执业兽医之微生免疫第01部分.docx
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执业兽医之微生免疫第01部分
执业兽医之【微生免疫】【第01部分】
姓名：
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指导：
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日期：
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一细菌的结构与生理
【01】细菌形态：
具有细胞壁和核质的单细胞原核细胞型微生物。
无成形的细胞核，无完整的细胞器。
以微米为测量单位。
在固体培养基上培养，肉眼可见菌体集落。
【02】细菌结构
（一）细胞壁：
1、肽聚糖：
为聚糖骨架；原核生物细胞特有。
2、磷壁酸：
G+菌特有；其抗原性较强：
黏附宿主细胞。
3、外膜：
外膜蛋白：
脂蛋白、微孔蛋白。
脂质双层：
脂多糖：
类脂A：
内毒素成分。
核心多糖：
具有属特异性。
特异性多糖：
具有种型特异性。
4、周浆间隙：
外膜与细胞膜之间，可获得营养，解除病毒。
（二）细胞膜：
定义：
为脂质双层，并镶嵌有特殊功能的载体蛋白酶类；不含胆固醇。
功能：
物质交换、分泌胞外酶、产生与利用能量有关、细胞生物合成的场所。
（三）细胞质：
成分：
水、蛋白质、脂类、核酸、少量无机盐、核糖体、质粒。
（为超微结构）
核糖体：
由RNA和蛋白质组成；是蛋白质合成场所。
质粒：
定义：
细胞染色体外的遗传物质，为双股DNA分子。
包括：
F质粒：
决定细菌的致育性。
R质粒：
决定耐药性。
毒力质粒：
决定致病性。
（四）核体：
染色体（裸露的双链DNA）
【03】G+菌：
革兰氏染色为紫色；G-菌：
革兰氏染色为红色。
【04】细胞壁的功能：
维持固有形态、物质交换、携带有抗原决定簇与致病性有关。
【05】细菌特殊结构：
⑴荚膜：
①为黏液样物质；
②为多糖或多肽或透明质酸奶；
③在营养品丰富时才形成；
④能抵抗吞噬；
⑤有特异性抗氧。
⑵鞭毛：
①细长波浪状物业；
②成分为蛋白质；
③能运行（沙门菌）；
④有特异的H抗氧;
⑤与黏附有关。
⑶菌毛：
①普通菌毛：
有黏附功能的；
②性菌毛：
F菌毛。
成分为菌毛蛋白（pillin）；有良好的抗生素抗性。
⑷芽孢：
定义：
一定条件下胞质脱水浓缩形成；有多层膜包裹；通透性低；有完整核质和酶系统；代谢静止；不能分裂繁殖。
是抵抗不良环境的特殊形成。
灭活方法：
160℃干热灭菌或高压蒸气灭菌。
【06】细菌染色方法
①革兰氏染色法的程序：
草酸铵结晶紫染色1min→碘液染1min→95％醇脱色30s→碳酸复红1min、
意义：
鉴别细菌、选择抗菌药物。
②瑞氏染色法：
l【09】细菌的生长曲线分为四个时期：
①迟缓期：
菌体增大，代谢活跃；分裂迟缓，细菌数增加不显著。
②对数期：
活菌数对数直线上升；生物活性典型；对抗生素敏感。
③稳定期：
新繁殖的活菌数与死菌数平衡；产生芽孢，外毒素等。
④衰亡期：
死菌数超过活菌数；菌体形态改变。
【10】细菌新成代谢的能量由ATP供给。
【11】细菌生物氧化的类型
①发酵：
以有机物为受氢体。
②有氧呼吸：
以氧气为受氢体。
③厌氧呼吸：
