玉环县疾病预防控制中心作业指导书.docx

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玉环县疾病预防控制中心作业指导书

文件编号：

YJKZ/ZYW6-001

标题：

试剂配制

版号：

第2版，共26页第1页

1目的与适用范围

本标准规定了各种染色法、培养基和试剂。

本标准适用于食品和食物中毒样品中各类微生物的检验。

2　染色液配制及染色法

　　2.1　革兰氏染色法（可按成品试剂上的说明操作）

　　2.1.1　结晶紫染色液

　　结晶紫　　　　　　　　1g

　　95%乙醇　　　　　　　20mL

　　1%草酸铵水溶液　　　　80mL

　　将结晶紫溶解于乙醇中，然后与草酸铵溶液混合。

　　2.1.2　革兰氏碘液

　　碘　　　　　　　　　　1g

　　碘化钾　　　　　　　　2g

　　蒸馏水　　　　　　　　300mL

　　将碘与碘化钾先进行混合，加入蒸馏水少许，充分振摇，待完全溶解后，再加蒸馏水至300mL。

2.1.3　沙黄复染液

　　沙黄　　　　　　　　　0.25g

　　95%乙醇　　　　　　　　10mL

　　蒸馏水　　　　　　　　90mL

　　将沙黄溶解于乙醇中，然后用蒸馏水稀释。

　　2.1.4　染色法

　　2.1.4.1　将涂片在火焰上固定，滴加结晶紫染色液，染1min，水洗。

　　2.1.4.2　滴加革兰氏碘液，作用1min，水洗。

　　2.1.4.3　滴加95%乙醇脱色，约30s；或将乙醇滴满整个涂片，立即倾去，再用乙醇滴满整个涂片，脱色10s。

　　2.1.4.4　水洗，滴加复染液，复染1min。

水洗，待干，镜检。

　　2.1.5　结果

　　革兰氏阳性菌呈紫色。

革兰氏阴性菌呈红色。

　　注：

亦可用1：

10稀释石炭酸复红染色液作复染液，复染时间仅需10s。

　　2.2吉氏染色法　（可按成品试剂上的说明操作）

吉氏粉0.5g

中性甘油25mL

甲醇25mL

将染粉加少量甘油研磨，边研边加，至甘油加完为止，倾入100mL玻塞瓶内，加入甘油，塞紧瓶塞，充分摇匀，置室温下3～5天，即为原液，临用时稀释。

2.2.4染色法

2.2.4.1将血片用甲醇固定约1min。

2.2.4.2滴加10%染液染45min。

水洗，待干，镜检。

2.3硼砂美蓝染色法

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文件编号：

YJKZ/ZYW6-001

标题：

试剂配制

版号：

第2版，共26页第2页

2.3.1硼砂3g

2.3.2美蓝2g

置研钵内,边研边加水,待溶解后冲入瓶中,加蒸馏水100mL配成原液,过滤后备用.染色时取原液5mL，加清水配成稀释液。

2.3.3染色法

血片染3～5min，使血膜呈天蓝色，水洗，待干，镜检。

2.4　耐酸性染色法（萎－倪二氏法）（可按成品试剂上的说明操作）

2.4.1　石炭酸品红染色液

　　碱性品红　　　　　　0.3g

　95%乙醇　　　　　　　10mL

　　5%酚水溶液　　　　　90mL

　　将品红溶解于乙醇中，然后与酚溶液混合。

　　2.4.2　3%盐酸－乙醇

　　浓盐酸　　　　　　　3mL

　　95%乙醇　　　　　　　97mL

　　2.4.3　复染液

　　吕氏碱性美蓝染色液。

　　2.4.4　染色法

　　2.4.4.1　将涂片在火焰上加热固定，滴加石炭酸品红染色液，徐徐加热至有蒸气出现，但切不可使沸腾。

染液如因蒸发减少时，应随时添加。

染5min，倾去染液，水洗。

　　2.4.4.2　滴加盐酸－乙醇脱色，直至无红色脱落为止（所需时间视涂片厚薄而定，一般为1～3min），水洗。

　　2.4.4.3　滴加吕氏碱性美蓝染色液，复染30s～1min，水洗，待干，镜检。

　　2.4.5　结果：

耐酸性细菌呈红色，其他细菌、细胞等物质呈蓝色。

