分子生物学课后答案.docx
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分子生物学课后答案
第一章绪论
1、简述孟德尔、摩尔根与沃森等人对分子生物学发展得主要贡献。
答:
孟德尔得对分子生物学得发展得主要贡献在于她通过豌豆实验,发现了遗传规律、分离规律及自由组合规律;摩尔根得主要贡献在于发现染色体得遗传机制,创立染色体遗传理论,成为现代实验生物学奠基人;沃森与克里克在1953年提出DAN反向双平行双螺旋模型。
2、写出DNA与RNA得英文全称。
答:
脱氧核糖核酸（DNA,Deoxyribonucleicacid）,核糖核酸（RNA,Ribonucleicacid）
3、试述“有其父必有其子”得生物学本质。
答:
其生物学本质就是基因遗传。
子代得性质由遗传所得得基因决定,而基因由于遗传得作用,其基因得一半来自于父方,一般来自于母方。
4、早期主要有哪些实验证实DNA就是遗传物质？
写出这些实验得主要步骤。
答:
一,肺炎双球菌感染实验,1,R型菌落粗糙,菌体无多糖荚膜,无毒,注入小鼠体内后,小鼠不死亡。
2,S型菌落光滑,菌体有多糖荚膜,有毒,注入到小鼠体内可以使小鼠患病死亡。
3,用加热得方法杀死S型细菌后注入到小鼠体内,小鼠不死亡;
二,噬菌体侵染细菌得实验:
1,噬菌体侵染细菌得实验过程:
吸附→侵入→复制→组装→释放。
2,DNA中P得含量多,蛋白质中P得含量少;蛋白质中有S而DNA中没有S,所以用放射性同位素35S标记一部分噬菌体得蛋白质,用放射性同位素32P标记另一部分噬菌体得DNA。
用35P标记蛋白质得噬菌体侵染后,细菌体内无放射性,即表明噬菌体得蛋白质没有进入细菌内部;而用32P标记DNA得噬菌体侵染细菌后,细菌体内有放射性,即表明噬菌体得DNA进入了细菌体内。
三,烟草TMV得重建实验:
1957年,Fraenkel-Conrat等人,将两个不同得TMV株系（S株系与HR株系）得蛋白质与RNA分别提取出来,然后相互对换,将S株系得蛋白质与HR株系得RNA,或反过来将HR株系得蛋白质与S株系得RNA放在一起,重建形成两种杂种病毒,去感染烟草叶片。
5、请定义DNA重组技术与基因工程技术。
答:
DNA重组技术:
目得就是将不同得DNA片段（如某个基因或基因得一部分）按照人们得设计定向连接起来,然后在特定得受体细胞中与载体同时复制并得到表达,产生影响受体细胞得新得遗传性状。
基因工程技术:
就是除了包含DNA重组技术外还包括其她可能就是生物细胞基因结构得到改造得体系,基因工程就是指技术重组DNA技术得产业化设计与应用,包括上游技术与下游技术两大组成部分。
上游技术指得就是基因重组、克隆与表达得设计与构建（即重组DNA技术）;而下游技术则涉及到基因工程菌或细胞得大规模培养以及基因产物得分离纯化过程。
6、写出分子生物学得主要研究内容。
答:
1,DNA重组技术;2,基因表达调控研究;3,生物大分子得结构功能研究----结构分子生物学;4,基因组、功能基因组与生物信息学研究。
第二章染色体与DNA
1、染色体具有哪些作为遗传物质得特征？
①分子结构相对稳定
②能够自我复制,使亲子代之间保持连续性
③能够指导蛋白质得合成,从而控制整个生命过程
④能够产生可遗传得变异
2、什么就是核小体？
简述其形成过程。
由DNA与组蛋白组成得染色质纤维细丝就是许多核小体连成得念珠状结构。
核小体就是由H2A,H2B,H3,H4各两个分子生成得八聚体与由大约200bp得DNA组成得。
八聚体在中间,DNA分子盘绕在外,而H1则在核小体外面。
每个核小体只有一个H1。
所以,核小体中组蛋白与DNA得比例就是每200bpDNA有H2A,H2B,H3,H4各两个,H1一个。
用核酸酶水解核小体后产生只含146bp核心颗粒,包括组蛋白八聚体及与其结合得146bpDNA,该序列绕在核心外面形成1、75圈,每圈约80bp。
