学年生物人教版选修1同步检测专题6课题2 胡萝卜素的提取.docx
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学年生物人教版选修1同步检测专题6课题2胡萝卜素的提取
课题2 胡萝卜素的提取
理一理
判一判
1.胡萝卜素化学性质稳定，易溶于有机溶剂，适宜采用萃取法提取。
（√）
2．胡萝卜粉碎后可直接进行萃取。
（×）
3．水溶性和水不溶性有机溶剂都可以用于提取胡萝卜素。
（×）
4．石油醚沸点高，适宜进行胡萝卜素的萃取。
（√）
5．萃取的效率仅取决于萃取剂的性质和用量。
（×）
6．胡萝卜素的鉴定可采用纸层析法。
（√）
7．干燥处理可减少原料的含水量，进而促进原料中的胡萝卜素溶解于萃取剂中。
（√）
8．萃取过程可用明火加热，还要安装冷凝管以防胡萝卜素损失。
（×）
悟一悟
1.萃取前，要将胡萝卜进行粉碎和干燥。
粉碎的胡萝卜颗粒越小越好。
2．新鲜的胡萝卜含有大量的水分，在干燥时要注意控制温度，温度太高、干燥时间太长会导致胡萝卜素分解。
3．胡萝卜干燥的速度和效果与破碎程度、干燥方式有关。
可以用烘箱烘干，也可以用热风吹干。
4．萃取的最佳温度和时间可以通过设置对照实验来摸索。
5．层析时应选择干净的滤纸，为了防止操作时对滤纸的污染，应尽量避免用手直接接触滤纸，可以戴手套进行操作。
6．点样应快速细致，样点不能太大（直径为2mm左右），并保持滤纸干燥。
点样后如果用吹风机吹干，温度不宜过高，否则样点会变黄。
7．点样完成后，将滤纸卷成筒状，卷纸时注意滤纸两边不能相互接触，以免因毛细现象导致溶剂沿滤纸两边的移动加快，溶剂前沿不齐，影响结果。
8．石油醚易挥发，层析容器要密封。
9．层析时间不宜过长，因为胡萝卜素随石油醚扩散速度很快。
感悟体会：
练一练
1.[全国高考题]回答与胡萝卜有关的问题：
（1）胡萝卜含有的胡萝卜素中，最主要的是________（填“α胡萝卜素”或“β胡萝卜素”或“γ胡萝卜素”），该胡萝卜素在人体内可以转变成两分子________，后者缺乏会引起人在弱光下视物不清的病症，该疾病称为________，胡萝卜素是________（填“挥发性”或“非挥发性”）物质。
（2）工业生产上，用养殖的岩藻作为原料提取胡萝卜素时，________（填“需要”或“不需要”）将鲜活的岩藻干燥。
（3）现有乙醇和乙酸乙酯两种溶剂，应选用其中的________________作为胡萝卜素的萃取剂，不选用另外一种的理由是________________________________________________________________________。
解析：
（1）胡萝卜中含有的主要是β—胡萝卜素，β—胡萝卜素可在人体内可转变成维生素A。
夜盲症是由于维生素A缺乏导致。
胡萝卜素没有挥发性。
（2）工业生产上，用养殖的岩藻作为原料提取胡萝卜素时，需要将新鲜的岩藻干燥。
（3）作为萃取胡萝卜素的萃取剂要有较高的沸点、能充分溶解胡萝卜素且与水不混溶。
胡萝卜素虽可溶于乙醇，但乙醇是水溶性有机溶剂，萃取中能与水混溶而影响萃取效果，所以不能用乙醇做萃取剂。
答案：
（1）β—胡萝卜素 维生素A 夜盲症 非挥发性
（2）需要 （3）乙酸乙酯 萃取胡萝卜素的有机溶剂应不与水混溶，而乙醇为水溶性有机溶剂
2．[江苏高考题]为了获得β－胡萝卜素产品，某小组开展了产β－胡萝卜素酵母的筛选与色素提取实验。
请回答下列问题：
（1）实验用的培养皿常用的两种灭菌方法是________；为了减少灭菌后器皿被污染，灭菌前应该__________________。
（2）为了筛选出酵母菌，培养基中添加了青霉素，其目的是___________________。
（3）上图是灭菌锅及其局部剖面示意图，图中甲、乙、丙指示的依次是__________。
（填序号）
①安全阀、放气阀、压力表
