复习题 2基因重组与基因工程.docx
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复习题2基因重组与基因工程
复习题2 基因重组与基因工程
一、A型题
1.实验室内常用的连接外源性DNA和载体DNA的酶是：
（A）
A．DNA连接酶 B．DNA聚合酶Ⅰ C．DNA聚合酶Ⅱ
D．DNA聚合酶Ⅲ E．反转录酶
2.用来鉴定DNA的技术是：
（B）
A．Northern印迹 B．Southern印迹 C．Western印迹
D．亲和层析 E．离子交换层析
3.下列那项不是重组DNA技术中常用的工具酶：
（D）
A．限制性核酸内切酶 B．DNA连接酶 C．DNA聚合酶Ⅰ
D．RNA聚合酶 E．反转录酶
4.关于限制性核酸内切酶的叙述，下列哪项是错误的？
（E）
A．限制性核酸内切酶分为三类，用于基因工程的为Ⅱ酶
B．限制性核酸内切酶切割后可产生粘性末端或平端
C．识别的核苷酸序列个数可以是6个或8个
D.识别的序列一般具有回文结构
E．识别的DNA为单链
5.关于基因工程的叙述，下列哪项是错误的？
（B）
A．基因工程也称基因克隆
B．只有质粒DNA可作为载体
C．重组体DNA转化或转染宿主细胞
D．需获得目的基因
E．需对重组DNA进行纯化、筛选
6.有关质粒的叙述，下列哪项是错误的？
（E）
A．小型环状双链DNA分子
B．可小到2～3Kb大到数百个Kb
C．能在宿主细胞中独立自主地进行复制
D．常含有耐药基因
E．只有一种限制性核酸内切酶切口
7．下列哪项不是重组DNA的连接方式？
（C）
A．粘性末端与粘性末端的连接 B．平端与平端的连接
C.粘性末端与平端的连接 D．人工接头连接
E．同聚物加尾连接
8．DNA克隆不包括下列哪项步骤？
（E）
A．选择一个适合的载体
B．限制性核酸内切酶在特异位点裂解质粒和目的基因
C．用连接酶连接载体DNA和目的DNA，形成重组体
D．用载体的相应抗生素抗性筛选含重组体的细菌
E．重组体用融合法导入细胞
9．基因重组是指DNA分子的：
（A）
A．共价连接 B．氢键连接 C．离子键连接 D．交换 E．退火
10．在分子生物学中，重组DNA又称为：
（D）
A.酶工程 B.蛋白质工程 C.细胞工程 D.基因工程 E.DNA工程
11．基因工程中，不常用到的酶是（E）
A．限制性核酸内切酶 B．DNA聚合酶 C．DNA连接酶
D．逆转录酶 E．DNA解酶
12．能识别DNA的特异序列，并在识别位点或其周围切割双链DNA的一类酶称为：
（B）
A.DNA内切酶 B．限制性内切核酸酶
C．非限制性内切核酸酶 D．限制性外切核酸酶
E．非限制性外切核酸酶
13．cDNA是指：
（A）
A．在体外经反转录合成的与RNA互补的DNA
B．在体外经反转录合成的与DNA互补的DNA
C．在体外经反转录合成的与RNA互补的RNA
D．在体内经反转录合成的与RNA互补的RNA
E．在体内经反转录合成的与RNA互补的DNA
14．质粒的分子结构是：
（A）
A．环状双链DNA B．环状单链DNA C．环状单链RNA
D．线状双链DNA E．线状单链DNA
15．聚合酶链式反应常常缩写为：
（E）
A．PRC B．PER C．PDR D．BCR E．PCR
16．用于PCR反应的酶是：
（E）
A．DNA连接酶 B．碱性磷酸酶 C．逆转录酶
D．限制性内切核酸 E．TaqDNA聚合酶
17．基因工程中使目的基因与载体拼接的酶是：
（C）
A．DNA聚合酶 B．RNA聚合酶 C．DNA连接酶
D．RNA连接酶 E．限制性核酸内切酶