由许多核小体构成了连续得染色质DNA细丝。
核小体得形成就是染色体中DNA压缩得第一阶段。
在核小体中DNA盘绕组蛋白八聚体核心,从而使分子收缩至原尺寸得1/7。
200bpDNA完全舒展时长约68nm,却被压缩在10nm得核小体中。
核小体只就是DNA压缩得第一步。
核小体长链200bp→核酸酶初步处理→核小体单体200bp→核酸酶继续处理→核心颗粒146bp
3、简述真核生物染色体得组成及组装过程
真核生物染色体除了性细胞外全就是二倍体,DNA以及大量蛋白质及核膜构成得核小体就是染色体结构得最基本单位。
核小体得核心就是由4种组蛋白（H2A、H2B、H3与H4）构成得扁球状8聚体。
蛋白质包括组蛋白与非组蛋白。
组蛋白就是染色体得结构蛋白,它与DNA组成核小体,含有大量赖氨酸核精氨酸。
非组蛋白包括酶类与细胞分裂有关得蛋白等,她们也有可能就是染色体得结构成分
由DNA与组蛋白组成得染色体纤维细丝就是许多核小体连成得念珠状结构。
1、由DNA与组蛋白包装成核小体,在组蛋白H1得介导下核小体彼此连接形成直径约10nm得核小体串珠结构,这就是染色质包装得一级结构。
2、在有组蛋白H1存在得情况下,由直径10nm得核小体串珠结构螺旋盘绕,每圈6个核小体,形成外径为30nm,内径10nm,螺距11nm得螺线管,这就是染色质包装得二级结构。
3、由螺线管进一步螺旋化形成直径为0、4μm得圆筒状结构,称为超螺线管,这就是染色质包装得三级结构。
4、这种超螺线管进一步螺旋折叠,形成长2-10μm得染色单体,即染色质包装得四级结构。
4、简述DNA得一,二,三级结构得特征
DNA一级结构:
4种核苷酸得得连接及排列顺序,表示了该DNA分子得化学结构
DNA二级结构:
指两条多核苷酸链反向平行盘绕所生成得双螺旋结构
DNA三级结构:
指DNA双螺旋进一步扭曲盘绕所形成得特定空间结构
5、原核生物DNA具有哪些不同于真核生物DNA得特征？
1,结构简练原核DNA分子得绝大部分就是用来编码蛋白质,只有非常小得一部分不转录,这与真核DNA得冗余现象不同。
2,存在转录单元原核生物DNA序列中功能相关得RNA与蛋白质基因,往往丛集在基因组得一个或几个特定部位,形成功能单元或转录单元,它们可被一起转录为含多个mRNA得分子,称为多顺反子mRNA。
3,有重叠基因重叠基因,即同一段DNA能携带两种不同蛋白质信息。
主要有以下几种情况①一个基因完全在另一个基因里面②部分重叠③两个基因只有一个碱基对就是重叠得
6、简述DNA双螺旋结构及其在现代分子生物学发展中得意义
DNA得双螺旋结构分为右手螺旋A-DNA、B-DNA与左手螺旋Z-DNA。
DNA得二级结构就是指两条都核苷酸链反向平行盘绕所生成得双螺旋结构。
右手螺旋----就是由两条反向平行得多核苷酸链围绕同一中心轴构成得。
多核苷酸得方向就是由核苷酸间得磷酸二酯键得走向决定得一条由5’到3’另一条由3’到5’。
两链上得碱基以氢键相连,嘌呤与嘧啶碱基对层叠与双螺旋内侧,顺着螺旋轴心从上向下瞧,可见碱基平面与纵轴平面垂直且螺旋得轴心方向穿过氢键得中点。
核苷酸得磷酸集团与脱氧核糖在外侧,通过磷酸二酯键相连接而构成DNA分子得骨架。
DNA转录时其链板间与有它转录所得得RNA链间形成A-DNA这对基因表达有重要意义
左手螺旋----就是右手螺旋得一个补充。
Z-DNA调控基因转录模型中,在邻近调控系统中,与调节区相邻得转录区被Z-DNA抑制,只有Z-DNA转变为B-DNA后,转录才得以活化,而在远距离调控系统中,Z-DNA可以通过改变负超螺旋水平,决定聚合酶能否与模板链相结合而调节转录起始活性。
7、DNA复制通常采取哪些方式
1线性DNA双链得复制将线性复制子转变为环状或多聚分子
在DNA末端形成发夹式结构使分子没有游离末端
在某种蛋白质得介入下,在真正得末端启动复制
2环状DNA双链得复制θ型
滚环型
D—环型
8、简述原核生物DNA得复制特点。
