离子色谱操作教程.docx
《离子色谱操作教程.docx》由会员分享,可在线阅读,更多相关《离子色谱操作教程.docx(8页珍藏版)》请在冰点文库上搜索。
离子色谱操作教程
离子色谱操作教程
离子色谱操作程序
一、准备工作:
Ø去离子水:
必须准备足量的去离子水
Ø淋洗液:
配制好要用的淋洗液
Ø配制标准溶液:
提前准备好预分析离子的标准溶液(均用去离子水配制)
Ø样品:
进样前要用0.45μm的过滤膜过滤
Ø检查淋洗液的液面高度,不应低于200ml
二、开关机:
1、开机:
Ø打开N2保护气,调钢瓶分压在0.1-0.2Mpa之间,淋洗液前仪器压力表3-6psi之间;
Ø打开IC、PC电源开关;打开仪器软件开关、开泵;
Ø开泵稳定一段时间后压力大于1000psi后打开抑制器;
Ø检验仪器是否正常:
压力1300-1500psi以下,一般阳离子1140-1160psi之间,阴离子在1140-1180之间;系统压力的波动应小于±10psi;阴离子的背景电导应低于20μS;阳离子的背景电导应低于10μS;内部无泄漏;抑制器、废液出口有连续气泡,泵出口无气泡
2、关机:
Ø关抑制器
Ø关泵
Ø关软件
Ø关保护气
Ø关电源
离子色谱程序设定方法
1、打开色谱工作站,点击计算机代码,双击与控制面板
2、确认各模块的“connected”图标均为绿色后,点击红色正方形图标(stopflow)和绿色三角图标(continue),开泵(pumpon/off),设定流速
3、点击蓝色圆形图标(acquisitionon/off),选ECD-ECD_1,选择抑制器类型,输入淋洗液浓度,点击“确定”开始采集基线
(如果这次和上次用的同一个系统,则可以直接连接后开泵,点击蓝色图标采集基线)
4、阳离子分析:
柱:
CS12A抑制器:
CAES淋洗液:
20mMMSA淋洗液流量:
1.0ml/min测试电流:
65mA
阴离子分析:
柱:
AS14抑制器:
ASRS_4mm淋洗液:
3.5mMNa2CO3/1.0MmNaHCO3淋洗液流量:
1.2ml/min测试电流:
20mA
5、设定运行程序(ProgramFile)
Ø依次点击file和new,选择programfile,点击“OK”,点击“下一步”,确认泵的工作方式(isocratic)、淋洗液通道%A、高/低压极限(设为0-3000psi)和流速是否正确,点击“下一步”。
选择手动进样“manual”,进样时间设为30s
Ø将acquisitiontime调整至0-18min,点击“下一步”,确认以下参数:
采样频率(5Hz),自动调零“Yes”池温柱温均为“35℃”选择抑制器类型,输入淋洗液浓度,电流为推荐值,点击“下一步”
Ø选择“reviewtheprograminanewwindow”,点击“完成”
Ø在程序的第一行添加一下提示信息:
message“请进样”,删除“0.000”的“inject”(注意:
绿色字体为注释信息,不起作用)
Ø存盘退出(推荐存入独立的“program”子目录中)
6、建立方法文件(mothedfile)
Ø依次点击file和new,选择methodfile
Ø依次点击file和saveas,存盘退出(推荐存入独立的“method”子目录中)
7、建立样品表(sequence)
Ø依次点击file和new,选择sequence(usingwizard),点击“OK”,点击“下一步”(连续两次次)填入未知样的数量“numberof”和每个样的平行测定次数“injectionper”,点击“apply”,点击“下一步”,填入标准样品的数量“numberof”和每个样的平行测定次数“injectionper”,点击“apply”,点击“下一步”,选择正确的程序文件,点击“open”,选择正确的方法文件,点击“open”,选择方法文件和程序文件,选择正确的报告文件,点击“下一步”,为这个sequence起名“sequencename”,点击“完成”
8、运行标准样品
Ø点击蓝色圆形图标(acquisitionon/off),选择“yes”,停止采集基线
Ø依次点击batch和start。
Ø点击“add”,打开需要运行的样品表
Ø点击“readycheck”,如果样品表没有错误,将出现“readycheckwassuccessful”提示,点击“确定”
Ø点击“start”,注入样品,点击“确定”
8、处理标准曲线(以多点校正为例)
Ø依次点击file和browser,双击需要处理的标准样品文件(第一个标准点),依次点击view和QNT-Editer
Ø点击屏幕左下角“General”,在“Dimensionof”处输入浓度单位“mg/L”
Ø点击相邻的“Detection”,设定最小峰面积为0.005。
点击键盘“↓”,选择“是(Y)”
将新生成的“MinimumArea”重新选为“InhibitIntegration”,按“Enter”键
Ø点击键盘的“↓”后,将鼠标放在水负峰和F-之间的水平基线处,在Ret.Time[min]的第三行输入屏幕左下角显示的时间“2.5”
Ø点击相邻的“PeakTable”选择Edit、AutogeneratePeaktable,依次点击OK和确定,在“PeakName”下顺序输入离子名称,注意:
定性分析到此结束。
如需进行单点校正,直接执行下一步。
在“Cal.Type”下“Lin”处双击左键,选择“LinearwithOffset”,点击“OK”,在“Loff”处点击右键,从弹出的对话框中选择“FillColumn”
