动植物生理实验.docx
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动植物生理实验
植物生理实验
实验1植物组织渗透势的测定（质壁分离法）
仪器药品
显微镜载玻片及盖玻片镊子刀片
配成0.5—0.1mol/L梯度浓度的蔗糖溶液各50ml。
称34.23g蔗糖用蒸馏水配成100ml，其浓度为1mol/L（母液）。
再配制成下列各种浓度：
0.50mol/L：
吸母液25ml+水25ml
0.45mol/L：
吸母液22.5ml+水27.5ml
0.40mol/L：
吸母液20.0ml+水30.0ml
0.35mol/L：
吸母液17.5ml+水32.5ml
0.30mol/L：
吸母液15.0ml+水35.0ml
0.25mol/L：
吸母液12.5ml+水37.5ml
0.20mol/L：
吸母液10.0ml+水40.0ml
0.15mol/L：
吸母液7.5ml+水42.5ml
0.10mol/L：
吸母液5.0ml+水45.0ml
实验2植物组织水势的测定（小液流法）
仪器药品
试管毛细滴管移液管剪刀镊子甲烯蓝蔗糖溶液（0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8mol/L）
实验3蒸腾强度的测定（钴纸法）
仪器药品
扭力天平烘箱
干燥器瓷盘
镊子剪刀
玻璃板载玻片
薄橡皮有塞指管
滤纸弹簧纸夹
5%氯化钴溶液（9.2gCoCl1·6H2O用蒸馏水配成100ml）滴几滴盐酸调成弱酸性。
实验4小孔的扩散（示范）
仪器药品
小烧杯台天平
培养皿刀片
尺及解剖针卡片纸
1%琼脂石蜡
红墨水或蓝墨水酒糟或丙酮
实验5单盐毒害及离子间拮抗现象
仪器药品
烧杯纱布
石蜡0.12mol/LKCl
0.06mol/LCaCl20.12mol/LNaCl（所用药品均需用AR）
实验6植物根系对离子的选择吸收
仪器药品
pH计精密pH试纸
移液管3个100ml三角烧瓶
0.5mg/ml（NH4）2SO4100ml0.5mg/mlNaNO3100ml蒸馏水100ml
实验7钾离子对气孔开度的影响
仪器药品
显微镜镊子温箱25摄氏度
载玻片、盖玻片培养皿3
0.5%硝酸钾15ml0.5%硝酸钠15ml
实验8植物的元素缺乏症（溶液培养）
仪器药品
分析天平培养缸（瓷质或塑料）
鱼缸打气泵量筒
烧杯移液管
按下表分别配制贮备液，所用药品均需为分析纯：
药品名称
用量（g/L）
Ca（NO3）2
82.07
KNO3
50.56
MgSO4·7H2O
61.62
KH2PO4
27.22
NaNO3
42.45
MgCl2
23.81
Na2SO4
35.51
CaCl2
55.50
KCl
37.28
Fe-EDTA
Na2-EDTA7.45g,FeSO4·7H2O5.57g
微量元素
H3BO32.860g,MnSO41.015g,
CuSO4·5H2O0.079g,ZnSO4.7H2O
0.220G,H2MOO40.090g
配制缺元素培养液
按下表用量配制缺元素培养液：
贮备液
贮备液（ml）
完全
-N
-P
-K
-Ca
-Mg
-S
-Fe
缺微量元素
Ca（NO3）2
KNO3
MgSO4
KH2PO4
Fe-EDTA
微量元素
NaNO3
MgCl2
Na2SO3
CaCl2
KCl
10
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1
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2.5
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配制时先取蒸馏水900ml，然后加入贮备液，最后配成1000ml，以避免产生沉淀。
