阿司匹林实验.docx

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阿司匹林实验

阿司匹林片剂的制备实验

Ⅰ阿司匹林的合成

【目的】1.熟悉酚羟基酰化反应的原理，掌握阿司匹林的制备方法。

2.掌握抽滤装置的安装和操作，并学会利用重结晶纯化固体有机物。

【原理】

【仪器和药品】

仪器：

电磁搅拌器，温度计,搅拌子，三口烧瓶，单口圆底烧瓶，锥形瓶，球形冷凝管，直形冷凝管，酒精灯，石棉网，橡皮管，电子天平，胶头滴管，铁架台，量筒，玻璃棒，移液管，烧杯，布氏漏斗，真空泵，滤纸，吸虑瓶，烘箱，熔点仪，T形连接管等。

药品：

水杨酸，乙酸酐，98%浓硫酸，饱和碳酸氢钠溶液，浓盐酸，乙醚，石油醚，蒸馏水，冰块，1%FeCl3等。

【内容】

因最终制备阿司匹林片剂时所需阿司匹林原料量过大，难以一次性合成，故整个合成过程分两批进行（如下），操作步骤相同。

1.新蒸乙酸酐：

量取乙酸酐60mL放入100mL的圆底烧瓶中进行普通蒸馏，收取137—140℃的馏分备用。

酒精灯

2.加料：

在250mL三口瓶中加入34.4g（0.249mol）水杨酸、48mL（0.508mol）新蒸乙酸酐和56滴浓硫酸（约2.8ml）。

3.酰化反应：

振摇三口瓶使水杨酸全部溶解（如不溶解则需补加乙酸酐和浓硫酸）。

安装回流装置，在磁力搅拌器中加热控制温度在80—85℃，同时保持低速匀速搅拌，反应20min后用1%FeCl3检查，当反应液不再呈现紫色时停止反应。

反应液稍冷却（50℃以下）后均分成几份倒入各烧杯中，先用100ml冰水水解过量的乙酸酐，冷却至室温后，即有乙酰水杨酸结晶析出（若不结晶，可用玻璃棒摩擦瓶壁）。

然后再加入400mL冰水，将混合物继续在冰水浴中冷却使结晶完全。

抽滤，结晶用少量冷蒸馏水洗涤3次，抽干后将粗产物转移至表面皿上，自然晾干得粗产品，称量。

4.重结晶：

将粗产品转移至500mL烧杯中，搅拌下加入400mL饱和碳酸氢钠溶液，直至无二氧化碳气泡产生，抽滤，用少量水冲洗漏斗，合并滤液（弃去滤渣）并倒入预先盛有将80mL浓盐酸和160mL水配成的溶液的烧杯中，搅拌均匀，使溶液PH呈弱酸性，即有乙酰水杨酸沉淀析出。

将烧杯置于冰水浴中冷却，使结晶完全。

抽滤，用冷蒸馏水洗涤2—3次，抽干后，将结晶移至表面皿上，自然风干，称重。

5.粗品精制：

将阿司匹林粗品转入250ml三口瓶中按1g粗品加入5ml乙醚,在25℃磁力搅拌器中溶解，抽滤去除不溶杂质。

然后在滤液中加入等量的石油醚并过量10ml。

（利用乙醚、石油醚能互溶，乙醚不仅溶解石油醚而且能溶解水杨酸和阿司匹林但石油醚只溶解乙醚和水杨酸不溶解阿司匹林的原理将阿司匹林晶体析出）。

乙酰水杨酸晶体开始析出后立即将锥形瓶放入冰水浴中，直至阿司匹林晶体全部析出。

抽滤得到的滤渣放入烘箱中于60℃下干燥2小时得阿司匹林原料药纯产品，白色针状结晶，并称重计算收率。

Ⅱ乙酰水杨酸分析

【目的】掌握乙酰水杨酸的鉴别方法、杂质检查方法以及含量测定。

【原理】1.乙酰水杨酸加热水解形成水杨酸，可与三氯化铁试液反应，呈紫堇色。

2.乙酰水杨酸与碳酸钠试液加热水解，生成水杨酸钠和醋酸钠，加过量硫酸酸化后，析出白色水杨酸沉淀并放出醋酸臭气。

3.乙酰水杨酸红外吸收图谱应与标准图谱（如下）一致。

乙酰水杨酸标准红外吸收图

4.含量测定：

【仪器和药品】

仪器：

千分之一天平，万分之一天平，酸碱滴定管，恒温水浴箱，烧杯，量筒，玻璃漏斗，玻璃棒，玛瑙研钵，红外分光光度计，红外灯，压片模具等。

药品：

FeCl3试液，碳酸钠试液，稀硫酸，KBr固体，无水氯仿，无水乙醇，5%乙醇，稀硫酸铁铵溶液，冰醋酸，比色用氯化钴液，比色用重铬酸钾液，比色用硫酸铜液，蒸馏水，标准铅溶液，醋酸盐缓冲液（pH3.5），硫代乙酰胺试液，乙醇，氢氧化钠滴定液（0.1mol/l），酚酞指示液等。

