贝克曼BECKMANAU标准操作程序SOP.docx

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贝克曼BECKMANAU标准操作程序SOP

文件名称:

AU5800全自动生化分析仪作业指导书

文件编号:

LAB-BL-SOP-INSTR00

版本号:

B

修订号:

0

编制人:

罗光成

审核人:

蒋兴亮

页码:

起始第1页共33页

批准人:

颁布日期:

2014年07月01日

生效日期:

2014年07月01日

仪器信息

仪器名称:

BECKMANCOULTERChemistryAnalyzerAU5800

仪器型号:

AU5800(AU5821)

生产商:

贝克曼库尔特株式会社

生产地:

东京都江东区有明三丁目5番7号

生产日期:

2013年9月

产品序号:

许可证号:

国食药监械(进)字2011第24003311号(更)

资产权属:

川北医学院附属医院

参考资料:

AU5800中文操作手册

AU5800User’sGuide

维修电话:

400-667-1808(客户服务电话)

相关记录:

检验科生化室AU5800全自动生化分析仪使用记录

检验科生化室AU5800全自动生化分析仪校准记录

检验科生化室AU5800全自动生化分析仪试剂更换记录

检验科生化室AU5800全自动生化分析仪维护保养与故障记录

目录2

BECKMANCOULTERAU5800全自动生化分析仪作业指导书3

1.应用范围及仪器简介3

2.测定范围及方法原理8

3.开机前准备10

4.开机11

5.关机12

6.参数设置12

7.试剂装载程序14

8.定标(校准)17

9.室内质控19

10.标本测定程序20

11.维护保养程序23

12.错误标记(报警信息)28

13.AU5800术语29

BECKMANCOULTERAU5800全自动生化分析仪作业指导书

1.应用范围及仪器简介

AU5800系列全自动生化分析仪是专为大型临床实验室和商业实验室设计的全自动生化分析系统,本实验所用的AU5821包括两个分析单元和带一个ISE单元,可进行比色分析、比浊分析、乳胶凝集分析、均项酶免疫分析和间接离子选择电极(ISE)分析,可同时测定111个项目,最高可达4900测试/小时(4000分光光度测试/小时+900离子选择电极测试/小时),可满足临床和科研检测的需要。

1.1名称:

BECKMANCOULTERAU5800全自动生化分析仪

1.2生产商、型号、序列号

1.2.1生产商:

贝克曼库尔特株式会社

1.2.2型号:

AU5800(AU5821)

1.2.3序列号:

1.3仪器工作环境

1.3.1安装环境:

要确保安装空间,距离墙壁至少需要500mm的距离;避免直接面对阳光;地板可以承受仪器重量(ISE单元300kg,双分析单元1520kg),倾斜度小于1/200;避免震动;适于2000米以下的地方使用;放置设备的房间温度应在18-32℃之间,温度波动不大于+2℃;相对湿度(RH)在40-80%之间,没有冷凝现象,无腐蚀性气体,根据具体情况选择是否安装空调;

1.3.2电气和噪音条件:

与该设备10m内,要有一个电源连接器,AC220V(+10%),50/60Hz(+3%);该设备的电源开关板上得短路开关负荷为50A;强烈推荐UPS(≥6kVA),确保本设备已经接地;

1.3.3给水:

设备距离去离子水出水孔在10m以内;去离子水导电度应不大于2us/cm(电阻率≥0.5MΩ·cm),去离子水温在5-28℃之间;水压应在0.49x105到3.92x105Pa之间;平均用水量62L/h,最大用水量2.5L/min。

1.4系统简介

系统组成:

系统由数据处理单元、样品处理单元、ISE单元和两个分析仪单元组成。

仪器外部结构见下图(图1.1)

1.4.1数据处理单元:

个人计算机作为数据处理单元用于处理各种数据。

用嵌入式硬盘来储存程序、分析参数和分析数据库。

监视器显示软件的运行情况,键盘和鼠标则用于输入信息。

1.4.2样品架装载和传送装置:

本单元可装载和收集样品架。

样品架可在样品架固定单元或者急诊样品架套件单元进行装载。

可进行条形码阅读器读取样品架和样品的ID,并自动将信息转移到分析仪计算机。

样品架以颜色区分不同功能:

白色样品架用于放置常规样品;红色样品架用于放置插入急诊样品橙色样品架用于放置手动重测样品;蓝色样品架用于放置试剂空白样品;黄色样品架用于放置定标品

图1.2试管架装载器俯视图

图1.3试管架传送示意图

1.样品架固定单元;2.样品架收集单元;3.样品架传送单元;4.返回通道;

5.通道转换器;6.样品传送主通道;7.副通道;8.样品架缓冲装置;

9.优先样品架套件单元

1.4.3ISE单元:

通过比较稀释后样品通过钠、钾和氯离子选择性电极后的电势与参比电极电势的差值来确定样品浓度。

ISE检测所需的试剂瓶包括一个缓冲液瓶,一个MID溶液瓶和一个参比溶液瓶。

1.4.4分析仪单元:

该单元包含的子单元主要有:

加样单元、试剂加载单元、比色杯单元、光度计装置和混匀洗涤装置。

加样单元:

每个单元有2个样品探针(S1和S2)进注样品或稀释剂,样品针从样品管取样后注入内部或外部比色杯轮。

样品针具有检测液面高度、上下碰撞和凝块的功能。

如下图1.4。

图1.4加样单元

1.样品转移探针(S2);2.样品转移探针(S1);3.样品探针冲洗槽(S2);4.样品探针冲洗槽(S1)。

试剂加载单元:

每个单元有4个试剂探针(R1-1,R1-2,R2-1,R2-2),用于进注试剂或稀释剂。

试剂探针从R1和R2舱吸取试剂后注入内部或外部比色杯轮。

探针具有检测液面高度、上下碰撞和凝块的功能。

如下图1.5所示。

图1.5试剂单元

1.试剂转移探针(R2-2);2.试剂转移探针(R2-1);3.试剂转移探针(R1-1);4.试剂转移探针(R1-2);5.试剂针冲洗槽(R2-2);6.试剂针冲洗槽(R2-1);7.试剂针冲洗槽(R1-1);8.试剂针冲洗槽(R1-2)。

比色杯轮单元:

该单元总共有408个比色杯,内外部各有204个。

比色杯轮被分成12个楔形物。

比色杯孵育温度维持在37°C。

每个玻璃比色杯的最小反应体积为80μL,最大反应体积为287μL,光程长度为5mm。

冲洗喷嘴单元会自动清洗比色杯。

每周光度计维护时会检查比色杯的完整性,并根据光测结果清洗或更换比色杯。

光度计装置:

光度计装置由卤素灯、透镜、光栅和光电检测器组成,用于测定穿透比色杯中反应液的光量。

光栅将自然光分成13种波长。

每个分析仪单元均含有一个光度计装置。

冲洗喷嘴单元:

该单元由6个冲洗喷嘴,1个清洁吸嘴,和2个干燥吸嘴组成,用于自动清洁、冲洗和干燥比色杯。

每个冲洗喷嘴皆为三通道喷嘴,最长的喷嘴吸取液体,中等的喷嘴注入液体,而最短的喷嘴则吸走任何溢出的液体(图1.6)。

图1.6冲洗喷嘴单元(1.溢出喷嘴;2.注液喷嘴;3.吸液喷嘴)。

试剂冰箱单元:

两个试剂冰箱分别用来存放第一试剂(R1)和第二试剂(R2)。

关机后冰箱温度仍保持在4°C到12°C之间。

R1和R2试剂冰箱各有54个位置。

每个试剂瓶的位置可被指定为试剂ID或者固定(无条形码)。

处理时间:

分析处理时间是指从样品探针吸取样品到测定结束所花费的时间。

必要的分析时间大约为8分40秒。

1.4.5仪器主要操作界面

主界面主要由3部分组成:

A、主控制区;B、菜单区;C、报警提示区(图1.7)。

图1.7仪器主要操作界面

模式显示区显示的系统测定模式如下所示:

2.测定范围及方法原理

2.1测定范围包括离子选择电极法测定的Na+、K+、Cl-和光学比色(浊)测定的血液、尿液、脑脊液、浆膜腔积液等化学项目。

这些化学分析项目包括:

丙氨酸氨基转移酶(ALT);门冬氨酸氨基转移酶(AST);碱性磷酸酶(ALP);谷氨酰转肽酶(GGT);腺苷脱氨酶(ADA);胆碱酯酶(ChE);5`-核苷酸酶(5`-NT);前白蛋白(PA);总蛋白(TP);白蛋白(ALB);球蛋白(GLOB);总胆汁酸(TBA);总胆红素(TBIL);直接胆红素(DBIL);甘油三酯(TG);总胆固醇(CHOL);高密度脂蛋白胆固醇(HDLC);低密度脂蛋白胆固醇(LDLC);极低密度脂蛋白胆固醇(VLDL);载脂蛋白A1(apoA1);载脂蛋白B100(apoB100);载脂蛋白(a)(LP(a));总钙(TCA);二氧化碳结合力(CO2);无机磷(IP);尿素(Urea);肌酐(CREA);胱抑素C(CysC);尿酸(UA)葡萄糖(GLU)等。

2.2测定原理

2.2.1电解质单元测定原理:

根据特定的稀释率将样品和缓冲液混合于ISE单元(选配)的稀释罐中。

吸取混合物并通过钠、钾和氯电极。

测定这些电极产生的电位。

MID溶液在样品之间循环以测定基准电位并防止遗留。

2.2.2化学分析单元测定原理:

当一个样品被放入本设备时,样本通过进样模块进入到仪器,通过轨道被运输至采样位置。

R1试剂探针吸取R1试剂加入反应杯(反应进程的0点)。

混匀器混匀R1后,样本探针随即吸取样本加入到相应反应杯中,混匀器混匀样本和R1(反应进程的1点)。

并且完成180秒的孵育后,R2试剂探针在反应进程的10到11点之间吸取R2试剂加入反应杯中,以前继续监测反应进程直到结束。

在整个反应进程中,样品和试剂在比色杯中发生显色反应。

检测单元中卤素灯泡发出的光通过反应液,被衍射光栅分离成特定的波长(13个波长)。

光电检测器会测定反应液的光密度。

仪器从添加R1开始,反应每隔18秒进行一次测定,共27个测光点。

根据特定测试参数设定的时间间隔和波长而测得的数值可用来计算浓度。

2.3测定方法

2.3.1试剂空白测定:

要算出样品的测定值(OD反应值),应从测得的与试剂反应后的样品OD值中减去试剂空白OD值(从P0至P27每个光度计点的试剂OD值)和去离子水空白OD值(光校正值)。

通过试剂空白测定法可获得下图所示的所有光度计点的试剂空白OD值(RB)。

如下图2.1所示。

图2.1试剂空白测定的反应进程图

2.3.2终点检测法

1-点终点法:

这是一般的终点检测法,它通过测定某一特定光度计点的OD值来确定反应混合物的OD值。

反应混合物OD值=OD(特定位置)—OD0(0位置),图2.2。

2-点终点法:

它用于要求样品空白调零的终点检测法。

应减去加注试剂2之前的OD值以作为空白管。

从加入试剂2之后测得的数值中减去空白管的OD值以得到不受血清的浑浊度和颜色影响的准确数据。

本方法的OD值如下图2.2所示。

K2={R1.V/(R1.V+R2.V+S.V)};K3={(R1.V+S.V)/(R1.V+R2.V+S.V)}

反应物OD值=(Px-K2×P0)-(K3×Pz-K2×P0)。

图2.2终点检测法的反应进程图

2.3.2速率检测法:

本检测法通过使用最小平方法计算光度计点之间吸光度差异(OD)的平均值确定每分钟吸光度变异率。

然后系统可根据该计算公式获得目标物质的OD率(图2.3)。

图2.3速率检测法的反应进程图

3.开机前准备

3.1检查供水与供电

检查去离子水电源、纯水机工作状态、水箱水量,确保仪器工作状态水箱有足够的水量,AU5800耗水速度最大为150L/h,水质要求电导率<2us/cm.