培养液配好后，用稀酸、碱调节至pH5—6
实验9硝酸还原酶活性的测定
仪器药品
721型分光光度计真空泵（或注射器）
保温箱天平
真空干燥器钻孔器
三角烧瓶移液管
烧杯
0.1mol/L磷酸缓冲液，pH7.5（见附表2）。
0.2mol/LKNO3：
溶解20.22gKNO3于1000ml蒸馏水中。
磺胺试剂：
1g磺胺加25ml浓盐酸，用蒸馏水稀释至100ml。
α-萘胺试剂：
0.2gα-萘胺溶于含1ml浓盐酸的蒸馏水中，稀释至100ml。
NaNO2标准溶液：
1gNaNO2用蒸馏水溶角成1000ml。
然后吸取5ml，再加蒸馏水稀释成1000ml，此溶液每ml含有NaNO210μg，用时稀释之。
实验10叶绿体色素的提取和分离（纸层析法）
仪器药品
大试管台天平
研钵量筒
烧怀漏斗
软木层新华滤纸
丙酮10ml四氯化碳
无水硫酸钠碳酸钙石英砂
实验11植物体色素及其性质
仪器药品
分光计天平
研钵分液漏斗
移液管量筒
吸球试管
碳酸钙氢氧化钾
丙酮乙醚
甲酸盐酸
醋酸铜
实验12叶绿体的分离
仪器药品
离心机天平
容量瓶量筒
移液管研钵
烧杯纱布
0.35mol/LNaCl
35mmol/LNaCl
10mmol/LTris-HCl缓冲剂，Ph7.8（见附表2）
实验13离体叶绿体对染料的还原作用（希尔反应）
仪器药品
721型人光光度计试管架
烧杯容量瓶
移液管试管
100mmol/L磷酸缓冲液，pH7.3（见附表2）
0.3mmol/L2，6二氯靛酚钠；称取8.7mg二氯靛酚钠，加蒸馏水定容至100ml（如药品纯度低，可适当提高浓度）。
实验14淀粉的合成——淀粉磷酸化酶
1-磷酸葡萄糖
淀粉
仪器药品
台天平离心机
水浴锅研钵
移液管1%1-磷酸葡萄糖
0.1mol/L柠檬酸-0.2mol/L磷酸缓冲液，pH6.5，（见附表2）。
I2-KI溶液：
溶液1.5gKI于少量蒸馏水中，加入结晶碘0.3g，待溶解后，稀释100ml。
实验15植物呼吸强度的测定（小篮子法）
仪器药品
广口瓶温度计
酸式滴定管干燥管
尼龙网制小篮
0.05mol/LBa（OH）2
指示剂：
0.1%麝香草酚酞酒精溶液（见附录表4）。
1/44mol/L草酸溶液：
准确称取重结晶的草酸H2C2O4·2H2O2.8652g，溶于蒸馏水，配成1000ml，每ml溶液相当于1mg的CO2。
实验16多酚氧化酶活性的测定（氧电极法）
仪器药品
测氧仪记录仪
超级恒温水浴离心机
磁力搅拌器匀浆机
反应杯微量注射器
不溶性PVP（聚乙烯吡咯烷酮，polyvinylpyrrolidone）
1mmol/L儿茶酚：
o.11g儿茶酚溶于1000ml0。
1mol/L磷酸缓冲液中，pH6.5。
0.1mol／L磷酸缓冲液，pH6.5（见附表2）．
实验17植物体内有机物运输途径（环割法）
仪器解剖刀
实验18吲哚乙酸氧化酶活性的测定
仪器药品
721型分光光度计离心机
恒温水浴锅天平
研钵试管
移液管烧杯
20mmol/L磷酸缓冲液，pH6.0（见附表2）。
1mmol/L2,4-二氯酚：
称取二氯酚16.3mg用蒸馏水配成100ml。
1mmol/L氯化锰：
称取MnCl2·4H2O19.8mg用蒸馏水配制成100ml。
1mmol/L吲哚乙酸：
称取IAA17.5mg用少量乙醇溶解，然后将其倒于盛有约90ml蒸馏水的容量瓶中（100ml），稀释至刻度。
吲哚乙酸试剂A或B（任备其中之一）：
试剂A：
15ml0.5mol/LfeCl3，300ml浓硫酸（比重为1.84），500ml蒸馏水，使用前混合之即成，避光保存。
用时1ml样品中加入试剂4ml。
试剂B：
10ml0.5mmol/LfeCl3，500ml35%过氯酸，使用前混合之即成，避光保存。
用时于1ml样品中加入试剂2ml。