Ø点击相邻的“AmountTable”,注意:
如果进行单点校正,在“Amount[mg/L]”处输入各个组分的浓度,存盘退出
Ø在“Amount[mg/L]”处点击右键,依次选择Columns和EditAmountColumns。
点击“Auto-Generate”,按“Apply”键,按“OK”键退出
Ø在“Amount”下输入各个组分的标准点浓度,屏幕右上方立即出现某一离子的标准曲线,点击“Integration”图标,选择“Calibration”,查标准曲线合格后,存盘退出
离子色谱的基本操作
一、淋洗液的配制:
Ø阳离子——20mM的MSA(甲磺酸)。
配制:
2.6mlMSA(分析纯即可)溶解在2升的淋洗液瓶中。
注意配制过程中MSA要用0.45um的滤膜过滤,以防止堵塞管路。
Ø阴离子——3.5mMNa2CO3/1.0mMNaHCO3。
配制:
称取37.1gNa2CO3/8.4gNaHCO3(分析纯即可)定容于1升的容量瓶中,配成350mMNa2CO3/100mMNaHCO3的阴离子淋洗液母液(可保留半年),用前需稀释100倍,即取20ml母液于2升的淋洗瓶中。
Ø注意:
淋洗液配制过程中一定要充分摇匀。
二、样品前处理
Ø过滤:
0.22µm,0.45µm过滤膜
Ø稀释:
未知样品稀释100倍
Ø基体消除:
去除样品中所包含的,有可能损坏仪器或者影响色谱柱/抑制器性能的成分(如:
重金属离子、有机大分子)
去除样品中所包含的,有可能干扰目标离子测定的成分(如:
高离子强度基体)
三、SRS使用注意事项
Ø淋洗液中含有机溶剂时,使用外接水或者化学抑制;
Ø尽量将电流设定为自动生成电流的最小值以延长抑制器的使用寿命;
Ø抑制器与泵同时开关;或当泵压1000psi以上在开抑制器
Ø每周至少开机一次,保持抑制器活性;
Ø长期不用应封存抑制器;
Ø重新启用前需要水化抑制器,具体操作如下:
①ASRS——从ELUENTOUT处注入3mLH2O
从REGENIN处注入5mLH2O
②CSRS——从ELUENTOUT处注入3mLH2O
从REGENIN处注入5mLH2O
完成上述操作后,将抑制器平放30分钟。
四、阴、阳离子色谱柱的更换:
Ø准备工作:
要在换柱之前开泵和抑制器洗柱,至少30min,直到仪器稳定为止,因为仪器稳定才说明柱子内部液体以充满。
Ø更换系统:
更换淋洗液、保护柱、分离柱、抑制器;接通电源,停泵,设置淋洗液存量;打开保护柱进口的接头,开泵;排气泡,调节流速;清洗管路,用试纸检验流出溶液的pH值,与分离柱要求的淋洗液一致后停泵;拧紧保护柱进口的接头,进行正常操作。
Ø注意:
每个接口的正确对应,保护柱和色谱柱连接时要注意液流方向,保护柱箭头向下、色谱柱箭头向上。
抑制器连接时注意阴阳离子的不同,阴离子的regenin/out均为平头接口,而阳离子则只有regenout为平头接口,注意更换。
换下来的柱子及抑制器一定要密封好,已保持内部有溶液,防止内部溶液干掉,阴离子的抑制器regenin/out用专用堵头密封。
Ø柱子装好后先开泵看是否漏水(气),再装上外面的两块面板。
五、排气泡:
如果淋洗液被抽干或者更换需要排气泡。
Ø具体操作:
首先开泵,将注射器插入右侧主泵,旋松主泵的旋钮,此时有液体从泵中流出,流到8ml左右关闭泵,拧紧主泵旋钮,取出注射器,弹出注射器内气泡,然后将注射器插回主泵,打开左侧副泵旋钮后,再缓慢打开主泵旋钮,慢慢将注射器内液体推入泵内,从副泵流出,旋紧两个泵的旋钮。
六、测柱头压:
要检查是否是柱子被堵塞时要分别测不地方的柱头压力。
Ø正常的柱头压力值:
过六通阀到保护柱前正常压力100psi以下;过保护柱后压力小于500-600psi;过分析柱后压力小于1500psi;系统正常压力1300-1500psi以下。
七、分离柱的存储与清洗
Ø分离柱的储存:
在存储前用淋洗液正常运行至少10min,取下保护柱和分离柱,用死接头将分离柱/保护柱两端封堵
Ø分离柱的清洗:
按清洗液—色谱柱—保护柱的流路进行清洗,流速为1.0ml/min;清洗程序及时间为:
去离子水-15min,清洗液-60min,去离子水-15min,淋洗液-30min
Ø清洗液的类型
阴离子柱:
①低价态亲水离子污染(常用——X10倍淋洗液
②高价态疏水离子污染——80%乙腈/20%200mMNaCl(用HCl调节pH=2.0)
③金属离子污染——0.1M草酸
阳离子柱
①高价阳离子/酸溶性污染——10mMHCl(15min)
——1MHCl(60min)
——10mMHCl(15min)
②疏水性阳离子/有机污染——10%100mMHCl/90%乙腈(30min)
八、抑制器的存储与清洗
Ø抑制器的存储:
Ø抑制器的清洗:
以1.0mL/min的流速,按清洗液-ELUENTIN-ELUENTOUT-REGENIN-REGENOUT流路进行清洗
Ø清洗液的类型
阴离子抑制器
①金属污染或沉淀——0.1MKCl/1.0MHCl(30min)
——去离子水(10min)
——0.2N硫酸
——淋洗液(10min)
②有机污染——10%1.0MHCl/90%ACN(30min)
——去离子水(10min)
——0.2N硫酸
——淋洗液(10min)Na2CO3
Ø阳离子抑制器
①金属污染或沉淀——1.0MMSA(30min)
——去离子水(10min)
——0.2NNaOH
——淋洗液(10min)
②有机污染——10%1.0MMSA/90%ACN(30min)
——其余同上