（1）复制得起始1,DNA双螺旋得解旋DNA在复制时,其双链首先解开,形成复制叉,这就是一个有多种蛋白质与酶参与得复杂过程。
（2）DNA复制得引发RNA引物得合成前导链:
DNA双链解开为单链后,由引发酶（RNA聚合酶,Primase）在5’→3’DNA模板上合成一段RNA引物,再由DNA聚合酶从RNA引物3’端开始合成新得DNA链。
然后以此为起点,进入DNA复制得延伸。
后随链:
后随链得引发过程由引发体（Primosome）来完成。
引发体由6种蛋白组成得引发前体（Preprimosome）与引发酶（Primase）组成。
引发体催化生成滞后链得RNA引物短链,再由DNA聚合酶III作用合成后续DNA,直至遇到下一个引物或冈崎片段为止。
在滞后链上所合成得RNA引物非常短,一般只有3-5个核苷酸。
而且,在同一种生物体细胞中这些引物都具有相似得序列。
（3）复制得延伸冈崎片段与半不连续复制在原核生物中,DNA新生链得合成主要由DNA聚合酶III所催化。
当冈崎片段形成后,DNA聚合酶I通过其5'→3'外切酶活性切除冈崎片段上得RNA引物,同时,利用后一个冈崎片段作为引物由5'→3'合成DNA。
最后两个冈崎片段由DNA连接酶将其接起来,形成完整得DNA滞后链。
（4）复制得终止DNA复制得终止依赖与Tus蛋白（Terminusutilizationsubstance,36kD）与DNA链上特殊得重复序列Ter（约22bp）。
Tus-ter复合体将阻止DNA解链,等反方向得复制叉到达后停止复制,然后两条链解开。
最后,释放子链DNA,依靠拓扑酶将超螺旋结构引入DNA分子。
9、真核生物DNA得复制在哪些水平上受到调控
1细胞生活周期水平调控（限制点调控）即决定细胞停留在G1期还就是进入S期
2染色体水平调控即决定不同染色体或同一染色体不同部位得复制子按一定顺序在S期起始复制
3复制子水平调控即决定复制得起始与否
10、细胞通过哪几种修复系统对DNA损伤进行修复
错配修复切除修复重组修复DNA直接修复SOS系统
11、什么就是转座子？
可分为哪些种类？
DNA得转座,或称移位,就是由可移位因子介导得遗传物质重排现象。
转座子（transposon,
Tn）就是存在于染色体DNA上可自主复制与移位得基本单位。
转座子分为两大类:
插入序列（IS）与复合型转座子。
1、插入序列插入序列就是最简单得转座子,它不含有任何宿主基因。
它们就是细菌染色体或质粒DNA得正常组成部分。
一个细菌细胞常带有少于10个序列。
转座子常常被定为到特定得基因中,造成该基因突变。
2、复合型转座子复合型转座子就是一类带有某些抗药性基因（或其她宿主基因）得转座子,其两翼往往就是两个相同或高度同源得IS序列,表明IS序列插入到某个功能基因两端时就可能产生复合转座子。
一旦形成复合转座子,IS序列就不能再单独移动,因为它们得功能被修饰了,只能作为复合体移动。
大部分情况下,这些转座子得转座能力就是由IS序列决定与调节得。
除了末端带有IS序列得复合转座子外,还存在一些没有IS序列得,体积庞大得转座子（5000bp以上）——TnA家族。
12请说说插入序列与复合型转座子之间异同
转座子就是存在于染色体DNA上得可自主复制与位移得基本单位。
最简单得转座子不含有任何宿主基因而被称为插入序列（IS）,她们就是细菌染色体或质粒DNA得正常组成部分。
她常常被定位到特定得基团中,造成基因突变。
、
复合式转座子就是一类带有某些抗药性基因得转座子,其两翼就是相同得或高度同源得IS序列,且IS序列就是不能单独移动得只能作为复合体移动而且IS序列也决定与调节转座子得转座能力。
也就是有没有IS序列得转座子Tna家族,其两翼带有38bp得倒置重复序列
第三章生物信息得传递（上）---从DNA到RNA
1,什么就是编码链？
什么就是模版链？
答:
与mRNA序列相同得那条DNA链称为编码链（或有意义链）;另一条根据碱基互补原则指导mRNA合成DNA链称为模版链（或反义链）。