检查UPS电源工作状态,UPS电源应该处于断电保护及AC灯亮的工作状态

3.1检查仪器

检查清洗剂原液量,桶内液面不低于1/3,如不足需添加。

检查样品针清洗液(W1位),Det1位置放置2%清洗液B50ml,Det2放有效氯量为0.5%的次氯酸钠消毒液50ml。

如不够则添加。

检查ISE试剂量(内标液、缓冲液、参比液)及试剂分配是否有渗漏。

检查样品针、试剂针、搅拌棒是否有结晶黏附、弯曲,是否处于正常状态。

如有结晶黏附,用乙醇擦拭干净,如弯曲,则校正至正常状态。

检查样品和试剂分配器是否有渗漏。

检查清洗液蠕动泵是否有渗漏。

检查样品架收集槽内有无样品架,有则去除。

确认仪器台面清洁、无杂物。

填写检查记录表,确认以上各项均正常后,执行开机程序。

4.开机

4.1启动电源:

按仪器前面右侧的电源开关“ON”启动仪器(如下图4.1所示)。

4.2仪器自动初始化过程:

当计算机显示“下载程序至分析仪”后,仪器将询问用户是建立新的索引还是使用上一次的索引(建议建立新的索引?

,选择“是”),仪器将自动运行“初始化”程序使仪器各部分做复位动作后,仪器转到“预热”状态,预热状态约需22min结束(正常开机需22min,如紧急停机后启动需90min左右)

4.3紧急停机后启动:

先按RESET键,然后再执行正常启动程序,预热90min(逃过预热:

主界面→分析仪保养→待机/F4)。

4.3检查试剂状态:

在开机完成后应检查试剂库存量,按需补足,以满足当天所需测试数为准(主界面→试剂管理→试剂主界面)。

4.4ISE校准:

AU5800采用间接离子选择电极(IonSelectiveElectrode,ISE)法测定钾、钠、氯离子,采用独立的校准品系统对仪器进行校准,在分析质控和病人样本之前,应对ISE单元进行校准。

4.4.1装载校准品:

将ISELowSerumStandard放在“S-L”位置上,将ISEHighSerumStandard放在“S-H”位置上,将ISEcleaner放在“CLEAN”位置上(如下图4.2)。

4.4.2执行校准程序

完成校准品装载后,点击主界面→分析仪保养→ISE保养→进入电解质状态界面,再选择定标→点击血清检测启动执行电解质血清定标。

仪器将自动完成电解质定标,并将定标结果显示在当前窗口,在窗口的下侧给出了每个项目的正常值,如定标通过,数据显示为蓝色,如定标未通过,数据显示为黄色,需重新定标

5.关机

5.1执行电解质单元清洗:

每天在关闭分析仪之前应执行电解质单元清洗。

在电解质处的“Clean”(清洁)位置放上电解质的清洁液。

点击主界面→分析仪保养→ISE保养→在电解质状态界面再选择保养。

点击右下角的清洁选项,清洁电解质单元,清洗完毕后仪器自动回到“待机”状态。

5.2执行关机:

仪器操作主界面点击

键,弹出“关机”窗口(在此窗口可以预设置下次自动开机的日期和时间),点击“是”,仪器将自动关闭仪器主机及PC电脑,仪器进入“待机关机”。

在此状态下仪器试剂仓保持制冷,试剂可以放在试剂仓中不用取出。

在此状态下ISE将自动做电极的定时冲洗。

6.参数设置

6.1通用测试参数设置(测试名称设置)