18．α互补筛选属于：
（C）
A．抗药性标志筛选 B．酶联免疫筛选 C．标志补救筛选
D．原位杂交筛选 E．免疫化学筛选
19．确切地讲，cDNA文库包含：
（E）
A．一个物种的全部基因信息
B．一个物种的全部RNA信息
C．一个生物体组织或细胞的全部基因信息
D．一个生物体组织或细胞的全部RNA信息
E．一个生物体组织或细胞所表达mRNA信息
20．下烈描述最能确切表达质粒DNA作为克隆载体特性的是：
（D）
A．小型环状双链DNA分子 B．携带有某些耐药基因
C．在细胞分裂时恒定地传递给子代细胞 D．具有自我复制能力
E．获得目的基因
21.基因工程中常用限制性内切酶Ⅱ的识别序列，正确的说法是：
（E）
A.聚胞苷酸
B.聚腺苷酸
C.6或8个任意核苷酸
D.4或6个任意核苷酸
E具有回文结构
22．基因工程的基本过程不包含：
（E）
A.DNA重组体的形成及转化
B.限制酶的切割
C.载体及目的基因的分离
D.重组体的筛选与鉴定
E.重组体的序列分析
23.有关理想质粒载体的特征，正确的是：
（B）
A.其复制受宿主控制
B.含有多种限制性内切酶的单一切点
C．含有同一限制酶的多个切点
D．为线性单链DNA
E．不含耐药基因
24.下列那个物质一般不用作基因工程的载体：
（C）
A．噬菌体
B．质粒
C．大肠杆菌基因组
D．反转录病毒DNA
E．人工酵母染色体
25.基因工程的操作程序可简单的概括为：
（E）
A．将重组体导入宿主细胞并筛选
B．限制酶的应用
C．将载体和目的基因接合成重组体
D．目的基因和载体的分离提纯与鉴定
E．分、切、接、转、筛
26.基因表达的多级调控不包括：
（A）
A．DNA复制
B．转录起始
C．转录后加工
D.翻译起始
E.翻译后加工
27.下列基因工程中的目的基因的来源，最不常用的是：
（C）
A.人工合成DNA
B．从mRNA合成cDNA
C.从真核生物染色体DNA中直接分离
D．从基因文库中获取
E．从细菌基因组DNA中直接分离
28.Ⅱ型限制性内切酶是：
（B）
A．有内切酶和甲基化酶活性
B.仅有内切酶活性，甲基化酶活性由另外一种酶提供
C．有外切酶和甲基化酶活性
D．限制性识别非甲基化的核苷酸序列
E．仅有外切酶活性，甲基化酶活性由另外一种酶提供
29.基因工程操作应用的许多载体质粒都有抗生素的抗性基因，这是为了便于：
（D）
A．外源基因插入质粒
B.宿主菌的生物繁殖
C．质粒的转化
D．带有目的基因的宿主菌的筛选
E．目的基因的表达
30.有关目的基因与载体连接的叙述错误的是：
（E）
A.可以同一限制酶切割产生粘性末端连接
B.平末端切口可采用“尾接法”
C．平末端切口可直接连接
D．均需DNA连接酶参与
E．不同限制型内切酶切割不能连接
1．基因工程的单元操作顺序是（ A ）
Ａ．酶切，连接，转化，筛选，验证 Ｂ．酶切，转化，连接，筛选，验证
Ｃ．连接，转化，筛选，验证，酶切 Ｄ．验证，酶切，连接，筛选，转化
Ｅ．酶切，连接，筛选，转化，验证
2．下列五个DNA片段中含有回文结构的是（ D、E ）
Ａ．GAAACTGCTTTGAC Ｂ．GAAACTGGAAACTG
Ｃ．GAAACTGGTCAAAG Ｄ．GAAACTGCAGTTTC
Ｅ．GAAACTGCAGAAAG
3．T4-DNA连接酶是通过形成磷酸二酯键将两段DNA片段连接在一起，其底物的关键基团是（ D ）
Ａ．2'-OH和5'-P Ｂ．2'-OH和3'-P
Ｃ．3'-OH和2'-P Ｄ．3'-OH和5'-P
Ｅ．5'-OH和3'-P
4．噬菌体l-DNA体外包装的上下限是天然l-DNA长度的（D ）
