医学检验职称考试4.doc

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医学检验职称考试31-40

31、交叉配合试验

传统的交叉配合（crossmatching）试验是检测受者体内是否存在抗供者的特异性抗体，现在可同时检测受者对供者LD抗原的相容程度。

不管是否已经进行过各种HLA分型试验，交叉配合试验对选择移植物都有一定的参考价值。

1.微量细胞毒试验：

用供者的淋巴细胞作靶细胞，与受者的血清进行CDC；出现阳性反应说明受者体内含有抗供者的特异性抗体，移植后很有可能发生超急排斥反应。

若要明确受者的抗体是抗Ⅰ类抗原还是抗Ⅱ类抗原，可以将供者的淋巴细胞进一步分离出较纯的T细胞和B细胞分别进行检测；若要排除患者自身抗体的影响，可以用患者自己的细胞与自已的血清进行试验作为对照。

交叉配合是移值前必须做的一个检验项目；对一些曾经接触过移植抗原的受者，例如多次接受输血者、经产妇、有不成功移植史或接受过血清透析治疗者，尤其要进行审慎的检验。

2.流式细胞仪检测：

将供者淋巴细胞与受者血清共育后，用荧光标记的抗人Ig对结合有抗体的细胞染色，在流式细胞仪上进行荧光标记测定。

该法比微量细胞毒法的灵敏度高100倍，有条件的单位可以优先考虑使用。

3.混合淋巴细胞培养：

将供者与受者的淋巴细胞做双向混合培养，或者灭活供者的淋巴细胞做向混合培养，细胞反应的程度与供－受者相容的程度呈负相关。

4.细胞介导的淋巴细胞毒试验检测受者对移植物可能发生的细胞介导的淋巴细胞毒作用（cell-mediatedlymphocytotoxicity，CML）。

将受者淋巴细胞与灭活的供者淋巴细胞做常规单向MLC，收获致敏的受者淋巴细胞后，再与51Cr标记的、PHA刺激的供者淋巴细胞做CML试验；51Cr释放的程度与供－受者相容程度呈负相关。

32、活化凝血时间法

1.CT延长

①较显著的因子Ⅷ、Ⅸ减少的血友病甲、乙凝血因子缺乏症；

②血管性血友病；

③严重的因子Ⅴ、Ⅹ、纤维蛋白抗凝剂、应用肝素以及低纤维蛋白原血症；

④继发性或原发性纤溶活力增强；

⑤循环血液中的抗涨物，如抗因子Ⅷ抗体因子搞体、SLE等。

2.CT缩短

①血栓前状态：

DIC高凝期等；

②血栓性疾病如心肌梗死，不稳定心绞痛、脑血管病变、溏尿病行之有效管病变、肺梗死、深静脉血栓形成、妊高征、肾病综合征及高血溏、高血脂等。

33、靶形细胞

靶形细胞：

细胞中央染色较深，外围为苍白区域，而边缘又深染，形如射击之靶。

有时，中央深染区呈细胞边缘延伸的半岛状或柄状。

细胞直径比正常大，但厚度变薄，由于红细胞内血红蛋白化学成分发生变异和铁代谢异常所致。

形成过程：

红细胞中血红蛋白溶解成镰状或弓形空白区，随后弓形空白区两端继续弯曲延伸，形成环形透明带，细胞生存时间约为正常细胞的一半或更短。

见于各种低色素性贫血（如珠蛋白生成障碍性贫血、HbC病）、阻塞性黄疸、脾切除后。

34、积液的免疫学检查

1.C-反应蛋白（CRP）

感染性和恶性积液CRP含量明显增高。

因此，CRP对诊断感染性、恶性积液及鉴别渗出液和漏出液有重要价值。

漏出液CRP＜10mg/L,渗出液CRP＞10mg/L,其灵敏度和特异性均为80%左右。

2.肿瘤标志物

（1）癌胚抗原：

癌胚抗原（CEA）常采用ELISA、放射免疫或化学发光法检测。

恶性积液CEA明显增高。

动态检测CEA,并与血清CEA相对照，对恶性肿瘤诊断的符合率可达80%.当积液中CEA＞20μg/L,积液CEA/血清CEA比值＞1.0时，应高度怀疑为恶性积液，且CEA对腺癌所致的积液诊断价值最高。

