分子期末总复习doc.docx

分子期末总复习doc.docx

《分子期末总复习doc.docx》由会员分享，可在线阅读，更多相关《分子期末总复习doc.docx（12页珍藏版）》请在冰点文库上搜索。

分子期末总复习doc

现代分子牛物学期末总复习

第一部分名词解释

1.c值是一种生物的单倍体基因组DNA的总量

2.启动子指能被RNA聚合酶识别、结合并启动基因转录的一段DNA序列

3.开放阅读框架从mRNA5,端起始密码子AUG到丁端终止密码子之间的核昔酸序列，各个三联体密码连续排列编码一个蛋白质多肽链，称为开放阅读框架

4.CpG岛没有被甲基化的CG小片段，称CG岛

5.信号肽指新合成多肽链中用于指导蛋白质跨膜转移的N-末端氨基酸序列

6.感受态细胞：

指处于能摄取各种外源性DNA分子的生理状态的细胞

7.管家基因某些基因在一个个体的几乎所有细胞中持续表达，通常被称为管家基因

&弱化子在操纵区与结构基因之间的一段可以终止转录作用的核昔酸序列

9・AP位点糖甘水解酶识别改变了的碱基，把碱基从N-P-糖昔键处切下来，在DNA链上形成去嚓吟或去囉唳位点，统称为AP位点

10.cDNA以niRNA为模板逆转录出的DNA称cDNA

11・转座子存在与染色体DNA上可自主复制和位移的基本单位。

12.结构基因DNA分子上转录出RNA的区段，称为结构基因

13.核心启动子保证RNA聚合酶II转录正常起始所必需的、最少的DNA序列，包括转录起始位点及转录起始位点上游TATA区

14•限制性内切酶已被证明是限制修饰系统中的一个组成部分，具有识别双链DNA分子中某种特定的核昔酸序列并由此切割DNA双链结构的酶

15.完全基因敲除通过同源重组法完全消除细胞或者动物个体中的靶基因活性

16.负控阻遏阻遏蛋白与效应物结合时，基因不转录

17.操纵子基因表达的协调单位，由启动子、操纵基因及其所控制的一组功能上相关的结构基因所组成。

操纵基因受调节基因产物的控制

18.前导序列在trpmRNA5‘端trpE基因的起始密码前一个长162bp的mRNA片段

19.假基因是基因组中因突变而失活的基因，无蛋白质产物

20.反式作用因子能直接或间接地识别或结合在各类顺式作用元件核心序列上，参与调控靶基因转录效率的蛋白质

21.核小体用于包装染色质的结构单位，是由DNA链缠绕一个组蛋白核构成的

22.转录单元一段从启动子开始至终止子结束的DNA序列

23.同义密码子对应于同一氨基酸的密码子

24.信号序列在起始密码子之后，有一段编码疏水性氨基酸序列的RNA区域，这个氨基酸序列就被称为信号序列

25.C（t）值产物荧光强度首次超过设定阈值时，PCR反应所需的循环数

26.细菌转化是指一种细菌菌株由于捕获了来自供体菌株DNA而导致性状特征发生遗传改变的过程

27.cDNA文库利用某种生物的总mRNA合成cDNA,再将这些cDNA与载体连接，转入细菌细胞中进行保存和扩增，称cDNA文库

28.超级调控子ppGpp与pppGpp的作用不只是一个或几个操纵子，而是影响一大批，所以称他们是超级调控子

29•顺式作用元件影响自身基因表达活性的非编码DNA序列

30.复合转座子是一类带有某些抗药性基因（或其他宿主基因）的转座子,其两翼往往是两个相同或高度同源的IS序列

31.三联子密码mRNA链上每三个核甘酸翻译成蛋白质多肽链上的一个氨基酸，这三个核甘酸就称为密码子或三联子密码