点击菜单列表→选择参数→进入通用测试参数→选择测试名称界面。

点击编辑按钮,按照参数文件逐项输入“测试”、“试剂ID”、“警报次数”,并在多种试剂切换选择为是。

在比色杯处选择使用内部或外部比色杯点击确认保存并退出。

6.2激活测试菜单

点击菜单列表→选择参数→进入通用测试参数→选择测试组,然后在测试组中选择需要编辑的测试组。

点击编辑→点击测试项目设置进入界面,选择需要添加的测试项目→点击确认保存并退出。

6.3项目具体分析参数设置

编定具体测试参数之前,必须先在通用测试参数→测试名称中编定测试名称。

有关编定测试名称的详细信息,请参阅本章的6.1。

点击菜单列表→点击参数→点击具体测试参数→选择常规选项卡→进入常规界面→在测试名称处选择需要编辑的项目→点击编辑按照相应项目参数录入相关参数→点击确认保存并退出。

注意:

操作选项必须设置为“是”,默认设置为“否”,如果不改为“是”,该项目将无法测定

6.4测试项目的范围设置(设置小数位)

点击菜单列表→选择参数→点击具体测试参数→选择范围→进入范围界面→在测试名称处选择需要编辑的测试项目。

点击编辑按钮→选择单位→点击设置小数位→编辑小数位数→点击确认保存并退出

6.5校准参数设置

在主界面选择菜单列表→选择参数菜单→选择定标参数→再选择定标品→点击编辑→设置定标液的名称,定标液放在样本架的位置→关闭编辑窗口,点击确认进行保存。

在主界面选择菜单列表→选择参数菜单→选择定标参数→再选择定标具体参数→点击编辑→按参数文件设定相应定标液的具体值,限制范围→点击“确认”保存并退出(原装试剂的具体数值需参考该批号的资料,BC公共网站可以下载)。

6.6删除实验项目

点击菜单列表→选择参数→进入通用测试参数→选择测试组,在测试组中选择需要编辑的测试组,点击编辑→点击测试项目设置进入界面选择需要删除的测试项目→点击确认保存并退出

6.7分析模式设置

在主界点击菜单列表→选择系统→选择系统状态→选择分析模式→选择编辑→窗口变成编辑模式,设定表中每个项目的系统参数:

6.8编定在线(通信)参数

6.8.1通信方法可从以下3种方法中选择:

实时:

在分析过程中执行测试申请问询和分析结果输出。

批次:

通过操作者干预执行测试申请问询和分析结果输出。

无:

没有进行在线输入/输出。

6.8.2操作步骤:

点击菜单列表→选择系统→选择在线→选择编辑窗口变成编辑模式→从下拉列表中为每种样品类型选择通信方法→选择确认保存并退出。

7.试剂装载程序

7.1分析仪单元试剂仓功能简介:

BeckmanCoulterAU5800全自动生化分析仪配置两个试剂仓,分别为R1试剂仓,R2试剂仓,R1试剂仓可装载54个(种)试剂,R2试剂仓可装载54个(种)试剂。

试剂必须使用配套的试剂瓶才能装载在试剂仓中,可供使用的试剂瓶规格有120ml、60ml、30ml、15ml共4种,使用15ml、30ml试剂瓶时必须使用相应的“适配器,挡片”固定,以防止试剂瓶倾倒。

试剂瓶尽量不要重复使用,或者清洗干净后再次使用。

BeckmanCoulterAU5800全自动生化分析仪配置ID条形码识别方式和固定试剂瓶位置两种试剂识别方式。

将试剂设定为ID条形码方式时,仪器通过扫描试剂瓶上的条形码自动识别试剂的种类。

这种识别方式必须使用原装配套试剂。

对于非原装试剂或在某些情况下ID条形码识别方式不能正常使用时,必须采取固定试剂位置方式,指定试剂种类的位置

7.2分析仪单元装载试剂

本部分以装载总蛋白(TP)测试试剂为例说明装载试剂的方法和步骤。

7.2.1原装试剂

打开R1试剂仓的盖子,将总蛋白试剂1(R1,30ml瓶装)放入R1试剂仓任意位置,加装挡片固定,盖上试剂仓盖子,并确定盖子位置正确。

打开R2试剂仓的盖子,将总蛋白试剂2(R2,30ml瓶装)放入R2试剂仓任意位置,加装挡片固定,盖上试剂仓盖子,并确定盖子位置正确

点击复位到主界面→选择试剂管理→进入试剂管理的主界面→点击试剂检查→点击详细信息进入详细信息界面,观察试剂详细信息(图7.1)

