丹心舒胶囊中三七和丹参的有效成分含量测定.docx
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丹心舒胶囊中三七和丹参的有效成分含量测定
丹心舒胶囊中三七和丹参的有效成分含量测定
【摘要】目的建立丹心舒胶囊中三七和丹参有效成分的含量测定方法。
方法采用HPLC法测定本品中三七中人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、三七皂苷R1及丹参中丹参酮ⅡA的含量。
结果人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、三七皂苷R1线性范围分别依次为～μg、～μg、～μg；平均回收率分别为％、％、％，RSD分别为％、％、％；丹参酮ⅡA线性范围为～μg,平均回收率为％，RSD为％。
结论本方法简便可靠，结果稳定，可用于丹心舒胶囊中三七和丹参的有效成分的含量测定。
【关键词】丹心舒胶囊人参皂苷Rg1Rb1三七皂苷R1丹参酮ⅡA含量测定
AnalysisoftheactivecompoundsofPanaxnotoginsengandSalviaemiltiorrhizaeinDanxinshucapsules
Abstract:
ObjectiveToanalyzetheactivecompoundsofPanaxnotoginsengandSalviaemiltiorrhizaeinDanxinshucapsules.MethodsHPLCwasusedtoanalyzethecontentsofginsenosideRg1andRb1,notoginsenosideR1andtanshinoneⅡAinDanxinshucapsules.ResultsThelinearrangesofginsenosideRg1,ginsenosideRb1,notoginsenosideR1andtanshinoneⅡAwere～,～,～and～μgwithaveragerecoveriesof％（RSD=％）,％（RSD=％）,％（RSD=％）and％（RSD=％）,respectively.ConclusionThemethodissimple,reliableandstable,whichcouldbeusedforthequalitycontrolofDanxinshucapsules.
Keywords:
Danxinshucapsule；ginsenosideRg1;ginsenosideRb1；notoginsenosideR1;tanshinoneⅡA
丹心舒胶囊由三七、丹参、桃仁等十一味药组成，本方为活血化瘀、通窍止痛类药物,并能扩张血管，增加冠状动脉血流量，用于冠心病、心绞痛等症。
三七和丹参为方中主药，三七中的主要有效成分是人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、三七皂苷R1，已有文献报道采用HPLC法测定以上成分的含量来控制制剂的质量［1-7］。
孙树周［7］和廖华卫［8］等报道采用HPLC法对丹参中丹参酮ⅡA进行含量测定。
本文采用HPLC法，同时对丹心舒胶囊中的三七总皂苷和丹参酮ⅡA进行了含量测定，可用于控制丹心舒胶囊的质量，同时也可作为丹心舒胶囊的质控标准。
1仪器与试药
Waters2695型高效液相色谱仪（美国Waters公司）；PDA检测器；DiamonsilC18柱；KQ100型超声波清洗器。
人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、三七皂苷R1、丹参酮ⅡA对照品均购自中国药品生物制品检定所；甲醇；乙腈；屈臣氏蒸馏水。
丹心舒胶囊。
2人参中有效成分含量测定
色谱条件
色谱柱：
DiamonsilC18柱；以乙腈为流动相A，水为流动相B，进行二元梯度洗脱，洗脱程序：
0→120min流动相A19%→36%，流动相B81%→64%；流速：
mL·min-1；柱温：
30℃；检测波长：
203nm。
对照品溶液制备
精密称取经五氧化二磷减压干燥的人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1及三七皂苷R1对照品适量，分别加甲醇制成：
人参皂苷Rg1质量浓度为mg/mL、人参皂苷Rb1质量浓度为mg/mL，三七皂苷R1质量浓度为mg/mL的溶液，将三者混合作为对照品溶液。
供试品溶液制备
取样品适量，研细，混匀，取约g，精密称定，置50mL量瓶中，加甲醇适量，超声30min，使三七总皂苷溶解后，加甲醇至刻度，滤过，取续滤液，即得。
阴性溶液制备
按处方比例依法配制除三七以外的阴性样品，按“”项方法制备三七阴性溶液。
取以上样品进行测定，结果显示阴性对照色谱中，人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1和三七皂苷R1峰附近无其他峰影响。
结果见图1。
A.对照品溶液B.供试品溶液C.阴性溶液
图1三七总皂苷的HPLC图谱
HPLCofPanaxNotoginsenySaponins
线性关系的考察
分别精密吸取人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1和三七皂苷R1对照品溶液2、4、8、12、16、20μL，按上述的HPLC条件分析，以峰面积对进样量（m）进行线性回归，得回归方程分别为：
人参皂苷Rg1线性方程为A=，r=，线性范围为～μg；人参皂苷Rb1线性方程为A=+，r=，线性范围为～μg；三七皂苷R1线性方程为A=，r=，线性范围为～μg。
精密度试验
分别精密吸取人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1和三七皂苷R1对照品溶液，于测定条件下进样10μL，分别重复进样5次。
以3种组分峰面积分别计算，结果人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1和三七皂苷R1的RSD分别为%、%、%，结果表明仪器精密度良好。
重现性试验
精密称取丹心舒胶囊内容物（批号050806）共5份，按“”项制备供试品溶液，取供试品溶液20μL，按“”项色谱条件测定，按外标法以峰面积计算样品含量。
