自身抗体检测项目及临床意义.docx

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自身抗体检测项目及临床意义

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一、抗核抗体

）泛指抗各种核成分的抗体，是一种广泛存，ANA抗核抗体（antinuclearantibodies可以。

ANAIgD和IgE，也有ANA的性质主要是IgGIgM和IgA，甚至在的自身抗体。

主要存在于血清中，也可与不同来源的细胞核起反应，无器官特异性和种属特异性。

ANA存在于其他体液如滑膜液、胸水和尿液中。

在许多研究报告中，但也出现在其他许多自身免疫病中，在SIE患者的滴度较高，ANA作为自身免疫甚至自身免疫病存在的依据。

这种现象的机制尚未明了，有待ANA都将检出于进一步研究。

的类型及意义ANA

（一）

。

ANA由于细胞核成分的复杂性，不同成分的抗原性也不同；因此就会有多种不同的

抗原存在不DNPDNA和组蛋白组成。

由于1．抗核蛋白抗体核蛋白抗原（DNP）由和抗体通常不完全被DNPDNA溶性和可溶性两个部分，可分别产生相应的抗体。

不溶性组蛋白所吸收，它是形成狼疮细胞的因子；可溶性抗原存在于各种关节炎病人的滑膜液中，病人的滑膜液中。

其相应抗体也出现于RA

DNAnDNA）抗体，或称抗双链抗体可以分为两大类：

①抗天然DNA（2．抗DNA抗dsDNAssDNA）抗体。

抗（（dsDNA）抗体；②抗变性DNA抗体，或称抗单链DNA病人该抗体阳性，效价较高，并与病％的活动期SLE70SLE有较高的特异性，％～90体对抗体可见于多种疾病中，特异性较差。

情有关。

抗ssDNA

）多从动物的胸腺中提取。

先将胸腺匀浆并破ENAENA抗体可提取性核抗原（．抗3ENA再经盐水或磷酸盐缓冲液处理后，很容易从胞核中提取出来。

碎细胞，分离出细胞核；可分为十几种，现仅介绍几种主，对核糖核酸酶敏感。

近年来的研究表明，DNAENA不含及其相应抗体。

ENA要的

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561h即核糖核蛋白，对核糖核酸酶和胰蛋白酶敏感，加热PNP抗体：

PNA

（1）抗抗体对混合性结缔组织病PNPPNP抗体多见于混合性结缔组织病。

高效价的抗变性。

抗有诊断意义，

患者中发现。

SIEPNP抗体可在而低效价的抗

姓的患者血中首次发现，便以其名字的前两个SmithSm抗体：

该抗体在一名

（2）抗但经碘酸盐及胰蛋均不敏感，及RNaseSm抗原系非核酸性糖蛋白，对DNase字母命名。

％～的特异性标志之一，但阳性率偏低，约为30白酶处理后可被水解。

抗Sm抗体是SLE抗和抗Sm％；可能是SIE的一种回忆性抗体，故在非活动期亦可检出。

若将抗dsDNA4的诊断率。

体同时检测，可提高SLE

抗原，可从动物胸腺的胞浆中提）的ASS-A为干燥综合征（SS（3）抗SS-A抗体：

中。

SLE抗体主要见于SS，但也可见于其他自身免疫病如SS-A取。

抗

抗原，亦可从动物胸腺或小鼠肝细胞浆中提取，B为SS的4）抗SS-B抗体：

SS-B（

SS-B患者有抗％的SS13％的SLE及30可被胰蛋白酶、轻度加热或改变溶液pH而破坏。

抗体。

组蛋白是一种碱性蛋白质，含有大量的赖氨酸及精氨酸。

AHA）：

（5）抗组蛋白抗体（。

抗组蛋白抗H-4、H-2BH-3、目前已经发现组蛋白抗原可分为5个亚单位：

H-1、H2A、病人血清中的抗组蛋白亚单位抗体检SLE及药物诱发的LE。

体及其抗亚单位抗体见于SLE为主，H-1和抗H-4，以抗H-2B及抗、抗出率顺序为：

抗H-2B、抗H-1H-3、抗H-2A的活动性有关。

SLE并与

的检测方法ANA

（二）

常用的方法有免疫荧光法、目前故测定方法繁多。

ANA的复杂性及多样性，由于ANA、免疫双扩散、对流免疫电泳及免疫印迹技术等。

ELISA放射免疫法、

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最常用的方法是荧光免疫组化法。

多用小鼠肝切片或．免疫荧光法检测血清总ANA1在荧光显微镜下见到的细胞核有荧光着色为阳性结果比较稳定可靠，印片作为细胞核基质，稀释仍然虽1:

80反应。

如将患者血清先进行不同比例的稀释，可以做大致的定量试验，在阳性的荧光现ANA阳性时，对SLE的诊断有较大的参考价值。

在油镜下观察结果，可以将种主要的荧光核型，核型的确定对临床诊断有进一步的参考价值。

①周边型表示4象分成抗体；④ENADNP抗体；③斑点（颗粒）型多为抗DNA抗抗体存在；②均质型表示有抗匀质型或混合型，斑点型多见于混合结患者常出现周边型、核仁型多为抗核小体抗体。

SLE有较高的特异性。

SLE缔组织病，而硬皮病多为核仁型；周边型对

因为这些抗体，近年有人用锥虫或血鞭毛虫（例如绿蝇短膜虫试验）作基质测定抗dsDNA，无其他抗原干扰；在阳性结果时，可见鞭毛一端血寄生虫的动基体内含大量的纯dsNDA抗体具有特异性强和敏感性高的因此该试验用于测定抗dsDNA的动基体显示清晰的荧光。

优点。

另外，短膜虫对人畜无害，可以人工养殖，来源方便，值得推广。

法的原理为用同位FarrFarrDNA抗体，有法及过滤法。

①2．放射免疫法常用检测抗％硫酸铵饱和液沉淀，50抗体结合，经DNADNA，被标记的和被检血清的抗DNA素标记％结合活性，一般结合率大于20DNA然后比较沉淀物和上清液中的放射活性，从而得出）进行过滤，游μm为阳性。

②过滤法是在分离结合物时用纤维素酯薄膜滤器（孔径为0.45被滤去而与抗体结合的复合物被阻留在滤膜上。

DNA离的

抗体，其重复性及敏感性均较检测抗dsDNAELISA3．临床上主要是应用间接ELISA对流免疫电泳及双扩散为高。

目前已有试剂盒供应。

）先将混合抗原作凝胶电泳，分离开不同的区带，然immunoblotting．免疫印迹（4将这些带转印到硝酸纤维素膜上，最后用酸标抗体或放射性同位素标记抗体进行检测和分析。

由于该试验不需纯化的单个抗原，可在同一固相上作多项分析检测，灵敏度高，特异性.

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抗抗体、如检测抗Sm强。

故目前已广泛用于自身免疫病患者血清中多种自身抗体的检测，抗体等。

SS-BSS-A抗体及RNP抗体、抗

间接血凝法和补体结合试验等。

还可用传统的琼脂双向扩散法、对流免疫电泳法、另外，

这些试验要求的实验条件比较低，但敏感性也比较低。

二、类风湿因子

IgG7S的的IgM，也可见19S类风湿因子（RF）是抗变性IgG的自身抗体，主要为主要出现在发生凝集反应。

RFIgG结合，而不与正常IgG及IgA。

它能与人或动物的变性，这RF％的滑漠液中可检出IgG类类风湿性关节炎患者，约70％～90％的血清中和约60变性所引起的一种自身免疫应答的表现。

IgG很可能是自身

这些抗体与相应抗原结合时会发生变是感染等原因诱导的免疫应答中的主干抗体，IgG就IgGIgG；这些变性性；此外，在炎症等病理条件下滑漠或其他部位可能产生不正常的结IgGRF与变性IgG抗体。

滑膜液中的IgG类构成自身抗原，刺激免疫系统产生各种抗更具有致病意义，因为这一类免类RF合而形成中等大小的免疫复合物，比血清中的IgM疫复合物易于沉积在关节滑膜等部位，可激活补体，形成慢性渐进性免疫炎症性损伤。

法）进行检测，目前最常的检测最初是用致敏绵羊红细胞凝集试验（Rose-WaalerRF吸附的胶乳颗粒凝集试验；但此法的灵敏度和特异性均不高，而且只能检出血清采用IgG等方法检测。

