高中生物实验详细总结.docx

高中生物实验详细总结.docx

《高中生物实验详细总结.docx》由会员分享，可在线阅读，更多相关《高中生物实验详细总结.docx（16页珍藏版）》请在冰点文库上搜索。

高中生物实验详细总结

原理

实验材料

试剂

操作

结果

淀粉的检验

淀粉遇碘单质变蓝。

物质氧化碘液，置换碘单质，碘单质与物质发生颜色反应。

马铃薯匀浆

碘液（碘化钾溶液）

①向试管内注入2mL待测组织样液。

②向试管内滴加两滴碘液，观察颜色变化。

样液颜色变蓝，则样液含淀粉。

还原糖的检验

还原糖（葡萄糖，果糖，麦芽糖）与斐林试剂发生作用，生成砖红色沉淀。

苹果或梨匀浆

斐林试剂：

甲液：

质量浓度为0.1g/mL的NaOH溶液；乙夜：

质量浓为0.05g/mL

①向试管内注入2mL待测组织样液。

②向试管内注入1mL斐林试剂（甲液乙液等量混合均匀后再注入）

③将试管放入盛有50~65℃温水的大烧杯中加热约2min

④观察试管中出现的颜色变化

若生成砖红色沉淀，则样液含还原糖。

脂肪

脂肪被苏丹Ⅲ染成橘黄色，被苏丹Ⅳ染成红色

花生种子或花生种子匀浆

苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ

方法一：

向待测组织样液中滴加三滴苏丹Ⅲ染液，观察染液被染色情况

方法二：

制作子叶临时切片①取材②切片③制片：

1.在花生子叶薄片上滴2~3滴苏丹Ⅲ，染色3min（苏丹Ⅳ染色一分钟）2.用吸水纸吸去染液再滴加1~2滴体积分数为50%的酒精溶液，洗去浮色3.用吸水纸吸取花生子叶周围的酒精，滴一滴蒸馏水，盖上盖玻片，制成临时装片