以无机物硝酸盐为受氢体。
【12】细菌合成的代谢产物：
①致热源：
（操作时严格注意无菌操作）。
②毒素：
内毒素为G-菌死后释放，外毒素为G+菌分泌的蛋白质。
③侵袭性酶类：
透明质酸酶（促使细菌扩散）。
④色素：
铜绿假单胞菌产绿色色素。
⑤细菌素：
仅对近缘菌株有抗菌作用的蛋白质，如：
绿脓菌素。
⑥抗生素：
多有放线菌和真菌产生。
⑦维生素：
大肠杆菌能合成维生素B维生素K。
【13】细菌的分解代谢试验：
①氧化发酵试验：
大肠杆菌产酸产气；沙门菌产酸不产气。
②氧化酶试验：
阳性者为什么紫色。
（阳性菌有假单胞菌、气单胞菌；阴性菌有：
肠科杆菌）
③过氧化氢酶试验：
阳性者产生气泡。
（阳性：
葡萄球菌、微球菌。
阴性：
链球菌。
）
④硫化氢试验：
产生黑色为阳性（阳性：
变形杆菌；阴性：
大肠杆菌）
⑤尿素酶试验：
阳性者呈红紫色（阳性：
变形杆菌；阴性：
沙门菌）
⑥吲哚试验：
阳性呈红色（阳性：
大肝杆菌、变形杆菌）
⑦甲基红试验（MR）：
红色反应为阳性（阳性：
大肠杆；阴性：
产气杆）
⑧VP试验：
阳性呈红色（阳性：
产气杆菌;阴性：
大肠杆菌）
⑨枸橼酸盐利用试验（C）：
培养基变深兰为阳性（阳性：
产气杆菌；阴性：
大肠杆菌）
⑩IMVC试验：
大肠杆菌++--;产气杆菌--++
【14】固体培养基中琼脂含义2％；半固体培养基中琼脂含量0.5%。
【15】基础培养基：
常用普通肉汤培养基，含蛋白胨、牛肉浸膏、NaCl、水等；常用于糖发酵试验。
【16】营养培养基：
在基础培养基中加入葡萄糖、血液、血清、酵母浸膏等；常用血琼脂平板（链球菌）。
【17】选择培养基：
麦康凯培养基抑制G+生长，利于用大肠杆菌、沙门菌生长。
【18】鉴别培养基：
另加入底物及指示剂，而鉴别细菌。
【19】厌氧培养基：
常用疱肉培养基；即在肉浸液中加入煮过的肉渣，用凡士林封口。
【20】液体培养基生长现象：
①混浊生长（葡萄球菌）；②沉淀生长（链球菌）；③菌膜生长（枯草杆菌）。
【21】半固体培养基中的生长现象：
沿穿刺线生长或穿刺线向四周扩散呈放射状生长。
【22】固体培养基中的生长现象：
平板上划线后形成菌落；斜面上划线重叠形成菌苔。
二细菌的感染
【01】正常菌体的分布：
①口腔：
球菌、乳杆菌、棒状杆菌；
②胃：
乳杆菌、幽门螺杆菌；
③反刍前胃：
无芽孢厌氧菌；
④大肠：
双歧，拟杆菌，肠球菌，大肠杆菌，乳杆菌；
⑤鼻、咽：
葡萄酒球菌；
⑥喉、扁桃体：
甲型链球菌，卡他球菌；
⑦阴道：
乳杆菌；
⑧尿道口：
葡萄球菌，棒状杆菌；
⑨支气管、肺：
无菌；
【02】正常菌群的生理作用：
生物颉颃作用，营养作用，免疫作用。
【03】柯赫法则：
是确定某种细菌是否有具有致病性的主要依据。
①特定的病原菌应在同一疾病中可见，在健康者不存在；
②此病原菌能被分离培养而得到纯种；
③此病原菌纯培养物接种易感动物能导致同样病症；
④自实验感染的动物体内能重新获得该病原菌的纯培养物。
【04】细菌的毒力因子：
⑴侵袭力
①黏附因子
F1菌毛：
无特异性；
F4菌毛K88：
黏附猪小肠前段；
F6菌毛987P：
黏附猪小肠后段。
②侵袭性酶
透明质酸酶、链激酶：
链球菌产生;
胶原酶：
梭菌、气单胞菌产生;
血液凝固酶：
致病葡萄菌产生。
③Ⅱ型分泌系统
沙门氏菌、大肠杆菌等具有。
④干扰防御
荚膜：
抵抗吞噬；