【鉴别】

1.性状

（1）外观：

本品应为白色针状晶体

（2）熔点：

用显微熔点仪测定该纯产品的熔点（mp.135—138℃）。

测定熔点时，应先将热载体加热至120℃左右，然后放入本品测定。

2.FeCl3反应

取该纯产品细粉适量（约0.1g），加水10ml,煮沸，放冷，加FeCl3试液1滴，即显紫堇色。

3.碳酸钠试液

取该纯产品细粉适量（约0.1g），加碳酸钠试液10ml，振摇后，放置5min，过滤，滤液煮沸2min，放冷，加过量稀硫酸，即析出白色沉淀，并发生醋酸臭气。

4.红外光谱鉴定

A、纯KBr空白片

取少量KBr固体，在玛瑙研钵中充分磨细，并将其在红外灯下烘烤10min左右。

取出约150mg装于干净的压片模具内（均匀铺撒并使中心凸起），在压片机上于29.4MPa压力下压1min，制成透明薄片。

将此片置于参比光路中，从4000~600cm-1进行波数扫描。

B、乙酰水杨酸样品

取1~2mg乙酰水杨酸产品（已经经过干燥处理），在玛瑙研钵中充分研磨后，再加入200mg干燥的KBr粉末，继续研磨到完全混合均匀，并将其在红外灯下烘烤10min左右。

取出150mg按照步骤1同样方法操作，得到吸收光谱，与对照图谱对比，应一致。

【检查】

1.溶液的澄清度取本品0.50g，加热至约45℃的碳酸钠试液10ml溶解后，溶液应澄清。

2.游离水杨酸取本品约0.1g,加无水氯仿3ml，不断搅拌2min,用无水氯仿水润湿的滤纸过滤，滤渣用无水氯仿洗涤3-4次，每次1ml，合并滤液与洗液，在室温下通风挥发至干；残渣用无水乙醇4ml溶解后，移至100ml量瓶中，用少量5%乙醇洗涤容器，洗液并入量瓶中，加5%乙醇稀释至刻度，摇匀，分取50ml,立即加新制的稀硫酸铁铵溶液[取盐酸溶液（9→100）1ml,加硫酸铁铵指示液2ml后，再加水适量使成100ml]1ml,摇匀，30s内显色，与对照液（精密称取水杨酸0.1g，置1000ml量瓶中，加水溶解后，加冰醋酸1ml,摇匀，在加水至刻度，摇匀）1.5ml，加无水乙醇2ml与5%乙醇使成50ml,再加上述新制的稀硫酸铁铵溶液1ml,摇匀比较，不得超过0.1%。

3.易炭化物取本品0.5g，缓缓加入至含硫酸[含H2SO494.5%-95.5%（g/g）]5ml的比色管中，振摇使溶解，静置15分钟后观察，溶液如显色，与对照液（取比色用氯化钴液0.25ml，比色用重铬酸钾液0.25ml，比色用硫酸铜液0.40ml,加水使成5ml）比较，不得更深。

4.干燥失重取本品，置相同条件下易干燥至恒重的扁形称量瓶中，除了另有规定外，在60℃干燥至恒重（供试品连续两次干燥后称重差异在0.3mg以下）减失重量不得过0.5%。

干燥失重%=[（称量瓶与加入样品重-恒重后称量瓶与样品重）/样品重]×100%。

5.重金属取25ml纳氏比色管两支，甲管加标准铅溶液（10μgPb/ml）2.0ml,醋酸盐缓冲液（pH3.5）2ml,加水稀释成25ml;取本品1.0g,加乙醇23ml溶解后，加醋酸盐缓冲液2ml。

