第07章痘病毒科Poxviridae.docx

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第07章痘病毒科Poxviridae

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第七章痘病毒科（Poxviridae）

一、概述三、早、晚期转录

二、痘病毒基因组结构四、痘病毒的繁殖

（一）DNA末端的发夹结构五、重组痘苗病毒

（二）DNA末端的倒置重复序列

（一）重组痘苗病毒的基本原理

（三）痘病毒基因组的保守区与变异区

（二）进行重组痘苗病毒必要条件

（四）我国痘苗病毒天坛株DNA结构的基本特征（三）几种可能的重组痘苗病毒活疫苗

（五）痘病毒基因变异株（四）重组痘苗病毒表达活性多肽

（六）痘病毒基因组的多肽编码区主要参考文献

（七）痘苗病毒基因组表达调节的特点

概述一、痘病毒科是一大群长方形或卵圆形病毒，长方形粒子长220～450nm，宽140～260nm，厚140～260nm。

卵圆形粒子长250～300nm，直径160～190nm。

病毒粒子由1个核心、2个侧体和2层脂质外膜组成，是动物病毒中体积最大、结构最复杂的病毒。

痘病毒在宿主细胞的胞浆内增殖，这在DNA病毒是独特的。

根据病毒的特征、自然宿主和特异性抗原，痘病毒分为两个亚科，即脊索动物痘病毒亚科和昆虫痘病毒亚科。

脊索动物痘病毒亚科包括正痘病毒属、禽痘病毒属、羊痘病毒属、兔痘病毒属（）、猪痘病毒属、副痘病毒属、

软疣痘病毒属和牙塔病毒属等8个属。

昆虫痘病毒亚科则只含昆虫痘病毒A、B、C3个亚属。

各属内的成员可发生遗传性重组，各属间的成员则可发生非遗传性复活。

目前仍有一些未定属的痘病毒（表7-1）。

表7-1痘病毒科分类

（Chordopoxrinae）一、脊索动物痘病毒亚科（Orthopoxvirus）

正痘病毒属1.（Variolavirus）天花病毒牛痘病毒（Cowpoxvirus）

（Rabbitpoxvirus）（Vacciniavirus）兔痘病毒痘苗病毒（Infectiousectromeliavirus）

小鼠传染性脱脚病病毒（Camelpoxvirus）骆驼痘病毒水牛痘病毒（Buffalopoxvirus）

（Monkeypoxvirus）猴痘病毒马痘病毒（Horsepoxvirus）

（Avipoxvirus）

2.禽痘病毒属（Pigeonpoxvirus）鸽痘病毒鸡痘病毒（Fowlpoxvirus）

（Canarypoxvirus）

（Turkeypoxvirus）火鸡痘病毒金丝雀痘病毒1/34

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麻雀痘病毒（Sparrowpoxvirus）燕八哥痘病毒（Starlingpoxvirus）

