无菌操作技术实践与发酵技术实践专题复习指导.docx
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无菌操作技术实践与发酵技术实践专题复习指导
“无菌操作技术实践与发酵技术实践”专题复习指导
一、考情分析
“无菌发酵技术”考点有微生物的分离和培养、微生物数量的测定、选择培养基的利用、利用微生物发酵来生产人类需要的的产物以及微生物的其他方面的引用。
微生物的培养、培养基对微生物的选择利用、利用微生物发酵来生产特定的产物是高考热门。
近年来不少地方的试题都多有涉及。
“发酵技术实践”专题内容琐碎分散，细知识多，与必修教材有着紧密的联系，复习时侧重于实验的回顾与复习，要特别注意相关实验的设计流程、操作要求、结果分析和方法改进等方面的内容。
本专题是选修部分的重点，也是高考的热点。
从命题角度看主要是以微生物的应用为背景材料进行实验设计或结合其他专题知识进行考查，考查的形式有选择、简答、实验设计等。
二、复习策略
复习本部分知识一定要专注主干知识，不能一味追求知识的全面而深挖每一个知识点，本专题的主干知识主要集中在微生物的培养、传统发酵技术的应用即果酒和果醋的制作、酶技术，复习每个小专题时建议加强知识的比较,注重选修知识与必修课本的结合处,如酵母菌的代谢类型与生产生活的联系点,微生物的培养过程中代谢类型与培养基成分的关系等等。
“微生物的培养与利用”是江苏高考前几年没有作要求的，而被列为2012年高考考查之列，因此在今后的高考试题中必然会有体现，复习时也应加以重视。
三、高频考点及实验要求列举
高频考点
实验要求
无菌操作技术实践
1．培养基的种类、制备原则和无菌操作技术。
2．分离纯化微生物的研究思路和方法。
3．微生物的计数方法。
4．植物组织培养的过程、原理和实践应用。
1．微生物培养中灭菌及划线方法等基本技术的方法。
2．微生物计数、分离与培养的实际问题。
3．植物组织培养实验中关于灭菌、消毒、培养基配制等问题的考查。
发酵技术实践
1．制作果酒、果醋、腐乳的基本原理和方法以及发酵条件。
2．了解果酒、果醋、腐乳过程中与微生物相关的知识。
3．果酒、果醋制作的实验装置安装及注意问题。
1．相关的实验装置、药品的作用。
2．实验原理、现象、结果和实验中应注意的问题。
3．探究相关微生物生活、繁殖的条件。
三、要点梳理，考点剖析
（一）列表比较，揭示知识间的异同
1．两种培养基的比较
种类
制备方法
原理
用途
举例
选择培养基
培养基中加入某些化学物质
依据某些微生物及某些物质的抗性而设计
从众多微生物中分离所需的微生物
加入青霉素分离得到酵母菌和霉菌
鉴别培养基
培养基中加入某种试剂或化学药品
依据微生物产生的某种代谢产物与培养基中的特定试剂或化学药品反应，产生明显的特征变化而设计
鉴别不同种类的微生物
伊红-美蓝培养基可以鉴别大肠肝菌
2．“消毒”与“灭菌”的比较
提醒：
消毒仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物（不包括芽孢和孢子），而灭菌杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。
酒精消毒时，75%的酒精效果最好，原因是：
浓度过高，使菌体表面蛋白质凝固成一层保护膜，乙醇分子不能进入其中；浓度过低，杀菌力减弱。
3．与传统发酵有关的几类微生物比较
酵母菌
醋酸菌
毛霉
乳酸菌
生物学分类
真核生物
原核生物
真核生物
原核生物
生活方式
异养兼性
厌氧
异养需氧
异养需氧
异养厌氧
适宜温度
20℃左右
30℃～35℃
15℃～18℃
室温
主要生殖
方式
适宜条件下
出芽生殖
二分裂
生殖
孢子生殖
二分裂
生殖
主要用途
酿酒、发面
酿醋
制作腐乳
制作酸
奶、泡菜
特别提醒：
（1）二分裂不是无丝分裂。
（2）酵母菌酿酒时先通气，后隔绝空气，原理是：
①在有氧条件下：
C6H12O6+6O2+6H2O
