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实验室常用试剂配制

实验室常用溶液及试剂配制

 

实验室常用溶液、试剂的配制

 

表一 普通酸碱溶液的配制

名称

(分子式)

比重

(d)

含量

(w/w%)

近似摩尔浓度

(mol/L)

欲配溶液的摩尔浓度(mol/L)

3

2

1

配制1L溶液所用的ml数(或g)

盐酸

(HcL)

1.18~1。

19

36~38

12

500

250

167

83

硝酸

(HNO3)

1.39~1.40

65~68

15

381

191

128

64

硫 酸

(H2SO4)

1.83~1。

84

95~98

18

84

42

28

14

冰醋酸

(Hac)

1.05

99.9

17

253

177

118

59

磷   酸

(H3PO4)

1.69

85

15

39

19

12

氨水(NH3·H2O)

0.90~0。

91

28

15

400

200

134

77

氢氧化钠(NaOH)

 

(240)

(120)

(80)

(40)

氢氧化钾(KOH)

 

(339)

(170)

(113)

(56.5)

 

表二     常用酸碱指示剂 

指示剂

PKHIn

变色范围pH

酸色

碱色

配制方法

百里酚蓝

(麝香草酚蓝)

1.65

12。

~2.8

0.1%的20%乙醇溶液

甲基橙

3.4

3。

1~4。

4

橙黄

0.05%水溶液

溴甲酚绿

4。

3。

8~5.4

0.1%的20%乙醇溶液或0。

1g指示剂溶于2。

9ml0.05mol/L NaOH加水稀释至100ml

甲基红

5。

0

4。

4~6.2

0。

1%的60%乙醇溶液

溴百里酚蓝

(麝香草酚蓝)

7.3

6。

2~7.3

0。

1%的20%乙醇溶液

中性红

7。

4

6。

8~8.0

黄橙

0。

1%的60%乙醇溶液

百里酚蓝

(第二变色范围)

9。

2

8.0~9.6

0。

1%的20%乙醇溶液

 

酚酞

9.4

8.0~10.0

无色

0.5%的90%乙醇溶液

百里酚酞

10。

0

9.4~10.6

无色

0.1%的90%乙醇溶液

 

 

表三   混合酸碱指示剂

指示剂组成(体积比)

变色点pH

酸色

碱色

备注

一份0。

1%甲基橙水溶液

一份0。

25%靛蓝二磺酸钠水溶液

4。

1

绿

灯光下可滴定

一份0.02%甲基橙水溶液

一份0。

1溴甲酚绿钠盐水溶液

4.3

蓝绿

PH3。

5黄色

PH4.05绿黄

PH4.3浅绿

三份0.1%溴甲酚绿20%乙醇溶液

一份0.2%甲基红60%乙醇溶液

5。

1

酒红

绿

颜色变化极鲜明

一份0。

2%甲基红乙醇溶液

一份0。

1%次甲基蓝乙醇溶液

5。

4

红紫

绿

PH5.2红紫

PH5.4暗蓝

PH5。

6绿色

一份0。

1%溴甲酚绿钠盐水溶液

一份0.1%绿酚红钠盐水溶液

6.1

黄绿

蓝紫

PH5.6蓝绿

PH5.8蓝色

PH6。

0浅紫

PH6。

2蓝紫

一份0.1%溴甲酚紫钠盐水溶液

一份0。

1溴百里酚蓝钠盐水溶液

6。

7

紫蓝

PH6。

2黄紫

PH6.6紫

PH6.8蓝紫

一份0.1中性红乙醇溶液

一份0。

1次甲基蓝乙醇溶液

7.0

蓝紫

绿

PH7.0为蓝绿

必须保存在棕色瓶中

一份0.1甲酚红钠盐水溶液

三份0。

1%百里酚蓝钠盐水溶液

8.3

PH8。

2玫瑰色

PH8。

4紫色

一份0。

1%百里酚蓝50%乙醇溶液

三份0.1酚酞50%乙醇溶液

9。

0

PH9。

0绿色

 

 