鹌鹑痘病毒（Quailpoxvirus）雪鸡痘病毒（Juncopoxvirus）

3.羊痘病毒属（Capripoxvirus）

绵羊痘病毒（Sheeppoxvirus）山羊痘病毒（Goatpoxvirus）

疙瘩皮肤病病毒（Lumpyskindiseasevirus）

4.兔痘病毒属（Leporipoxvirus）

粘液瘤病毒（Myxomavirus）兔纤维瘤病毒（Rabbitfibromavirus）

野兔纤维瘤病毒（Harefibromavirus）松鼠纤维瘤病毒（Squirrelfibromavirus）

5.猪痘病毒属（Suipoxvirus）猪痘病毒（Swinepoxvirus）

6.副痘病毒属（Parapoxvirus）

羊接触传染性脓疱性皮炎病毒（Orfvirus）假牛痘病毒（Pseudocowpoxvirus）

牛脓疱性口炎病毒（Bovinepustularstomatitisvirus）

新西兰红鹿副痘病毒（ParapoxvirusofreddeerinNewZealand）

7.软疣痘病毒属（Molluscipoxvirus）

人传染性软疣病毒（Malluscumcontagiosumvirus）

8.牙塔痘病毒属

牙巴猴肿瘤痘病毒（Yabamonkeytumorvirus）塔那痘病毒（Tanapoxvirus）

二、昆虫痘病毒亚科（Entomopoxvirinae）

昆虫痘病毒A属蛴螬（鞘翅目）昆虫痘病毒等昆虫痘病毒

昆虫痘病毒B属摩氏蛾（鳞翅目）昆虫痘病毒等昆虫痘病毒

昆虫痘病毒C属淡黄摇蚊（双翅目）昆虫痘病毒等昆虫痘病毒

至严重的致痘病毒引起人与多种动物包括禽类的疾病——由持续较长时间的轻症感染，

死性感染。

除犬和猫不发生痘病毒感染外。

几乎各种哺乳动物都有其各自的痘病毒，但某些痘病毒可以感染几种不同的动物。

形态结构1.）如副痘病毒或卵圆形（痘病毒具有独特的形态结构，电镜下为大型长方形（如正痘病毒）和蛋白质组成颗粒。

中央为一个两面凹陷的核心，两个侧体分别位于凹陷内。

核心是由DNA的核蛋白复合体。

紧帖于核心周围的是一层栅栏状的核心膜。

核心和侧体一起，由脂蛋白性表面膜包围，其间充填着可溶性蛋白。

正痘病毒等的表面膜显示许多小杆状或小球状单位；外。

细胞外的病毒粒子，直径为10～20nm）副痘病毒等的表面膜上则有规律性缠绕的螺旋丝（7-1。

面还有一层来自细胞的囊膜，囊膜内含有病毒特异的蛋白质，见图

痘病毒的结构模式图7-1巯基乙醇进行处理，可使囊膜结构疏松，这可2-早期研究表明，提纯痘苗病毒粒子时用能是由于蛋白质二硫键被破坏的结果。

如再加入非离子化去垢剂，则外膜破坏，核心与其相处理，更可使侧体从核心上脱落下来。

加去氧）（如胰蛋白酶连的侧体释出。

如果再用蛋白酶20%DNA和胆酸钠、二硫苏糖醇和氯化钠于痘苗病毒的核心悬液中，可以使其破裂而释放出的蛋白质，以及包括许多溶解状态的酶类。

但羊痘病毒较小。

如禽痘病毒和兔痘病毒等的大小和形态结构基本相同，其它正痘病毒，

，×250nm400从昆虫痘病毒的形态差异较大。

Melolontha幼虫分离的昆虫痘病毒较大，直径为幼虫分离的从Amsacta只有单一侧体。

的球形结构，其表面有直径为22nm核心呈偏心肾形，痘病毒较小，具有珠状表面结构，核心致密，核心周围缠绕着层中等密度的物质，侧体不明显。

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2.理化学特性

33病毒粒子的S20w约5000。

在庶糖中的浮密度为1.25g/cm，在氯化铯中约1.3g/cm，66痘苗病毒DNA的分子量为122×10，但鸡痘病毒的DNA分子量高达200×10。

这样大分子量的DNA，可以编码几百种蛋白质。

有关痘病毒的理化学特性的资料数据，主要来自痘苗病毒。

该病毒的高度提纯制品含有92%蛋白质、3.2%DNA、1.2%胆固醇、2.1%磷脂、1.7%中性脂肪、0.2%非核酸碳水化合物以及微量的铜、核黄素和生物素。

但鸡痘病毒的含脂量高达病毒粒子干重的34%。

正痘病毒属和禽痘病毒属抗乙醚，副痘病毒属、羊痘病毒属和兔痘病毒属对乙醚敏感。

痘病毒的耐乙醚程度看来取决于其所含脂类是否为必需的脂质。

痘病毒的G+C含量甚低，只35%左右。

已知痘病毒含有70多种早期蛋白质和40多种晚期蛋白质，分子量由8kDa～250kDa不等，一部分为糖蛋白和磷蛋白。

应用非离子去垢剂和还原剂处理痘苗病毒粒子，可以使其外膜释出十几种主要多肽，如210kDa、110kDa、85kDa、42kDa、37kDa、21.5kDa、21kDa和20kDa，其中7种是糖蛋白。

37kDa为主要蛋白，非糖基化。

85kDa蛋白是血凝素-（hemagglutinin,HA）,HA的痘苗病毒，其毒力显著降低。

42kDa蛋白为穿膜蛋白。

37kDa蛋白32kDa膜蛋白，此蛋白质能增强病毒对机体和宿主细胞

的感染力；14kDa膜蛋白，则促进病毒与细胞以及细胞与细胞间的融合。

糖蛋白对“胰蛋白酶消化”敏感，可能紧贴于病毒粒子表面之下，在用上述去垢剂和还原剂处理后，至少还有18种多肽不被释出，可能就是核心的结构蛋白，包括那些分子量和含量最多的多肽。