（2）甲胎蛋白（AFP）：

常用ELISA、放射免疫或化学发光法检测AFP.血清AFP对原发性肝癌和胚胎性肿瘤的诊断价值较大。

积液中AFP含量与血清浓度呈正相关，当腹腔积液AFP＞25μg/L时，对诊断原发性肝癌所致的腹水有重要价值。

35、考试复习重点

当发生先天性或获得性代谢缺陷时，尿中一种或数种氨基酸量比正常增多，称为氨基酸尿。

（1）肾性氨基酸尿。

这是由于肾小管对某些氨基酸的重吸收发生障碍所致。

①非特异性：

Fanconi综合征（多发性肾近曲小管功能不全）、胱氰酸病、Wilson病（进行性肝豆状核变性）、半乳糖血症。

②特异性：

胱氨酸尿、甘氨酸尿。

（2）溢出性氨基酸尿。

由于氨基酸中间代谢的缺陷，导致血浆中某些氨基酸水平的升高，超过正常肾小管重吸收能力，使氨基酸溢入尿中。

①非特异性：

肝病、早产儿和新生儿、巨幼细胞性贫血、铅中毒、肌肉营养不良、Wilson病及白血病等。

②械糖尿病、Hartnup病（遗传性尼克酰氨缺乏）、苯丙酮尿。

（3）由氨基酸衍生物的异常排泄所致。

黑酸尿、草酸盐沉积症、苯丙酮尿及吡哆醇缺乏。

36辅导资料

1.CT延长

①较显著的因子Ⅷ、Ⅸ减少的血友病甲、乙凝血因子缺乏症；

②血管性血友病；

③严重的因子Ⅴ、Ⅹ、纤维蛋白抗凝剂、应用肝素以及低纤维蛋白原血症；

④继发性或原发性纤溶活力增强；

⑤循环血液中的抗涨物，如抗因子Ⅷ抗体因子搞体、SLE等。

2.CT缩短

①血栓前状态：

DIC高凝期等；

②血栓性疾病如心肌梗死，不稳定心绞痛、脑血管病变、溏尿病行之有效管病变、肺梗死、深静脉血栓形成、妊高征、肾病综合征及高血溏、高血脂等。

37、常考内容

肺炎球菌肺炎是由肺炎球菌或肺炎链球菌所引起，占院外感染肺炎中的半数以上。

肺段或肺叶呈急性炎性实变，患者有寒战、高热、胸痛、咳嗽和血痰等症状。

近年来由于抗菌药物的广泛应用，临床上症状轻或不典型病较为多见。

肺炎球菌一般通过吸入，经上呼吸道到达肺部。

它们停留在细支气管内增殖并引起炎症过程，开始在肺泡腔内产生大量蛋白质的液体，这种液体起着病菌培养介质的作用，并可帮助病菌向邻近肺泡扩散，典型的结果是导致大叶性肺炎。