3　生化试验培养基和试剂

3.1生理盐水

氯化钠8.5g

蒸馏水　　　　　　　　　　1000mL

溶解后，分装121℃高压灭菌20min。

3.2　磷酸盐缓冲液

3.2.1　储存液

磷酸二氢钾　　　　　　　　34g

1mol/L氢氧化钠溶液　　　175mL

蒸馏水　　　　　　　　　　825mL

3.2.2　制法

先将磷酸盐溶解于500mL蒸馏水中，用1mol/L氢氧化钠溶液校正pH7.2后，再用蒸馏

水稀释至1000mL。

3.2.3　稀释液：

取储存液1.25mL，用蒸馏水稀释至1000mL。

分装每瓶100mL或每管10mL，121℃高压灭菌15min。

3.375%乙醇

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文件编号：

YJKZ/ZYW6-001

标题：

试剂配制

版号：

第2版，共26页第3页

95%乙醇790mL

蒸馏水　　　　　　　　　　210mL

混匀后备用。

3.4　蛋白胨水（靛基质试验用）（可用微量发酵管）

3.4.1　成分

蛋白胨（或胰蛋白胨）　20g

氯化钠　　　　　　　5g

蒸馏水　　　　　　　1000mL

pH7.4

3.4.2　制法

按上述成分配制，分装小试管，121℃高压灭菌15min。

3.4.3　靛基质试剂（可按成品试剂上的说明操作）

3.4.3.1　柯凡克试剂：

将5g对二甲氨基苯甲醛溶解于75mL戊醇中。

然后缓慢加入

浓盐酸25mL。

3.4.3.2　欧－波试剂：

将1g对二甲氨基苯甲醛溶解于95mL95%乙醇内。

然后缓慢加

入浓盐酸20mL。

3.4.4　试验方法

挑取小量培养物接种，在36±1℃培养1～2d，必要时可培养4～5d。

加入柯凡克试剂

约0.5mL，轻摇试管，阳性者于试剂层呈深红色；或加入欧－波试剂约0.5mL，沿管壁流下，

覆盖于培养液表面，阳性者于液面接触处呈玫瑰红色。

注：

蛋白胨中应含有丰富的色氨酸。

每批蛋白胨买来后，应先用已知菌种鉴定后方可使用。

3.5　尿素琼脂（可用微量发酵管）

3.5.1　成分

蛋白胨　　　　　1g

氯化钠　　　　　　5g

葡萄糖　　　　　　1g

磷酸二氢钾　　　　2g

0.4%酚红溶液　　　3mL

琼脂　　　　　　　20g

蒸馏水　　　　　1000mL

20%尿素溶液　　　100mL

pH7.2±0.1

3.5.2制法

将除尿素和琼脂以外的成分配好，并校正pH，加入琼脂，加热溶化并分装烧瓶。

121℃

高压灭菌15min。

冷至50～55℃，加入经除菌过滤的尿素溶液。

尿素的最终浓度为2%，最终pH应为7.2±0.1。

分装于灭菌试管内，放成斜面备用。

　　3.5.3　试验方法

　　挑取琼脂培养物接种，在36±1℃培养24h，观察结果。

尿素酶阳性者由于产碱而使培养基变为红色。

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文件编号：

YJKZ/ZYW6-001

标题：

试剂配制

版号：

第2版，共26页第4页

　3.6　氰化钾（KCN）培养基（可按成品试剂上的说明操作或者用微量发酵管）

　　3.6.1　成分

　　蛋白胨　　　　　10g

　　氯化钠　　　　　5g

　　磷酸二氢钾　　　0.225g

　　磷酸氢二钠　　　5.64g

　　蒸馏水　　　　　1000mL

　　0.5%氰化钾溶液　20mL

　　pH7.6

　　3.6.2　制法

　　将除氰化钾以外的成分配好后分装烧瓶，121℃高压灭菌15min。

放在冰箱内使其充分冷却。

每100mL培养基加入0.5%氰化钾溶液2.0mL（最后浓度为1∶10000），分装于12mm×100mm灭菌试管，每管约4mL，立刻用灭菌橡皮塞塞紧，放在4℃冰箱内，至少可保存两个月。