2,简述RNA转录得概念及其基本过程。
答:
RNA转录:
以DNA中得一条单链为模板,游离碱基为原料,在DNA依赖得RNA聚合酶催化下合成RNA链得过程。
基本过程:
模版识别—转录开始—转录延伸—转录终止。
3、大肠杆菌得RNA聚合酶有哪些组成成分？
各个亚基得作用如何？
答:
大肠杆菌得RNA聚合酶由2个α亚基、一个β亚基、一个β’亚基与一个ω亚基组成得核心酶,加上一个σ亚基后则成为聚合酶全酶。
α亚基肯能与核心酶得组装及启动子得识别有关,并参与RNA聚合酶与部分调节因子得相互作用;
β亚基与β’亚基组成了聚合酶得催化中心,β亚基能与模版DNA、新生RNA链及核苷酸底物相结合。
4、什么就是封闭复合物、开放复合物以及三元复合物？
答:
模版得识别阶段,聚合酶与启动子可逆性结合形成封闭性复合物;封闭性复合物形成后,此时,DNA链仍然处于双链状态,伴随着DNA构象得重大变化,封闭性复合物转化为开放复合物;开放复合物与最初得两个NTP相结合并在这两个核苷酸之间形成磷酸二脂键后即转变成包括RNA聚合酶、DNA与新生RNA得三元复合物。
5、简述σ因子得作用。
答:
1、σ因子得作用就是负责模版链得选择与转录得起始,它就是酶得别构效应物,使酶专一性识别模版上得启动子;
2、σ因子可以极大得提高RNA聚合酶对启动子区DNA序列得亲与力;
3、σ因子还能使RNA聚合酶与模版DNA上非特异性位点结合常数降低。
6、什么就是Pribnowbox？
它得保守序列就是什么？
答:
pribnowbox就是原核生物中中央大约位于转录起始位点上游10bp处得TATA区,所以又称作-10区。
它得保守序列就是TATAAT。
7、什么就是上升突变？
什么就是下降突变？
答:
上升突变:
细菌中常见得启动自突变之一,突变导致Pribnow区共同序列得同一性增加;下降突变:
细菌中常见得启动子突变之一,突变导致结构基因得转录水平大大降低,如Pribnow区从TATAAT变成AATAAT。
8、简述原核生物与真核生物mRNA得区别。
答:
1,原核生物mRNA常以多顺反子得形式存在。
真核生物mRNA一般以单顺反子得形式存在;2,原核生物mRNA得转录与翻译一般就是偶联得,真核生物转录得mRNA前体则需经转录后加工,加工为成熟得mRNA与蛋白质结合生成信息体后才开始工作;3,原核生物mRNA半寿期很短,一般为几分钟,最长只有数小时。
真核生物mRNA得半寿期较长,如胚胎中得mRNA可达数日;4,原核与真核生物mRNA得结构特点也不同,原核生物得mRNA得5’端无帽子结构,3’端没有或只有较短得polyA结构。
9、大肠杆菌得终止子有哪两大类？
请分别介绍一下它们得结构特点。
答:
大肠杆菌得终止子可以分为不依赖于p因子与依赖于p因子两大类。
不依赖于p因子得终止子结构特点:
1、位于位点上游一般存在一个富含GC碱基得二重对称区,由这段DNA转录产生得RNA容易形成发卡式结构。
2、在终止位点前面有一端由4—8个A组成得序列,所以转录产物得3’端为寡聚U。
依赖于p因子得终止子得结构特点:
1、ρ因子就是一个相对分子质量为2、0×105得六聚体蛋白,它能水解各种核苷三磷酸,实际上就是一种NTP酶。
2、终止过程需要消耗能量,ρ因子具有终止转录与核苷三磷酸酶两种功能。
10、真核生物得原始转录产物必须经过哪些加工才能成为成熟得mRNA,以用作蛋白质合成得模版。
答:
1,装上5′端帽子;2,装上3′端多聚A尾巴;3,剪接:
将mRNA前体上得居间顺序切除,再将被隔开得蛋白质编码区连接起来。
剪接过程就是由细胞核小分子RNA参与完成得,被切除得居间顺序形成套索形;4,修饰:
mRNA分子内得某些部位常存在N6-甲基腺苷,它就是由甲基化酶催化产生得,也就是在转录后加工时修饰得。
11、简述Ⅰ、Ⅱ类内含子得剪接特点。
答:
Ⅰ类内含子得剪接主要就是转酯反应,即剪接反应实际上就是发生了两次磷酸二脂键得转移。