表四   容量分析基准物质的干燥

基准物质

干燥温度和时间

基准物质

干燥温度和时间

碳酸钠(NaCO3)

500~650℃,40-50min

氯化物(NaCl)

500-650℃,干燥40—50min

草酸钠(H2C2O4)

150—200℃,1—1。

5h

硝酸银(AgNO3)

室温,硫酸干燥器中至恒温

草酸(H2C2·2H2O)

室温,空气干燥2-4h

碳酸钙(CaCO3)

120℃,干燥至恒重

硼砂(Na2B2O·10H2O)

室温,在NaCl和蔗糖饱和液的干燥器中,4h

氧化锌(ZnO)

800℃灼烧至恒重

邻苯二甲酸氢钾(KHC6H4O4)

100—120℃,干燥至恒重

锌(Zn)

室温,干燥器24h以上

重铬酸钾(K2Cr2O7)

100-110℃,干燥3—4h

氧化镁(MgO)

800℃灼烧至恒重

表五  缓冲溶液的配制

1、 氯化钾—盐酸缓冲溶液

0.2mol/LKCl(ml)

50

50

50

50

50

50

50

0。

2mol/LHCl(ml)

97。

0

64.3

41.5

26.3

16.6

10.6

6。

7

水(ml)

53.0

85。

108。

5

123.7

133.4

139。

4

143.3

PH(20℃)

1。

0

1.2

1。

1.6

1.8

2.0

2.2

 

2、  邻苯二甲酸氢钾—氢氧化钾缓冲溶液 

0.2mol/LKHC6H4O4(ml)

50

50

50

50

50

0。

2mol/LHCl(ml)

46。

70

32.95

20。

32

9.90

2。

63

水(ml)

103.30

117。

05

129.68

140。

10

147.37

PH(20℃)

2。

2

2.6

3。

0

3.4

3。

8

 

3、 邻苯二甲酸氢钾-氢氧化钾缓冲溶液

0。

2mol/LKHC6H4O4(ml)

50

50

50

50

50

0。

2mol/LHCl(ml)

0.40

7。

50

17。

70

29.95

39。

85

水(ml)

149。

60

142。

50

132.20

120。

05

110。

15

PH(20℃)

4.0

4。

4

4。

5。

5。

6

 

4、  乙酸—乙酸钠缓冲溶液

0.2mol/LHAc(ml)

185

164

126

80

42

19

0.2mol/LNaAc(ml)

15

36

74

120

158

181

PH(20℃)

3。

4。

0

4.4

4。

5.2

5。

 

5、  磷酸二氢钾—氢氧化钠缓冲溶液

0.2mol/LKH2PO4(ml)

50

50

50

50

50

50

0。

2mol/LNaOH(ml)

3.72

8.60

17。

80

29。

63

39.50

45。

20

水(ml)

146。

26

141.20

132。

20

120.37

110。

50

104。

80

PH(20℃)

5.8

6。

2

6.6

7。

0

7.4

7.8

 

 

 

 

 

 

6、 硼砂—氢氧化钠缓冲溶液 

0。

2mol/L硼砂(ml)

90

80

70

60

50

40

0.2mol/LNaOH(ml)

10

20

30

40

50

60

PH(20℃)

9.35

9.48

9.66

9。

94

11.04

12.32

 

7、 氨水-氯化铵缓冲溶液

0。

2mol/LNH3·H2O(ml)

1

1

2

8

32

0。

2mol/LNH4Cl(ml)

32

8

2

1

1

PH(20℃)

8。

8。

58

9.1

9。

8

10。

11.0

 