试剂B较试剂A灵敏。
实验19IAA的生物鉴定（小麦芽鞘切段伸长法）
仪器药品
25oC暗室滤纸
旋转器分析天平
小瓷缸大瓷缸
培养皿银试管
移液管青霉素瓶
刀片小镊子
尼龙网刻度尺
半对数座标纸饱和漂白粉溶液
小麦品种，扬麦1号最好用中农28。
100ppmIAA母液：
称10mgIAA溶于少量无水酒精中，再用水稀释至100ml。
此溶液在冰箱中可保存一个月。
缓冲液：
称取K2HPO4，1.794g，柠檬酸1.019g，蔗糖（AR）20g溶于1000ml重蒸馏水中，pH为5.0。
实验20细胞分裂素对萝卜子叶的保绿作用
仪器药品
721型分光光度计合天平
培养皿量筒
容量瓶小漏斗
剪刀研钵
0.lmol/LHCl
6-苄基氨基嘌呤（或玉米素）溶液：
称取10mg6-苄基氨基腺嘌呤，先用0.1mol/LHCl溶解，再用蒸馏水稀释成100ml，则浓度为100ppm再稀释成5、10、20ppm，配成的溶pH约为5左右。
实验21乙烯对棉花子叶脱落的效应
仪器药品
剪刀镊子
培养皿小烧杯
脱脂棉乙烯利
实验22种子发芽率的快速测定
氯化三苯四氮唑法（TTC法）
仪器药品
恒温箱烧坏
培养皿镊子
刀片天平
0.5%TTC溶液：
称取0.5gTTC放在烧杯中，加入少许95%乙醇使其溶解，然后用蒸馏水稀释至100ml。
溶液避光保存，若变红色，即不能再用。
实验23谷物种子萌发时淀粉酶活性的测定
仪器药品
天平恒温水浴锅
研钵白磁板
漏斗漏斗架
培养皿滤纸
1%淀粉溶液0.2mol/L磷酸缓冲液，Ph6
I-KI溶液：
1．原碘液：
I211g，KI22g，定容至500ml。
2．标准稀碘液：
取原碘液15ml，加KI8g定容至500ml。
3．比色稀碘液：
原碘液2ml加KI20g，定容至500ml。
标准糊精：
称取0.12g糊精，悬浮于少量水中，再移至沸水中，冷却定容至200ml，取其中1ml加3ml标准稀碘液作为比较颜色。
实验24植物组织培养
Ⅰ．愈伤组织培养和分化
仪器药品
培养室接种箱或超净工作台
高压灭菌锅分析天平
水浴锅长镊子
解剖刀剪刀
三角饶瓶（100ml）容量瓶
烧杯移液管
量简牛皮纸
培养皿称量纸
棉线HgCl2（或次氨酸钠）
乙醇6-苄基氨基腺嘌呤
IAA或2，4-DMS培养基（见附表16和17）
1．配制培养基
（1）愈伤组织诱导培养基：
MS培养基（蔗糖含量为10g/L，2，4-D含量为2mg/L，琼脂10g/L）。
（2）试验培养基：
按下表配制。
序号
吲哚乙酸（mg/L）
6-苄基氨腺嘌呤
相对比值
1
0
2.0
—
2
0.2
2.0
1:
10
3
0.5
2.0
1:
4
4
1.0
2.0
1:
2
5
2.0
2.0
1:
1
6
2.0
1.0
2:
1
7
2.0
0.5
4:
1
8
2.0
0.2
10:
1
9
2.0
0
—
吲哚乙酸用少量0.1mol/LNaOH溶解，6苄基氨基腺瞟吟用少量0.lmol/LHCI溶解。
Ⅱ原生质体的分离和培养
仪器药品
培养室超净工作合或接种稻
真空系或水泵高压灭菌锅
离心机手摇离心机
细菌过滤器过滤瓶
血球计数器移液管
培养皿三角烧瓶
不锈钢网k00—400目）长镊子
剪刀漂白精片
70%乙醇
NT琼脂培养基（见附表16和17），另加入1.2%琼脂。
酶液：
0.7g纤维素酶（EA3－867）5.5g甘露醇，0.05gCaCl2,配成100ml,PH5.7，溶解后4000r/min离心15分钟，取上清液，通过灭菌漏斗过滤消毒（用0.45
m微孔滤膜减压过滤），滤液在超净工作台上分装在灭菌的三角烧瓶中，每瓶约10m1，贮于冰箱中备用。
洗涤液：
5.5g甘露醇，0.05gCaCl2用NT培养液配成100ml。
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