7.2.2非原装试剂

打开R1试剂仓的盖子,将总蛋白试剂1(R1,30ml瓶装,无条码)放入试剂仓1的第5号位置,加装挡片固定,盖上试剂仓盖子,并确定盖子位置正确。

打开R2试剂仓的盖子,将总蛋白试剂2(R2,30ml瓶装,无条码)放入试剂仓2的第5号位置,加装挡片固定,盖上试剂仓盖子,并确定盖子位置正确.

点击复位到主界面→选择试剂管理→点击右下角试剂检查→等待试剂检查完成→点击详细信息选项→在试剂显示处选位置选项→在成分处选择R1或R2→上下翻页,选择需要放置试剂的位置(本例TP放置位置为5号位置,此时此处试剂显示为“?

”)→选择需要放置试剂的位置→点击位置设置→选择为固定试剂→点击编辑→编辑相应的试剂名称和相关信息→点击“确认”保存并退出,可以发现固定位置试剂左方有一个“*”(图7.1)

然后再选择试剂检查对刚才设定试剂的液量进行检查。

图7.1试剂设置

7.3更换或添加试剂

点击复位到主界面→选择试剂管理→进入试剂管理的主界面→点击试剂检查→点击详细信息→进入详细信息界面观察试剂详细信息→其中显示当前剩余测试数、在机有效期、批号、瓶号等。

根据用量添加或者更换试剂(一台仪器同一个项目最多可以放置5套相同试剂),应尽可能的采用更换试剂方式,避免重复使用试剂瓶。

打开试剂仓盖,根据试剂信息显示,更换或添加所需试剂;点击左下角的“初始化在机稳定期”

7.4检查试剂

BeckmanCoulterAU5800全自动生化分析仪要求更换试剂或者添加试剂后必须执行一次“试剂检查”程序,更换或者添加的试剂才被确认。

点击复位到主界面→选择试剂管理→进入试剂管理的主界面,在右下角有一个“试剂检查”,点击进行试剂检查。

试剂检查方式有多种:

开机后第一次试剂检查或者更改过试剂参数后只能选择“检查所有位置”,将在机的所有试剂进行检查。

后面更换或者添加试剂,可以根据具体情况选择具体的试剂检查方式。

有如下方式:

①仅重置:

执行此操作只做试剂仓复位;②检查所有位置:

检查全部项目的试剂;③检查指定位置:

检查指定试剂位置,选择此项后弹出项目窗口,用鼠标选择需要检查的R1、R2的具体位置;④检查已更改位置:

检查开机后位置改变了的条码项目。

查看试剂信息:

点击复位到主界面→选择试剂管理→进入试剂管理的主界面→点击试剂检查→点击详细信息→进入详细信息界面观察试剂详细信息。

其中显示当前剩余测试数、在机有效期、批号、瓶号等。

确认正确后,退出并返回“复位”界面。

填写《试剂添加与更换记录表》

7.5补充浓缩清洗液

浓缩清洗液箱被安装在试管架进料器装置内,每个分析仪单元内的浓缩清洗液箱自动从试管架进料器装置内的箱获得溶液。

即使试管架进料器装置内的箱空了,系统可以使用每个分析仪单元的浓缩清洗液箱内剩余的清洗液继续分析,最多可达4小时。

操作步骤:

打开试管架进料器装置的前板→拔掉黑色浮球感应器连接器→向前拉出清洗液箱→从清洗液箱取下盖帽和连接器→补充足够的清洗液→拧紧盖帽,插上黑色浮球感应器连接器→关闭进样单元前板。

7.6补充ISE试剂

ISE试剂包括缓冲液、MID标准液和参比液(图7.2),ISE试剂在机稳定期为90天。

开机前应确认液位足够用于典型的日常分析,当液位降至3cm

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