在病毒粒子核心中74kDa、62kDa、25kDa和11kDa4种蛋白质，约占核心重量的70%，其中11kDa和25kDa蛋白对RNA有很高的亲和性。

在病毒粒子核心中还有与核心DNA呈高度亲合性的60kDa、43kDa、28kDa、18kDa和14.5kDa5种蛋白质。

痘病毒能在室温下耐受干燥几个月。

于干燥条件下，可耐100℃5～10mins，但在潮湿条件下，60℃mins即可破坏之。

对常用消毒剂具有较强抵抗力，但50%酒精和0.01%KMnO1hrs内使其灭活。

于-70℃，可以存活

4多年。

保存于50%甘油中的痘病毒，可于0℃以下温度中存活3～4年。

3.增殖和培养

痘苗病毒粒子对细胞膜的吸附过程较快，50%以上的种入病毒可于接种后的15mins内吸附于细胞，且无方向性，可以发生横向或纵向吸附。

痘病毒虽然是DNA病毒，但它的整个增殖过程，全部在胞浆内进行。

并在20hrs内完成一个复制周期。

第一阶段，痘病毒粒子与细胞表面接触后，被细胞吞饮到吞饮泡内，在其中被水解酶系酶解，进行第一阶段脱壳（脱去外膜），使病毒的核心等释放入胞浆。

病毒粒子中存在有一整套用于自身增殖的酶，病毒脱去外膜后，在病毒RNA合成酶系作用下，占全病毒基因组近一半的拷贝被转录成早期mRNA。

在核心内由依赖于DNA的RNA聚合酶、早期转录因子（ETF）、帽加工酶、甲基化酶、终止因子、聚（A）酶和磷酸酶等协同作用下，合成早期mRNA并很快释放入细胞质，并开始早期蛋白质的翻译，早期蛋白质的合成在病毒感染1～4hrs内进行。