32.基因工程是指在体外将核酸分子插入病毒、质粒或其他载体分子中，构成遗传物质的新组合，使之进入原先没有这类分子的寄主细胞内并进行持续稳定的繁殖与表达

33.基因扩增指生物体内或体外人工方式使基因拷贝数大规模增加

34.基因表达从DNA到蛋白质或功能RNA的过程

35.RBS（核糖体结合位点）：

mRNA链上起始密码子AUG上游的一段非翻译区

36.编码链与mRNA序列相同的那条DNA链称为编码链

37.多顺反子mRNA编码多个蛋白质的mRNA

38.模板链根据碱基互补原则指导mRNA合成的DNA链称为模板链

39.简并由一种以上密码子编码同一个氨基酸的现象称为简并

40.条件性基因敲除指通过定位重组系统实现特定时间和空间的基因敵除41•限制性内切酶已被证明是限制修饰系统中的一个组成部分，具有识别

双链DNA分子中某种特定的核昔酸序列并由此切割DNA双链结构的酶

42.诱导物如果某种物质能够促使细菌产生酶来分解它，这种物质就是诱导物

43.基因家族真核生物的基因组中有很多来源相同、结构相似、功能相关的基因，将这些基因称为基因家族

44.基因重排将一个基因从远离启动子的地方移到距它很近的位点从而启动转录，这种方式被称为基因重排

45.负控诱导阻遏蛋白不与效应物结合时，基因不转录

46.组成型剪接：

一个基因的转录产物通过剪接只能产生一种成熟的niRNA

47.可阻遏基因如果某一代谢途径最终产物合成酶的基因可以被这个产物本身所关闭，这种基因称为可阻遏基因

48.RBS（核糖体结合位点）：

niRNA链上起始密码子AUG上游的一段非翻译区

第二部分简答题

1.简述真核细胞基因表达调控的不同层

DNA染色体水平的调控；真核基因转录水平的调节控制；转录产物的加工与转录后调节；RNA结合蛋白的结构与功能

2.组建一个cDNA文库的步骤

1）分离表达目的基因的组织或细胞2）从组织或细胞中制备总体RNA和mRNA

3）第一条cDNA链的合成，需要RNA模板，cDNA合成引物，逆转录酶，4

种脱氧核昔三磷酸以及相应的缓冲液（Mg2+）等。

4）第二条cDNA链的合成

5）cDNA的甲基化和接头的加入6）双链cDNA与载体的连接

3.蛋白质合成的过程

氨基酸的活化；翻译的起始；肽链的延伸；肽链的终止；蛋白质前体的加工

4.PCR的反应成分

模板（单双链DNA均可）；引物；Taq-DNA聚合酶；dNTP;Mg2+

5.增强特点

远距离效应；无方向性；顺式调节；无物种和基因的特异性；具有组织特异性；有相位性；有的增强子可对外部信号产生反应。

6.组蛋白的一般特性

进化上的极端保守性；无组织特异性；肽链氨基酸分布的不对称性；组蛋白的修饰作用；富含赖氨酸的组蛋白H5

7.转录的基本过程

起始位点的识别；转录的起始；转录的延伸；转录的终止

&弱化子作用机制

RNA分子在分子内采用不同的碱基配对方式，形成不同的二级结构而参与调控；当不同的结构对是否允许终止存在差异时，改变二级结构可对转录终止进行调控

9.原核生物转座子的类型

插入序列；复合转座子；TnA家族

10.简述hnRNA转变成mRNA的加工过程

①5'端形成特殊的帽子结构（m7G5ppp5N.mpN^-）;在链的3'端切断并加上多聚腺昔酸（polyA）;通过剪接除去由内含子转录而来的序列；链内部的核昔被甲基化。

11・转座子的特点

1）转座子是不必借助同原序列就可以移动的片段，即转座作用与供体和受体的序列无关；2）原核生物和真核生物都有转座子；3）转座序列可沿染色体移动，甚至在不同染色体间跳跃