④观察花生子叶最薄处

脂肪颗粒被染成橘黄色（红色）

蛋白质

蛋白质（肽键）与双缩脲发生颜色反应，蛋白质含量越高紫色越深

豆浆或鲜肝研磨液

双缩脲试剂：

A液：

质量浓度为0.1g/mL的NaOH溶液；B夜：

质量浓为0.01g/mL的CuSO4

①向试管内注入2mL待测组织样液

②向试管内注入双缩脲试剂A液1mL，摇匀

③向试管内注入双缩脲试剂B液4滴，摇匀

④观察试管内出现的颜色变化

样液变紫

观察DNA和RNA在细胞中的分布

两种染色剂对DNA和RNA的亲和力不同，甲基绿使DNA呈现绿色，吡罗红使RNA呈现红色。

人的口腔上皮细胞或洋葱鳞片叶内表皮细胞

①质量分数为0.9%的NaCl溶液②质量分数为8%的盐酸

①去口腔上皮细胞制片：

1.在载玻片上滴一滴NaCl溶液。

2.在口腔内侧轻刮几下，将碎屑在液滴中涂抹。

3.点燃酒精灯，将载玻片烘干

②水解

1.在小烧杯中加入30mL质量分数为8%的盐酸，载玻片放入其中。

2.在大烧杯中加入30℃温水。

3.将小烧杯放在大烧杯中保温5min

③冲洗涂片：

用缓水流冲洗载玻片10s

④染色：

1.吸水纸吸水2.将混合染色剂滴2滴在载玻片上，染色5min3.吸去多余染色剂，盖上盖玻片

⑤观察

真核细胞DNA主要分布在细胞核中，RNA主要分布在细胞质中。

用高倍显微镜观察叶绿体和线粒体

叶绿体散布于细胞质中，可用高倍显微镜观察其形态和分布。

健那绿染液是将活细胞中线粒体染色的专一性染料，使活细胞中线粒体呈现蓝绿色可维持活性数小时

新鲜菠菜叶或黑藻叶；人的口腔上皮细胞

质量分数为1%的健那绿溶液

①制作藓类叶片临时装片：

在载玻片上滴一滴清水，用镊子取一片小叶或菠菜叶带叶肉的下表皮，放入水滴盖上盖玻片

②观察叶绿体

③制作人的口腔上皮细胞临时装片

④观察线粒体

叶绿体随细胞质流动而流动。

代谢旺盛的位置线粒体较多

鉴别死细胞与活细胞

活细胞的细胞膜可以控制物质进出

动物细胞

台盼蓝

用台盼蓝染色，观察细胞是否着色

活的动物细胞不着色

植物细胞的吸水与失水

植物细胞的原生质层相当于一层半透膜；原生质层比细胞壁的伸缩性大；细胞液浓度大于外界溶液的浓度

紫色的洋葱鳞片叶

质量浓度为0.3g/mL的蔗糖溶液

1.制作临时装片2.用低倍显微镜观察液泡大小及原生质层位置3.从盖玻片的一侧滴入蔗糖溶液，在盖玻片的另一侧用吸水纸吸引。

4.用低倍显微镜再次观察5.在盖玻片的另一侧滴入清水，在盖玻片的另一侧用吸水纸吸引。

6.再次用低倍显微镜观察

细胞发生质壁分离，后又发生质壁分离的复原

探究酵母菌的呼吸方式

酵母菌是兼性厌氧菌；CO2可使澄清石灰水变浑浊，也可使溴麝香草酚蓝水溶液由蓝变绿再变黄；橙色的重铬酸钾在酸性条件下与乙醇发生化学反应，变成灰绿色。

食用酵母菌

澄清石灰水；质量分数为5%的葡萄糖溶液；澄清石灰水；溴麝香草酚蓝水溶液；重铬酸钾溶液

①酵母菌培养液的制备：

制备两瓶，均注入葡萄糖溶液

②检测CO2的产生：

对A:

让空气间歇性依次通过三个锥形瓶，然后放置25-35℃环境中培养5-8h对B：

封口放置一段时间，再联通盛有澄清石灰水的锥形瓶

③检测酒精的产生：

各取培养液的余液，分别注入两只试管，分别滴加0.1g溶有重铬酸钾的浓硫酸溶液，轻轻振荡，观察试管中溶液颜色变化

观察根尖分生组织细胞的有丝分裂

有丝分裂常见于根尖根芽等分生区细胞，染色体容易被碱性染料如龙胆紫和醋酸洋红溶液染色

洋葱根尖细胞

质量分数为15%的盐酸，体积分数为95%的酒精，龙胆紫溶液或醋酸洋红液

①洋葱根尖的培养

②装片的制作；

1.解离

2.漂洗：

用镊子把根尖放入盛有清水的玻璃皿中

3.染色

4.制片：

根尖放载玻片上，用镊子吧根尖弄碎，盖上盖玻片，用拇指轻轻按压

③根尖细胞有丝分裂的观察

处于间期的细胞最多

低温诱导植物染色体数目的变化

用低温处理植物分生组织细胞，能抑制纺锤体的形成，

洋葱或大葱，蒜

卡诺氏液；改良苯酚品红染液；

质量分数为15%的盐酸溶液；体积分数为95%的酒精溶液

①将洋葱放在装满清水的广口瓶上，待洋葱长出乐1cm不定根时将装置放入冰箱（约4℃），诱导培养36h

②剪取经处理的根尖0.5-1cm放入卡诺氏液中浸泡0.5-1h，以固定细胞形态，然后用体积分数为95%的酒精冲洗两次

③制作装片，包括：

解离，漂洗，染色，制片

④观察

DNA的鉴定

DNA中嘌呤核苷酸上的脱氧核糖遇酸生成w—羟基—r酮基戊醛，它再和二苯胺作用而显现蓝色（溶液呈浅蓝色）

鸡血或菜花细胞

二苯胺试剂

①取两只20ml试管，各加入量浓度为2mol/L的NaCl溶液5mL。

②将丝状物放入其中一支试管，用玻璃棒搅拌，使物质溶解

③向两只试管个加入4ml二苯胺试剂，混合均匀。

④将试管置于沸水中加热5min，待试管冷却后，比较溶液颜色，观察含DNA的试管溶液是否变蓝

鉴定能分解尿素的细菌

在细菌分解尿素的化学方应中，脲酶将尿素分解成氨，是培养基碱性增强，使酚红指示剂变红

能分解尿素的细菌

酚红指示剂

在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂，培养某种细菌后，如果pH升高，指示剂将变红，就可以初步鉴定该种细菌可以分解尿素