②放气阀、安全阀、压力表
③安全阀、放气阀、温度表
④放气阀、安全阀、温度表
（4）为了将分离到的菌株纯化，挑取了菌落在3块相同平板上划线，结果其中一块平板的各划线区均未见菌生长，最可能的原因是___________________________________________________。
（5）为增加β－胡萝卜素提取量，在研磨酵母细胞时，添加石英砂的目的是_____________；研磨时___________________（填“需要”或“不需要”）添加CaCO3，理由是_______________________。
解析：
（1）实验室中培养皿的灭菌方法有干热灭菌和高压蒸汽灭菌；为了减少灭菌后器皿被污染，灭菌前应用牛皮纸（报纸）包扎器皿。
（2）青霉素可抑制细菌（放线菌）生长，而不影响酵母菌，所以向培养基中添加青霉素可筛选出酵母菌。
（3）图中甲是安全阀，乙是放气阀，丙是压力表。
（4）平板上各划线区均未见菌生长，最可能是接种温度过高，菌被杀死。
（5）提取色素时，添加石英砂的目的是有助于研磨充分；由于β－胡萝卜素较耐酸，所以不需向其中加入CaCO3。
答案：
（1）干热灭菌和湿热灭菌（高压蒸汽灭菌） 用牛皮纸（报纸）包扎器皿
（2）抑制细菌（放线菌）生长 （3）①
（4）接种环温度过高，菌被杀死 （5）有助于研磨充分 不需要 β－胡萝卜素较耐酸
考点1实验原理
1.工业生产中，下列哪种途径不能用于提取天然β—胡萝卜素（ ）
A．从植物中提取
B．从动物中提取
C．从大面积养殖的岩藻中获得
D．微生物的发酵生产
解析：
工业生产上，提取天然β－胡萝卜素的方法有三种：
一是从植物中提取，二是从大面积养殖的岩藻中获取，三是利用微生物的发酵生产，而动物细胞中没有β－胡萝卜素。
答案：
B
2．下列关于胡萝卜素的叙述，正确的是（ ）
A．根据碳氧双键数目可以将胡萝卜素分为α、β、γ三类
B．一分子维生素A可以被氧化成两分子β－胡萝卜素
C．β－胡萝卜素只含C、H两种化学元素
D．不能利用微生物发酵生产胡萝卜素
解析：
根据碳碳双键数目可以将胡萝卜素分为α、β、γ三类，A项错误；一分子的β胡萝卜素可被氧化成两分子的维生素A，B两项错误；根据β－胡萝卜素化学式可知，β－胡萝卜素只含C、H两种化学元素，C项正确；胡萝卜素能利用微生物发酵生产，D项错误。
答案：
C
考点2实验设计
3.[2019·西宁市第三中学高二期末]石油醚可作为提取胡萝卜素的萃取剂，其原因是（ ）
A．石油醚为水溶性有机溶剂
B．石油醚挥发性强
C．石油醚不易燃烧
D．石油醚的沸点较高
解析：
石油醚为水不溶性、脂溶性有机溶剂，能够充分溶解胡萝卜素，A项错误；石油醚不易挥发，B项错误；石油醚是易燃烧物，C项错误；石油醚的沸点较高，D项正确。
答案：
D
4．[2019·东北师范大学长白山实验中学高二期中]下列关于胡萝卜素的提取的叙述，错误的是（ ）
A．萃取胡萝卜素的萃取剂通常选用有机溶剂
B．胡萝卜素萃取的效率主要取决于萃取剂的性质和使用量
C．萃取过程中应该避免明火加热，采用水浴加热
D．在浓缩前，不需要过滤，因为萃取液中没有不溶物
解析：
由于胡萝卜素易溶于有机溶剂，根据相似相溶原理，萃取时通常选用有机溶剂，A项正确；萃取剂的性质和使用量直接决定胡萝卜素萃取的效率，B项正确；因为有机溶剂都是易燃物，直接使用明火加热容易引起燃烧、爆炸，C项正确；在浓缩前，需要先进行过滤以除去萃取液中的不溶物，D项错误。
答案：
D
5．下列有关胡萝卜素鉴定的纸层析法的实验操作的叙述，错误的是（ ）
A．选择干燥的滤纸
B．点样时点样斑点不能太大
C．点样后用吹风机吹干，温度不宜过高
D．点好样的滤纸卷成圆筒状，滤纸的两边可以相互接触
解析：
在纸层析法鉴定胡萝卜素的操作中，将点好样的滤纸卷成圆筒状，但滤纸的两边不能相互接触，否则会引起层析液在滤纸边缘处扩散速度不同。
答案：
D
