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年产100吨冬虫夏草菌粉。

2.4.主要原、辅料:

蝙蝠蛾拟青霉菌种、葡萄糖、豆粕、硫酸镁、磷酸二氢钾、蛋白胨。

2.5.发酵工段产品:

未烘干前呈浅黄色,烘干后呈棕黄色,深棕色,色泽均匀的冬虫夏草菌粉。

3. 产品方案

3.1.产品名称和性质:

发酵蝙蝠蛾拟青霉冬虫夏草菌粉,为黄色粉末,气香,味微苦。

3.2.产品的质量规格:

虫草干品含粗蛋白25.32%,粗脂肪8.4%,粗纤维18.53%,碳水化合物28.9%,灰分4.1%,水分10.84%。

另外含虫草酸约7%,还含有游离氨基酸12种,水解后有氨基酸18种,其中成年人必需从食物中供给的8种氨基酸均具备,还有幼儿生长发育所必需的组氨酸。

此外,尚含有维生素B12、麦角脂醇、六碳糖醇、生物碱等。

3.3.产品规模:

100T/a。

3.4.产品包装方式:

桶装。

4.生产方法和工艺流程

4.1.路线的选择——生物发酵法

发酵冬虫夏草菌粉是1992年由中国医学科学院药物研究所首次人工培养获得成功,从天然冬虫夏草中可以分离获得虫草头胞菌、蝙蝠蛾拟青霉菌、中国拟青霉等,它们均可以在液体培养基中培养。

培养基根据分离到的菌株不同有所差异。

液体深层发酵设备规模投资较大,但生产过程相对简单,生产周期短,受环境因子影响少,因此可适合工业化集团经营,所获产品为菌丝体(或菌丝粉)。

4.1.1.冬虫夏草真菌分离

采用组织分离法可以获得植物内生菌做为人工冬虫夏草的生产菌株,即采用直接切取虫草的子座部分或菌核部分的一小块组织,经表面消毒和灭菌水洗后,在无菌操作条件下,由虫草体上转移到培养基上。

切取组织1mm左右,组织切取过大会增加染菌的机会,组织切取过小,一方面在表面消毒过程中易将该组织杀死,另一方面也相应地延长了虫草菌种的生长时间。

取春夏之交的新鲜冬虫夏草的子座,用0.1L汞液表面消毒5min,再用无菌水反复冲洗,在无菌条件下切去外层、避开肠边,切取内部白色组织1c㎡左右,压碎涂于培养基表面,20℃温箱4个月,得到母种[3]。

4.1.2.培养过程[5]

4.1.2.1.斜面培养 

以蔗糖2%,工业蛋白胨0.15%,酵母粉1%,MgSO40.05%,KH2PO40.1%为培养基(pH6~7)。

于121℃灭菌30min,接种于固体培养基上于27±

1℃,培养4~5d,菌丝均匀长满斜面后,置冰箱4℃保存备用。

4.1.2.2.摇瓶培养

以蔗糖2%,工业蛋白胨0.15%,酵母粉1%,MgSO40.05%,KH2PO40.1%为培养基(pH6~7),采用250ml三角瓶装培养基50ml,采用27±

1℃,摇床转速230r/min,振荡培养。

4.1.2.3.摇瓶种子培养 

以蔗糖2%,工业蛋白胨0.15%,酵母粉1%,MgSO40.05%,KH2PO40.1%为培养基(pH6~7),采用500ml三角瓶,装培养基120ml,采用27±

1℃,摇床转速230r/min,振荡培养48~60h,镜检菌丝粗壮,无杂菌后,合并作为进罐种子。

4.1.2.4.种子罐培养

葡萄糖25kg/m3,豆粕20kg/m3,豆油0.6kg/m3,硫酸镁0.6kg/m3,磷酸二氢钾0.1kg/m3,蛋白胨3kg/m3为发酵液(pH6~7),采用1m3种子罐,装料系数为0.8,在27±

1℃温度下发酵培养。

4.1.2.5.发酵罐培养

 葡萄糖100kg/m3,豆粕25kg/m3,豆油0.9kg/m3,硫酸镁0.9kg/m3,磷酸二氢钾0.2kg/m3,蛋白胨6kg/m3,消泡剂0.6kg/m3为培养基(pH6~7),采用10m3发酵罐,装料系数为0.8,在27±

1℃温度下培养。

4.1.3.发酵液后处理

发酵液

离心过滤

菌丝体

80℃干燥

成品菌粉

 