8、  常用缓冲溶液的配制

PH

       配制方法

3.6

NaAc·3H2O 8g,溶于适量水中,加6mol/LHAc134ml,稀释至500ml

4.0

NaAc·3H2O20g  溶于适量水中,加6mol/LHAc 134ml,稀释至500ml

4。

5

NaAc·3H2O 32g 溶于适量水中,加6mol/LHAc 68ml,稀释至500ml

5.0

NaAc·3H2O50g  溶于适量水中,加6mol/LHAc  34ml,稀释至500ml

8。

NH4Cl 50g  溶于适量水中,加15mol/LNH3·H2O 3.5ml,稀释至500ml

8。

5

NH4Cl  40g  溶于适量水中,加15mol/LNH3·H2O 8.8ml,稀释至500ml

9.0

NH4Cl 35g 溶于适量水中,加15mol/LNH3·H2O 24ml,稀释至500ml

9.5

NH4Cl 30g 溶于适量水中,加15mol/LNH3·H2O  65ml,稀释至500ml

10

NH4Cl 27g 溶于适量水中,加15mol/LNH3·H2O 197ml,稀释至500ml

实验室常用试验方法2

 

九、柠檬酸(C6H8O7·H2O)

称取试样1。

5g(精确到0.0002g)于三角瓶内,加入水50ml溶解,加酚酞指示剂3滴,用1mol/L氢氧化钠标准溶液滴定至粉红色为终点,同时做空白试验。

计算:

X%(一水)=(V1—V0)×C×0。

06404      m×(1—0。

08566)×100

 

     X%(无水)=(V1—V0)×C×0.06404              m×100

V1——---消耗氢氧化钠标准溶液的体积,ml;

V0-——-—空白所消耗氢氧化钠标准溶液的体积,ml;

C--—--—氢氧化钠标准溶液浓度,mol/L;

m—-—样品质量。

 

十、钙含量测定(磷酸氢钙CaHPO4、磷酸二氢钙Ca(H2PO4)2·H2O、钙粉等)

称取2g(精确到0.0002g)样品,用10ml盐酸(1+1)溶解,转移至100ml容量瓶中定溶,用移液管吸取10ml于250ml锥形瓶中,加50ml水,5ml蔗糖溶液(25g/L),2ml三乙酸胺(1+1),1ml乙二胺(1+1),1滴孔雀绿指示液(1g/L),滴加氢氧化钾溶液(200g/L)至无色,再过量10ml,加0。

1g盐酸羟胺(每加一种试剂都要摇匀),加钙黄绿素少许,在黑色背景下用0.05mol/L的EDTA标准溶液滴定至绿色荧光消失呈现紫红色为滴定终点.

Ca%= C×V×0.4008      m×100

C----——EDTA标准溶液的浓度,mol/L;

V-—---消耗EDTA标准溶液的体积,ml;

m--—-样品质量。

 

(二)氟(Fˉ)含量的测定:

1、标准曲线的绘制;

2、试样含量的测定:

称取0。

5g(精确到0。

0002g)置于50ml纳氏比色管中,加1mol/L盐酸10ml,密闭提取1h(不时摇动),避免粘于管壁,提取后加总离子强度缓冲液25ml,加水至刻度,以滤纸过滤。

以氟电极测平衡电位值。

结果计算:

X=C×50×1000 m×1000=50C m

X—-—--试样中氟含量,

m—--试样质量,g;

C—-—--据电位值查得的浓度,

总离子强度缓冲液:

现配现用,3mol/L乙酸钠;0。

75mol/L柠檬酸钠,配成(1+1).

测定时,用蒸馏水洗电极装置至值为—370以后。

 

(三)磷(P)的测定

   磷标准曲线的绘制:

准确移取磷标准溶液(分析纯的磷酸二氢钾,在105℃干燥1h,冷却后称取0.2195g,溶于1L的容量瓶中,加硝酸3ml,用水稀释至刻度,得到50ug/ml溶液),分别吸取0。

0、1。

0、2.0、4。

0、6。

0、8.0、10。

0、12。

0、15.0ml于50ml容量瓶中,各加入磷显色液(钒—钼酸铵显色液:

偏钒酸铵1。

25g,加250ml硝酸于1000ml容量瓶中;钼酸铵25g于烧杯中,加400ml水溶解,冷却下,将此液倒入容量瓶中,定容)10ml,用蒸馏水定容,摇匀放置10min以上,以0。

0为参比,在400nm波长测定各溶液的吸光度。

以横坐标为磷含量,纵坐标为吸光度,作标准曲线。

    样品的测定(磷酸氢钙):