38、尿脱落细胞的分级标准

尿脱落细胞学分级标准（巴氏分级国际标准）

Ⅰ级：

未发现异型细胞。

Ⅱ级：

细胞有异型性，但无恶性证据。

Ⅲ级：

具有可疑的恶性细胞，但不能确定。

Ⅳ级：

具有较明显的恶性细胞。

Ⅴ级：

具有肯定的恶性细胞。

注：

在实际应用中为了减少疏漏，在Ⅱ级与Ⅲ级间增加一档Ⅱ～Ⅲ级，标准是涂片内有非典型细胞或异常细胞，且出现频率在10%以上。

按巴氏分级标准

Ⅰ级：

细胞少，无不典型。

Ⅰ～Ⅱ级：

有细胞，属非肿瘤的良性病理情况。

Ⅱ级：

细胞不典型，但结构良好。

Ⅲ级：

有可疑恶性细胞（细胞很不典型，但不能确诊为癌）。

Ⅳ级：

高度怀疑癌或癌特征。

Ⅴ级：

癌。

巴氏结果判断

Ⅰ级：

未见异常细胞。

Ⅱ级：

发现异常细胞，但均为良性。

Ⅲ级：

发现可疑恶性细胞。

（1）性质不明细胞。

（2）细胞形态明显异常，难于肯定其良、恶性，需要近期复查核实。

（3）未分化或退化的可疑恶性细胞与恶性裸核。

Ⅳ级：

发现待证实的癌细胞（高度可疑的恶性细胞），具有恶性特征但不够典型；或更典型但数目太少，需要复核，例如高度可疑的未分化或退化癌细胞，或少数低分化癌细胞。

Ⅴ级：

发现癌细胞，其恶性特征明显或数目较多，可作互相比较以确定为恶性者，例如高分化的鳞癌或腺癌细胞；医|学教育网搜集整理成群未分化或低分化癌细胞。

化验单：

巴氏分级法及TBS分类

巴氏I级：

完全正常。

巴氏II级：

多见于绝经后或育龄伴有宫颈炎症者，指个别细胞核异质明显，但不支持恶性。

巴氏III级：

可疑癌，需马上做进一步确诊，大约有10%的几率向癌症发展。

巴氏IV级：

重度可疑癌，全面检查。

巴氏V级：

确定癌。

39、培养基的组成成分

培养基的组成成分包括三大类：

营养物质、凝固物质、抑制剂和指示剂。

（一）营养物质

尽管不同的细菌对营养的要求不同，但细菌需要的营养物质应含有水、氮源、碳源、无机盐类和生长因子等，常用的营养物质如下：

1.蛋白胨：

蛋白胨是制备培养基时最常用的成分之一，提供细菌生长繁殖所需要的氮源。

是动物或植物蛋白质经酶或酸碱分解而成。

植物胨和动物胨各有优点，配制培养基常将两者按一定比例混合使用，提高培养基的营养价值。

蛋白胨易溶于水，遇酸不沉淀，不因受高温而凝固，并为两性电解质有缓冲作用。

但吸水性强，应注意干燥密封保存。

2.肉浸液：

是用新鲜牛肉浸泡、煮沸而制成的肉汁。

其中含有可溶性含氮浸出物（肌酸、黄嘌呤、腺嘌呤、次黄嘌呤核苷酸、谷氨酸、甘氨酸等）和非含氮浸出物（肝糖、乳酸、琥珀酸、磷酸己糖、脂肪、无机盐类等）。

还有一些生长因子。

肉浸液可为细菌提供氮源和碳源，但肉浸液中所含氮物质过少而不能满足细菌的需要，因此在制备培养基时应再加入1％～2％的蛋白胨和0.5％氯化钠。

3.牛肉膏：

由肉浸液经长时间加热浓缩而制成。

糖类在加热过程中被破坏，所以其营养价值低于肉浸液，但因无糖可用作肠道杆菌鉴别培养基的基础成分。

由于使用方便，常用于制备培养基。

4.糖类、醇类：

为细菌生长提供碳源和能源。

制备培养基所用的糖类、醇类有多种，常用的糖类有单糖（葡萄糖、阿拉伯糖等）、双糖（乳糖、蔗糖等）和多糖（淀粉、菊糖等）；常用的醇类有甘露醇、卫茅醇等。

除葡萄糖、蔗糖主要作为碳源和能源的基本成分外，其他糖类和醇类主要用于鉴定细菌所做的发酵反应。

5.血液：

血液中既含有蛋白质、多种氨基酸、糖类、无机盐类等营养物质，又能提供辅酶（如V因子）、血红素（X因子）等特殊生长因子，所以培养基中加入血液用于培养营养要求较高的细菌。