粉碎包装

4.2.工艺流程

4.2.1.工艺流程的设计原则[6]

进行工艺设计,必须考虑以下几项原则:

4.2.1.1.保证产品质量符合国家标准,外销产品还必须满足销售地区的质量要求。

4.2.1.2.尽量采用成熟的、先进的技术和设备。

努力提高原料利用率,提高劳动生产率,降低水、电、汽及其他能量消耗,降低生产成本,使工厂建成后能够迅速投入生产,使短期内达到设计生产能力和产品质量要求,并做到生产稳定、安全、可靠。

4.2.1.3.尽量减少三废排放量,有完善的三废治理措施,以减少或消除对环境的污染,并做好三废的回收和综合利用。

4.2.1.4.确保安全生产,以保证人身和设备的安全。

4.2.1.5.生产过程尽量采用机械化和自动化,实现稳产、高产。

4.2.2.工艺流程方框图(见附图4.1)

5.车间的组成和生产制度

5.1.车间组成及其所需时间

发酵

配料          0.8h

搅拌0.5h

投料0.5h

蒸汽灭菌      1h

冷却到27℃       约1h

接种            0.20h

发酵44h

发酵的总反应时间为  48h

清洗发酵罐         1.5h

5.2. 人员配置

表5.1车间岗位人员配置表

工段

名称

岗位

人员配制班制

人 数

每班

轮休

合计

发酵

配料罐

2

1

发酵罐

7

3

4

过滤

烘干

6

其他

车间主任

/

车间副主任

合计

15

8

9

17

6.原料的主要技术规格[7]

6.1.葡萄糖[7]

分子式:

C6H12O6;

分子量:

180。

雪白的晶体,易溶于水,难溶于乙醇,具有甜味,甜度仅及蔗糖的74%。

葡萄糖是机体所需能量的重要来源。

据测定,吃进一克葡萄糖,在人体内氧化后,大约可以产生将近16.736kJ热量,在人体中,葡萄糖是靠血液运送到身体各部分的。

葡萄糖是一种很好的保健品。

葡萄糖虽然不能用于合成蛋白质,但能起节约蛋白质的作用。

在葡萄糖供应充足,糖代谢正常的情况下,有利于组织蛋白的合成。

反之,当糖缺乏或糖代谢失常,蛋白质分解就会增加。

在此情况下,则不利于组织内蛋白质的合成。

6.2.蛋白胨

蛋白胨是一种外观呈淡黄色的粉剂,具有肉香的特殊气息。

它作为微生物培养基的主要原料,在抗生素,医药工业,发酵工业,生化制品及微生物学科研等领域中的用量均很大;

不同的生物体需要特定的氨基酸和多肽,因此存在各种蛋白胨,一般来说,用于蛋白胨生产的蛋白包括动物蛋白(酪蛋白、肉类)和植物蛋白(豆类)两种。

6.3.豆粕

豆粕是大豆提取豆油后得到的一种副产品。

豆粕一般呈不规则碎片状,颜色为浅黄色至浅褐色,味道具有烤大豆香味。

豆粕的主要成分为:

蛋白质40%~48%,赖氨酸2.5%~3.0%,色氨酸0.6%~0.7%,蛋氨酸0.5%~0.7%。

豆粕是棉籽粕、花生粕、菜籽粕等12种动植物油粕饲料产品中产量最大,用途最广的一种。

作为一种高蛋白质,豆粕是制作牲畜与家禽饲料的主要原料,还可以用于制作糕点食品,健康食品以及化妆品和抗菌素原料。

6.4.硫酸镁

MgSO4;

120.37。

白色粉末,熔点:

1124(分解),相对密度(水=1):

2.66,溶解性:

溶于水、乙醇、甘油。

主要用途:

医药上用作泻剂。

也用于制革、炸药、肥料、造纸、瓷器、印染料等工业。

6.5.磷酸二氢钾(MKP)

KH2PO4;

136.09。

无色四方晶体或白色结晶性粉末。

相对

密度2.338,熔点252.6℃,溶于水(90℃时为83.5g/100ml水),水溶液呈酸性,

1%磷酸二氢钾溶液的pH值为4.6。

不溶于醇,有潮解性。

加热至400℃时熔化而

成透明的液体,冷却后固化为不透明的玻璃状偏磷酸钾。

用于制药物和焙粉,也可用作肥料,饲料添加剂,食品添加剂,pH调节剂,细菌培养基等。

7.物料及热量衡算[6]