细菌表面蛋白：
抗吞噬、避免抗体补体作用；
蛋白酶；
细胞内逃逸：
如产生过氧化氢，中和吞噬细胞中的氧自由基。
⑵毒素
①外毒素
由G+及少量G-（如产毒性大肠埃希氏菌）产生；
0、3%甲醛刺激机体
外毒素→→→→类毒素→→→产生抗毒素；
神经毒素：
包括破伤风毒素，肉毒毒素。
②内毒素
是G-菌细胞壁的脂多糖，当细菌死亡后才游离出来；
产生症状：
发热、毒血症、休克、内凝血、出血。
【05】破伤风梭菌及其芽孢必须侵入缺氧的深部创口才能致病。
【06】几种血症的区别
①菌血症：
病原菌侵入血统，但不繁殖。
②毒血症：
病原菌不的入血，但其产生内毒素入血，引起症状。
③败血症：
病原菌入血，并繁殖产生毒性物质，引起中毒症状（高热、皮肤黏膜淤斑、肝脾肿大）。
④脓毒血症：
化脓性细菌入血并繁殖，产生新的化脓灶。
【07】药敏试验结果判定标准：
①敏感：
用常用剂量时，该抗菌药物治疗有效。
②中介：
指被测菌株的MIC与该抗菌药物常用剂量所能达到的血清和组织浓度相近。
③耐药：
指被测菌株不能被该抗菌药物常用剂量达到的血液浓度所抑制，临床治疗无效。
三细菌感染的诊断
【01】采集样本的原则：
①严格无菌操作；
②根据不同疾病或同一疾病不同时期采集不同的标本；
③应在使用抗菌药前采集，且采集时不得使用消毒剂；
④样本须新鲜，尽快送检；
⑤多数可冷藏运输，粪便样本常加入甘油缓冲盐水保存液；
⑥按规定包装、冷藏、专人递送；做好标记。
【02】抗体检测：
最好检测急性期和恢复双份血清样本，后者为前者4倍以上才具诊断价值。
【03】聚合酶链式反应（PCR）的4种主要材料：
DNA模板、引物、耐热DNA聚合酶、脱氧核苷酸。
【04】核酸杂交技术的设计原理：
DNA双螺旋分子的碱基互补原理。
【05】利用生化反应对肠道杆菌进行鉴定是必不可少的。
四消毒与灭菌
【01】消毒：
指杀灭病原微生物，但不一定能杀死芽孢。
【02】灭菌：
指杀灭病原微生物、非病原微生物及其芽孢。
【03】高压蒸汽灭菌法：
应用最广、灭菌效果最好的方法。
其条件为103、4kp、121、3℃、维持15-30min、
【04】煮沸法：
100℃时5min可杀死细菌的繁殖体，1-3h杀死芽孢，加入2%碳酸钠则沸点升至少105℃
【05】流通蒸汽法：
100℃30min杀死细菌的繁殖体，不可杀死芽孢。
【06】巴氏消毒法：
主要用于食品消毒，如下65℃维持30min、
【07】热空气灭菌法：
160℃，2h可杀死芽孢。
用于玻璃器皿消毒。
【08】紫外线灭菌：
265nm波长的紫外线杀菌能力最强。
用于实验室，养殖场入口的消毒室、手术室、种蛋等的空气消毒。
【09】电离辐射灭菌：
称“冷灭菌”，用于一次性医用塑料制品消毒。
【10】滤过除菌法：
所器具为滤菌器，其孔径为0、22-0、45um即细菌不能通过，但病毒、支原体可通过。
【11】紫外线消毒：
有效距离不超过2-3m、
【12】消毒剂作用机制：
①使菌体蛋白变性、凝固（醇、酚、醛）；
②干扰细菌代谢（酚类）；
③改变细胞膜通透性（新洁尔灭）。
【13】能杀灭芽孢的消毒剂：
氯制剂、过氧化化物、醛类。
【14】影响消毒药作用的因素：
①浓度、性质、作用时间；
②温度和酸碱度；
③细菌种类、数量状态；
④有机物。
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