移取测钙时所用的试样溶液5ml于100ml容量瓶中,用水定容,摇匀,准确移取2ml于50ml容量瓶中,加磷显色液10ml,用水定容,测其吸光度。

P%=W×稀释倍数    m×106×100

W--——以吸光度算出的浓度,

m—---试样质量,g。

 

十一、硫酸铜(CuSO4·5H2O)

鉴别:

1、Cu2+,取试样溶液,加0.5ml乙二胺四乙酸二钠溶液(15%,m/v),0。

5ml氢氧化钠溶液(0。

1mol/L),1ml乙酸乙酯,振摇,有机层显黄棕色。

2、SO42—,取试样溶液,置于白色瓷板上,加BaCl2溶液(5%,m/v),即有白色沉淀生成,在盐酸和硝酸中不溶.

测定:

称取0。

35g左右(精确到0。

0002g)置于碘量瓶中,加50ml水溶解,40ml冰乙酸,2g碘化钾(10mlKI溶液),摇匀,于暗处放置10min,用Na2S2O3标准溶液滴定至淡蓝色,加2ml淀粉,继续滴定至无蓝色(或蓝色刚刚消失为终点)。

硫酸铜%=C×V×0.06355      m×100

C——-———Na2S2O3标准溶液的浓度,mol/L;

V--———消耗Na2S2O3标准溶液体积,ml;

m--—-—样品质量,g。

 

十二、硫酸锌(ZnSO4·H2O)

称取0。

2g试样,加50ml水溶解,加3g酒石酸钾钠,2ml浓氨水,50mg络黑体,用EDTA标准溶液(0.05mol/L)滴定至紫色变为纯蓝色。

ZnSO4%=C×V×0。

06537       m ×100%

C--———EDTA标准溶液的浓度,mol/L;

V--—-—消耗EDTA标准溶液的体积,ml;

m—--—样品质量。

 

十三、硫酸亚铁(FeSO4·H2O)

称取0。

35g试样于250ml三角瓶中,加50ml水,5ml浓硫酸(缓慢加入),2ml浓磷酸,冷却至室温,用0。

1mol/L高锰酸钾标准溶液滴定至粉红色即为终点。

FeSO4%=C×V×0。

05585      m×100%

C—-—--高锰酸钾标准溶液的浓度,mol/L;

V-—---消耗高锰酸钾标准溶液的体积,ml;

m——--试样的质量。

 

十四、砷

1、   原理:

在酸性介质中,金属锌将砷化物还原为砷化氢,砷化氢在溴化汞试纸上形成棕黄色砷斑与标准砷进行比较。

   2、试剂:

盐酸(HCl),碘化钾(KI),氧化亚锡盐酸溶液(40%、m/v),无砷金属锌,乙酸铅棉花·溴化汞试纸,砷标准溶液(1ug/ml)。

   3、测定:

称取1g试样(精确到0。

01g)置于广口瓶中,用水稀释至70ml,加6ml盐酸,摇匀,加1g碘化钾(5mlKI溶液、200g/L),再滴加氯化亚锡,直到溶液由黄色变成无色或白色,摇匀,放置10min,加2.5g无砷金属锌,装好置于暗处25—30℃放置1—1.5h,溴化汞试纸所呈棕黄色不得深于标准。

 

十五、硫酸镁(MgSO4)

无色结晶或白色粉末.

称取试样1g(精确到0.0002g),用水溶解,转移至100ml容量瓶中,定容,准确吸取25ml溶液至250ml锥形瓶中,加30ml水,10ml氨-氯化铵缓冲溶液(PH=10),及5滴铬黑体指示剂(0.5%),用EDTA滴定至溶液由紫红色变为纯蓝色为终点.

X%= C×V×0.02431      m×100

C—-—---EDTA标准溶液的浓度,mol/L;

V——--—消耗EDTA标准溶液的体积,ml;

m——--样品质量,g.