各管分别加硫代乙酰胺试液2ml，摇匀，再放置2min,同置白纸上，供试液先出的颜色与标准铅溶液比较，含重金属不得过百分之十。

【含量测定】取本品约0.4g，精密称定，加中性乙醇（对酚酞指示液显中性）20ml溶解后,加酚酞指示液3滴，滴加氢氧化钠滴定液（0.1mol/l）至溶液显粉红色。

每1ml氢氧化钠滴定液（0.1mol/l）相当于18.02mg的C9H8O4。

Ⅲ乙酰水杨酸的镇痛作用

【目的】了解热板法的实验原理，观察阿斯匹林的镇痛作用。

【原理】小鼠的足底无毛，皮肤裸露，在温度55±0.5℃的金属板上产生疼痛反应，表现为舔后足，踢后腿等现象。

阿斯匹林可提高痛阈，推迟小鼠疼痛出现时间。

【器材】恒温水浴箱、热板槽、大烧杯（250-500ml）2个、天平、鼠笼，注射器（1ml）、秒表1个。

【药物】0.4%阿司匹林悬液、生理盐水、30mg/ml苦味酸溶液。

【动物】雌性小鼠。

【方法】

1、将恒温水浴箱内加水至没过烧杯底部1cm，调节水温至55±0.5℃。

2、筛选并测定正常痛阈将小鼠放入烧杯内立即用秒表记录时间，密切观察小鼠反应，以舔

后足为痛觉指标。

记录痛阈时间值（从小鼠放入热板烧杯内到出现舔后足）。

每只小鼠测

痛阈2次（间隔3min），取其平均值为正常痛阈（药前痛阈s）。

凡在30s内不舔后足或痛阈小于10s者弃去。

3、分组给药，并记录给药时间。

甲组用0.4%阿司匹林悬液灌胃0.15ml/10g；乙组用同等剂量的生理盐水。

4、测痛阈变化值给药后15、30、60min各测痛阈1次，对60s内不舔足的小鼠应立即取出来，痛阈按60s计算。

【结果】

1、综合全实验室数据，计算出各组痛阈的平均值（X）填入下表

组别动物数痛阈值（s）

药前药后15min药后30min药后60min

乙酰水杨酸

生理盐水

2、计算各组动物用药后15、30、60min时的痛阈提高百分率（P）

P=药后痛阈值均数-药前痛阈值均数×100％

药前痛阈值均数

3、以时间（min）为横坐标，痛阈提高百分率为纵坐标，绘制各组的时-效曲线。

【注意事项】

1、本实验应选用雌性小鼠，雄性小鼠遇热时阴囊松弛下垂，与热板接触影响实验结果。

2、室温应控制在13±18℃，此温度小鼠对痛反应较稳定。

3、正常痛阈≥30s、≤10s以及喜跳跃的小鼠均应弃用。

4、测痛阈时若60s仍无反应，应立即取出小鼠，以免烫伤足趾，且痛阈按60s计。

Ⅳ阿司匹林片的制备

【目的】

【原理】

【材料与设备】

【制备】

【处方】

阿司匹林20g

淀粉2g

柠檬酸适量

10%淀粉浆适量

滑石粉适量，制成45片

湿法制粒压片法：

Ⅴ阿司匹林片的质量检查

【目的】掌握片剂质量检测方法（硬度、崩解时限、脆碎度、重量差异等）

【原理】

根据10版药典规定对片剂进行质量检查并判断是否合格

【材料及仪器】

材料：

阿司匹林片剂

仪器：

硬度计、脆碎度测定仪、崩解仪、电子天平

【内容】

1.硬度

用硬度仪测定，将药片径向固定在活动柱杆和底片之间，活动柱杆借助弹簧对片剂径向加压，当片剂破碎时，活动杆的弹簧停止加压，仪器刻度盘上所指示的压力即为片剂的硬度。

2.脆碎度

片重为0.65g或以下者取若干片，使其总重约为6.5g;片重大于0.65g者取10片。

用吹风机吹去脱落的粉末，精密称重，置圆筒中，转动100次。

取出，同法除去粉末，精密称重，减失重量不得过1%，且不得检出断裂、龟裂及粉碎的片。

本试验一般仅作1次。

如减失重量超过1%时，应复检2次，3次的平均减失重量不得过1%,并不得检出断裂、龟裂及粉碎的片。

3.崩解时限

将吊篮通过上端的不锈钢轴悬挂于金属支架上，浸入1000ml烧杯

中，并调节吊篮位置使其下降时筛网距烧杯底部25mm，烧杯内盛有温度为37℃

±1℃的水，调节水位高度使吊篮上升时筛网在水面下15mm处。

除另有规定外，取供试品6片，分别置上述吊篮的玻璃管中，启动崩解仪进

行检查，各片均应在15分钟内全部崩解。

如有1片不能完全崩解，应另取6片

复试，均应符合规定。

4.片重差异

取供试品20片，精密称定总重量，求得平均片重后，再分别精密称定每片的重量，每片重量与平均片重相比较（凡无含量测定的片剂,每片重量应与标示片重比较）,按表中的规定，超出重量差异限度的不得多于2片，并不得有1片超出限度1倍。

【结果及讨论】

表1外观、硬度、抗张强度

编号

外观

直径×厚度

（mm）

硬度

（kg）

抗张强度

（MPa）

评价及原因分析：

1

2

3

4

5

6

平均

Ⅵ片剂的含量测定

两步滴定法：

取本品20片，精密称定，研细，精密称取片粉适量（约相当于阿司匹林0.3g），加中性乙醇20ml,振摇使阿司匹林溶解，加酚酞指示液3d，滴加氢氧化钠滴定液（0.1mol/l）至溶液显粉红色。

加定量过量的氢氧化钠滴定液（0.1mol/l）40ml，置水浴上加热15min并时时振摇，迅速放冷至室温，用硫酸滴定液（0.05mol/l）滴定剩余的碱。

将滴定结果用空白试验校正，根据消耗的滴定液体积及滴定度计算含量。

（每1ml氢氧化钠滴定液（0.1mol/l）相当于18.02mg的C9H8O4）

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组员：

李沙沙20093202

曾琴20093247