6CO2+12H2O+能量，生活状态：
大量繁殖②无氧条件下：
C6H12O6
2C2H5OH+2CO2+能量，生活状态：
进行发酵，产生大量酒精
（3）由于醋酸菌和乳酸菌属于原核生物，因此在利用这两类微生物时，其环境中一定不要加入青霉素等抗生素。
4．果酒和果醋的制作原理和发酵条件的比较
比较
果酒制作
果醋制作
制作
原理
酵母菌先在有氧条件下大量繁殖，再在无氧条件下进行酒精发酵
醋酸菌在氧气、糖源充足时，将糖分解成醋酸；当缺少糖源时，将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸
最适发
酵温度
18℃～25℃
30℃～35℃
对氧的
需求
前期：
需氧
后期：
不需氧
需充足氧
pH
酸性环境
（3.3～3.5）
酸性环境
（5.4～6.3）
发酵时间
10～12d
7～8d
（二）注重知识的纵向延伸，深化考点
1.大肠杆菌的培养和分离
（1）特性：
革兰氏阴性、兼性厌氧的肠道杆菌。
（2）用途：
是基因工程技术中被广泛采用的工具。
（3）实验中用LB液体培养基扩大培养大肠杆菌。
（4）分离（实验部分）
培养基灭菌
↓
倒平板
↓
接种
↓
划线分离
↓
培养观察
50mLLB液体培养基和50mLLB固体培养基及培养皿高压蒸汽灭菌
将固体培养基倒入4个灭菌后的培养皿中，水平放置，使之形成平面
在装有液体培养基的三角瓶中接种大肠杆菌，培养12h
用接种环在接种有大肠杆菌的三角瓶中蘸菌液一次，在固体培养基的平板上连续划线，盖好培养皿培养皿
倒置（盖在下面），放在37℃恒温培养箱中培养12～24h后，可看到划线的末端出现不连续的单个菌落
2．纯化大肠杆菌
（1）微生物接种的方法最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法。
（2）平板划线法是通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作。
（3）稀释涂布平板法是将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。
分为系列稀释操作和涂布平板操作两步。
（4）用平板划线法和稀释涂布平板法接种的目的是：
使聚集在一起的微生物分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成单个的菌落，以便于纯化菌种。
（5）平板划线法操作步骤：
①将接种环放在火焰上灼烧，直到接种环烧红。
②在火焰旁冷却接种环，并打开棉塞。
③将试管口通过火焰。
④将已冷却的接种环伸入菌液中蘸取一环菌液。
⑤将试管通过火焰，并塞上棉塞。
⑥左手将皿盖打开一条缝隙，右手将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内，划三至五条平行线，盖上皿盖。
注意不要划破培养皿。
⑦灼烧接种环，待其冷却后，从第一区域划线的末端开始往第二区域内划线。
重复以上操作，在三、四、五区域内划线。
注意不要将最后一区的划线与第一区相连。
⑧将平板倒置放入培养箱中培养。
（6）涂布平板操作的步骤：
①将涂布器浸在盛有酒精的烧杯中。
②取少量菌液，滴加到培养基表面。
③将沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃，待酒精燃尽后，冷却8～10s。
④用涂布器将菌液均匀地涂布在培养基表面。
3．制作果酒和果醋实验操作过程注意问题
（1）为防止发酵液被污染，发酵瓶要用70%酒精消毒；
（2）葡萄汁装入发酵瓶时，要留1/3的空间；
（3）制作葡萄酒时将温度严格控制在18—25度之间，时间控制在10—20天，要对发酵情况及时进行检测和调控。
（4）制葡萄醋时，将温度严格控制在30—35度之间，时间控制在7—8天，并注意适时通过充气口充气。
4．腐乳的制作
（1）腐乳发酵是利用了多种微生物的共同作用，但以毛霉。
