电位法的测定原理及实验方法，并学会正确使用氟离子选择性电极和离子计的使用方法。
二、实验原理
饮用水中的氟含量的高低对人体的健康有一定的影响，氟的含量过低易得龋齿，过高则会发生氟中毒现象，适宜的含量为0.5毫克/升左右。
目前测定氟的方法有比色法和电位法。
前者的测量范围较宽，但干扰因素多，往往要对试样进行预处理，后者的测量范围虽然范围不如前者宽，但一般能满足大多数水质分析的要求，而且操作简便，干扰少，样品一般不必进行预处理。
因此，现在电位法测定氟离子以成为常规的分析方法。
本实验中应用氟离子选择性电极、饱和甘汞电极（SCE）和待测试液组成原电池。
测量的电池电动势E与氟离子活度符合能斯特方程：
E?
K?
2.303RTlg?
F?
F
其中K、R、F均为常数，若在试液中加入适量的惰性电解质（如硝酸钠等）,使离子强度保持不变，即使离子的活度系数为一常数，则上式中的氟离子活度可用浓度[F-]代替。
25OC时上式可写作：
E?
K?
?
0.059lg[F?
]
可见，电动势E与lg[F-]成线性关系。
因此，只要作出E对lg[F-]的标准曲线，即可由水样测得的E,从标准曲线求得水样中的氟离子浓度。
三、仪器与试剂
1.仪器：
PXSJ-226离子计，CSB-F-1型氟离子选择性电极，饱和甘汞电极，磁力搅拌器容量瓶100mL7个
移液管50mL1支
吸量管0.5mL1支、10mL2支
聚乙烯烧杯100mL7个
2.试剂：
氟化钠标准溶液，0.100mol·L-1：
称取4.1988g氟化钠（G.R）,以去离子水溶解并稀释至1升，摇匀，储于聚乙烯瓶中备用。
总离子强度调节缓冲液（TISAB）:
取29克硝酸钠和0.2克二水合柠檬酸钠，溶于50毫升1：
1（体积）的醋酸与50毫升5mol·L-1的氢氧化钠的缓冲溶液中，测量该溶液的pH,若不在5.0～5.5内，可用5mol·L-1的氢氧化钠和6mol·L-1的盐酸调节至所需范围。
四、实验步骤
1.调整仪器：
氟电极接离子计的负端，饱和甘汞电极接离子计的正端，仪器连接好电源后，打开电源开关，仪器即显示“PXSJ－226型离子计”等字样，稍等片刻，仪器自动进入起始状态，仪器必须开机预热0.5小时后方可进行测量。
注意：
①测量前需用电阻在3MΩ以上的去离子水浸泡活化一小时以上，当测得其在纯水中的毫伏数大于300mV时,便可用于测量。
2016年更新化学与化工系-4-
②测量时，单晶薄膜上不可附有气泡，以免干扰读数。
③溶液的搅拌速度应缓慢、稳定。
2.标准曲线法：
（1）系列标准溶液的配制
用吸量管取10毫升0.100mol·L-1氟化钠标准溶液，和10毫升TISAB溶液，在100毫升容量瓶内用去离子水稀释至刻度，摇匀。
并用逐级稀释法配制成浓度为10-2、10-3、10-4、10-5、10-6mol·L-1的氟化钠系列标准溶液。
逐级稀释时，只需加入9毫升TISAB溶液。
（2）标准曲线的绘制
将上述标准溶液依次倒入小聚乙烯塑料烧杯中（浸没电极即可），用滤纸吸去悬挂在电极上的水滴，插入氟离子选择电极和饱和甘汞电极，连接线路，放入搅拌子，开动搅拌器，由稀至浓分别测量标准溶液的电位值，待电位值稳定后读取读数。
每次测定前用被测试液清洗电极、烧杯以及搅拌子。
标准溶液测量完毕后将电极用蒸馏水清洗直至测得电位值300mV左右待用。
（3）饮用水样的测定：
用移液管移取50毫升饮用水样于100毫升容量瓶中，加入10毫升TISAB溶液，用去离子水稀释至刻度，摇匀。
清洗氟离子选择性电极，使其在纯水中测得的电动势在300毫伏。
将清洗后的电极用滤纸吸去悬挂着的水滴，插入盛有上述未知水样的烧杯中，搅拌数分钟，读取稳定的电动势。
五、数据及处理
记录对氟化钠系列标准溶液所测得的电动势E，并在坐标纸上作E对pF的标准曲线。
记录未知试样溶液的电动势，并由标准曲线查得未知试样溶液中的氟离子浓度[F-]，由下式计算饮用水中的氟离子含量。
WF?