6．[2019·巴彦淖尔市临河区第三中学高二期末]请回答下列有关“胡萝卜素提取”的问题。
（1）从胡萝卜中提取胡萝卜素常用的方法是________法。
（2）在胡萝卜颗粒的加热干燥过程中，应严格将________________________控制在一定范围内。
（3）图甲为提取胡萝卜素的装置示意图，请指出图中一处错误并改正：
________________________________________________________________________。
（4）图乙是胡萝卜素粗品鉴定装置示意图。
该鉴定方法的名称是________法。
（5）在图乙的胡萝卜素的结果示意图中，A、B、C、D四点中，属于提取样品的样点是________。
解析：
（1）胡萝卜素不溶于水，微溶于乙醇，易溶于石油醚等有机溶剂，因此可用萃取法提取。
（2）温度过高时胡萝卜素易分解，因此在胡萝卜颗粒的加热干燥过程中，应严格将加热温度和加热时间控制在一定范围内。
（3）萃取剂是易燃物，直接使用明火加热容易引起燃烧、爆炸，图中应对烧瓶进行水浴加热。
（4）鉴定提取的胡萝卜素粗品，可与标准样品共同进行纸层析。
（5）提取样品往往不纯，在图乙的胡萝卜素粗品鉴定结果示意图中，B、C层析后出现两个色素带，应为提取样品的样点。
答案：
（1）萃取
（2）温度和时间 （3）应避免明火加热，而采用水浴加热 （4）纸层析 （5）B和C
一、选择题
1．[2019·新疆兵团农八师一四三团第一中学高二期中]作为萃取胡萝卜素的有机溶剂，下列哪一项不符合实验要求（ ）
A．能充分溶解色素B．与水混溶
C．对人无毒D．易与产品分离
解析：
作为萃取胡萝卜素的有机溶剂要能充分溶解色素，A项正确；作为萃取胡萝卜素的有机溶剂不能与水混溶，B项错误；有机溶剂要对人无毒，C项正确；有机溶剂要容易与产品分离，便于从产品中完全除去，D项正确。
答案：
B
2．[2019·吉林吉化第一高级中学校高二期中]下列有关胡萝卜素的叙述，错误的是（ ）
A．胡萝卜素是一种化学性质稳定，溶于水，不溶于乙醇的物质
B．胡萝卜等蔬菜是提取天然β－胡萝卜素的原料
C．微生物的发酵生产是工业提取β－胡萝卜素的方法之一
D．提取后，干燥过程中，时间不能太长，温度不能太高
解析：
胡萝卜素是一种化学性质比较稳定，不溶于水，微溶于乙醇的物质，A项错误；胡萝卜是提取天然β－胡萝卜素的原料，B项正确；微生物的发酵生产是工业提取β－胡萝卜素的方法之一，C项正确；提取后，干燥过程中，时间不能太长，温度不能太高，D项正确。
答案：
A
3．[2019·武汉市钢城第四中学高二期中]炒胡萝卜时应多加油，其原因是（ ）
A．溶解在油中的胡萝卜素容易被人体吸收
B．两者混合增加蔬菜的营养成分
C．胡萝卜素在油的作用下分解为两分子维生素A
D．胡萝卜素的碳碳双键会断裂，利于人体吸收
解析：
炒胡萝卜时多加油的原因是：
胡萝卜素能溶于油，这样溶解的胡萝卜素才容易被人体吸收，A项正确。
答案：
A
4．下列有关纸层析法鉴定胡萝卜素的说法，不正确的是（ ）
A．层析时，尽量避免用手直接接触滤纸
B．在滤纸条下端距底边2cm处做基线
C．将点好样的滤纸卷筒时，滤纸两边不能相互接触
D．纸层析时用到的层析液是乙醇
解析：
层析时要使用干净的滤纸，为了防止操作时对滤纸的污染，应尽量避免用手直接接触滤纸，A项正确；滤纸规格为18cm×30cm，应在距底边2cm处做基线，B项正确；卷成圆筒状的滤纸两边不能接触，否则会由于物理上的毛细现象而使溶剂前沿不齐，C项正确；纸层析时用到的层析液是石油醚，D项错误。
答案：
D
5．下列关于胡萝卜素提取的叙述，不正确的是（ ）
A．萃取前需要将胡萝卜粉碎和干燥
B．安装冷凝回流装置的目的是防止胡萝卜素挥发
C．萃取液的浓缩可直接使用蒸馏装置
D．在浓缩前需要过滤以除去不溶物
解析：