（2）腐乳发酵的实质是利用酶的专一性将不易被吸收的大分子物质转变成易于吸收的小分子物质的过程。
（三）以图为媒，突出要点
1．发酵装置图各部位的作用
充气口：
在醋酸发酵时连接充气泵进行充气。
排气口：
排出酒精发酵时产生的CO2。
出料口：
是用来取样的。
与瓶身相连的长而弯曲的胶管：
加水后防止空气中微生物的污染。
（2）该装置的使用方法
使用该装置制酒时，应该关闭充气口；制醋时，应将充气口连接气泵，输入氧气。
（四）关注考查细节，以细微处见真知
1.关于腐乳制作的某些知识辨析不清
（1）腐乳制作时，参与的微生物很多，但主要是毛霉。
（2）含水量70%为宜，过高、过低都影响腐乳的品质——形状、口味等。
（3）卤汤中盐、酒、香辛料都有杀菌、防腐与调味的功能。
（4）毛霉属于真菌，分为直立菌丝和匍匐菌丝，呈白色。
（5）制作原理：
毛霉产生蛋白酶和脂肪酶，将豆腐中的蛋白质、脂肪分解为多肽、甘油和脂肪酸等物质。
2.对微生物发酵过程中灭菌措施考虑不周
（1）果酒与果醋制作中原料的消毒
①榨汁前葡萄应先冲洗再去枝梗，因为在去梗的同时会使一些微生物侵入果实内部，给消毒带来一定的困难。
②体积分数为70%的酒精杀菌效果最强，其原因是浓度过低，杀菌力弱；浓度过高，使菌体表面蛋白质凝固形成一层保护膜，乙醇分子不能渗入其内，因此杀菌效果受影响。
（2）腐乳制作过程中的杀菌消毒
①制作腐乳的玻璃瓶用温水冲洗并用酒精消毒。
②酒、盐、香辛料都有杀菌作用。
③接种、封瓶时都要进行无菌操作。
三、真题及经典题回顾
例1．（2010江苏高考题）右图表示果酒和果醋制作过程中的物质变化过程，下列叙述正确的是（）
A.过程①和②都只能发生在缺氧条件下
B.过程①和都③只发生在酵母细胞的线粒体中
C.过程③和④都需要氧气的参与
D.过程①~④所需的最适温度基本相同
知能定位以流程图为载体主要考查了果酒和果醋的制作过程及有氧呼吸与无氧呼吸的异同点。
属于考纲分析判断层次。
解题指导解答本题的关键果酒和果醋制作的不同条件及细胞呼吸的过程、场所。
据图分析可知：
①是细胞呼吸的第一阶段；②是无氧呼吸的第二阶段；③包括了有氧呼吸的第二、第三两个阶段；④是乙醇氧化为醋酸阶段。
A项中①过程在有氧或无氧的条件下都可以进行，故A项叙述错；B项中①过程是在细胞质基质中进行而非线粒体，故B项叙述错；C项中③包括了有氧呼吸的第二、第三两个阶段；④是乙醇氧化为醋酸阶段，它们都必须在有氧的条件下才可以进行，故C项叙述正确；D项中①、②、③是果酒制作阶段的化学反应，其适宜的温度为18℃～25℃，④是果醋制作阶段的化学反应，其适宜的温度为30℃～35℃，故D项叙述错。
答案C
易错点击本题由于不能准确判断图中数字所代表的生理过程及果酒与果醋制作过程中所需的不同条件而出错。
例2．（2010广东高考题·多选）小李尝试制作果酒，他将葡萄汁放入已灭菌的发酵装置中进行试验（见图），恰当的做法是（）
A．加入适量的酵母菌
B．一直打开阀b通气
C．一直关紧阀a，偶尔打开阀b几秒钟
D．把发酵装置放到4℃冰箱中进行试验
解题指导本题主要考查学生的理解能力。
果酒的制备过程中先让酵母菌在有氧条件下迅速扩增，再让酵母菌在无氧条件下发酵产生酒精。
答案AC
例3.（09安徽高考题）下列是关于“检测土壤中细菌总数”实验操作的叙述，其中错误的是（）
A．用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基，经高温、高压灭菌后倒平板
B．取104、105、106倍的土壤稀释液和无菌水各0.1mL，分别涂布于各组平板上
C．将实验组和对照组平板倒置，37℃恒温培养24~48小时
D．确定对照组无菌后，选择菌落数在300以上的实验组平板进行计数
解题指导本题考察的是选修1专题2微生物的应用与培养的有关知识。
确定对照组无菌后，选择菌落数在30—300的进行记数，求起平均值，再通过计算得出土壤中细菌总数。
答案D