[F?
]?
100?
MF?
100050.0
式中WF为每升饮用水样中氟离子的毫克数，设MF为氟的原子量。
六、思考题
1.氟离子选择性电极使用时应注意哪些问题？
2.TISAB的组成是什么？
它在测量中起的作用是什么？
3.溶液的酸度对测定的影响如何？
2016年更新化学与化工系-5-
实验三吸光光度法测定铁（以邻二氮菲为显色剂）
一、试验目的
通过吸光光度法测定铁的基本条件试验，学习如何选择吸光光度法分析的实验条件，并掌握721型分光光度计的使用方法。
二、实验原理
在可见区的吸光光度测量中，若被测组分本身有色，则可直接测量。
若被测组分本身无色或颜色很浅，则可用显色剂与其反应（即显色反应），生成有色化合物，再进行吸光度的测量。
铁的显色试剂很多，例如硫氰酸铵、巯基乙酸、磺基水杨酸钠等。
邻二氮菲是测定微量铁的一种较好的试剂，它与二价铁离子反应，生成稳定的橙红色络合物（lgK稳=21.3）此反应很灵敏，此络合物的lgK稳=21.3，在510nm下，摩尔吸光系数ε为1.1×104，在pH＝2～9之间，颜色深度与酸度无关，而且很稳定，在有还原剂存在的条件下，颜色深度可以保持几个月不变。
本方法的选择性很高，相当于铁含量40倍的Sn2+、Al3+、Ca2+、Mg2+、Zn2+、SiO32-；和20倍的Cr3+、Mn2+、VO3-、PO43-；5倍的Co、Cu2+等均不干扰测定，所以此法应用很广。
而Fe3+能与邻二氮菲生成3∶1配合物，呈淡蓝色，lgK稳=14.1，稳定性较差。
所以在加入显色剂之前，应用盐酸羟胺（NH2OH·HCl）将Fe3+还原为Fe2+，其反应式如下：
2Fe3++2NH2OH·HCl→2Fe2++N2+H2O+4H++2Cl-
测定时控制溶液的酸度为pH≈5较为适宜，用邻二氮菲可测定试样中铁的总量。
三、仪器与试剂
1、仪器
721型分光光度计（附1厘米液槽4个）
容量瓶50毫升7个
滴定管50毫升1支
吸量管1毫升1支2毫升1支5毫升1支
量杯10毫升1个
2、试剂
⑴铁标准溶液，100微克/毫升：
准确称取0.8634克NH4Fe（SO4）2·12H2O置于烧杯中，加入20毫升1：
1的盐酸和少量水，溶解后，转移至1升容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀。
⑵盐酸羟胺溶液10%（临用时配制）
⑶邻二氮菲溶液0.15%（临用时配制）：
应先用少许酒精溶液，再用水稀释。
2016年更新化学与化工系-6-
⑷醋酸钠溶液1mol·L-1⑸氢氧化钠溶液⑹精密试纸四、实验步骤1、准备工作
打开仪器电源开关，预热，调解仪器。
2、绘制吸光度对铁的浓度曲线
取5个50毫升容量瓶，分别加入0，0.40，0.80，1.20，1.60，2.00毫升100微克/毫升铁标准溶液，每个容量瓶再加入1毫升10%盐酸羟胺溶液，2毫升0.15%邻二氮菲溶液，以及5毫升1mol·L-1醋酸钠溶液。
在选定的波长下，用1厘米液槽，以不含铁的试剂溶液作参比溶液，测量各个溶液的吸光度。
以吸光度对铁的浓度作图。
3、未知试样溶液的测定
取1个50毫升容量瓶，移取5.00毫升未知试样溶液，按实验步骤1的方法配制溶液，并测量吸光度。
五、数据及处理
记录系列标准溶液浓度及相应的吸光度。
绘制吸光度对铁的浓度曲线，并确定其线性范
六、思考题1、实验中，盐酸羟胺、醋酸钠的作用是什么？
若用氢氧化钠代替醋酸钠，有什么缺点？