这种早期转录不受蛋白质合成抑制剂的影响。

这些被翻译的70多种早期合成蛋白中的一些蛋白质作用于核心蛋白，进行第二阶段脱壳，使核蛋白和DNA相互分离。

第二阶段为痘病毒DNA的复制和结构蛋白大量合成阶段。

早期合成的蛋白中含有DNA聚合酶、胸苷激酶等与DNA复制相关的酶系。

病毒DNA复制开始于DNA从核心蛋白分离的第二阶段脱壳期。

由于DNA复制在病毒感染后2～5hrs开始，故在病毒感染后2～6hrs，在电镜下可见到胞浆内的“工厂区”。

DNA的复制开始后，大部分早期蛋白质合成将停止，转入晚期mRNA的转录、大量结构蛋白的合成、少量其它病毒蛋白及少量酶的合成。

早期和晚期mRNA含甲基化的末5'端，3'末端含有约100个腺苷酸残基。

结构蛋白的合成阶段，DNA复制自然终止。

但痘病毒的某些DNA复制发生于胞核，证明了细胞核在痘病毒增殖中的作用。

第三阶段为病毒粒子成熟阶段。

此阶段为多种合成成份组装成病毒粒子的过程。

其中一部分多肽，进行糖基化、磷酸基化或断裂等修饰。

超薄切片和电镜负染可3/34

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以看到，成熟的病毒粒子核心为两层膜包裹了的DNA。

在“工厂区”内出现月牙状脂质双层膜结构，凸面上有一层短的针状体。

随后逐渐变为球形的闭合脂质双层膜，其中央腔内含有电子密度高的颗粒物质，最后出现清晰的核心和侧体，并且逐渐成熟。

可见在细胞质内装配的成熟痘病毒具有重新合成的脂质双层膜，但与细胞膜无关。

病毒粒子在出芽时仍可获得与感染细胞膜相关的脂质双层外膜，即囊膜。

但尚不清楚病毒粒子是如何离开“工厂区”，运动至细胞周边的。

除接触传染性脓疱性皮炎病毒以外，其它痘病毒易在其感染细胞内形成胞浆内包涵体。

包涵体内含有病毒粒子，又称原生小体。

现已清楚，只有一少部分病毒经出芽方式离开感染细胞，而大部分病毒粒子仍滞留在感染细胞内。

一个感染细胞可产生10000个病毒粒子。

利福平（rifampin）可阻断痘苗病毒外膜的形成和病毒粒子的聚集，而甲吲噻腙（methisazone）则阻断晚期蛋白质合成和病毒粒子的集聚。

大多数痘病毒易在鸡胚绒毛尿囊膜上生长，并产生溃烂的病灶、痘斑或结节性病灶。

痘斑的形态和大小随病毒种类或毒株而不同。

天花病毒和粘液瘤病毒引起小而分散的灰白色痘斑（白痘）。

但痘苗病毒形成大而中心环死的痘斑，牛痘病毒和某些嗜神经性痘苗毒株产生中央出血性痘斑（红痘）。

兔纤维瘤病毒在绒毛尿囊膜上引起极微小的病变，甚至难用肉眼见到。

各种正痘病毒在鸡胚中生长的温度上界不同，例如猴痘病毒和鼠痘病毒为39℃，天花病毒为38.5℃，牛痘病毒为40℃，痘苗病毒和兔痘病毒为41℃。

这些差别常被用于各种正痘病毒的鉴别。

痘病毒易在组织培养细胞内增殖，并常产生明显的细胞病变或蚀斑。

经常用于病毒培养的细胞有牛肾、兔肾细胞、HeLa细胞和鸡胚成纤维细胞等。

感染正痘病毒的细胞经常具有血细胞吸附作用。

4.血凝性

正痘病毒的囊膜表面和感染细胞膜表面有血凝素蛋白，因此能够凝集火鸡红细胞和某些品种的鸡的红细胞。

而禽痘病毒、羊痘病毒、兔痘病毒和副痘病毒均无血凝素蛋白。

血凝素是分子量为85kDa和68kDa的糖蛋白，它具有N和O连接的糖分子，而其它病毒糖蛋白只有N连接的糖分子。

85kDa蛋白产生于病毒感染早期，且分布于囊膜表面。

68kDa蛋白则出现在病毒感染晚期，可能来源于85kDa蛋白。

应用离心沉淀方法，可将血凝素由病毒粒子上分离下来。

血凝素为直径50～65nm的颗粒，可耐100

两种成分，可以再次重新组合成为具有活性的血凝素。

借助红细胞吸附试验，也可证明痘苗和天花病毒感染的细胞胞膜上存在血凝素。

已经吸附于红细胞上的血凝素不会自动由细胞上脱落下来。

给动物注射血凝素，可使其产生抗血凝素抗体。

疫苗接种的人和动物的血清中，也有这种抗体的存在。

但已证明血凝素抗体没有中和病毒作用。

二、痘病毒的基因组结构与功能

痘病毒基因组的长度差异较大，副痘病毒约130Kb，而禽痘病毒约300kb。

正痘病毒的基因组是一条双链DNA。

采用温和的DNA提取办法可以获得完整的无缺口的病毒DNA分子。

其长度的变化也较大，从兔痘病毒的120MD至牛痘病毒的145KDA，痘苗病毒本身的DNA长度也有变异，不同毒株为120~130MD，即180~200Kb。

其DNA无感染性。

正痘病毒属各成员的基因组有70%~90%的同源性。

正痘病毒基因组结构的特点如下：

（一）DNA末端的发夹结构

如图7—2A所示，痘病毒DNA链的末端有单链的发夹结构，即末端交叉连结。

由于这一结构，原始基因组和末端的酶切片段在碱或加热变性后很快可以复性。

存在这一发夹结构的证据是，如果不用单链特异性核酸酶处理，毒粒DNA对外切酶Ⅲ、末端转移酶、多核苷酸激酶、蛇毒磷酸二脂酶和脾磷酸二脂酶的活性有抵抗。

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Baroudy等（1982）对痘病毒DNA末端进行了克隆和序列分析，结果表明，每一末端有104个核苷酸并不完全配对，存在两种形式，呈倒置互补，称为“反转”发夹结构（图7—2B），即使在合适的构形中，还有10个核苷酸不能配对。

图7—2痘苗病毒DNA的末端结构

A:

结构示意图；B:

两种“反转”发夹结构

（引自Joklik1985,McFaddenetal1983）

至于在DNA复制过程中，这一单链复制区的命运尚不清楚。

Pogo（1977）报道，在接种痘苗病毒后，这一交叉连结发夹结构在90mins内消失。

母株DNA发夹结构消失的时间相当于DNA合成开始的阶段。

在痘苗病毒接种后大约4~5hrs，DNA合成业已停止时，发夹结构才重新出现（Pogo1977,1979,1980）。

发夹结构的消失是由于在末端发夹单链区产生缺口还是在DNA的主体部分发生缺口，也尚未阐明。

Esteban等（1977）在电镜下研究痘苗病毒DNA复制中间体，发现逐渐增大的末端双链复制的泡状结构，提示在DNA复制的早期，末端发夹结构并未解开。

Forte等（1979）也观察到，在酵母DNA末端类似的复制结构，有完整的末端发夹。

目前，关于带有末端发夹结构的线状DNA的复制机理有3种模式（图7—3）。

（1）根据Cavalier-Smith末端回文模式（Cavalier-Smith1974）提出的Bateman模式（Bateman1975）；DNA的合成以5'→3'方向前进，向右通过末端发夹，在靠近末端处引入两个位点特异性缺口（在B'/C‘连接处），产生的子分子具有开放的单链末端。

这种缺口的引入使之有可能进行自我退火和连接，从而形成具有完整发夹末端的子分子。

（2）Esteban模式（Estebanetal1977）：

DNA的合成经RNA来起动，开始于发夹处或发夹附近，这样在末端就产生单链的裂口（a/a'）。

同时，病毒诱导的单链特异性内切酶在单链裂口处造成缺口，末端的游离单链尾由于存在回文序列而能自我退火，最后经修复和连接，子分子的末端形成共价关闭的结构。

图7—3具有末端发夹结构的线状DNA复制模式示意图

A.Bateman模式；B.Esteban模式；C.McFadden和Morgan模式

（引自McFaddenetal1983）

（3）McFadden和Morgan模式（McFaddenetal1983）：

DNA的合成开始与Bateman模式一样，从5'→3'端方向前进并通过发夹。

利用在发夹处经复制形成的回文序列，产生一种暂时性的十字形结构，这种十字形的构形相当于Hol-liday交叉中间物，从后者可以分离出具有完整发夹的子分子。

根据这一模式，有关的重组酶类必须参与。

（二）DNA末端的倒置重复序列

正痘病毒基因组具有较长的末端倒置重复序列（ITRs）。

不同成员的ITRs的长度也不一样，痘苗病毒、牛痘病毒和猴痘病毒的ITRs约有10kb长，而兔痘和鼠痘病毒则仅为其一半，天花病毒则十分短，小于小于2kb。

这种结构与腺病毒、疱疹病毒的ITRs相似，但后者短得多。

病毒的ITRs结构可能与其繁殖方式有关。

在ITRs的远侧端尚有串联的重复序列区，如图7—4所示。

紧接着“反转”发夹结构有一86核苷酸的区段NR1，依次跟随着：

⑴第1套串联重复序列（Set1），它由串联的重复序列单位所组成，在痘苗病毒则为AB两个单位，长约70bp，有13次重复；⑵NR2独特区，牛痘与痘苗病毒有77%的同源，其中有DdeI和AluI切点；⑶第二套串联重复序列（Set2），AB两个单位重复18次；⑷NR3独特区，在痘苗病毒Set2后1800bp处有SalI切点；在牛痘病毒Set2后269bp处有SalI切点。

牛痘病毒与痘苗病毒的重复单位十分相近，但其排列不同（Joklik1985）。

此外，痘苗病毒Lister株和兔痘病毒DNA的末端串联重复区也相似或相同（Witleketal1980）。

倒置末端重复区内的串联重复区的生理作用，可能是加速单链DNA的自我退火而形成环状结构。

另外，在倒置末端重复区内还编码早期蛋白（详见下节）。

图7—4痘苗病毒WR株与牛痘病毒BR株的末端串联重复序列区段

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（引自Joklik1985）

不转录的、周期性的、或长或短的高度重复序列是真核基因的共同特征（Donehoweretal

1979）。

这种重复序列可能无特异性功能，有人建议称为“自私DNA”（SelfishDNA）。

其所以能保持其恒定结构，可能是由于不等重组的结果。

痘苗病毒DNA的末端的这种13~18串联重复序列也属于这一类。

这种转座子样的排列可以促进重组的发生，导致DNA末端序列的不均一性，这可以解释DNA末端的酶切片段在凝胶电泳中为什么呈散状。

在痘苗病毒的传代过程中，其DNA分子有两种形式，一种称为稳定形式，即每一端有一套13~18的70bp的串联重复序列，13次与18次之间有435bp的间隔；另一种称为不稳定形式，即有多套重复序列和间隔。