绿叶中色素的提取与分离

色素能溶解在无水乙醇中；不同色素在层析液中溶解度不同。

溶解度高的扩散快。

菠菜的绿叶

无水乙醇；层析液；二氧化硅（研磨充分）；碳酸钙（防色素被破坏）

①提取绿叶中的色素：

1.剪碎绿叶，向研钵中放入少许二氧化硅和碳酸钙，再加入10ml无水乙醇，进行迅速充分的研磨。

2.将研磨液迅速倒入玻璃漏斗中进行过滤，用棉塞将试管口封严。

②制备滤纸条：

将滤纸条的一端剪去两角，并在距这端1cm处用铅笔画一条细线

③画滤液细线：

用毛细管吸取少量滤液，沿铅笔线均匀画细线，待干后，再画一两次

④分离绿叶中的色素：

将滤纸条有细线的一端轻轻插入层析液中，随后用棉花紧塞试管口（不能让滤液细线触及层析液）

从上到下：

胡萝卜素：

橙黄

叶黄素：

黄色

叶绿素a：

蓝绿（最多）

叶绿素b：

黄绿

（叶绿素，[3/4]主要吸收蓝紫和红光，类胡萝卜素[1/4]主要吸收蓝紫光）

测定饮用水中的大肠杆菌数目

如果有大肠杆菌，因其强烈分解乳糖而产生大量的混合酸，菌体带H+，故菌落被染成深紫色，从菌落表面的反射光中还可以看到金属光泽。

饮用水的滤膜

伊红美蓝培养基

根据培养基上黑色菌落的数目，计算出水样中大肠杆菌的数量。

鉴别纤维素分解菌

刚果红可以与纤维素这样的多糖物质形成红色复合物，但不和纤维二糖和葡萄糖反应。

纤维素分解菌

刚果红（CR）

法1：

在长出菌落的培养基上覆盖1g/ml的CR溶液，10-15min后倒去，再加入NaCl溶液，15min后倒去

法2：

1:

200比例将10g/ml的CR溶液加入培养基，混匀后倒平板

通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌

酒精在高中生物中：

1、脱色剂

“探究叶绿体在光照下合成淀粉实验”中,将处理过的天竺葵叶片放入盛有酒精的小烧杯里,隔水加热,使叶片褪色（破坏和溶解叶片中所含的色素）.这样就可在滴加碘液后,避免对观察叶片颜色变化的干扰.

2、漂洗剂

酒精是良好的有机漂洗剂.“脂肪的鉴定实验”中,用苏丹Ⅲ染液对脂肪组织进行染色后,可用体积分数为50%的酒精来冲洗浮色,以免干扰对细胞内脂肪颗粒的观察.

3、　提取剂和层析剂

绿叶中色素的提取和分离实验”中,可以用纯酒精作为提取色素的试剂和层析剂.在“DNA的粗提取与鉴定实验”中,采用酒精沉淀法,利用DNA不溶于酒精,而蛋白质、脂肪及磷脂等能溶解其中,可以进一步提出含杂质较少的DNA丝状物.

4、固定剂

在“观察植物细胞有丝分裂实验”中,一般采用质量分数为15%的盐酸和体积分数为95%的酒精按体积比1：

1混合而成的药液作为解离试剂.盐酸能够使洋葱细胞的细胞壁软化,并使细胞间的中胶层物质溶解,从而达到分离细胞的目的.酒精的作用是固定蛋白质,使细胞的原生质凝固,不发生变化,固定细胞的分裂相,以尽可能保持原来的结构供观察.酒精也可与其它试剂混合成复合固定剂,如“低温诱导染色体加倍”中的卡诺固定液就是由无水酒精3份：

冰醋酸1份配制而成,适用于一般植物组织和细胞的固定,常用于根尖、花药压片及子房石蜡切片等.

5消毒剂选一中所有的70％的酒精都是消毒剂.70％～75％浓度杀菌作用最强,此浓度的酒精与细菌的渗透压近似,在细菌表面蛋白未变性前能不断地向菌体内部渗入,使细菌所有蛋白脱水、变性凝固,最终杀死细菌,以达到消毒杀菌的目的.浓度低于70％,则渗透性降低,达不到灭菌消毒目的.

5.燃烧剂　　酒精灯中的燃料

盐酸在高中生物中：

1、“DNA和RNA在细胞在的分布”中8％盐酸的作用

（1）盐酸能改变细胞膜的通透性,加速染色剂的跨膜运输；

（2）盐酸使染色体中的DNA与蛋白质分离,便于DNA与染色剂的结合

2、“有丝分裂观察”和“低温诱导染色体加倍”中15％盐酸能够使洋葱细胞的细胞壁软化,并使细胞间的中胶层物质溶解,从而达到分离细胞的目的.

3、“酶活性受PH影响实验”和“生物组织中PH维持稳定的机制”盐酸用来变PH值。

高中生物常见染色剂

①氧化还原类

1斐林试剂2.重铬酸钾

②络合物类

1.碘2.双缩脲

③有机染色剂：

1.苏丹染色剂2.甲基绿，吡罗红，二苯胺3.龙胆紫，醋酸洋红，刚果红

④酸碱指示剂类：

1.溴麝香草酚蓝水溶液2.酚红指示剂

1斐林试剂检测可溶性还原糖

原理：

还原糖+斐林试剂→砖红色沉淀

注意：

斐林试剂的甲液和乙液要等量混合均匀后方可使用,而且是现用现配,条件需要水浴加热.