2、参比溶液的作用是什么？
在本实验中可否用蒸馏水作参比？
2016年更新化学与化工系
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实验四荧光光度法测定荧光素含量的测定
一、实验目的
1．掌握荧光分析方法。
2．学会使用荧光分光光度计。
二、实验原理
荧光是光致发光。
当物质的分子吸收光以后，从基态跃迁到激发态，为激发态分子，处于激发态的分子通过无辐射去活（释放能量），回到第一电子激发态的最低振动能级，再以发射辐射的形式去活，跃迁回至基态的各个振动能级则发出荧光。
有苯环或具有多个共轭双键体系以及具有刚性平面结构的有机物分子易产生荧光。
大多数无机盐金属离子不产生荧光，而一些金属鳌合物能产生很强的荧光。
取代基的性质、溶剂的极性、体系的pH值和温度都会影响荧光体的荧光特性或荧光强度。
1．荧光光谱定量分析原理
溶液的荧光强度F与该溶液对光吸收的程度、溶液中荧光物质的荧光效率及浓度有关：
F＝2.303ΦI0bεc
式中Φ为荧光效率，为发射的光子数与吸收的光子数之比；I0为激发光强度；ε为摩尔吸光系数；b为光程长度，c为荧光物质浓度。
当入射光强度一定时，
F＝Kc
只有在c较小时上式才适用。
即在低浓度时，荧光强度F与溶液荧光物质的浓度c成正比例关系。
荧光分析仪由光源、单色器、液池和检测器等几个部分组成，其结构如图1。
2016年更新化学与化工系-8-
图1荧光分析仪光路图
1－氙灯，2－凸面镜，3－凹面镜，4－入射狭缝，5－激发凹面光栅
6－出射狭缝，7－双透镜，8－样品池，9－透镜，10－入射狭缝
11－出射狭缝，12－发射凹面光栅，13－凹面镜，14－光电倍增管
2．激发光谱
固定荧光最大发射波长，改变激发光波长，测得荧光强度与激发光波长的关系即为激发光谱曲线，由激发光谱曲线可选出最大激发波长。
3．荧光光谱
固定最大激发光波长，测定不同发射波长时的荧光强度，即得到荧光光谱曲线。
由荧光光谱曲线可选出最大发射波长。
激发光谱与荧光光谱有镜像关系。
荧光素产生较高的荧光量子效率（约0.85），低浓度时产生强的荧光，在pH＝5～10范围内pH与荧光有关，用0.1mol?
L-1NaOH溶液保证恒定的发光效率。
二、实验主要用品
荧光分光光度计（F96PRO）
容量瓶（50mL）
移液管（5mL）
荧光素、NaOH
三、实验步骤与内容
1．标准溶液配制
荧光素标准溶液I（1.0×10-3mol?
L-1）：
称0.0166克荧光素于小烧杯中，加少量水溶解，2016年更新化学与化工系
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转移到50mL容量瓶中；加1moL/LNaOH5mL，用水稀释至刻度。
荧光素标准溶液II：
取1mL荧光素标准溶液I于100mL容量瓶中，加1mol?
L-1NaOH10mL，用水稀释到刻度，配成含荧光素为1×10-5mol?
L-1的0.1mol?
L-1NaOH溶液。
2．扫描荧光发射光谱
取荧光素标准溶液II2mL于50mL容量并中，加5mL1mol?
L-1NaOH溶液，用水稀释至刻度。
将该溶液装入样品池中，在F96Pro荧光分光光度计上扫描荧光发射光谱，并找出萤光发射波长。
3．荧光素的定量分析
（1）绘制工作曲线
取荧光素标准溶液II1.0、2.0、3.0、4.0、6.0mL分别于5个50mL容量并中，加5mL1mol?