12.为了选择下面两种突变型，应对只含有葡萄糖、硫酸鞍以及无机离子的基本培养基做何调整？

（1）Z”・,亮氨酸营养缺陷型

（2）gal-,不能以半乳糖作为惟一碳源的突变型

（1）在培养基中加入亮氨酸，然后分离在添加亮氨酸的培养基上生长而在不添加亮氨酸的培养基上不生长的菌落；

（2）在培养基中加入半乳糖不加葡萄糖，然后分离在基本培养基上生长而加半乳糖不加葡萄糖的培养基上生长不生长的菌落

13.原核生物基因调控机制的类型

代谢产物对基因活性的调节；弱化子对基因活性的影响；降解物对基因活性的调节；细菌的应急反应

14.简述PCR的反应特点

特异性强；敏感性高；快速；简便；可以扩增mRNA

15.影响DNA迁移速率的因素有哪些？

DNA分子的大小，DNA分子量越大’迁移越慢；琼脂糖浓度越低，迁移越快；DNA的构象超螺旋〉环状〉线性；凝胶和电泳缓冲液中的澳化乙锭；所用电压；琼脂糖种类

16.写出细胞对DNA损伤的五种修复系统

切除修复、错配修复、直接修复、重组修复和SOS应急反应

17.真核生物基因调控中组蛋白变化

1富含Lys组蛋白水平降低②H2A,H2B二聚体不稳定性增加③组

蛋白修饰④H3组蛋白蔬基暴露

18.活性染色质的主要特点

活性染色质上具有DNasel超敏感位点；活性染色质上具有基因座控制区

活性染色质上具有核基质结合区（MAR序列）

19.cDNA文库的特点

不含内含子序列；可以在细菌中直接表达；包含了所有编码蛋白质的基因;

比DNA文库小的多，容易构建

20.简述PCR的反应过程

变性（94€-95€5分钟’DNA双链打开）；复性（50-60oC下1分钟，引物优先与模板复性）；延伸（72C下1-2分钟，TaqDNA聚合酶在引物的3'端上加上核昔酸）；变性（94€下1分钟，新合成的DNA双链又变性成单链模板）

21.遗传密码性质

简并性；普遍性与特殊性；连续性；摆动性

22.简述真核细胞内核小体与核小体核心颗粒的结构

①.每个核小体单位包括200bp左右的DNA和一个组蛋白八聚体及一个分子的组蛋白H1。

②.组蛋白八聚体构成核小体的核心颗粒，由H2A、H2B、H3、H4各两分子形成。

③.DNA分子以左手螺旋缠绕在核心颗粒表面。

④.相邻核心颗粒之间为一段连接DNA,连接DNA上有组蛋白H1和非组蛋白。

23.葡萄糖是如何影响涉及糖代谢的操纵子（葡萄糖敏感型操纵子）的表达

在缺少葡萄糖时，cCAM的水平升高，CAP蛋白同每一葡萄糖敏感型操纵子中启动子内的CAP结合位点结合，协同转录起始；如果有葡萄糖，cCAM的水平下降，CAP蛋白不能与启动子内的CAP结合位点结合，转录速度下降

24.转座作用的遗传学效应

转座引起插入突变；转座产生新的基因；转座产生的染色体畸变；转座引起的生物进化

25.真核生物基因调控中组蛋白变化

富含Lys组蛋白水平降低；H2A,H2B二聚体不稳定性增加；组蛋白修饰；H3组蛋白疏基暴露

26.信号序列特点

一般带有10-15个疏水氨基酸；在靠近该序列N-端常常有1个或数个带正电荷的氨基酸；在其C-末端靠近蛋白酶切割位点处常常带有数个极性氨基酸，离切割位点最近的那个氨基酸往往带有很短的侧链（丙氨酸或甘氨酸）