ELISARIA或类IgG类和IgARF则需要用。

中的IgM类RF

的倾向性诊断，如对阳性支持早期RARF在类风湿性关节炎患者中的检出率很高，RF也RF和风湿热间的鉴别；而对非活动期RA的诊断，需参考病史。

但RA年轻女性应进行阳性，在其他结缔RF病人均有SLE50％独有的特异性抗体。

在一样，并不是象ANARA、硬皮病、慢性活动性肝炎及老年人中均可有不同程度的阳性率。

组织病如SS

三、其他自身抗体

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（一）抗甲状腺球蛋白及微粒体抗体

这类抗体可以针对甲状腺的多种成分，以甲状腺球蛋白和微粒体为代表。

抗体主要是

）甲Hashimoto，可以介导ADCC活性，引起慢性淋巴细胞性甲状腺炎，又称乔本（IgGESISA、以甲状腺组织的冰冻切片作基质。

也可用RIA状腺炎。

检测方法多用免疫荧光技术，强阳性反应或高滴度抗体对乔本甲状腺炎和原发性甲状腺功能减退症有诊等方法进行检查。

对乔本甲状腺炎与甲状腺功能亢进的抗体变化对于疾病治疗转归的评价甚为重要，断意义，％无疾病症状105％～鉴别诊断也有较大价值。

正常人血清中很少检出甲状腺抗体，或仅有人群有低度反应；女性和年龄较大的人群检出率较高。

检出该抗体可提示既往患过自身病，也可能是自身免疫病的早期指标。

，包括长效甲患者的血清中存在甲状腺刺激抗体（TSAb）在甲状腺功能亢进（Graves病）

受体，使。

这些抗体作用于甲状腺细胞表面的TSHLATS者（LATS-P）状腺刺激素（LATS）和受体活化并促进甲状腺素的释放；过多的甲状腺素引起机体的代谢亢进。

（二）抗乙酰胆碱受体抗体

）抗体可结合到横纹肌细胞的乙酰胆碱受体上，引起运动终板AchR抗乙酰胆碱受体（的破坏，使神经－肌肉之间的信号传导发生障碍，导致骨髓肌运动无力，称为重症肌无力）。

疾病可发于任何年龄，最先出现的症状常是眼肌无力，进MGmyastherniagravis，（而累及其他部位，常呈进行性加重。

银环蛇毒素包被酶标板，法：

以α-抗AchR抗体多用较敏感的方法进行检测。

①ELISA

）作用，再加入待测血清和对照血清，最后加酶标抗体。

试验的AchR并与骨骼肌匀浆（含银环蛇毒素与骨骼-0.03mmol/L。

②放免法：

将放射性同位素标记的α正常结果为阴性或≤使之沉淀，检测沉淀物的放射性。

匀浆结合，再加入患者血清和抗人IgG

MG90MGAchR抗抗体的检测对具有诊断意义，且特异性和敏感性较高，大约％的.

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同时还用来监测对该疾病抗体效价低于普通症状的病人；患者阳性；伴有眼肌症状的病人，免疫抑制治疗的效果。

肌萎缩侧索硬化症患者用蛇毒治疗后可出现假阳性。

（三）抗平滑肌抗体

）产生机制不明，但与肝和胆管的自身免疫疾病有关，尤其是慢ASMA抗平滑肌抗体（）。

该类疾病的发生与自身免疫PBC性活动性肝炎（狼疮性肝炎）和原发性胆汁性肝硬化（性密切相关，试验结果有助于诊断以及与其他肝病的鉴别诊断。

的检测用间接免疫荧光法，用大鼠胃大弯或小弯的冰冻切片作基质；正常结果ASMA；而在肝外性胆汁阻塞、。

检出阳性率较高的疾病有慢性活动性肝炎和PBC为阴性或≤1:

20的检出率极低。

药物诱发性肝病、急性病毒性肝炎及肝细胞癌等时ASMA

（四）抗心肌抗体

在心肌受损（例如手术、感染或梗塞等）时，心肌细胞内的物质释出，作为隐蔽抗原刺

风湿例如心包切开综合征、激机体产生抗体。

这些抗体与心脏结合可导致新的免疫性损伤，性心脏病等。

正常进行免疫荧光检测，抗心肌抗体的检测用胎儿或大鼠心肌的冰冻切片作抗原基质，心肌梗塞后综合征和风湿性心脏病等。

心脏术后综合征、值为阴性。

阳性结果相关的疾病有：

）检测（五）抗线粒体抗体（AMA

）所针对的抗原是内层线粒体膜，无器官特异性和种属特异性。

抗线粒体抗体（AMA

相关，但对肝细胞或胆管没有直接的损伤效应，在疾病中的作PBC该抗体主要是IgG，与用尚不明确。

用免疫荧光法进行检测，用大鼠肾的冰冻切片作基质；也可用补体结合试验来检AMA％为阳性反应或效价≥94％～患者可有以下。

测。

正常结果为阴性或效价在1:

5PBC79；长期持续性肝阻塞、慢性活动性肝炎；、原因不明性肝硬化等也可呈阳性反应。

但1:

160.