L-1NaOH，用水稀释至刻度，在F96Pro荧光分光光度计上测量其每个溶液荧光强度。
由实验数据可绘制标准曲线。
（2）测定未知样品
以绘制工作曲线的条件测定未知样品的荧光强度。
四、数据处理
1．绘制标准曲线。
以荧光强度和溶液浓度作图，绘制标准曲线。
2．求出未知样浓度。
由未知样品的荧光强度在工作曲线上求出未知样浓度。
五、思考题
1．解释为什么荧光强度的测量要在与激发辐射成直角的方向？
2．叙述如何绘制荧光发射光谱。
2016年更新化学与化工系-10-
实验五荧光光度法测定维生素B2的含量
一、实验目的
（1）学习荧光光度法测定多维葡萄糖粉中维生素B2的分析原理。
（2）掌握970CRT荧光光度计的操作技术。
二、实验原理
维生素B2，又叫核黄素，是橘黄色无臭的针状结晶。
维生素B2易溶于水而不溶于乙醚等有机溶剂。
在中性或酸性溶液中稳定，光照易分解，对热稳定。
维生素B2水溶液在430~440nm蓝光或紫外光照射下会发生绿色荧光，荧光峰在535nm，在pH6~7的溶液中荧光强度最大，在pH11的碱性溶液中荧光消失。
由于维生素B2在碱性溶液中经光线照射，会发生光分解而转化为光黄素，后者的荧光比核黄素的荧光强的多。
因此，测量维生素B2的荧光时，溶液要控制在酸性范围内，且须在避光条件下进行。
三、仪器与试剂
970CRT荧光分光光度计。
10μg/mL维生素B2标准溶液：
准确称取10.0mg维生素B2，用热蒸馏水溶解后，转入1L棕色容量瓶中，冷却后加蒸馏水至标线，摇匀，置于暗处保存。
冰乙酸（AR）；维生素B2试样溶液。
四、实验步骤
（1）标准曲线的绘制
于6只50mL容量瓶中，分别加入10μg/mL维生素B2标准溶液0.50、1.00、1.50、2.00、
2.50、3.00mL，再各加入冰乙酸2.0mL，加水至标线，摇匀。
在970CRT荧光分光光度计上，用1cm荧光比色皿于激发波长440nm，发射波长540nm处，测量标准系列溶液的荧光强度。
（2）维生素B2样品浓度的测定
样品稀释后在相同的测量条件下，测量其荧光强度。
平行测定三次。
五、实验记录及数据处理
以相对荧光强度为纵坐标，维生素B2的质量为横坐标绘制标准曲线。
从标准曲线上查出待测试液中维生素B2的质量，并计算出维生素B2试样的浓度。
六、思考题
1.试解释荧光光度法较吸收光度法灵敏度高的原因。
2.维生素B2在pH=6~7时最强，本实验为何在酸性溶液中测定？
2016年更新化学与化工系-11-
实验六原子吸收分光光度法测定水样中的铜
一、实验目的
1．了解AA7003型原子吸收分光光度计的基本结构和使用方法。
2．观察了解空心阴极灯电流、火焰高度、火焰状态等因素对吸光度值的影响。
3．掌握原子吸收分光光度法进行定量测定的方法。
二、实验原理
原子吸收光谱法基于从光源发出的被测元素的特征辐射通过样品蒸气时，被待测元素基态原子所吸收，由辐射的减弱程度求得样品中被测元素的含量。
在锐线光源条件下，光源的发射线通过一定厚度的原子蒸气，并被基态原子所吸收，吸光度与原子蒸气中待测元素的基态原子数间的关系遵循朗伯－比耳定律：
A=logI0/I=KLN
式中A为吸光度；I0为入射光强度；I为经过原子蒸气吸收后的透射光强度；K为吸光系数，L为光波所经过的原子蒸气的光程长度，N为基态原子密度。
在火焰温度低于3000K的条件下，可以认为原子蒸气中基态原子的数目实际上接近于原子总数。
特定的实验条件下，原子总数与试样浓度c的比例是恒定的，所以，上式又可以写成：
A=Kc
这就是原子吸收分光光度法的定量基础。
常用的定量方法为标准曲线法和标准加入法等。
原子吸收分光光度计主要组成部分包括光源、原子化器、分光系统和检测系统。
其光路如图1所示。
图1原子吸收分光光度计光路图
1．空心阴极灯；2．火焰；3．入射狭缝；4．凹面反射镜；5．光栅；6．出射狭缝；7．检测器
三、实验主要用品
AA7003型原子吸收分光光度计
空心阴极灯（铜灯一只）
空气压缩机，乙炔钢瓶，容量瓶（50mL，100mL，1000mL）
移液管（5mL），烧杯（100mL，250mL）
四、实验步骤与内容
1.铜的标准溶液配制
2016年更新化学与化工系-12-
取浓度为1mg?