同时，将不加氰化钾的培养基作为对照培养基，分装试管备用。

　　3.6.3　试验方法

　　将琼脂培养物接种于蛋白胨水内成为稀释菌液，挑取1环接种于氰化钾（KCN）培养基。

并另挑取1环接种于对照培养基。

在36±1℃培养1～2d，观察结果。

如有细菌生长即为阳性（不抑制），经2d细菌不生长为阴性（抑制）。

　　注：

氰化钾是剧毒药物，使用时应小心，切勿沾染，以免中毒。

夏天分装培养基应在冰箱内进行。

试验失败的主要原因是封口不严，氰化钾逐渐分解，产生氢氰酸气体逸出，以致药物浓度降低，细菌生长，因而造成假阳性反应。

试验时对每一环节都要特别注意。

3.7　氨基酸脱羧酶试验培养基（可用微量发酵管）

　　3.7.1　成分

　　蛋白胨　　　　　　　　　　5g

　　酵母浸膏　　　　　　　　　3g

　　葡萄糖　　　　　　　　　　1g

　　蒸馏水　　　　　　　　　　1000mL

　　1.6%滇甲酚紫－乙醇溶液　　1mL

　　L－氨基酸或DL－氨基酸　　0.5或1g/100mL

　　pH6.8

　　3.7.2　制法

　　除氨基酸以外的成分加热溶解后，分装每瓶100mL，分别加入各种氨基酸：

赖氨酸、精氨酸和鸟氨酸。

L－氨基酸按0.5%加入，DL－氨基酸按1%加入。

再行校正pH至6.8。

对照培养基不加氨基酸。

分装于灭菌的小试管内，每管0.5mL，上面滴加一层液体石蜡，115℃高压灭菌10min。

　　3.7.3　试验方法

　　从琼脂斜面上挑取培养物接种，于36±1℃培养18～24h，观察结果。

氨基酸脱羧酶阳性者由于产碱，培养基应呈紫色。

阴性者无碱性产物，但因葡萄糖产酸而使培养基变为黄色。

对照管应为黄色。

　　3.8　糖发酵管（可用微量发酵管）

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文件编号：

YJKZ/ZYW6-001

标题：

试剂配制

版号：

第2版，共26页第5页

　3.8.1　成分

　　牛肉膏　　　　　5g

　　蛋白胨　　　　　　10g

　　氯化钠　　　　　　3g

　　磷酸氢二钠（Na2HPO4·12H2O）　　2g

　　0.2%滇麝香草酚蓝溶液　12mL

　　蒸馏水　　　　　　1000mL

　　pH7.4

　　3.8.2　制法

　　3.8.2.1　葡萄糖发酵管按上述成分配好后，按0.5%加入葡萄糖，分装于有一个倒置小管的小试管内，121℃高压灭菌15min。

　　3.8.2.2　其他各种糖发酵管可按上述成分配好后，分装每瓶100mL，121℃高压灭菌15min。

另将各种糖类分别配好10%溶液，同时高压灭菌。

将5mL糖溶液加入于100mL培养基内，以无菌操作分装小试管。

　　注：

蔗糖不纯，加热后会自行水解者，应采用过滤法除菌。

　　3.8.3　试验方法：

从琼脂斜面上挑取小量培养物接种，于36±1℃培养，一般观察2～3d。

迟缓反应需观察14～30d。

3.9　ONPG培养基（可用微量发酵管）

　　3.9.1　成分

　　邻硝基酚β－D-半乳糖昔（ONPG）　　　　　　　60mg

　　（O－Nitrophenyl－β－D－galactopyranoside）

　　0.01mol/L磷酸钠缓冲液（pH7.5）　　　　　　　10mL

　　1%蛋白胨水（PH7.5）　　　　　　　　　　　　　30mL

　　3.9.2　制法

　　将ONPG溶于缓冲液内，加入蛋白胨水，以过滤法除菌，分装于10mm×75mm试管，每管0.5mL，用橡皮塞塞紧。

　　3.9.3　试验方法

　　自琼脂斜面上挑取培养物1满环接种，于36±1℃培养1～3h和24h观察结果。

如果β－半乳糖苷酶产生，则于1～3h变黄色，如无此酶则24h不变色。

3.10　丙二酸钠培养基（可用微量发酵管）

　　3.10.1　成分

　　酵母浸膏　　　　　　　　　1g

　　硫酸铵　　　　　　　　　　2g

　　磷酸氢二钾　　　　　　　　0.6g