萃取法提取胡萝卜素时，萃取前要将胡萝卜粉碎、干燥，A项正确；萃取过程中在加热瓶口安装冷凝管，是为了防止加热时有机溶剂挥发而不是胡萝卜素，B项错误；在胡萝卜素的提取过程萃取液的浓缩可直接使用蒸馏装置，萃取液将来流入冷凝装置，剩下的就是胡萝卜素，C项正确；在浓缩前，需要过滤，除去萃取液中的不溶物，D项正确。
答案：
B
二、非选择题
6．[2019·吉林白城一中高二期末]下图表示从胡萝卜中提取胡萝卜素的操作流程，请回答下列问题：
→
→
→
→
→
→
（1）用于提取胡萝卜素的有机溶剂是________（填“水溶性”或“水不溶性”）有机溶剂；水蒸气蒸馏法________（填“适合”或“不适合”）胡萝卜素的提取。
（2）A操作过程应控制________，以防止胡萝卜素分解；B操作过程宜采用________________________加热方式以防止温度过高；C操作的目的是________________________；一般情况下，提取效率与原料颗粒的含水量成________________________比。
（3）鉴定提取物中是否含有胡萝卜素时，通常采用________法；若结果如图所示，则甲、乙、丙、丁四样点中，属于标准样品的样点是__________，②代表的物质是__________。
解析：
（1）胡萝卜素是水不溶性的，因此用水不溶性有机溶剂，水蒸汽蒸馏法适用于水溶性的，挥发性较强的物质，而胡萝卜素是非挥发性的物质，不能随水蒸气蒸馏出来，故不适合胡萝卜素的提取。
（2）A过程是干燥，应控制温度和时间，温度太高、干燥时间太长会导致胡萝卜素分解。
B过程是萃取，应用水浴加热，因为有机溶剂都是易燃物，直接使用明火加热容易引起燃烧、爆炸。
C过程是过滤，目的是滤去萃取液中的不溶性的杂质，提取效率与原料颗粒的含水量呈反比。
（3）胡萝卜素的鉴定法常用纸层析法，因为甲和丁只有一个色素带应是标准样品，乙和丙除了标准色素带外还有一个色素带应是其他色素带和杂质。
答案：
（1）水不溶性 不适合
（2）温度和时间 水浴 滤去萃取液中的不溶物 反 （3）纸层析 甲丁 其他色素和杂质
7．[2019·通榆县第一中学高二月考]回答与胡萝卜素有关的下列问题：
（1）胡萝卜含有的胡萝卜素中，最主要的是________（填“α－胡萝卜素”，“β－胡萝卜素”或“γ－胡萝卜素”），该胡萝卜素在人体内可以转变成两分子________，后者缺乏会引起人在弱光下视物不清的病症，该疾病称为________。
（2）现有乙醇和乙酸乙酯两种溶剂，应选用其中的________________作为胡萝卜素的萃取剂，不选用另外一种的理由是________________________。
（3）从胡萝卜中提取胡萝卜素时，通常在萃取前要将胡萝卜粉碎和________，以提高萃取效率；水蒸气蒸馏法________（填“适合”或“不适合”）胡萝卜素的提取，原因是________________________________________________________________________
________________________________________________________________________。
（4）鉴定萃取物中是否含有胡萝卜素时，通常可采用__________法，并以________作为对照。
解析：
（1）胡萝卜含有的胡萝卜素中，最主要的是β－胡萝卜素，该胡萝卜素在人体内可以转变成两分子维生素A，后者缺乏会引起人在弱光下视物不清的病症，该疾病称为夜盲症。
（2）胡萝卜素的化学性质稳定，不溶于水，微溶于乙醇，易溶于石油醚等有机溶剂，常采用萃取法提取。
萃取胡萝卜素的有机溶剂应该能够充分溶解胡萝卜素，并且不与水混溶，而乙醇是水溶性的有机溶剂，影响萃取效果，故乙醇和乙酸乙酯两种溶剂中，应选用其中的乙酸乙酯作为胡萝卜素的萃取剂。
