酶的定向进化技术.docx

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酶的定向进化技术

筛选nn选择特异的多肽或蛋白质结合物选择的核心是亲和选择（如图所示）

第五节定向进化的应用目标酶卡那霉素核苷基转移酶枯草杆菌蛋白酶β-内酰胺酶对硝基苯酯酶所需功能热稳定性作用于有机溶剂作用于新底物有机溶剂中的底物特异性和活性第五特异性基因理疗底物特异性砷酸抗性方法定位诱变+选择易错PCR+选择结果实施菌种在60-50℃酶半衰期耐热脂肪增加200倍芽孢杆菌在60％二甲基亚砜主仆女冠活力增强170倍对cefotaxime的抗性增加32000倍活力增加60-150倍枯草杆菌DNA改组+选择易错PCR+重组大肠杆菌大肠杆菌胸苷激酶β-半乳糖苷酶砷酸脱毒途径交错延伸+选择DNA改组+选择DNA改组+选择活力增加43倍活力增加66倍底物特异性增加1000倍抗性增加12倍大肠杆菌大肠杆菌大肠杆菌

展望总之，具有新功能和特性的酶可以通过从大量未知的自然种系中寻找以及对现有的天然酶进行改造，对现有的天然酶进行改造可能更加合适。

我们相信，随着基因工程技术、蛋白质工程技术以及高通量筛选技术的迅速发展，定向进化技术将成为获得新酶的一个有效快捷的手段，这将为工业生产提供更多性能优良的酶制剂。

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