Ａ．25-50% Ｂ．50-100%
Ｃ．75-100% Ｄ．75-105%
Ｅ．100-125%
8．分子杂交的化学原理是形成（E ）
Ａ．共价键 Ｂ．离子键
Ｃ．疏水键 Ｄ．配位键 Ｅ．氢键
9．促红细胞生长素（EPO）基因能在大肠杆菌中表达，但却不能用大肠杆菌的基因工程菌生产人的促红细胞生长素，这是因为（ E ）
Ａ．人的促红细胞生长素对大肠杆菌有毒性作用
Ｂ．人的促红细胞生长素基因在大肠杆菌中极不稳定
Ｃ．大肠杆菌内毒素与人的促红细胞生长素特异性结合并使其灭活
Ｄ．人的促红细胞生长素对大肠杆菌蛋白水解酶极为敏感
Ｅ．大肠杆菌不能使人的促红细胞生长素糖基化
10．鸟枪法克隆目的基因的战略适用于（ A ）
Ａ．原核细菌 Ｂ．酵母菌
Ｃ．丝状真菌 Ｄ．植物 Ｅ．人类
11．cDNA第一链合成所需的引物是（D）
Ａ．PolyA Ｂ．PolyC
Ｃ．PolyG Ｄ．PolyT Ｅ．发夹结构
12．cDNA法获得目的基因的优点是（ B ）
Ａ．成功率高 Ｂ．不含内含子
Ｃ．操作简便 Ｄ．表达产物可以分泌 Ｅ．能纠正密码子的偏爱性
13．人工合成DNA的单元操作包括（ E ）
I去保护 II偶联 III封端 IV氧化
Ａ．I+II Ｂ．II+IV
Ｃ．I+II+III Ｄ．II+III+IV Ｅ．I+II+III+IV
二、B型题
A．抗药性筛选 B．分子杂交筛选 C．RNA反转录
D．免疫学方法 E．体外翻译
1．用于鉴定质粒是否转化的一般方法是：
（A）
2．用于鉴定转化子细胞是否含有目的基因的常用方法是：
（B）
3．利用目的基因表达产物的特异性抗体来筛选含有目的基因的转化子细胞价方法是：
（D）
A．限制性核酸内切酶 B．DNA连接酶 C．反转录酶
D. TaqDNA聚合酶 E．碱性磷酸酶
4.识别DNA回文结构并对其双链进行切割的是：
（A）
5.用于PCR反应的酶是：
（D）
6.将目的基因与载体进行拼接的酶是：
（B）
A．转染 B．转化 C．感染 D．转导 E．转位
7．以质粒为载体，细菌为宿主的导入方式是：
（B）
8．以噬菌体为载体，细菌为宿主的导入方式是：
（D）
9．以病毒为载体，哺乳动物细胞为宿主的导入方式是：
（C）
A.94℃ B.85℃ C.50℃ D.72℃ E.100℃
10.PCR变性温度一般为：
（A）
11.PCR退火温度一般为：
（C）
12.PCR延伸温度一般为：
（D）
A分 B切 C接 D转 E筛
13．获取目的基因属于基因工程中的步骤是（A）
14.DNA连接酶用于基因工程中的步骤是（C）
15.DNA重组子转化宿主细胞的步骤是（D）
16.限制性内切酶切割目的基因和载体的步骤是（B）
17.对含有DNA重组体的宿主细胞进行筛选的步骤是（E）
三、C型题
A、含有该生物的全部基因 B、含有该生物的结构基因
C、两者都是 D、两者都不是
1、基因组文库（A）
2、cDNA文库（B）
A、需要逆转录酶 B、需要限制性内切酶
C、两者都是 D、两者都不是
3、建立cDNA文库（C）
4、建立基因组文库（B）
A、连接酶 B、逆转录酶 C、两者都是 D、两者都不是
5、建立cDNA文库需要（C）
6、建立基因组文库需要 （A）
四、X型题
1.可用于基因工程载体的DNA分子有：
（BDE）
A．染色体DNA B．病毒DNA C．细菌DNA
D．噬菌体DNA E．质粒DNA
2.重组DNA技术的基本过程包括：
（ACDE）
A．目的基因的获取 B．PCR反应 C．克隆载体的构建
D．目的基因与载体的连接 E．重组体分子导入受体菌
3.基因克隆又称为：
（AC）