在连续传代的母系病毒中，有20是不稳定型。

这一现象，即使将病毒反复纯化也不能避免，单一病毒颗粒就可以形成这一结果。

但是，每一次空斑纯化可使大约20%的不稳定型DNA回复成稳定型DNA。

DNA稳定型和不稳定型的感染性没有差别。

稳定型DNA与不稳定型DNA的转变可以用下列重组模式来解释：

第一步在DNA分子的第一套串联重复序列与另一个分子的第二套之间发生重组，这样，可以形成缺乏一套重复序列和间隔序列的分子，以及具有三套重复序列的分子。

由于重复序列在倒置末端重复区内，因此，重组可以发生在同一分子或不同分子的对立端，这样就可以形成许多具有不同数量重复序列的分子，包括稳定型DNA分子（图7—5）。

图7—5稳定型与不稳定型痘苗病毒DNA不等重组模式图

I图中的数字表示每套重组序列；Ⅱ示酶切位点

（引自Mossetal1981）

（三）痘病毒基因组的保守区与变异区

除浣熊和Tatera痘病毒外，其它痘病毒科成员基因组的酶谱是十分相似的。

Mackett等（1979）采用酶切分析法比较了5种正痘病毒，包括15个毒株的DNA结构，即痘苗病毒DIE株、HI（HallInstitute）株、LS（Lister）株、WR（WesternReserve）株；猴痘病毒MPC（Congo）株、MPD（Denmark）株、MPE（Espaina）株；天花病毒BUT（Butler）株、HAR（Harvey）株；牛痘病毒AR株（RedStrainAustria）、BR（Brighton）株、RR（Ruthin）株、DR（Daisy）株；鼠痘病毒EH（Hampstead）株、EM（Moscow）株。

如图7—6所示，从HindⅢ切点的分布来看，中央区大约有120kb区段是保守的，但其中也有一些型特异性的差异存在，特别是鼠痘病毒毒株；在近末端区的变异则较大，包括长度和序列。

在兔痘、牛痘和痘苗病毒DNA倒置末端重复区间有同源序列。

Schuemperli等（1980）采用详细的酶谱分析证明，Utrecht株和Elstree株DNA的差异完全发生在末端，包括末端的重复序列和附近序列。

McCarron等（1978）报道，WR株和CV-1之间的差异在于HindⅢC片段的大小。

Wittek等（1978）发现痘苗病毒在传代过程中DNA末端的长度常不一致。

Archard等（1979）报道，红牛痘病毒的白痘变异株在一个近末端有大约12%的基因组缺失。

同样兔痘病毒的白痘变异株也在一个近末端有大片段的缺失。

这种缺失还可影响宿主范围（Moyeretal1980）。

Panicali等（1981）报道，在痘苗病毒WR株的传代过程中分离出两种变异株，称为S和L变异株。

两种变异株经HindⅢ、AvaⅠ、XhoⅠ、SstⅡ和SmaⅠ分析说明，在S变异株中有一段6.3MD的缺失，它位于离末端6.8MD之外，也就是刚好在倒置末端重复区之外。

这段缺失的片段在体内体外均有转录物，但对该毒株在HeLa细胞上生长周期并无影响。

作者认为多出的6.3MD片段，可能在病毒进化过程的早期来源于宿主细胞，而为病毒复制所必需，在随后的演变过程中为其它机制所取代。

另外，Panicali等还证明，WR株的AvaIM片段（DNA最末端）的大小常有变化，变化范围大约有50~300bp，这与McFadden（1979）报道的痘苗病毒IDH—W株的末端重复序列中缺失的大小相一致。

图7—6正痘病毒属基因组的结构

a.正痘病毒DNAHindⅢ和SmaⅠ酶切图

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b.中央保守区与侧翼区示意图（CPV—BR）

黑色区为倒置末端重复序列

（引自Mackettetal1979）

由此可见，一般来说，正痘病毒基因组中央区约120kb为保持区，两侧的侧翼区（图7—6）长40kb（R1和R2）。

一般认为中央保守区编码与病毒繁殖有关的重要酶类，而两侧的侧翼区则与型特异性、宿主范围等性质有关。

（四）我国痘苗病毒天坛株DNA结构的基本特征

我国痘苗病毒天坛株是曾在我国大量人群中进行预防接种的疫苗株。

但其来源尚不清楚。

据云，该株是我国学者早在20年代从天花患者分离的病毒，经猴、兔、牛多次传代后获得的，但始终无法进行