CovarisM220DNAShearing用户培训手册pdfdoc.docx
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CovarisM220高性能样品处理系统
培训手册
基因有限公司生命科学组
二o一二年三月
一、CovarisM220高性能样品处理系统技术特点二、系统安装条件
三、培训所需试剂设备及样品
四、安装及调试安排
五、培训程序及时间安排
六、仪器及试剂系统介绍
七、实验操作流程
八、仪器使用注意事项
九、常见问题处理
十、附录
一．Covaris高性能样品处理系统技术特点
Covaris高性能样品处理系统是在专利技术——自动声波聚焦（AFA）技术的基础上建
立起来的样品处理平台。
该技术整合了非线性、高强度、汇聚性声学冲击波和高级计算机控
制系统，其圆盘状传感器可将声波能量聚焦在样品上，通过等温、非接触的方式对样品进行
声学匀浆、分解和混匀。
而且，此系统的聚焦声能是可控，可根据应用范围和样品量选择波频率和波形，以控制聚焦带的尺寸和声波强度，且声学优化的样品容器也可根据声波聚焦带
进行调整。
另外，系统处理的水浴环境可维持均一的处理温度，适用于对温度敏感的生物样
本。
技术原理
介于20Hz～20kHz的机械波振动在弹性介质中的传播就形成声波，介于20kHz～
500MHz的称为超声波，超声波的传播速度就是声波的传播速度，而超声波具有波长短，
易于定向发射和会聚等优点。
AFA技术利用几何聚焦声波能量，通过0.5MHz的球面固态超声传感器可将波长为1mm的声波能量聚焦在样品上，不仅可以控制波形，而且自动聚焦的能量无损失，且可直接作用于管内样品上。
系统特点：
1.非接触式样品处理，无污染和交叉反应，且不用清洁探头
2.等温处理，不会产生过热现象而破坏样本的生物活性
3.可精确控制样本处理过程，重复性高
4.自动聚焦的能量无损失，直接作用于管内样品上
应用领域
适用100bp-3kb大小的DNA目的片段剪切
二．系统安装条件
1.位置要求：
稳定水平的操作平台放置设备，远离热源，避免阳光直射
2.空间及载重要求：
操作平台尺寸（长×宽×高）：
12”Wx17”Dx10”H（30cm43cmxx25cm）（平台下预留空间放置环路冷却/加热装置），仪器周围要留出至少3cm空隙，以方便散热。
操作平台载重：
10kg
3.温度要求：
15-30℃
4.水浴要求：
双蒸水或去离子水，仪器操作温度范围6-40℃（要求水浴范围2-55℃）
用户如自备水浴，需要准备冷却/加热循环装置所需的软管；
建议采用covaris水环境系统（WCS）来维持高通量应用过程的水纯度。
5.电源：
100-240VAC500VA,50-60Hz。
6.电脑：
操作系统要求MicrosoftWindows7
7.其它：
通用插头接线板
三．培训所需试剂设备及样品
尊敬的用户，培训实验以DNAShearingwithmicroTUBEs（<1.5kbfragments）为例，请提前准备以下物品，我公司培训人员将使用以下物品进行仪器使用的培训工作。
1.所需样品和试剂
λDNA或基因组DNA（全长>50kb，浓度20-35ng/ul，体积130ul，A260/A280=1.8-2.0）：
将λDNA用TrisEDTA（pH8.0）buffer稀释到20ng/ul，使用前可用核酸测定仪进行浓度及
纯度核对，注意保证完全溶解。
500bp及2kb的ladder（DL2000），TrisEDTA（pH8.0）buffer，1×TAE电泳缓冲液，DNA上样缓冲液（溴酚兰），1%琼脂糖胶，溴化乙锭（EB）。
2.耗材
（1）holder（PartNo.500114）一个；
（2）（6x16mm）100μltubewithAFAfiber&snap-caps（PartNo.520045）若干；
（3）PrepStation（PartNo.500142）一个。
或者准备一个试剂盒DNAShearingKITSsnap-cap（PartNo.500117），其中包括了以上三种耗材。
3.所需其他设备和耗材
凝胶成像议，离心机，核酸电泳相关设备，核酸测定仪（分光光度机），200ul移液枪及
Tip头若干，离心管，冰盒，乳胶手套。
四、安装及调试安排
1.根据合同开箱验货，并明示到货情况
2.系统安装
3.系统调试及校准
五、培训程序及时间安排
请安排2-4名实验室长期工作人员参加培训，培训时间预计为一天
1.基本原理讲解及讨论（1小时）
2.软件基本功能综述及使用培训（2小时）
3.用户实际操作及实验培训（4小时）
4.软件和仪器操作问题答疑（1小时）
六．仪器及试剂系统介绍
1．基本原理讲解
2.仪器系统组成和工作原理讲解
3.仪器基本注意事项
七．实验操作流程
以下是关于使用Covaris高性能样品处理系统的快速操作指南，便于初学者能快速掌
握软件的主要功能。
关于软件应用的进一步的深入，请参见随机所带的英文操作使用手册。