 

另:

沸石粉、滑石粉、石膏粉和膨润土,只测Pb、Cd和As。

 

三、维 生素

一、甜菜碱盐酸盐

   1、原理,采用非水滴定法,用乙酸汞将甜菜碱盐酸盐转化为乙酸盐和难电离的氯化汞,在乙酸介质中用高氯酸滴定溶液对生成的乙酸盐进行滴定。

  2、试剂,①冰乙酸;②乙酸汞溶液,将50g乙酸汞研细,加1000ml冰乙酸溶解,置棕色瓶中,密闭保存。

③结晶紫指示剂;2g/L,取2g结晶紫,加100ml冰乙酸;④高氯酸标准滴定液,0.1mol/L的溶液。

  3、测定

取试样预先在105℃烘箱中干燥至恒重,称取干燥试样0.4g(精确到0.0002g),加50ml冰乙酸加热溶解,加25ml乙酸汞溶液,冷却,加结晶紫指示剂2滴,用0。

1mol/L的高氯酸标准溶液滴定到溶液呈绿色,同时作空白试验.

X%= (V—V0)×C×0.01536             M×100

  C-——-高氯酸标准溶液的浓度mol/L

  V—-—试验组消耗高氯酸标准溶液的体积ml

  V0———空白组消耗高氯酸标准溶液的体积ml

   m--—试样质量。

 

二、氯化胆碱

    称取经105℃干燥至恒重的试样1g(精确到0。

0002g),置于100ml容量瓶中,加水70ml混匀,在约80℃水浴上加热15min,取出,在电动振荡器振荡20min,用水定容至100ml,过滤,吸取10ml滤液于100ml高型烧杯中,在冰箱内冷却到5℃以下,加10ml雷氏盐溶液(2%),不时搅拌反应30min(再令沉淀静置陈化15min),然后将沉淀定量到转移到事先在105℃烘干至恒重的玻璃砂芯坩埚中,减压抽滤,在用水洗涤沉淀3—4次,每次10ml,将装有沉淀的坩埚滤器放入烘箱,105℃烘2h称重。

氯化胆碱%=  沉淀重×3。

3045 样品重量×100%

 

  雷氏盐甲醇溶液(2%):

2g雷氏盐,溶于100ml甲醇中,放置于低温下保存.

   胺盐定性分析:

称取3-4g试样,煮50ml水至70-80℃,在加样品,摇匀充分溶解,过滤于150ml三角瓶中,加入1ml浓硫酸,摇匀,将滤液煮沸,用氨制硝酸盐试剂沾滤纸测其气,观察试纸颜色是否发黑,继续煮1-2min,从电炉上取下放冷,加40%氢氧化钠5ml再煮沸,用PH湿润试纸测其蒸气的PH值,PH在7-8为合格.

氨制硝酸银溶液:

取硝酸银1g,加水20ml,滴加氨试剂(取浓氨水400ml,加水至1000ml),边加边搅拌,至棕色沉淀将近全溶,过滤,置于棕色瓶中,在暗处保存。

(二)仲裁法(非水滴定法):

原理:

采用非水滴定法,用乙酸汞将氯化胆碱转化成乙酸盐和难电离的氯化汞,在乙酸介质中,以高氯酸对生成的乙酸盐进行滴定.

试剂:

5%乙酸汞溶液、50g/L(称取5g乙酸汞研细,用微热的冰乙酸溶解并稀释至100ml,在棕色瓶中密封保存;0.2%结晶紫、2g/L(称取0.2g,加100ml冰乙酸)

测定步骤:

称取试样0。

3g(精确到0。

0002g)置于100ml锥形瓶中,加20ml冰乙酸,2ml乙酸酐,10ml乙酸汞溶液和2滴结晶紫指示剂,摇匀,用高氯酸标准溶液滴定至溶液呈纯蓝色。

即为终点。

同时做空白试验.

X%=C×(V1—V0)×139。

63       m×1000×100

C———-—高氯酸标准溶液的浓度,mol/L;

V1--—-试验组消耗高氯酸溶液的体积,ml;

V0—-—-空白组消耗高氯酸溶液的体积,ml;

m——-—样品的质量,g.