4．（09山东卷）人参是一种名贵中药材，其有效成分主要是人参皂苷。
利用细胞培养技术生产人参皂苷的大致流程如下：
悬浮培养
细胞分离
诱导
收集
提取
请回答：
（1）配制诱导愈伤组织的固体培养基，分装后要进行。
接种前，要对人参根进行。
（2）用于离体培养的根切块，叫做。
培养几天后发现少数培养基被污染，若是有颜色的绒毛状菌落，属于污染；若是有光泽的黏液状菌落，属于污染。
（3）用少量酶处理愈伤组织，获取单细胞或小细胞团，在液体培养基中进行悬浮培养，可有效提高人参皂苷合成量。
（4）人参皂苷易溶于水溶性（亲水性）有机溶液，从培养物干粉中提取人参皂苷宜选用
方法，操作时应采用加热。
解题指导山东理综生物试题选修一试题历年来，立足课本，主要考察课本的基础知识，题目较简单。
今年仍然立足课本，以植物组织培养为材料背景考察了植物组织培养过程中涉及到的培养基及消毒灭菌的相关的知识，及污染后的菌落特征的比较。
同时考查了选修一中关于物质的提取和鉴定的专题，跨度较大，考查的知识面较广。
（1）接种前，要对材料进行消毒（不能填灭菌，灭菌时是采用强烈的因素杀菌），配制培养基并分装后要用灭菌锅灭菌。
（2）比较菌落特征：
真菌污染：
有颜色的绒毛状菌落
细菌污染：
有光泽的黏液状菌落
（3）利用果胶酶处理愈伤组织可以获得单个的细胞
（4由题干，人参皂苷易溶于亲水性有机溶液，故而采用萃取的方法可以从培养物干粉中提取人参皂苷宜。
答案
（1）灭菌消毒
（2）外植体真菌（霉菌）细菌（3）果胶（4）萃取水浴
例5.（09宁夏卷）
（1）在大肠杆菌培养过程中，除考虑营养条件外，还要考虑______、______和渗透压等条件。
由于该细菌具有体积小、结构简单、变异类型容易选择、______、______等优点，因此常作为遗传学研究的实验材料。
（2）在微生物培养操作过程中，为防止杂菌污染，需对培养基和培养皿进行________（消毒、灭菌）；操作者的双手需要进行清洗和______；静止空气中的细菌可用紫外线杀灭，其原因是紫外线能使蛋白质变性，还能__________。
（3）若用稀释涂布平板法计数大肠杆菌活菌的个数，要想使所得估计值更接近实际值，除应严格操作、多次重复外，还应保证待测样品稀释的_______。
（4）通常，对获得的纯菌种还可以依据菌落的形状、大小等菌落特征对细菌进行初步的____________。
（5）培养大肠杆菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染。
对于固体培养基应采用的检测方法是_________。
（6）若用大肠杆菌进行实验，使用过的培养基及其培养物必须经过_______处理后才能丢弃，以防止培养物的扩散。
解题指导本题综合考查了微生物的培养及灭菌及大肠肝菌计数等重要考点:
（1）大肠杆菌具有体积小、结构简单、变异类型容易选择、易培养、生活周期短等优点，培养过程中，除考虑营养条件外，还要考虑温度、酸碱度和渗透压等条件。
（2）灭菌使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物,所以对培养基和培养皿进行灭菌,消毒使用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物,操作者的双手需要进行清洗和消毒,紫外线能使蛋白质变性，还能损伤DNA的结构.
（3）稀释涂布平板法是将菌液进行一系列的梯度稀释,然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面,进行培养,应保证样品稀释的比例适合.
（4）对获得的纯菌种还可以依据菌落的形状、大小等菌落特征对细菌进行初步的鉴定.
（5）培养大肠杆菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染。
对于固体培养基应采用的检测方法是将未接种的培养基在适宜的温度下放置适宜的时间,观察培养基上是否有菌落产生.