1.开机检查
1）检查固定在机器顶部的电脑与机器的线路连接妥当
2）确认水盘（DripTray）放置机器下方
3）插入操作管支架（TubeHolder）
2.水浴设置
将操作管支架（TubeHolder）顶部的滑行砝码（SlidingWeight）拉起并旋转90°C，用随机水瓶（washbottle）将约15ml蒸馏水或去离子水加入支架中心，水位到达或超过运行标记（“RUN”marker）为宜。
3.样品放置
1）将操作管支架（TubeHolder）顶部的滑行砝码（SlidingWeight）拉起并旋转90°C
2）放入样品管，旋转并放下滑行砝码，使之压住样品管，然后关闭安全门
4.开机
先打开仪器主机，然后开启电脑和软件。
5.软件主界面
点击软件，出现以下界面：
主菜单：
Run–编辑或选择运行方法
History–查看系统操作历史
Setup–用户系统设置
Maintenance–厂家或维修人员的仪器参数设定
Help–用户操作指南
About–系统配置信息
6.Run界面参数设置
点击Method，下拉菜单显示编辑过的Method信息，可进行Method选择，新建和编辑
编辑界面如下：
操作按钮：
AddStepInsertStepEditStepRemoveRemoveAllDuplicateGroupStepsMoveUpMoveDown
在操作方法末尾添加步骤
在选定的步骤前后添加新步骤
编辑选定的步骤
删除选定的步骤
删除所有步骤
复制选定的步骤
新建一个包含多个选定步骤的步骤集。
可设定重复操作的次数。
将选定步骤上移
将选定步骤下移
点
AddStep
步骤，有以下几项需要选择：
Duration持续时间：
操作样品的时间，设置范围0-3600sec
PeakIncidentPower最高入射功率：
作用在样品上瞬时超声波功率，设置范围
2.5到50瓦。
DutyFactor工作系数：
超声波作用于样品的时间占总时间段的百分数，
设置范围0.1%-50%。
CyclesperBurst超声波作用于样品过程中超声波能量传递的数目，设置范围
50-1000。
点Delay步骤，设定操作的延迟时间，有利于两次不同操作间的样品沉降
点Prompt步骤，编辑特定操作信息，可供操作者暂停操作，确认下一步是否继续
点Group步骤，可设定重复操作的次数
7.启动程序
1）在参数设置界面新建或修改一个操作
点击软件Run界面的Method，点击New新建或在列表中选择一个已有的操作方法后点
Edit。
按照实际需要设置相关参数（具体参数见附录）。
2）Run界面中运行程序
在Run界面点击“Run”按钮，运行程序。
8.关闭软件和机器
1）用配套注射器清空水浴；若水盘（DripTray）有水，需倒掉并用绒布擦干。
2）关闭软件，然后关闭仪器主机，最后关闭电脑。
八．仪器使用注意事项
1.实验室的室温应保持在15-30℃，不宜过冷。
2.在没有水浴的情况下，禁止运转程序，以免损坏传感器。
3.水浴只能使用除双蒸水或去离子水。
4.每天使用完毕，必须清空水浴，擦干水盘，以防藻类等微生物滋生。
5.操作时关闭安全门。
九．常见问题处理
故障
可能原因
可能解决方案
1.
安全门没关好；
重新关闭前部安全门；
门的状态和水位状态不是
2.
1.
水位太低；
将水加至满刻度线；
绿色
3.
2.
操作管支架放偏，导致水位
确认操作管支架放好
3.
过低
仪器连接不上，软件不识
1.
1.
检查USB连接；
电缆松了或坏了；
重启机器和软件；到Setup
别
2.
2.
软件无法通过USB识别机器
界面手动重连
1.关闭其他软件
软件系统不响应Windows资源被其他软件占用2.重启计算机；
3.重启系统
水加满仍显示水位过低水位感应器受阻清理水位检测通道
十、附录
一、仪器相关耗材：
S-series
E-series
PartNo.
Product
Description
Holder
Rack
520045
microTUBEsnap-cap（100ul）
Glasstubewithsnap-cap
500111
For<1.5kbDNAfragments
500114
Glasstubewithcrimp-cap
500182（24）
520052
microTUBEcrimp-cap（100ul）
For<1.5kbDNAfragments
500143（96）
520064
miniTUBE-CLEAR（200ul）
PlastictubewithAFAsurface
For2.0kbDNAfragments
500206
500205
PlastictubewithAFAsurface
520065
miniTUBE-Blue（200ul）
For3.0kbDNAfragments
二、操作参数
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