7.1.物料衡算

7.1.1.物料流程图

发酵罐种子罐

葡萄糖20kg

豆粕16kg

豆油0.48kg

硫酸镁0.48kg

磷酸二氢钾0.08kg

蛋白胨2.4kg

25º

C,30min

葡萄糖800kg

豆粕200kg

豆油7.2kg

硫酸镁7.2kg

磷酸二氢钾1.6kg

蛋白胨48kg

消泡剂4.8kg

料水比1:

4料水比1:

自来水

25℃

30min30min

121℃121℃

121℃,30min121℃,30min

1h

冷却至27º

C

冷却至27º

C

接种量20%

发酵罐

图7.1物料流程图

7.1.2.工艺技术指标及基础数据

(1)主要技术指标如表所示:

表7.1冬虫夏草发酵工艺主要技术指标

指标名称

单位

指标数

生产规模

t/a

100

葡萄糖转化率

%

48

生产方法

倒罐率

生产天数

d/a

300

发酵周期

h

发酵初糖

kg/m3

冬虫夏草提取率

16.5%

(2)二级种子培养基

二级种子培养基(kg/m3)配方如下:

葡萄糖25,豆粕20,豆油0.6,硫酸镁0.6,磷酸二氢钾0.1,蛋白胨3,接种量12%。

发酵罐培养液(kg/m3)配方如下:

葡萄糖100,豆粕25,豆油0.9,硫酸镁0.9,磷酸二氢钾0.2,蛋白胨6,消泡剂0.6,接种量12%。

7.1.3.发酵车间的物料衡算

发酵液量生产100吨纯度100%的冬虫夏草菌粉,需耗用的原辅材料及其他物料量

(1)发酵液量:

V1=100000÷

(100×

48%×

16.5%×

99%)=1.3×

104(m3)

式中100——发酵培养基初糖浓度(kg/m3)

48%——葡萄糖转化率

16.5%——冬虫夏草提取率

99%——除去倒罐率1%后的发酵成功率

(2)发酵液配制需糖量(以纯糖计):

m1=V1×

100=1.3×

106(kg)

(3)二级种子液量:

V2=12%×

V1=1.6×

103(m3)

式中12%——接种量

(4)二级种子培养液所需糖量:

m2=25×

V2=4.0×

104(kg)

式中25——二级种液含糖量(kg/m3)

(5)生产100吨冬虫夏草需糖总量:

m=m1+m2=1.34×

(6)硫酸镁耗用量:

m(MgSO4)=0.6V2+0.9V1=1.27×

(7)磷酸二氢钾耗用量:

m(KH2PO4)=0.1V2+0.2V1=2.76×

103(kg)

(8)消泡剂耗用量:

m(消泡剂)=0.6V1=7.8×

103(kg)

(9)豆油耗用量:

m(豆油)=0.6V2+0.9V1=1.14×

(10)蛋白胨耗用量:

m(蛋白胨)=3V2+6V1=8.28×

104(kg)

(11)豆粕耗用量:

m(豆粕)=20V2+25V1=3.57×

105(kg)

(12)冬虫夏草菌丝体量:

1)发酵液冬虫夏草菌丝体含量为:

m(冬虫夏草)=1.3×

106×

(1-1%)=6.2×

105(kg)

2)实际生产的冬虫夏草(提取率16.5%)菌丝体为:

m(实际)=6.2×

105×

16.5%=102300(kg)=102.3(t)

100t/a冬虫夏草发酵车间的物料衡算表如下:

表7.2100t/a冬虫夏草发酵车间的物料衡算表

物料名称

生产100t冬虫夏草的物料量

每日物料量

发酵液量(m3)

1.3×

104

43.33

二级种液量(m3)

1.6×

103

5.33

发酵用糖量(kg)

106

4333.33

二级种子液用糖量(kg)

4.0×

133.33

糖液总量(kg)

1.34×

4466.67

硫酸镁(kg)

1.27×

44.72

磷酸二氢钾(kg)

2.76×

42.33

消泡剂(kg)

7.8×

26

豆油(kg)

1.14×

38

豆粕(kg)

3.57×

105

1190

蛋白胨(kg)

8.28×

276

冬虫夏草菌粉(t)

102.3

341

7.2.热量衡算

(一)发酵罐需配料量为:

G1=800+200+7.2+7.2+1.6+48+4.8=1061.6(kg)

(二)种子罐需配料量为:

G2=20+16+0.48+0.48+0.08+2.4=39.44(kg)

(三)根据工艺,需加水量为:

GW=(1061.6+39.44)×

4=4404.16(kg)

注:

料水比=1:

(四)料液总量为:

G=G1+G2+GW=1061.6+39.44+4404.16=5505.2(kg)

(五)醪液煮沸耗热量Q总

由发酵工艺流程(图7.1)可知,

Q总=Q’+Q’’+Q’’’

(1)发酵罐内料液由初温t0=25℃加热至t1=121℃耗热,料液总量G=5505.2kg

Q’=Gc(t1-t0)=5505.2×

3.7×

(121-25)=1.96×

106(kJ)

式中c——发酵液的比热容,3.7kJ/(kg·

K)

(2)煮沸过程中蒸汽带出的热量

煮沸时间30min,蒸发量为每小时5%,则蒸发水分量为

V1=G×

5%×

30÷

60=5505.2×

60=137.63(kg)

故Q’’=V1·

I=137.63×

2198.91kJ/kg=3.03×

105(kJ)

式中I——为在温度121℃下的水的汽化潜热,为2198.91kJ/kg

(3)热损失Q’’’

醪液升温和煮沸过程的热损失约为前二次耗热量的15%,即:

Q’’’=15%(Q’+Q’’)=15%×

(1.96×

106+3.03×

105)=3.39×

105(kJ)

(4)由上述结果可得:

Q总=Q’+Q’’+Q’’’=1.96×

105+3.39×

105=2.60×

(5)故耗用蒸汽量D

使用表压为0.4MPa的饱和蒸汽,I=2737.23kJ/kg,则

D=Q总/[(I-i)η]=2.60×

106/[(2737.23-601.53)×

95%]=1282.65(kg)

式中i——相应冷凝水的焓(601.53kJ/kg)

η——蒸汽的热效率,取η=95%

(5)发酵过程每小时最大蒸汽耗量Qmax

在各步骤中,加热过程耗热量最大,且知加热时间为30min,热效率为95%,

故Qmax=Q总/(30/60×

95%)=2.60×

106/(0.5×

95%)=5.47×

106(kJ/h)

相应的最大蒸汽耗量为:

Dmax=Qmax/(I-i)=5.47×

106/(2737.23-601.53)=2562.95(kg/h)

式中I——使用表压为0.4MPa的饱和蒸汽,I=2737.23kJ/kg

i——相应冷凝水的焓(601.53kJ/kg)

(6)蒸汽单耗

已知发酵需要48h,放罐、洗罐、维修的时间要60天,一年生产300天,60天用于维修,48小时发酵,大概4天生产一批产品,每年生产75批产品。

据设计,每年发酵次数为75批,共产生冬虫夏草102.3吨。

年耗蒸汽总量为:

DT=D×

75=1282.65×

75=9.62×

每吨成品耗蒸汽量:

DS=9.62×

104/102.3=940.37kg/t

最后,把上述计算结果列成热量消耗综合表,如表所示。

表7.3100t/a冬虫夏草发酵车间总热量衡算表

名称

规格

每吨产品消耗定额(kg)

每小时最大用量(kg/h)

年消耗量(kg/a)

蒸汽

0.4(表压)

940.37

2562.95

9.62×

7.3.发酵车间水衡算

(1)原料预处理用水量

已知一次发酵原料预处理用水量为4404.16kg,每年发酵次数为75次。

故发酵原料预处理总用水量GW为:

GW=4404.16×

75=3.30×

105(kg)

(2)发酵工序用水量

A.蒸汽灭菌用水量

由上述热量衡算可知

D=Q总/[(I-i)η]=1282.65(kg)

式中η——蒸汽的热效率,取η=95%

I——使用表压为0.4MPa的饱和蒸汽,I=2737.23kJ/kg

B.冷却水用量

已知发酵一次,料液总量为G=5505.2kg,把醪液从t1=121℃冷却至t2=25℃,冷却水使用t3=20℃的深井水,终温为t4=70℃,逆流操作,冷却时间t=1h。

则每小时耗水量为:

W=Gc(t1-t2)/(c水t(t4-t3))

=5505.2×

(121-25)/(4.18×

(70-20)×

1)

=9356.2(kg)

式中3.7——发酵液的比热容(kJ/(kg·

K))

4.18——水的比热容(kJ/(kg·

年发酵工序用水量

据设计,每年发酵次数为75次,年发酵工

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