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是肝外性黄疸为阴性。

（六）抗胃壁细胞抗体

有时也可发现）可以破坏胃粘膜的壁细胞，使内因子产生障碍，抗胃壁细胞抗体（APA

抗内因子抗体而使其功能受阻，从而导致恶性贫血的发生。

患者可无前驱症状或患有胃炎。

常以间接免疫荧光法检测，用人或家兔的胃冰冻切片作抗原基质，正常成人为阴APA

恶性贫血患者能检出抗胃壁细胞或抗内因子抗20％的检出率。

2性反应，正常儿童可有％～体。

而其他各种贫血患者不能检出其中任何一种抗体。

胃溃疡或胃癌等极少该抗体阳性。

（七）抗胰岛素抗体

使胰岛素的活性明显降低甚抗胰岛素抗体在体内可与胰岛素结合形成抗原抗体复合物，至无效；从而导致胰岛素依赖性糖尿病，必需注入大量胰岛素才能有疗效。

该抗体主要为类可能引起胰IgM也存在；其中IgE类抗体可引起病人的变应性反应，类IgG，其他4Ig岛素耐受。

等ELISA检测抗胰岛素抗体及其免疫球蛋白类别可用各种琼脂扩散试验、间接血凝和还可用于监测病人的胰岛素此外，方法，试验结果会有助于糖尿病的分型诊断及适当治疗。

耐量。

（八）抗肾小球基底膜抗体

）抗体多产生在链球菌感染后，为共同抗原交叉诱导产生。

抗抗肾小球基底膜（GBM

损伤，导致肾小球肾炎的发生。

GBMGBM抗体可引起

用动物或人的肾组织冰冻切片作抗原GBM抗抗体的检测也是用荧光或酶免疫组化法，

这与免疫复合物时基质。

阳性反应可见与肾小球血管走行相一致的荧光染色或酶底物染色；该试验主要用于肾小球肾炎的分型诊试验正常值为阴性。

斑块状分布的染色现象完全不同。

抗体引发，为自身免疫性。

GBM5断与鉴别诊断。

约％的肾小球肾炎由抗

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（九）抗精子抗体

正常情况下精细胞是隐蔽抗原，但当外伤、手术或感染时，精子可与免疫系统接触，诱

是导致导机体产生抗精子抗体。

高滴度的抗精子抗体可使精细胞的活力下降甚至数量减少，男子不育症的原因之一。

在部分女性也可检出抗精子抗体，可能与不孕症相关。

ELISA抗精子抗体的检测方法很多，例如精子制动试验、精子凝集试验、免疫荧光法、一抗精子抗体阳性相关的疾病有实验性输精管阻塞和输精管切断等，法和免疫珠结合法等。

部分妇女和孕妇也可检出抗精子抗体。

（十）抗血细胞抗体

血型抗体及自身免疫性抗体，与输血、新生儿溶血RhABO的抗红细胞抗体主要涉及症和自身免疫性溶血性贫血等相关。

抗血小板和抗白细胞抗体等均与自身免疫性血液病相关。

四、其他免疫学检测

（一）淋巴细胞检测

而与致敏虽然自身免疫病多与自身抗体有关，但仍有部分疾病不存在相关的自身抗体，

这些相关因素的检测对疾病的诊断还可能与免疫调节异常或其他因素有关。

淋巴细胞有关，有一定的参考意义。

．特异性致敏淋巴细胞在溃疡性结肠炎、外周神经炎及实验性变态反应性脑脊髓炎等1

虽然这些淋巴细胞在疾病中的确切作用要比自疾病，可能与自身反应性致敏淋巴细胞有关。

检测致敏淋巴细胞可用器官特但相关性本身也具有一定参考价值。

身抗体的作用更难证实，皮肤试验也能反映进行淋巴细胞转化试验或吞噬细胞移动抑制试验等；异性抗原作诱导剂，实验结果需结合临床或其他检查进但有诱导致敏性或诱发变态反应的危险。

机体致敏情况，行综合分析。

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．在免疫缺陷病或免疫失调时容易发生自身免疫病，所以进行淋巴细胞数量及亚群比2亚CD4/CD8和B细胞分类计数及例的检查也有一定意义。

检测内容包括淋巴细胞总数、T群比例测定等。

（二）狼疮细胞试验

的中性粒细胞。

狼疮病人血清中的抗核）细胞是胞浆内含有大块状聚合LEDNA狼疮（因子。

用病人血清与正常人中性粒细胞一起培养，细胞的形成，因此称为LE抗体可诱导LE天连续重复进行。

3可使后者变成LE细胞。

该试验称为狼疮细胞试验，试验过程更要

、硬皮病、部分肝炎、结节性动脉％呈阳性。

在RA75系统性红斑狼疮病人有％～80现已证明至少有十几种药物皮肌炎和变态反应病等偶尔可呈阳性反应。

炎、多发性硬化症、细胞试验阳性。

LE可诱发

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