mL-1铜的标准溶液2.5mL于50mL容量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度，其含铜量为50μg?
mL-1。
2.工作曲线的绘制
分别移取浓度为50μg?
mL-1铜的标准溶液0.00，1.00，3.00，4.00，5.00mL于50mL容量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度。
以零号溶液为空白，选择灯电流为2～5mA，在324.7nm的波长位置测量吸光度值。
将测得的吸光度值对铜溶液的质量浓度作图，绘出工作曲线。
3.未知样的分析
取1个50毫升容量瓶，移取50毫升自来水，用制作工作曲线的相同测量条件测定其吸光度值。
由工作曲线上查出自来水中铜的质量浓度。
六、思考题
1．原子吸收光谱仪由哪几部分组成？
各部分的作用是什么？
2．为保证分析的准确度和精密度，在实验中应该注意哪些问题？
2016年更新化学与化工系-13-
实验七高效液相色谱的定性定量方法
一、实验目的
1、了解并熟悉高效液相色谱仪的流程。
2、掌握液相色谱定性及外标定量方法。
3、了解液相色谱检测器及色谱柱的分类。
二、实验原理
（一）高效液相色谱
高效液相色谱仪的主要部件：
贮液器、高压泵、梯度洗提装置、进样器、色谱柱、检测器、恒温器、数据处理系统等。
二、实验原理
（一）高效液相色谱
高效液相色谱仪的主要部件：
贮液器、高压泵、梯度洗提装置、进样器、色谱柱、检测器、恒温器、数据处理系统等。
仪器流程：
贮液器中贮存的载液（常需除气）经过过滤后由高压泵输送到色谱柱入口。
当采用梯度洗提时一般需用双泵系统来完成输送。
样品由进样器注入载液系统，而后送到色谱柱进行分离。
分离后的组分由检测器检测，输出信号供给记录仪或数据处理装置。
如果需收集馏分作进一步分析，则在色谱柱一侧出口将样品馏分收集起来。
各部分功能：
1、高压泵：
往复式柱塞泵：
是一种恒流泵，这种泵的特点是不受整个色谱体系中其余部分阻力稍有2016年更新化学与化工系-14-
变化的影响，连续供给恒定体积的流动相；更换溶剂方便，很适用于梯度洗提；不足之处是输出有脉冲波动，会干扰某些检测器（如差示折光检测器），但对紫外检测器的影响不大。
2、进样装置：
高压定量进样阀：
这是通过进样阀（常用六通阀）直接向压力系统内进样而不必停止流动相流动的一种进样装置。
3、色谱柱：
目前液相色谱法常用的标准柱型是内径为4.6mm，长度为25cm的直形不锈钢柱。
填料颗粒度5～10μm，色谱柱的填料种类主要有-C18、-C8、-NH2、-CN、-SO3-、-COOH等等。
4、检测器：
紫外光度检测器：
紫外光度检测器是液相色谱法广泛使用的检测器，它的作用原理是基于被分析样品组分对特定波长紫外光的选择性吸收，组分浓度与吸光度的关系遵守比耳定律。
紫外光度检测器有固定波长（单波长和多波长）、可变波长（紫外分光和紫外可见分光）和二极管阵列检测器。
这种检测器的特点：
①灵敏度高；②最小检测浓度可达10-9g/mL；③对温度和流速不敏感，可用于梯度洗提；④结构简单；⑤缺点是不适用于对紫外光
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