3.2体外受精和早期胚胎培养.pptx

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3.2体外受精和早期胚胎培养,受精阶段,卵子成熟,减数分裂,知识回顾,第一个试管婴儿于1978年7月25日在英国的奥尔德姆市医院诞生，她的名字叫路易丝.布朗。

路易丝.布朗的母亲梅.布朗因输卵管阻塞而不能生育。

首例试管婴儿,医生从梅.布朗（时年31岁）体内提取卵子，再取她丈夫（时年38岁）的精液，经处理在体外使卵子受精，受精卵分裂形成16细胞胚后重新植入梅.布朗的子宫内。

9个多月后就生下了路易丝.布朗。

1988年3月10日我国首例试管婴儿诞生,著名妇产科专家张丽珠教授与中国首例试管婴儿,1992年我国首例三胞胎试管婴儿,1982年世界首例试管牛犊问世,试管牛（两头小牛）,是指通过人工操作使卵子和精子在体外条件下成熟和受精，并通过培养发育成早期胚胎后，再经移植产生后代的技术。

快速繁殖动物优良品种,4、目的：

3、技术手段：

体外受精、早期胚胎培养和胚胎移植。

精子卵子,受精卵,早期胚胎,子宫,个体,1、概念：

2、过程：

一、试管动物技术,体外受精,其中包含哪几个关键步骤？

1、卵母细胞的采集和培养,2、精子的采集和获能,3、体外受精,胚胎培养,4、胚胎的早期培养,二、体外受精,1.卵母细胞的采集和培养,2.精子的收集和获能,3.受精,超数排卵法,用促性腺激素处理，使其排出更多的卵子，然后从输卵管中冲取卵子,小鼠、兔、猪、羊,采集的卵子可直接参与体外受精,卵巢取卵法,大家畜或大型动物，如牛,已屠宰母畜的卵巢中采集卵母细胞,借助工具，直接从活体动物的卵巢中吸取卵母细胞,采集的卵母细胞，要体外人工培养成熟后，才能参与受精,输卵管,卵巢,1.卵母细胞的采集和培养,假阴道法,手握法,电刺激法,体型小，易控制的家畜，如，猪、犬,野生动物或经济动物,麻醉动物，用特制电极伸入动物直肠，直接刺激射精中枢神经（腰骶部）,无需设备，徒手或戴上橡胶手套，直接把握雄性动物的阴茎，给予适当的压力和刺激,采用仿生学方法，模仿发情雌性动物阴道环境，满足雄性动物交配时对压力、温度和润滑度的要求，同时配有活台畜或假台畜,体型较大的家畜,2.精子的采集和获能,

（1）.精子的采集,啮齿类动物、家兔和猪等,人工配制的获能液,牛、羊等家畜,一定浓度的肝素或钙离子载体A23187溶液中,培养法,化学诱导法,

（2）.精子的获能,获能溶液或专用的受精溶液,精子和卵子一般要放在培养液小滴内共同培养一段时间才能完成受精,

（1）环境,

（2）要求,3.受精,新鲜或解冻精液,分离精子和精液,培养法化学诱导法,获能液/专用受精溶液,3.受精,受精卵应移入发育培养液中继续培养，以检查受精状况和受精卵的发育能力,1.原因,2.培养液成分,维生素、激素、氨基酸、核苷酸等,血清,3.胚胎后期操作,向受体移植,/冷冻保存,三、胚胎的早期培养,4.不同动物胚胎移植的时间不同,牛、羊等,小鼠、家兔等实验动物,人,桑椹胚或囊胚阶段,桑椹胚或囊胚前阶段,816个细胞阶段,三、胚胎的早期培养,澳大利亚海福特肉用牛,良种荷斯坦奶牛,3万5万,A、价格昂贵，资金的限制,B、牛生育力低，一生只能生育4-5头,5.牛体外受精胚胎工厂化生产,采集良种母牛的卵母细胞,卵母细胞的体外培养,采集良种公牛精子,精子体外获能,体外受精,受体牛（子宫内孕育）,“试管牛”工厂化生产流程图,有性生殖无性生殖,核移植技术、胚胎移植,遵循不遵循,体外受精胚胎移植,来自2个个体主要来自核供体,四、试管动物和克隆动物的比较,试管动物技术,体外受精,早期胚胎培养,卵母细胞的采集,精子的获取,受精：

条件：

培养液成分：

假阴道法手握法电刺激法,方法一：

用促性腺激素处理，使其超数排卵，从输卵管中冲取卵子方法二：

从屠宰母畜卵巢中采集方法三：

直接从活体动物的卵巢中吸取卵母细胞,受精卵在发育培养液中培养,无机盐、有机盐、维生素、激素、氨基酸、核苷酸、血清等,获能的精子培养成熟的卵子完成受精,本节小结,1、下列关于体外受精和早期胚胎培养的说法错误的是（）,A、在体外受精前，要对精子进行获能处理,B、精子和卵子一般要放在培养液小滴内共同培养一段时间才能完成受精作用,C、受精卵在受精溶液中进行早期发育,D、胚胎发育到适当阶段可进行冷冻保存,C,受精溶液,区分：

获能溶液受精溶液发育培养液,精子获能,受精,胚胎的早期培养,胚胎移植,2、根据下图回答,卵母细胞,母体,精子,所作的处理为，是过程，是，是。

牛卵巢,牛卵巢中采卵,借助超声波探测仪和内窥镜的引导，从活母畜卵巢采集卵母细胞。

操作员先将带有超声波探头和吸卵针的采卵器通过生殖道插入子宫，同时将探头贴在卵巢上。

根据B超屏幕所显示的卵泡位置，利用采卵针穿刺卵泡并同时抽吸卵母细胞。

从活体卵巢中采集卵母细胞,课件制作仙游第一中学黄美洪,