（3）从胡萝卜中提取胡萝卜素时，通常在萃取前将胡萝卜粉碎和干燥，以提高萃取效率；由于水蒸气蒸馏法适用于蒸馏挥发性物质，而胡萝卜素为非挥发性物质，不能随水蒸气蒸馏出，所以水蒸气蒸馏法不适合胡萝卜素的提取。
（4）鉴定萃取物中是否含有胡萝卜素时，通常可采用纸层析法，实验时需要用标准的胡萝卜素样品作为对照。
答案：
（1）β－胡萝卜素 维生素A 夜盲症
（2）乙酸乙酯 萃取胡萝卜素的有机溶剂应不与水混溶，而乙醇属于水溶性有机溶剂，影响萃取效果 （3）干燥 不适合 水蒸气蒸馏法适用于分离挥发性物质，而胡萝卜素为非挥发性物质，不能随水蒸气蒸馏出 （4）纸层析 标准样品
8．[2019·重庆八中高三月考]请回答下列与胡萝卜素有关的问题：
（1）工业上提取天然β－胡萝卜素的方法主要有三种，其中一种方法是利用三孢布拉氏霉菌发酵生产。
生产中大量培养该霉菌所用培养基依物理性质属于________培养基，在发酵中加入的玉米粉和豆饼为三孢布拉氏霉的生长分别主要提供________________________________________________________________________。
（2）实验室中常用萃取法提取β－胡萝卜素，但提取到的是胡萝卜素的________，还需后续分离。
提取试剂的选择上，石油醚的提取效果远好于丙酮和乙醇，原因是石油醚为____________（填“水溶性”或“水不溶性”）有机溶剂。
萃取胡萝卜素的有机溶剂还应具有的一个重要特点是________________________。
（3）提取获得的胡萝卜素粗品还需进行鉴定，其鉴定方法是________。
解析：
（1）工业上利用微生物发酵生产胡萝卜素都需要用液体培养基，因为这种培养基能让微生物充分利用其中的营养物质并且易于分离提纯。
在发酵培养基中加入的玉米粉和豆饼主要是为培养微生物生长分别主要提供碳源和氮源。
（2）胡萝卜为原料提取胡萝卜素的流程是：
胡萝卜→粉碎→干燥→萃取→过滤→浓缩→胡萝卜素。
实验室中常用萃取法提取β－胡萝卜素，当提取到它的粗品后，还需后续分离。
再萃取剂的选择上，选石油醚的提取效果远好于丙酮和乙醇，主要是因为石油醚为水不溶性有机溶剂；其次是充分溶解胡萝卜素，具有较高沸点，萃取效率高。
（3）鉴定胡萝卜素的方法是纸层析法。
答案：
（1）液体 碳源、氮源
（2）粗品 水不溶性 充分溶解胡萝卜素，具有较高沸点 （3）纸层析
9．[2019·随州市第一中学高二期中]胡萝卜素是一种常用的食用色素，可以预防白内障、有助于保护眼睛晶体的纤维部分，还可以促进眼内感光色素的生成，加强视力的形成；还可以预防夜盲症，加强眼睛变色的功能。
可分别从胡萝卜或产胡萝卜素的微生物菌体中提取获得。
请根据其提取过程及胡萝卜素的性质，回答下列问题。
（1）从胡萝卜中提取胡萝卜素时，干燥过程应控制好________和________，以防止胡萝卜素分解；萃取过程中宜采用________方式加热；萃取液浓缩前需进行________。
（2）茉莉精油常用的提取方法是________________法，该方法________（填“适合”或“不适合”）胡萝卜素的提取。
（3）工业上提取天然β－胡萝卜素的方法有三种：
大面积种植岩藻、微生物发酵和________________________________________________________________________。
解析：
（1）从胡萝卜中提取胡萝卜素时，干燥过程应控制好时间和温度，若温度过高或时间过长，会导致胡萝卜素分解；萃取过程中由于有机溶剂易燃，宜采用水浴加热；萃取液浓缩前需进行过滤，滤去不溶物。
（2）茉莉精油常用的提取方法是水蒸气蒸馏法，该方法不适合胡萝卜素的提取，提取胡萝卜素常采用萃取法。
（3）工业上提取天然β－胡萝卜素的方法有三种：
大面积种植岩藻、微生物发酵和从植物中提取。
答案：
（1）时间 温度 水浴 过滤
（2）水蒸气蒸馏 不适合 （3）植物中提取