另外，还可根据细菌在血液培养基中的溶血现象而进行鉴定。

6.无机盐类：

提供细菌生长的各种元素，如：

钾、钠、铁、镁、钙、磷、硫等。

用于制备培养基的无机盐类有多种，其中最常用的有氯化钠和磷酸盐，前者对维持酶的活性、调节菌体内外的渗透压非常重要，后者是细菌良好的磷源，并在培养基中具有缓冲作用。

7.鸡蛋和动物血清：

虽然不是构成培养基的基本成分，但却是某些细菌生长所必需的营养物质，所以仅用于制备一些特殊的培养基，这些细菌直接从鸡蛋和动物血清中获取营养。

如培养结核分枝杆菌的鸡蛋培养基和培养白喉杆菌的吕氏血清培养基等。

8.生长因子：

是细菌生长所必需的，但需要量很小。

在制备培养基时，常在肝浸液、肉浸液、酵母浸液和含血液培养基中加入维生素、氨基酸、嘌呤、嘧啶等生长因子。

（二）凝固物质

制备固体培养基时，需要在液体中加入凝固物质。

最常用的凝固物质为琼脂，特殊情况下也可用明胶、卵白蛋白、血清等。

琼脂是从石花菜中提取出来的一种半乳糖胶，当温度达98℃以上时可溶于水，在45℃以下则凝固成凝胶状态，是一种理想的固体培养基赋形剂。

因其不被细菌分解利用，故无营养作用。

（三）抑制剂和指示剂

在制备培养基时常加入抑制剂和指示剂，这些并不是细菌生长繁殖所必需的物质，而是由于选择、鉴定及判断结果的需要。

1.抑制剂：

抑制剂必须具有选择抑制作用，在制备培养基时加入一定种类的抑制剂，目的在于抑制非检出菌（非病原菌）的生长，以利于检出菌（病原菌）的生长。

抑制剂的种类很多，可根据不同的目的选用不同的抑制剂。

常用的有胆盐、煌绿、亚硫酸钠、亚硒酸钠及一些染料和某些抗生素等。

2.指示剂：

在培养基中加入一定种类的指示剂，是为了便于观察细菌是否利用和分解培养基中的糖、醇类。

常用的有酚红、中性红、甲基红、溴甲酚紫、溴麝香草酚蓝、中国蓝等酸碱指示剂。

美蓝常用作氧化还原指示剂。

40、尿脱落细胞学分

尿脱落细胞学分级标准（巴氏分级国际标准）

Ⅰ级：

未发现异型细胞。

Ⅱ级：

细胞有异型性，但无恶性证据。

Ⅲ级：

具有可疑的恶性细胞，但不能确定。

Ⅳ级：

具有较明显的恶性细胞。

Ⅴ级：

具有肯定的恶性细胞。

注：

在实际应用中为了减少疏漏，在Ⅱ级与Ⅲ级间增加一档Ⅱ～Ⅲ级，标准是涂片内有非典型细胞或异常细胞，且出现频率在10%以上。

按巴氏分级标准

Ⅰ级：

细胞少，无不典型。

Ⅰ～Ⅱ级：

有细胞，属非肿瘤的良性病理情况。

Ⅱ级：

细胞不典型，但结构良好。

Ⅲ级：

有可疑恶性细胞（细胞很不典型，但不能确诊为癌）。

Ⅳ级：

高度怀疑癌或癌特征。

Ⅴ级：

癌。

巴氏结果判断

Ⅰ级：

未见异常细胞。

Ⅱ级：

发现异常细胞，但均为良性。

Ⅲ级：

发现可疑恶性细胞。

（1）性质不明细胞。

（2）细胞形态明显异常，难于肯定其良、恶性，需要近期复查核实。

（3）未分化或退化的可疑恶性细胞与恶性裸核。

Ⅳ级：

发现待证实的癌细胞（高度可疑的恶性细胞），具有恶性特征但不够典型；或更典型但数目太少，需要复核，例如高度可疑的未分化或退化癌细胞，或少数低分化癌细胞。

Ⅴ级：

发现癌细胞，其恶性特征明显或数目较多，可作互相比较以确定为恶性者，例如高分化的鳞癌或腺癌细胞；医|学教育网搜集整理成群未分化或低分化癌细胞。

化验单：

巴氏分级法及TBS分类

巴氏I级：

完全正常。

巴氏II级：

多见于绝经后或育龄伴有宫颈炎症者，指个别细胞核异质明显，但不支持恶性。

巴氏III级：

可疑癌，需马上做进一步确诊，大约有10%的几率向癌症发展。

巴氏IV级：

重度可疑癌，全面检查。

巴氏V级：

确定癌。