A．重组DNA B．重组RNA C．DNA克隆
D．RNA克隆 E．蛋白质复制
4.组成PCR反应体系的物质包括：
（BD）
A．RNA引物 B．TaqDNA聚合酶 C．RNA聚合酶
D．DNA模板 E．ddNTP
5.对于重组体的筛选，属于直接选择法的是：
（BCD）
A．免疫化学法 B．原位杂交法 C．Southern印迹
D．补救标志筛选 E．抗药性标志筛选
6.对于重组体的筛选，属于非直接选择法的是：
（AE）
A．免疫化学法 B．原位杂交法 C．Southern印迹
D．补救标志筛选 E．酶联免疫筛选
7.限制性核酸内切酶切割 DNA时可产生：
（ABCE）
A．5’粘性末端 B．3’粘性末端 C．平末端
D．单链缺口 E．粘性末端
8.基因工程中目的基因的来源有：
（ABCDE）
A．化学合成 B．PCR合成 C．cDNA文库
D．基因组文库 E．组织细胞中染色体DNA直接提取
9.基因工程中外源性基因又称为：
（ABD）
A．目的基因 B．目的DNA C．目的RNA
D．targetDNA E．外源RNA
10．重组DNA技术中常用的工具酶有：
（ABCDE）
A．限制性核酸内切酶 B．DNA聚合酶Ⅰ C．DNA连接酶
D．反转录酶 E．末端转移酶
11．作为基因工程的载体必须具备的条件是：
（ABCD）
A．能独立自主复制 B．易转化 C．易检测（含有抗药性基因等）
D．具有限制性内切核酸酶的位点 E．易提取获得
五、填空题
1．基因工程的一个理想的载体必须具备的条件有__至少有一个复制起点____、___有克隆位点、具备转化的功能、遗传标记基因___、___具有较高的装载能力___。
2．基因工程常用的载体DNA分子有______、______和______。
3．一个完整的DNA克隆过程应包括______的获取、______的选择与构建、
______与载体的拼接、重组体导入______、筛选与鉴定出______。
4．目的基因获取的途径或来源有______、______、______、______。
5．基因工程过程中重组体直接筛选法的方式有______、______、______。
6．当细胞与细胞或细菌通过菌毛相互接触时，______就可以从一个细胞（细
菌）转移到另一细胞（细菌），这种类型的DNA转移称为______作用。
7．重组DNA技术中常用的工具酶有______、______、______、______。
8.Klenow没的活性有：
5’3’聚合酶活性；3’5’外切酶活性
9.人工化学合成DNA新形成的核苷酸的合成方向是’3’5’，合成的DNA5’末端是-OH;3’末端是-OH
10.进行PCR扩增DNA时，反应体系应加入模板DNA，Taq酶、一对引物、dNTP和缓冲液。
5.现代生物工程主要包括基因工程，酶工程，细胞工程，发酵工程。
6．使DNA的结构分析问题从根本上得到了解决的两项关键性工程技术分别是DNA分子的体外切割与连接技术和DNA分子的核酸序列分析技术。
7．基因工程的工具酶主要有限制性核酸内切酶和DNA连接酶。
8．基因克隆载体主要有质粒、噬菌体、病毒三大类。
9．基因克隆载体应具备的条件是有克隆位点（外源DNA插入点），能携带外源DNA进入受体细胞，能自主复制；具有选择标记，便于重组体的筛选和鉴定；
10．将外源性重组DNA导入受体细胞的途径有转化（或转染）、杂交、转导、细胞融合、显微注射等方式。
11．目的基因导入受体细胞成功的关键是：
选用合适的克隆载体
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