27.根据DNA复性动力学研究，DNA序列可以分成哪几种类型？

不重复序列/单一序列；高度重复序列；卫星DNA

28.原核生物基因组结构特点

结构简练基因组很小，大多只有一条染色体；存在转录单元；有重叠基因

29.CAP蛋白如何作为乳糖操纵子的正调节物起作用

CAP即cCAM活化蛋白，结合cCAM的CAP可与乳糖操纵子的调节区结

合，使RNA聚合酶对该DNA的转录增强

30.为什么在PCR反应中，在复性过程中，引物优先与模板复性

引物的浓度高；引物的链短

31.葡萄糖不存在和乳糖存在时乳糖操纵子如何进行复合调控

葡萄糖不存在CAP发挥正调控作用，乳糖存在，阻遏蛋白由于诱导剂的存在而失去负调控作用，基因被打开，启动转录

32.假定你从一先发现的病毒中提取了核酸，请用最简单的方法确定

1）它是DNA还是RNA;2）它是单链还是双链

确定碱基比率，如果有胸腺囉唳，为DNA,如果有尿囉唳，则为RNA。

如果为双链分子，那么A与T（或U）的量以及G或C的量应相等

33.分别说出5种以上RNA的功能

转运RNAtRNA转运氨基酸；核蛋白体RNArRNA核蛋白体组成成；信使RNAmRNA蛋白质合成模板；不均一核RNAhnRNA成熟mRNA的前体；小核RNAsnRNA参与hnRNA的剪接;小胞浆RNAscRNA/7SL-RNA蛋白质内质网定位合成的信号识别体的组成成分；反义RNAanRNA/micRNA对基因的表达起调节作用；核酶RibozymeRNA有酶活性的RNA

34.简述核糖体的活性部位有哪些

核糖体至少包括5个活性中心，即mRNA的结合部位，结合或接受AA-tRNA部位（A位）、结合或接受肽基tRNA的部位（P位）及形成肽键的部位，此外还有负责肽链延伸的各种延伸因子的结合位点。

35.原核生物与真核生物mRNA的特征比较

原核生物mRNA的特征半衰期短；许多原核生物mRNA以多顺反子的形式存在；原核生物mRNA5，端无帽子结构，3，端没有或只有较短的多聚（A）的结构

真核生物niRNA的特征真核生物mRNA59端存在帽子结构，绝大多数真核生物mRNA具有多聚（A）尾巴

36.基因文库的筛选方法

核酸杂交法；PCR筛选法；免疫筛选法

37.真核生物mRNA的特征

5〉端存在“帽子”结构

多数mRNA3，端具有poly（A）尾巴（组蛋白除外）

单顺反子的形式存在

第三部分论述题

1.论述葡萄糖效应

是指葡萄糖对Lac,ara操纵子中结构基因转录的阻遏效应。

这是由于在大

肠杆菌的培养基中，当葡萄糖乳糖和阿拉伯糖同时存在时，葡萄糖将先被分解利用，它被耗尽之后乳糖或阿拉伯糖才能诱导转录。

而且葡萄糖分解代谢产物又可抑制cAMP的形成，cAMP-CRP复合物不能产生，因而也不能进行CRP的正控制。

葡萄糖代谢产物抑制cAMP的水平，可能是通过抑制腺昔酸环化酶的活性，因此ATP不能转化为cAMP,或者是促进二磷酸酯酶的活性，加速了cAMP转化为AMP

2.真核细胞与原核细胞在基因转录、翻译及DNA的空间结构方面存在的差异

1在真核细胞中，一条成熟的mRNA链只能翻译出一条多肽链，很少存在原核生物中常见的多基因操纵子形式。

2真核细胞DNA与组蛋白和大量非组蛋白相结合，只有一小部分DNA是裸露的。

3高等真核细胞DNA中很大部分是不转录的，大部分真核细胞的基因中间还存在不被翻译的内含子。

4真核生物能够有序地根据生长发育阶段的需要进行DNA片段重排，还能在需要时增加细胞内某些基因的拷贝数。

5在真核生物中，基因转录的调节区相对较大，它们可能远离启动子达几百个甚至上千个碱基对，这些调节区一般通过改变整个所控制基因5，上游区DNA构型来影响它与RNA聚合酶的结合能力。