结果样品中测得人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1和三七皂苷R1平均含量分别为2．67、、mg/g，人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1和三七皂苷R1的RSD分别为％，％、％。
测定结果表明，本方法重现性符合要求。
稳定性试验
精密称取丹心舒胶囊内容物（批号050806），分别按“”项制备供试品溶液，分别在0、2、4、8、10、24h进样，结果人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1和三七皂苷R1的RSD分别为%、%、%。
表明供试品溶液在24h内稳定。
回收率试验
精密称取已知含量的丹心舒胶囊样品6份（批号050806），分别精密加入人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1和三七皂苷R1对照品适量，按“”项下方法制备供试品溶液并在上述色谱条件下测定，计算回收率，结果见表1～3。
样品测定
取3批丹心舒胶囊内容物，分别按“”项下方法进行处理样品及测定，结果批号为050806、050807、050808的样品测得的三七总皂苷含量分别为9、2、1mg/粒。
表1人参皂苷Rg1加样回收率试验
RecoverytestofginsenosideRg1
表2人参皂苷Rb1加样回收率试验
TherecoverytestofginsenosideRb1
表3三七皂苷R1加样回收率试验
RecoverytestofnotoginsenosideR1
3丹参中有效成分丹参酮Ⅱ的含量测定
色谱条件［9］
色谱柱：
DiamonsilC18柱；流动相：
甲醇水（体积比75∶25）；流速：
mL·min-1；柱温：
30℃；检测波长：
270nm。
对照品溶液制备
精密称取丹参酮ⅡA对照品mg，置50mL棕色量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀；精密量取2mL，置10mL棕色量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得。
供试品溶液制备
取样品适量，研细，取g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加甲醇50mL，密塞，称定重量，加热回流提取1h，放冷，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
阴性溶液制备
按处方比例依法配制除丹参以外的阴性样品，按““项方法制备丹参阴性溶液。
结果显示阴性对照色谱中丹参酮ⅡA峰附近无其他峰影响。
结果见图2。
线性关系的考察
精密吸取丹参酮ⅡA对照品溶液2、4、8、12、16、20μL，按上述的HPLC条件分析，以峰面积对进样量（m）进行线性回归，得丹参酮ⅡA回归方程为A=＋，r=，线性范围为～μg。
精密度试验
精密吸取丹参酮ⅡA对照品溶液，于测定条件下进样10μL，分别重复进样5次。
以丹参酮ⅡA峰面积计算，其RSD为%；结果表明仪器精密度良好。
重现性试验
精密称取丹心舒胶囊内容物（批号050806）共5份，按“”项方法制备供试品溶液，取供试品溶液20μL，按“”项色谱条件测定，按外标法以峰面积计算样品含量。
结果样品中测得丹参中丹参酮ⅡA平均含量为mg/g，RSD为％。
测定结果表明，本方法重现性符合要求。
A丹参酮ⅡA对照品B供试品溶液C阴性溶液
图2丹参酮ⅡA的HPLC图谱
HPLCofTanshinoneⅡA
稳定性试验
精密称取丹心舒胶囊内容物（批号050806），分别按“”项制备供试品溶液，分别在0、2、4、8、10、24h进样，结果丹参酮ⅡA的RSD为%，表明供试品溶液在24h内稳定。
回收率试验
精密称取已知含量的丹心舒胶囊样品6份（批号050806），分别精密加入丹参酮ⅡA对照品适量，按“”项下方法制备供试品溶液并在上述色谱条件下测定，计算回收率，结果见表4。
3．10样品测定
取3批丹心舒胶囊内容物，分别按“”项下方法进行处理样品及测定，结果批号为050806、050807、050808的样品测得的丹参酮ⅡA含量分别为、、mg/粒。
表4丹参酮ⅡA加样回收率试验
RecoverytestoftanshinoneⅡA
4讨论
丹参酮ⅡA是丹参中主要脂溶性活性成分，为全面考察丹参有效成分在成品中的转移率，我们测定了丹参药材和丹心舒胶囊中丹参酮ⅡA的含量，胶囊中含量为％，按药材含量折算转移率为%，因此可作为丹心舒胶囊的质控指标。
丹参酮ⅡA是丹参治疗冠心病的有效成分之一，其水溶性差，遇光和热不稳定。
在提取过程中，提取时间、温度、方法等对其含量都有影响，其损失随加热温度升高和加热时间延长而增加,所以温度成为影响丹参酮ⅡA提取效率的重要因素，同时本品中的含量高低也与提取工艺有关。
【参考文献】
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［2］邸峰，孙毅坤．高效液相色谱法测定复方丹参片中三七皂甙R1的含量［J］．中国中药杂志，1996，21（11）：
672．
［3］何夏秋，杨蕾，贺建华，等．用HPLC法测定三七及益尿通胶囊中人参皂苷Rg1的含量［J］．中国中药杂志，2001，26
（1）：
37．
［4］王强，江英桥，马世平，等．高效液相色谱法测定三七中三七皂苷R1的含量［J］．中国中药杂志，2000，25（10）：
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［5］权丽辉，赵淑平，薛岚，等．HPLC测定鑫森脑泰粉针剂中三七皂苷R1的含量［J］．中草药，2001，32（6）：
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［6］李性天，周密妹，耿立坚，等．高效液相色谱法梯度洗脱测定三七中三七皂苷R1的含量［J］．中国医院药学杂志，2000，20（12）：
728．
［7］孙树周.HPLC法测定复方丹参片中丹参酮ⅡA的含量［J］.广东药学院学报，2002，18：
201.
［8］廖华卫，朱彩燕，邓金梅，等.RP-HPLC测定血脉通片中丹参酮ⅡA的含量［J］.广东药学院学报，2007，23：
129.
［9］国家药典委员会.中华人民共和国药典：
2005年版一部［S］.北京：
化学工业出版社，2005：
52.
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