　　磷酸二氢钾　　　　　　　　0.4g

　　氯化钠　　　　　　　　　　2g

　　丙二酸钠　　　　　　　　　3g

　　0.2%溴麝香草酚蓝溶液　　　12mL

　　蒸馏水　　　　　　　　　　1000mL

　　pH6.8

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文件编号：

YJKZ/ZYW6-001

标题：

试剂配制

版号：

第2版，共26页第6页

3.10.2　制法

　　先将酵母浸膏和盐类溶解于水，校正pH后再加入指示剂，分装试管，121℃高压灭菌15min。

　　3.10.3　试验方法

　　用新鲜的琼脂培养物接种，于36±1℃培养48h，观察结果。

阳性者由绿色变为蓝色。

　　3.11　葡葡糖铵培养基（可按成品试剂上的说明操作）

　　3.11.1　成分

　　氯化钠　　　　　　　　　　　　　　5g

　　硫酸镁（MgSO4·7H2O）　　　　　　　0.2g

　　磷酸二氢铵　　　　　　　　　　　　1g

　　磷酸氢二钾　　　　　　　　　　　　1g

　　葡萄糖　　　　　　　　　　　　　　2g

　　琼脂　　　　　　　　　　　　　　　20g

　　蒸馏水　　　　　　　　　　　　　　1000mL

　　0.2%溴麝香草酚蓝溶液　　　　　　　40mL

　　pH6.8

　　3.11.2　制法

　　先将盐类和糖溶解于水内，校正pH，再加琼脂，加热溶化，然后加入指示剂，混合均匀后分装试管，121℃高压灭菌15min，放成斜面。

　　3.11.3　试验方法

　　用接种针轻轻触及培养物的表面，在盐水管内做成极稀的悬液，肉眼观察不见混浊，以每一接种环内含菌数在20～100之间为宜。

将接种环灭菌后挑取菌液接种，同时再以同法接种普通斜面一支作为对照。

于36±1℃培养24h。

阳性者葡萄糖铵斜面上有正常大小的菌落生长；阴性者不生长，但在对照培养基上生长良好。

如在葡萄糖铵斜面生长极微小的菌落可视为阴性结果。

　　注：

容器使用前应用清洁液浸泡。

再用清水、蒸馏水冲洗干净，并用新棉花做成棉塞，干热灭菌后使用。

如果操作时不注意，有杂质污染时，易造成假阳性的结果。

3.12　西蒙氏柠檬酸盐培养基（可用微量发酵管）

3.12.1　成分

　　氯化钠　　　　　　　　　　　　　5g　

　　硫酸镁（MgSO4·7H2O）　　　　　　　0.2g

　　磷酸二氢铵　　　　　　　　　　　1g

　　磷酸氢二钾　　　　　　　　　　　1g

　　柠檬酸钠　　　　　　　　　　　　5g

　　琼脂　　　　　　　　　　　　　　20g

　　蒸馏水　　　　　　　　　　　　　1000mL

　　0.2%溴麝香草酚蓝溶液　　　　　　40mL

　　pH6.8

　　3.12.2　制法

先将盐类溶解于水内，校正pH，再加琼脂，加热溶化。

然后加入指示剂，混合均匀后

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文件编号：

YJKZ/ZYW6-001

标题：

试剂配制

版号：

第2版，共26页第7页

分装试管，121℃高压灭菌15min。

放成斜面。

　　3.12.3　试验方法

　　挑取少量琼脂培养物接种，于36±1℃培养4d，每天观察结果。

阳性者斜面上有菌落生长，培养基从绿色转为蓝色。

3.13　氧化酶试验（可用纸片法）

　　3.13.1　试剂

　　3.13.1.1　1%盐酸二甲基对苯二胺溶液：

少量新鲜配制，干冰箱内避光保存。

　　3.13.1.2　1%α-萘酚－乙醇溶液。

　　3.13.2　试验方法

　　3.13.2.1　取白色洁净滤纸沾取菌落。

加盐酸二甲基对苯二胺溶液一滴，阳性者呈现粉红色，并逐渐加深；再加α-萘酚溶液一滴，阳性者于半分钟内呈现鲜蓝色。

阴性于两分钟内不变色。

　　3.13.2.2　以毛细吸管吸取试剂，直接滴加于菌落上，其显色反应与以上相同。

3.14甲基红（MR）试验（可按成品试剂上的说明操作）