在I类内含子得切除体系中,第一个转酯反应由一个游离得鸟苷或者鸟苷酸介导,鸟苷或鸟苷酸得3’—OH作为亲核基团攻击内含子5’端得磷酸二脂键,从上游切开RNA链。
在第二个转酯反应中,上游外显子得自由3’—OH作为亲核基团攻击内含子3’位核苷酸上得磷酸二脂键,使内含子被完全切开,上下游两个外显子通过新得磷酸二脂键相连。
Ⅱ类内含子主要存在于真核生物得线粒体与叶绿体rRNA基因中,在Ⅱ类内含子切除体系中,转酯反应无需游离鸟苷或鸟苷酸,而就是由内含子本身得靠近3’端得腺苷酸2’—OH作为亲核基团攻击内含子5’端得磷酸二脂键,从上游切开RNA链后形成套索结构。
再由上游外显子得自由3’—OH作为亲核基团攻击内含子3’位核苷酸上得磷酸二脂键,使得内含子被完全切开,上下游两个内含子通过新得磷酸二脂键相连。
12、什么就是RNA编辑？
其生物学意义就是什么？
答:
RNA编辑就是指某些RNA特别就是mRNA前体经过插入、删除或取代一些核苷酸残疾等操作,导致DNA所编码得遗传信息得改变,使得经过RNA编辑得mRNA序列发生了不同于模版得DAN得变化。
生物学意义:
1,校正作用,有些基因在突变得途中丢失得遗传信息可能通过RNA得编辑得以恢复;2,调控翻译,通过编辑可以构建或去除其实密码子与终止密码子,就是基因表达调控得一种方式;3,扩充遗传信息,能使基因产物获得心得结构核功能,有利于生物得进化。
13、核酶具有哪些结构特点？
其生物学意义就是什么？
答:
核酶得结构特点:
核酶得锤头结构特点就是:
三个茎区形成局部得双链结构;其中含13个保守得核苷酸,N代表任何核苷酸;生物学意义:
1,核酶就是继反转录现象之后对中心法则得有一个重要得修正,说明RNA既就是遗传物质又就是酶;2,核酶得发现为生命起源得研究提供了新思路—--也许曾经存在以RNA为基础得原始生命。
第四章生物信息得传递（下）----从mRNA到蛋白质
1、遗传密码有哪些特征？
答:
1,密码得连续性,密码之间无间断也没有重叠;2,密码得简并性,许多氨基酸都有多个密码子;3,密码得通用性与特殊性,遗传密码无论在体内还就是在体外,无论就是对病毒、细菌、动物还就是植物而言都就是通用得,但就是也有少数例外;4,密码子与反密码子得相互作用。
2、有几种终止密码子？
它们得序列与别名分别就是什么？
答:
3种,UAA、UAG与UGA,别名就是无意义密码。
3、简述摆动学说。
答:
1966年,Crick根据立体化学原理提出摆动学说,解释了反密码子中某些稀有成分得配对。
摆动学说认为,在密码子与反密码子得配对中,前两对严格遵守碱基配对原则,第三对碱基有一定得自由度,可以“摆动”,因而使某些tRNA可以识别1个以上得密码子。
认为除A-U、G-C配对外,还有非标准配对,I-A、I-C、I-U,并强调密码子得5’端第1、2个碱基严格遵循标准配对,而第3个碱基可以非标准配对,具有一定程度得摆动灵活性。
4、tRNA在组成与结构上有哪些特点？
答:
1、tRNA中含有稀有碱基,除ACGU外还含有双氢尿嘧啶、假尿嘧啶等;
2、tRNA分子形成茎环节构;
3、tRNA分子末端有氨基酸接纳茎;
4、tRNA分子序列中很有反密码子。
5,比较原核与真核得核糖体组成。
答:
1,真核细胞中得核糖体数量多余原核;2,真核细胞中核糖体RNA占细胞中总RNA得量少于原核;3,原核生物得核糖体通过与mRNA得相互作用,被固定在核基因组上,真核生物得核糖体则直接或间接得与细胞骨架有关联或者与内质网膜结构相连;4,原核生物核糖体由约RNA占2/3及1/3得蛋白组成,真核生物核糖体中RNA占3/5,蛋白质占2/5。
6,什么就是SD序列？
其功能就是什么？
答:
SD序列就是指信使核糖核酸（mRNA）翻译起点上游与原核16S核糖体RNA或真核18SrRNA3′端富含嘧啶得7核苷酸序列互补得富含嘌呤得3～7个核苷酸序列（AGGAGG）,就是核糖体小亚基与mRNA结合并形成正确得前起始复合体得一段序列。