（6）因为有的大肠杆菌会释放一种强烈的毒素，并可能导致肠管出现严重症状，使用过的培养基及其培养物必须经过灭菌处理后才能丢弃，以防止培养物的扩散。
答案
（1）温度酸碱度易培养生活周期短
（2）灭菌消毒损伤DNA的结构
（3）比例合适
（4）鉴定（或分类）
（5）将未接种的培养基在适宜的温度下放置适宜的时间,观察培养基上是否有菌落产生.
（6）灭菌
例6（2010北京海淀期中练习）人们利用某些微生物制作食品时，需要分析微生物的特点，控制微生物的发酵条件。
下列与此有关
的各项内容都正确的是（）
解题指导本题考查微生物的应用知识，考查内容
较较广，比较贴近生活。
A、制果酒时是利用酵
母菌的无氧呼吸来生产酒精，所以不能通所。
C、应该先接种毛霉，让其生长，再加盐。
D、制泡菜用乳酸菌，而不是醋酸菌。
答案：
B
例7（2010北京崇文区考前模拟题）请回答下列与大肠杆菌有关的问题：
（1）从生态系统的成分上看，大肠杆菌属于______
_____；它的同化作用类型是______。
（2）下表是某
公司研发的一种培养大肠杆菌菌群的培养基配方。
根据用途划分该培养基属于____________培养基（选择、鉴别）。
该培养基中的碳源是_____________。
（3）培养大肠杆菌时，常用的接种方法是平板划线法和___________。
为防止杂菌污染需要对培养基和培养皿进行_________________。
（4）现有一升水样，用无菌吸管吸取1mL转至盛有9mL无菌水的试管中，依次稀释103稀释度。
各取0.1mL已稀释103倍的水样分别接种到三个培养基上培养，记录的菌落数分别为55、56、57，则每升原水样中大肠杆菌数为__________________。
（5）以下微生物发酵生产特定
产物时，所利用主要微生物的细胞结构与大肠杆菌相同的是____________。
A．制作果酒B．由果酒制作果醋C．制作泡菜D．制作腐乳
（6）利用培养基不仅可以分离培养微生物，也可以进行植物组织
培养。
与微生物培养明显不同的是，用于组织培养的培养基中还需要加入______________。
解题指导
（1）大肠杆菌在体外环境条件下培养是腐生生物，因此为分解
者，同化作用类型是异养型。
（2）培养基中有显色剤，用于鉴别不同种类的微生物，所以为鉴别培养基。
（3）培养大肠杆菌常用的接种方法是平板划线法和稀释涂布平
板法，培养基和培养皿需要灭菌。
（4）每升原水样中大肠杆菌数计算式为（55+56+57）/（10-3×10-3×0.1）=5.6×108（5）所利用的微生物是：
A为酵母菌B为醋酸菌，C为乳酸菌，D主要是毛霉。
大肠杆菌为原核生物，与其结构结构相同的是
醋酸菌和乳酸菌。
（6）植物组织培养与微生物培养明显不同的就是，组织培养的培养基中
还需要加入植物激素，主要是生长素和细胞分裂素。
答案
（1）分解者异养型
（2）鉴别乳糖、蔗糖（蛋白胨）（3）稀释涂布平板法灭菌（4）5.6×108（5）B．C（6）植物激素（或生长素和细胞分裂素）
四、模拟训练
1．下列有关果酒，果醋和腐乳制作的叙述，正确的是（）
A参与果酒发酵和果醋发酵的微生物都含有线粒体
B果酒制成后只需将装置转移至温度较高的环境中即可制作果醋
C在腐乳制作过程中必须有能生产蛋白质的微生物参与
D在腐乳装瓶时自下而上随层数的增加逐渐减少盐量
2．在制作腐乳时，加卤汤密封腌制过程中，对腐乳风味和质量无影响的因素是（）
A．酒的种类和用量B．周围环境中的湿度
C．香辛料的组成和用量D．腌制的温度和时间
3．下列评价果酒和果醋制作是否成功的方法中，不合理的是（）
A．通过观察相关微生物的存在或数量变化进行鉴定
B．通过向果酒发酵液中加入重铬酸钾试剂进行鉴定
C．通过检测果醋发酵前后发酵液的pH变化进行鉴定
D．通过检测果酒发酵前后发酵液的温度变化进行鉴定
4．微生物的接种方法最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法，关于两者的区别下列说法正确的是（）