　　自琼脂斜面挑取少量培养物接种缓冲葡萄糖蛋白胨水中，于36±1℃培养2～5d，哈夫尼亚菌则应在22～25℃培养。

滴加甲基红试剂一滴，立即观察结果。

鲜红色为阳性，黄色为阴性。

甲基红试剂配法：

10mg甲基红溶于30mL95%乙醇中，然后加入20mL蒸馏水。

3.15　V－P试验（可按成品试剂上的说明操作）

　　用琼脂培养物接种缓冲葡萄糖蛋白胨水培养基中，于36±1℃培养2～4d。

哈夫尼亚菌则应在22～25℃培养。

加入6%α－萘酚－乙醇溶液0.5mL和40%氢氧化钾溶液0.2mL，充分振摇试管，观察结果。

阳性反应立刻或于数分钟内出现红色，如为阴性，应放在36±1℃下培养4h再进行观察。

3.160.25%氯化钙

氯化钙2.5g

蒸馏水1000mL

3.17　缓冲葡萄糖蛋白胨水（可用微量发酵管）

　　3.17.1　成分

　　磷酸氢二钾　　5g

　　多胨　　　　　7g

　　葡萄糖　　　　　5g

　　蒸馏水　　　　　1000mL

　　pH7.0

　　3.17.2　制法

　　溶化后校正pH，分装试管，每管1mL，121℃高压灭菌15min。

3.183%过氧化氢溶液

30%过氧化氢溶液临用时稀释10倍。

3.1920%碳酸钠溶液

碳酸钠20g

灭菌蒸馏水　　100mL

3.20甘露醇发酵培养基（可用微量发酵管）

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文件编号：

YJKZ/ZYW6-001

标题：

试剂配制

版号：

第2版，共26页第8页

3.20.1成分

牛肉膏　　　　　　5g

甘露醇10g

　　蛋白胨　　　　　　10g

　　氯化钠　　　　　5g

　　0.2%麝香草酚蓝溶液　12mL

　　蒸馏水　　　　　　1000mL

　　3.20.2　制法

将蛋白胨、氯化钠、牛肉膏加到蒸馏水中，加热溶解，校正pH7.4后，加入甘露醇和指示剂，分装试管，121℃高压灭菌20min。

3.211.5%硫代硫酸钠

硫代硫酸钠15g

蒸馏水　　　　　　1000mL

121℃高压灭菌20min。

3.2210%硫代硫酸钠

硫代硫酸钠100g

蒸馏水　　　　　　1000mL

121℃高压灭菌20min。

3.230.1%硫代硫酸钠肉汤

硫代硫酸钠1g

肉汤　　　　　　1000mL

121℃高压灭菌20min。

3.243%（W/V）吐温80和0.3%卵磷脂肉汤

吐温8030g

卵磷脂3g

肉汤　　　　　　1000mL

121℃高压灭菌20min。

3.250.3%甘氨酸肉汤

甘氨酸3g

肉汤　　　　　　1000mL

115℃高压灭菌15min。

3.263%（W/V）吐温80

吐温8030g

肉汤　　　　　　1000mL

121℃高压灭菌20min。

4　一般培养基和专用培养基

4.1　营养琼脂（可按成品试剂上的说明操作）

4.1.1　成分

蛋白胨　　　　10g

牛肉膏　　　　3g

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YJKZ/ZYW6-001

标题：

试剂配制

版号：

第2版，共26页第9页

氯化钠　　　　5g

琼脂　　　　　15～20g

蒸馏水　　1000mL

4.1.2　制法

将除琼脂以外的各成分溶解于蒸馏水内，加入15%氢氧化钠溶液约2mL，校正pH至

7.2～7.4。

加入琼脂，加热煮沸，使琼脂溶化。

分装烧瓶，121℃高压灭菌15min。

注：

此培养基可供一般细菌培养之用，可倾注平板或制成斜面。

如用于菌落计数，琼

脂量为1.5%；如作成平板或斜面，则应为2%。

4.2　乳糖胆盐发酵管（可按成品试剂上的说明操作）

4.2.1　成分

蛋白胨　　　　　　　　　　20g

猪胆盐（或牛、羊胆盐）　　　5g

乳糖　　　　　　　　　　　10g

0.04%滇甲酚紫水溶液　　　25mL

蒸馏水　　　　　　　　　　1000mL