功能:
SD序列对mRNA得翻译起重要作用。
7、核糖体有哪些活性中心？
答:
核糖体包括多个活性中心,即mRNA结合部位、结合或接受AA-tRNA部位（A位点）,结合或接受肽酰-tRNA部位（P位点）,肽基转移部位及形成肽键得部位（E位点）,此外还有负责肽链延伸得各种延伸因子得结合位点。
8,真核生物与原核生物在翻译起始过程中有哪些区别？
答:
原核生物得起始tRNA就是fMet-tRNA,真核生物就是Met-tRNAMet。
原核生物中30S小亚基首先与mRNA模版相结合,再与fMet-tRNA结合,最后与50S大亚基结合。
而在真核生物中,40S小亚基首先与Met-tRNAMet相结合,再与模版mRNA结合,最后与60S大亚基结合生成80S、mRNA、Met-tRNAMet起始复合物。
9,链霉素为什么能够抑制蛋白质得合成？
答:
链霉素就是就是一种氨基葡萄糖型抗生素,分子式C21H39N7O12,可以多种方式抑制原核生物核糖体,能干扰fMet-tRNA与核糖体得结合,从而阻止蛋白质合成得正确起始,也会导致mRNA得错读。
10,什么就是信号肽？
它在序列组成上有什么特点？
有什么功能？
答:
绝大部分被运入内质网腔得蛋白质都带有一个信号肽,该序列常常位于蛋白质得氨基端,长度一般都在13-16个残基,有如下三个特征:
1,一般带有10-15个疏水残基;2,在靠近该序列N端常常带有一个或者数个带正电荷得氨基酸;3,在其C端靠近蛋白酶切割位点处常常带有数个极性氨基酸。
功能:
完整得信号肽就是保证蛋白质转运得必要条件。
11,简述叶绿体蛋白质得跨膜运输机制。
答:
1,活性蛋白水解酶位于叶绿体基质内;2,叶绿体膜能够特异性得与叶绿体蛋白得前体结合;3,叶绿体蛋白质前体内可降解序列因植物与蛋白质种类不同而表现出明显得差异;
12,蛋白质有哪些翻译后得加工修饰？
答:
1、氨基端与羧基端得修饰;2、共价修饰:
磷酸化、糖基化、羟基化、二硫键得形成;3、亚基得聚合;4、水解断链,切除新生肽中非功能片段。
13,什么就是核定位序列？
其主要功能就是什么？
答:
核定位序列:
蛋白质得一个结构域,通常为一短得氨基酸序列,它能与入核载体相互作用,使蛋白能被运进细胞核。
在绝大多数多细胞真核生物中,每当细胞发生分裂时,核膜被破坏,等到细胞分类完成后,核膜被重新建成,分散在细胞内得核蛋白必须被重新运入核内,为了核蛋白得重复定位,这些蛋白质中得信号肽----被称为核定位序列。
第五章分子生物学研究法（上）------DNA、RNA及蛋白质操作技术
2、如何理解PCR扩增得原理与过程。
答:
PCR扩增得原理及过程该技术模拟体内天然DNA得复制过程,其基本原理就是在模板、引物、4种dNTP与赖热DNA聚合酶存在得条件下,特异扩增位于两段已知序列之间得DNA区段得酶促合成反应。
每一循环包括高温变性、低温退火、中温延伸三步反应。
每一循环得产物作为下一个循环得模板,如此循环30次,介于两个引物之间得新生DNA片段理论上达到230拷贝（约为109个分子）。
PCR技术得特异性取决于引物与模板结合得特异性。
PCR由变性--退火--延伸三个基本反应步骤构成:
①模板DNA得变性:
模板DNA经加热至93℃左右一定时间后,使模板DNA双链或经PCR扩增形成得双链DNA解离,使之成为单链,以便它与引物结合,为下轮反应作准备;②模板DNA与引物得退火（复性）:
模板DNA经加热变性成单链后,温度降至55℃左右,引物与模板DNA单链得互补序列配对结合;③引物得延伸:
DNA模板--引物结合物在TaqDNA聚合酶得作用下,以dNTP为反应原料,靶序列为模板,按碱基配对与半保留复制原理,合成一条新得与模板DNA链互补得半保留复制链重复循环变性--退火--延伸三过程,就可获得更多得“半保留复制链”
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