10．[2019·石河子第二中学高二月考]提取胡萝卜素的实验流程示意图如下：
胡萝卜→粉碎→干燥→萃取→过滤→浓缩→胡萝卜素
（1）作为β－胡萝卜素萃取剂应符合________________________________________________的特点。
（2）萃取的效率主要取决于____________________。
（3）图甲是提取胡萝卜素的装置，指出图中一处错误并改正：
________________________________________________________________________。
（4）乙为胡萝卜素的纸层析结果示意图，图中基线一般距底边________cm，A、B、C、D四点中，属于提取样品的样点是________________________。
解析：
（1）β－胡萝卜素萃取剂具有较高的熔点，能够充分溶解胡萝卜素，并且不与水混溶的特点。
（2）萃取的效率主要取决于萃取剂的性质和使用量。
（3）据图分析，图甲中应避免明火加热，而采用水浴加热。
（4）图乙为胡萝卜素的纸层析结果示意图，在18×30cm的滤纸条下端距底边2cm处做一个基线，在基线上取A、B、C、D四点，其中属于标准样品的样点是A和D，提取样品的样点是B和C。
答案：
（1）具有较高的熔点，能够充分溶解胡萝卜素，并且不与水混溶
（2）萃取剂的性质和使用量 （3）应避免明火加热，而采用水浴加热 （4）2 B和C
11．胡萝卜因含有多种营养成分而备受人们青睐，胡萝卜素既有造血功能补充人体所需的血液，从而改善贫血或冷血症，同时含有丰富的钾。
根据从胡萝卜中提取胡萝卜素的相关知识及胡萝卜素的性质，回答下列问题。
（1）胡萝卜素是________色的结晶。
从胡萝卜中提取胡萝卜素时，常用________（石油醚或乙醚）作为溶剂，原因是________________________________________________________________________。
（2）一般情况下，提取胡萝卜素时，提取效率与原料颗粒的含水量成________比。
（3）用萃取法提取胡萝卜素时，萃取的效率主要取决于萃取剂的________。
（4）为了更多的获取产胡萝卜素工程菌，在进行该菌培养时，除供给足量的水、无机盐、氧气外，还需要供给________、________等营养物质。
（5）若发酵液中的产胡萝卜素工程菌需进行及时的数量分析，最好采用__________________法进行计数。
解析：
（1）胡萝卜素是橘黄色的结晶，属于脂溶性物质，其化学性质比较稳定，不溶于水，微溶于乙醇，易溶于石油醚等有机溶剂。
萃取胡萝卜素的有机溶剂应该具有很高的沸点，能够充分溶解胡萝卜素，并且不与水相溶；从胡萝卜中提取胡萝卜素时，常用溶点高，能够充分溶解胡萝卜素的石油醚作为溶剂；而乙醚沸点只有35℃不符合要求。
（2）萃取的效率主要取决于萃取剂的性质和使用量，同时还受到原料颗粒的大小、紧密程度、含水量、萃取的温度和时间等条件的影响。
一般情况下，提取胡萝卜素时，提取效率与原料颗粒的含水量成反比，有水存在会降低有机溶剂的萃取程度；萃取前，要将胡萝卜进行粉碎和干燥。
（3）用萃取法提取胡萝卜素时，萃取的效率主要取决于萃取剂的性质和使用量。
（4）培养基一般都含有水、碳源（提供碳元素的物质）、氮源（提供氮元素的物质）和无机盐；在进行胡萝卜素工程菌培养时，除供给足量的水、无机盐、氧气外，还需要供给氮源、碳源等营养物质。
（5）进行发酵液中的产胡萝卜素工程菌数量分析，最好采用显微镜直接计数法进行计数，操作简单，用时少。
答案：
（1）橘黄 石油醚 溶点高，充分溶解
（2）反 （3）性质和使用量 （4）氮源 碳源 （5）显微镜直接计数
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