在原核生物中，转录的调节区都很小，大都位于启动子上游不远处，调控蛋白结合到调节位点上可直接促进或抑制RNA聚合酶与它的结合。

6真核生物的RNA在细胞核中合成，只有经转运穿过核膜，到达细胞质后,才能被翻译成蛋白质，原核生物中不存在这样严格的空间间隔。

7许多真核生物的基因只有经过复杂的成熟和剪接过程，才能顺利地翻译成蛋白质。

3•论述基因工程研究的主要内容或步骤

从复杂的生物有机体基因组中，经过酶切消化或PCR扩增等步骤，分离出带有目的基因的DNA片段；

在体外，将带有目的基因的外源DNA片段连接到能够自我复制的并具有选择记号的载体分子上，形成重组DNA分子；

将重组DNA分子转移到适当的受体细胞（寄主细胞），并与之一起增殖;

从大量的细胞繁殖群体中，筛选出获得了细胞重组DNA分子的受体细胞

克隆；

从这些筛选出来的受体细胞克隆，提取出已经得到扩增的目的基因，供进一步分析研究使用；

将目的基因克隆到表达载体上，导入寄主细胞，使之在新的遗传背景下实现功能表达，产生出人类所需要的物质

4.乳糖操纵子的结构模型

1Z、Y、A基因的产物由同一条多顺反子的H1RNA分子所编码

2这个mRNA分子的启动子紧接着0区，而位于I与0之间的启动子区（P）,不能单独起动合成13-半乳糖昔酶和透过酶的生理过程。

3操纵基因是DNA上的一小段序列（仅为26bp）,是阻遏物的结合位点

4当阻遏物与操纵基因结合时,lacmRNA的转录起始受到抑制。

5诱导物通过与阻遏物结合，改变它的三维构象，使之不能与操纵基因结合，从而激发lacmRNA的合成。

当有诱导物存在时，操纵基因区没有被阻

遏物占据，所以启动子能够顺利起始mRNA的合成。

5.真核生物基因组DNA结构特点

含有大量重复序列真核基因组大部分为非编码序列多于编码序列（9:

1）

单顺反子基因不连续性断裂基因、内含子、外显子真核基因组中存在大量的顺式作用元件

真核基因组中存在大量的DNA多态性

真核基因组具有端粒结构

6.f"操纵子的阻遏调控机制

色氨酸操纵子主要参与调控一系列用于色氨酸合成代谢的酶蛋白的转录合成。

当细胞内缺乏色氨酸时，此操纵子开放，而当细胞内合成的色氨酸过多时，此操纵子被关闭。

色氨酸操纵子的调控机制与乳糖操纵子类似，但通常情况下，操纵子处于开放状态，其辅阻遏蛋白不能与操纵基因结合而阻遏转录。

而当色氨酸合成过多时，色氨酸作为辅阻遏物与辅阻遏蛋白结合而形成阻遏蛋白，后者与操纵基因结合而使基因转录关闭。

7.真核生物基因表达调控的特点

（1）RNA聚合酶

（2）多层次（3）个体发育复杂（4）活性染色体结构变化：

对核酸酶敏感、DNA拓扑结构变化、DNA碱基修饰变化、组蛋白变化（5）正性调节占主导（6）转录与翻译间隔进行（7）转录后修饰、加

8.已知目的基因cDNA序列，拟用基因工程技术使之在哺乳动物细胞中表达，请写出设计方案

提取目的基因的mRNA,逆转录成cDNA,根据cDNA序列设计引物，以cDNA

为模板进行PCR,

PCR产物和载体,

物导入大肠杆菌,

琼脂糖凝胶电泳，纯化PCR产物，用限制性内切酶切割

用DNA连接酶连接切割后的PCR产物和载体，将连接产筛选阳性克隆，DNA序列分析，提取重组DNA，导入哺乳动物细胞。

9•信号肽引导真核分泌蛋白进入内质网的过程信号肽与SRP结合-肽链延伸终止-SRP与受体结合tSRP脱离信号肽-肽链在内质网上继续合成，同时信号肽引导新生肽链进入内质网腔一信号肽切除-肽链延伸至终止-翻译体系解散。