比较方面
平板划线法
稀释涂布平板法
①
需要无菌下操作
不需无菌操作
②
培养皿要靠近酒精灯
培养皿不需靠近酒精灯
③
不可计算菌液中的活菌数
可计算菌液中的活菌数
④
需要接种环
需要涂布器
A．②、④B.③、④C．①、④D②、③B.③、④
5．下列有关微生物营养物质的叙述中，正确的是（）
A.是碳源的物质不可能同时是氮源B.凡碳源都提供能量
C.除水以外的无机物只提供无机盐D.无机氮源也能提供能量
6．右图是微生物平板划线示意图。
划线的顺序为12345。
下列操作方法正确的是（）
A．操作前要将接种环放在火焰边灼烧灭菌
B．划线操作须在火焰上进行
C．在5区域中才可以得到所需菌落
D．在12345区域中划线前后都要对接种环灭菌
7．果酒、果醋等是日常生活中常用的一类饮料。
红葡萄酒中的色素主要来自红葡萄皮中，它不仅给葡萄酒以美的红色，还具有酸碱指示剂的作用，如遇小苏打（碱性）会变颜色。
（1）在葡萄酒的自然发酵过程中，菌种的来源主要是附着在葡萄皮上的野生型酵母菌。
从呼吸角度看，酵母菌属于菌，可用酸性条件下的 溶液检验呼吸产生酒精。
（2）某同学在用带盖的瓶子进行葡萄酿酒时。
在发酵过程中，每隔一段时间。
（3）制作果醋时，需适当升高温度到30—35℃并通气，可以说明醋酸杆菌。
（4）为提高果酒的品质及节约生产成本，厂家已尝试使用固定化细胞技术。
酵母细胞的固定多采用法。
在用此法制备固定化酵母过程中，为加快海藻酸钠在水中的溶解速度，最好采用加热的方法，以防海藻酸钠发生焦糊。
（5）现有两个品牌颜色一样的红葡萄酒，其中一个是用100%红葡萄汁酿造，另一个是以化学物质用人工方法勾兑而成。
现提供小苏打、小烧杯若干，请简述能鉴别出两个品牌红葡萄酒的实验思路。
。
8．19世纪中期，人们已知酿酒是活酵母利用糖类发酵产生酒精和二氧化碳的过程，但对“糖类是怎样变成酒精和二氧化碳”存在不同观点：
一是糖类转变成酒精和二氧化碳需要活酵母菌的参与。
二是发酵是酵母菌细胞内某些物质引发的。
现在，人们普遍认为“发酵是由酵母菌细胞内某些物质（酶）引起的”，请利用下列材料加以证明。
（1）材料用具：
带孔的橡皮塞和锥型瓶（500ml）两个、凡士林、新鲜酵母、5%的葡萄糖溶液、恒温箱、玻璃导管、澄清的石灰水、蒸馏水、研钵、石英砂、离心机、量筒、烧杯和玻璃棒等。
（2）实验步骤:
①将100ml（或适量）5%的葡萄糖溶液倒入锥形瓶甲中；
②取10克（或适量）新鲜酵母；
③将得到的上清液倒入装有葡萄糖的锥形瓶甲中；
④取另一锥形瓶乙倒入50ml（或适量）澄清的石灰水，；
（3）实验结果及推论________________________________。
（4）实验分析
本实验是否可以不需要设对照实验？
，请说明原因
9．发醉法生产酒精后的废液〔pH4.3）含有大量有机物，可用于培养、获得白地霉菌体，生产高蛋白饲料。
培养、制取白地霉菌体的实验过程示意图如下，请据图分析回答问题：
（1）实验过程中培养白地霉的培养基是_____________________。
培养基定量分装前，先调节____________,分装后用棉塞封瓶口，最后______________________处理。
（2）图中①过程称为________________，从甲到丁的培养过程是为了____________。
白地霉的代谢类型为__________________。
（3）为确定菌体产量，图中②操作之前，应先称量__________________的质量。
过滤后需反复烘干称量，直至__________________________________________。
所得菌体干重等于_____________________________________________________________。
10．下图简单表示了葡萄酒的酿制过程。
请据图分析：
（1）葡萄酒的酿制原理
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