应用：

检验和检测某糖是否为还原糖；不同生物组织中含糖量高低的测定；在医学上进行疾病的诊断,如糖尿病、肾炎.

2苏丹Ⅲ、苏丹Ⅳ检测脂肪

原理：

苏丹Ⅲ+脂肪→橘黄色；苏丹Ⅳ+脂肪→红色

注意：

脂肪的鉴定需要用显微镜观察.

应用：

检测食品中营养成分是否含有脂肪.

3双缩脲试剂检测蛋白质

原理：

蛋白质+双缩脲试剂→紫色

注意：

双缩脲试剂在使用时,先加A液再加B液,反应条件为常温（不需要加热）.

应用：

鉴定某些消化液中含有蛋白质；用于劣质奶粉的鉴定.

4碘液检测淀粉

原理：

淀粉+碘液→蓝色

注意：

这里的碘是单质碘,而不是离子碘.

应用：

检测食品中营养成分是否含有淀粉

5DNA的染色与鉴定

染色原理：

DNA+甲基绿→绿色

应用：

可以显示DNA在细胞中的分布.

鉴定原理：

DNA+二苯胺→蓝色

应用：

用于DNA粗提取实验的鉴定试剂.

6吡罗红使RNA呈现红色

原理：

RNA+吡罗红→红色

应用：

可以显示RNA在细胞中的分布.

注意：

在观察DNA和RNA在细胞中的分布时用的是甲基绿和吡罗红混合染色剂,而不是单独染色.

7台盼蓝使死细胞染成蓝色

原理：

正常的活细胞,细胞膜结构完整具有选择透过性能够排斥台盼蓝,使之不能够进入胞内；死细胞或细胞膜不完整的细胞,胞膜的通透性增加,可被台盼蓝染成蓝色.

应用：

区分活细胞和死细胞；检测细胞膜的完整性.

8线粒体的染色

原理：

健那绿染液是专一性染线粒体的活细胞染料,可以使活细胞中的线粒体呈现蓝绿色,而细胞质接近无色.

应用：

可以用高倍镜观察细胞中线粒体的存在.

9酒精的检测

原理：

橙色的重铬酸钾溶液在酸性条件下与酒精发生化学反应,变成灰绿色.

应用：

探究酵母菌细胞呼吸的方式；制作果酒时检验是否产生了酒精；检查司机是否酒后驾驶.

10CO2的检测

原理：

CO2可以使澄清的石灰水变混浊,也可使溴麝香草酚蓝水溶液由蓝变绿在变黄.

应用：

根据石灰水混浊程度或溴麝香草酚蓝水溶液变黄的时间长短,可以检测酵母菌培养液中CO2的产生情况.

11染色体（或染色质）的染色

原理：

染色体容易被碱性染料（如龙胆紫溶液或醋酸洋红溶液）染成深色.

应用：

用高倍镜观察细胞的有丝分裂.

12吲哚酚试剂与维生素C溶液呈褪色反应

原理：

吲哚酚即2,6-二氯酚靛酚钠,其水溶液为蓝紫色,维生素C具有还原性,能将其褪色.

应用：

可用于检测食品营养成分中是否含有维生素C.

13亚硝酸盐的检测出现玫瑰红

原理：

在盐酸酸化条件下,亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后,与N-1-萘基乙胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料.

应用：

将显色反应后的样品与已知浓度的标准液进行目测比较,可以大致估算出泡菜中亚硝酸盐的含量.

14脲酶的检测

原理：

细菌合成的脲酶可以将尿素分解成氨,氨会使培养基的碱性增强,使PH升高,从而使酚红指示剂变红.

应用：

在以尿素为唯一氮源的培养基加入酚红指示剂,培养某种细菌后,看指示剂变红与否可以鉴定这种细菌能否分解尿素.

15伊红美蓝检测大肠杆菌

原理：

在伊红美蓝培养基上,大肠杆菌的代谢产物（有机酸）与伊红美蓝结合使菌落呈现黑色.

应用：

用滤膜法测定水中大肠杆菌的含量.

16刚果红检测纤维素分解菌

原理：

刚果红是一种染料,它可以与像纤维素这样的多糖物质形成红色复合物,但并不和水解后的纤维二糖和葡萄糖发生这种反应.当在含有纤维素的培养基中加入刚果红时,刚果红能与培养基中的纤维素形成红色复合物.当纤维素被纤维素分解菌分解后,刚果红-纤维素的复合物就无法形成,培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈.

应用：

筛选纤维素分解菌.