139。

63-----氯化胆碱的分子量。

 

三、维生素B6

称0。

15g样品(精确到0。

0002g),加冰乙酸20ml,乙酸汞溶液5ml,温热溶解,放冷,加结晶紫指示剂1滴,用高氯酸标准溶液滴定至溶液呈蓝绿色,同时做空白校正。

VitB6%= (V-V0)×F×0.02056            m×100

V——-—样品溶液耗高氯酸标准溶液的体积,ml;

V0---—空白溶液耗高氯酸标准溶液的体积,ml;

F—-———高氯酸标准溶液浓度,mol/L;

m-——--样品重,g。

本法适用于化学合成制得的vitB6。

 

四、维生素B2(核黄素)

  避光操作,称取0.075g(精确到0。

0002g),置于烧杯中,加冰乙酸1ml和水75ml,加热溶解后,加水稀释放冷,移置500ml容量瓶中,用水定容。

摇匀,吸取10ml于100ml容量瓶中,加1。

4%乙酸钠溶液7ml。

并用水定容,同时做空白试验作对照。

以444nm波长测吸光度。

VitB2%=A        323×L×C×100= 50A 323m×100%

A-————样品吸光度;

323—-—-维生素B2的系数;

L—-——光路长度1cm;

C--——-100ml溶液中样品的g数.

 

五、维生素C(包被)

称取0.2g于250ml三角瓶中,加水100ml(煮沸,冷却),10ml冰乙酸,1ml1%淀粉指示剂,用0。

1mol/L碘标准溶液滴定至溶液为蓝色。

VitC%=V×F×0.00886      m×100

V—-——-消耗碘标准溶液的体积,ml;

m-—-—试样质量,g;

F—-—浓度校正系数(碘标液/样品液浓度)碘标准溶液的浓度,mol/L。

 

四、氨 基酸

一、赖氨酸硫酸盐含量的测定

1、标准曲线的绘制

标准贮备液:

称取L—赖氨酸2克左右于1000ml容量瓶中,加1mol/L盐酸1ml用水溶解,定容。

则浓度大约在0。

2mg/ml。

标准曲线的绘制:

分别吸取3.0,5.0,10。

0,11.0,12。

0,13。

0和14。

0ml标准贮备液于100ml容量瓶中,加水定容摇匀.在以上各容量瓶中分别吸取2.00ml于比色管中,然后在每只比色管中再加10ml印三酮显色液,不定容,用力振摇.于沸水浴中水浴40分钟.立即冷却至室温。

同时作空白(只是不加分解液)。

在分光光度计上于475nm波长处,以空白调零,测量各吸光度,以吸光度为纵坐标,浓度为横坐标,作图。

2、样品的测定:

称取样品1.5克左右,加1mol/L的盐酸7ml充分溶解样品,用水定容,过滤,吸取2。

00ml于100ml容量瓶中,加水定容,摇匀。

其它同作标准曲线的步骤。

测出吸光度。

3、计算:

于标准曲线上查出所测样品的浓度,代入公式

X(%)=  C×500  M

C——---——-为从标准曲线上查得的样品的浓度。

     M--——-——样品的质量。

500———--为样品稀释的倍数和转变为百分含量的系数。

(空白加样品液和空白试液.)

   

(一)原理:

赖氨酸在PH≤3.0是与茚三酮反应生成红色化合物,其颜色深浅与赖氨酸含量存在性性关系.

  

(二)试剂:

1、茚三酮A液,称取茚三酮1。

50g于烧杯中,量取110ml乙二醇—甲谜于烧杯中,溶解。

    2、茚三酮B液,称取1.80g二水氯化铜(CuCl2·2H2O)于烧杯中,再量取0.1mol/L柠檬酸39ml于烧杯中,搅拌使其溶解.

    3、将A、B两液全部转入1000ml容量瓶中定容,摇匀得茚三酮显色液。

   4、赖氨酸空白显色液、称取1.80g二水氯化铜(CuCl2·2H2O)于烧杯中,再量取0.1mol/L柠檬酸39ml于烧杯中,搅拌使其溶解.转移至1000ml容量瓶中定容,摇匀即可。

 

二、苏氨

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