pH7.4

4.2.2　制法

将蛋白胨、胆盐及乳糖溶于水中，校正pH，加入指示剂，分装每管10mL，并放入

一个小倒管，115℃高压灭菌15min。

注：

双料乳糖胆盐发酵管除蒸馏水外，其他成分加倍。

4.3　伊红美蓝琼脂（EMB）（可按成品试剂上的说明操作）

4.3.1　成分

蛋白胨　　　　　　　　　　　10g

乳糖　　　　　　　　　　　　10g

磷酸氢二钾　　　　　　　　　2g

琼脂　　　　　　　　　　　　17g

2%伊红Y溶液　　　　　　　　　20mL

0.65%美蓝溶液　　　　　　　　10mL

蒸馏水　　　　　　　　　　　1000mL

pH7.1

4.3.2　制法

将蛋白胨、磷酸盐和琼脂溶解于蒸馏水中，校正PH，分装于烧瓶内，121℃高压灭菌

15min备用。

临用时加入乳糖并加热溶化琼脂，冷至50～55℃，加入伊红和美蓝溶液，摇匀，倾注平板。

4.4　乳糖发酵管（可用微量发酵管）

4.4.1　成分

蛋白胨　　　　　　　　　　20g

乳糖　　　　　　　　　　　10g

0.04%溴甲酚紫水溶液　　　25mL

蒸馏水　　　　　　　　　　1000mL

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文件编号：

YJKZ/ZYW6-001

标题：

试剂配制

版号：

第2版，共26页第10页

pH7.4

4.4.2　制法

将蛋白胨及乳糖溶于水中，校正pH，加入指示剂，按检验要求分装30mL、10mL

或3mL，并放入一个小倒管，115℃高压灭菌15min。

　　注：

①双料乳糖发酵管除蒸馏水外，其他成分加倍。

　　②30mL和10mL乳糖发酵管专供酱油及酱类检验用，3mL乳糖发酵管供大肠菌群证实试验用。

4.5　EC肉汤（可按成品试剂上的说明操作）

　　4.5.1　成分

　　胰蛋白胨　　　　　　　　20g

　　3号胆盐（或混合胆盐）　　1.5g

　　乳糖　　　　　　　　　　5g

　　磷酸氢二钾　　　　　　　4g

　　磷酸二氢钾　　　　　　　1.5g

　　氯化钠　　　　　　　　　5g

　　蒸馏水　　　　　　　　　1000mL

　　4.5.2　制法

　　将上述成分混合，溶解后，分装有发酵倒管的试管中，121℃高压灭菌15min，最终pH为6.9±0.2。

　　4.6　缓冲蛋白胨水（BP）（可用微量发酵管）

　　4.6.1　成分

　　蛋白胨　　　　　　　　　　　　　　10g

　　氯化钠　　　　　　　　　　　　　　5g

　　磷酸氢二钠（Na2HPO4·12H2O）　　　　9g

　　磷酸二氢钾　　　　　　　　　　　　1.5g

　　蒸馏水　　　　　　　　　　　　　　1000mL

　　pH7.2

　　4.6.2　制法

　　按上述成分配好后以大烧瓶装，121℃高压灭菌15min。

临用时无菌分装每瓶225mL。

　　注：

本培养基供沙门氏菌前增菌用。

　　4.7　氯化镁孔雀绿增菌液（MM）（可按成品试剂上的说明操作）

　　4.7.1　甲液

　　胰蛋白胨　　　　　　5g

　　氯化钠　　　　　　　8g

　　磷酸二氢钾　　　　　1.6g

　　蒸馏水　　　　　　　1000mL

　　4.7.2　乙液

　　氯化镁（化学纯）　　　40g

　　蒸馏水　　　　　　　100mL

　　4.7.3　丙液

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YJKZ/ZYW6-001

标题：

试剂配制

版号：

第2版，共26页第11页

　　0.4%孔雀绿水溶液。

　　4.7.4　制法

　　分别按上述成分配好后，121℃高压灭菌15min备用。

临用时取甲液90mL、乙液9mL、丙液0.9mL，以无菌操作混合即可。

　　注：

本培养基亦称Rappaport10（R10）增菌液。

　　4.8　亚硒酸盐胱氨酸增菌液（SC）（可按成品试剂上的说明操作）

　　4.8.1