蛙心灌流实验docWord格式.docx

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不同因素对离体蛙心灌流的现象观察

实验项目学分：

指导教师：

黄瑛

姓名：

学号：

专业：

实验时间：

论文提交时间：

生物科学教学实验中心制

评分表

评价方面

权重

评分

平时表现：

（包括实验态度、实验室常识、实验习惯、实验技能、原始记录等方面）

20分

实验方案设计：

（包括开展本项实验研究的理论基础、研究目的、技术路线、研究方法、实验进度安排、可行性分析等。

）

论文：

（严格按照正规期刊要求的格式撰写论文。

主要评价指标：

是否按照科学的研究方法完成实验，实验结果是否翔实、充足，论文撰写是否规范，分析讨论是否合理到位。

60分

合计

100分

指导老师签字：

不同因素对离体蛙心灌流的现象观察

【摘要】本次试验通过用不同的试剂及条件对离体蛙心进行灌流，利用生物信息采集系统对蛙心的搏动进行分析。

结果表明不同和的条件及物质对蛙心的搏动有不同的影响。

【关键词】蛙心灌流不同物质收缩搏动

1材料与方法

1.1实验动物蟾蜍

1.2实验试剂有钙任氏液、无钙任氏液、50℃有钙任氏液、4℃有钙任氏液、1:

10000mg/L乙酰胆碱溶液、1:

10000mg/L肾上腺素溶液、1%乳酸溶液、2.5%NaHCO3溶液、1%KCl溶液、2%CaCl2溶液、5%CaCl2溶液、5%NaCl溶液

1.3实验仪器BL-420生物信号采集系统、蛙心夹、蛙心插管、铁支架、剪刀、张力传感器、烧杯、滴管、钉子、线

1.4方法与步骤

1.4.1在体蛙心实验取一只蛙，双毁髓，腹部朝上固定于蛙板上。

用镊子提起剑突处皮肤，用粗剪刀剪一小口，由切口处向上呈“V”形剪开胸骨表面皮肤，提起剑突，将粗剪刀伸入胸腔内，紧贴胸壁（避免损伤心脏和血管）沿中线剪开胸骨，打开胸腔。

用镊子提起心包膜，并用眼科剪刀仔细剪开心包，暴露出心脏。

用蛙心夹夹住心尖部，将蛙心夹上的系线绕过滑轮与张力传感器相连，连接1通道。

调节滑轮位置，使心脏不离开体腔且能记录心搏曲线。

依次使用4℃有钙任氏液、50℃有钙任氏液灌流蛙心，记录心电图。

1.4.2离体蛙心实验取一只蛙，双毁髓，腹部朝上固定于蛙板上。

在主动脉干下方引2根线。

一条在左主动脉上端结扎作插管时牵引用，另一根则在动脉圆锥上方，系一松结用于结扎固定蛙心插管。

左手持左主动脉上方的结扎线，用眼科剪在松结上方左主动脉根部剪一小斜口，右手将盛有少许任氏液的大小适宜的蛙心插管由此剪口处插入动脉圆锥。

当插管头到达动脉圆锥时，有将插管稍稍后退，并转向心室中央方向，在心室收缩期插入心室。

判断蛙心插管是否进入心室可根据插管内的任氏液的液面是否能随心室的舒缩而上下波动。

如蛙心插管已进火心室，则将预先准备好的松结扎紧，并固定在蛙心插管的侧钩上以免蛙心插管滑出心室。

剪断主动脉左右分支。

轻轻提起蛙心插管以抬高心脏，用一线在静脉窦与腔静脉交界处作一结扎，结扎线应尽量下压，以免伤及静脉窦，在结扎线外侧剪断所有组织，将蛙心游离出来。

用新鲜任氏液反复换洗蛙心插管内含血的任氏液，直至蛙心插管内无血液残留为止。

依次使用4℃有钙任氏液、50℃有钙任氏液、1%KCl溶液、2%CaCl2溶液、5%CaCl2溶液、5%NaCl溶液、1:

10000乙酰胆碱溶液、1:

10000肾上腺素溶液、1%乳酸溶液、2.5%NaHCO3溶液灌流蛙心，待效果明显后，记录心电图，用有钙任氏液灌流几次，待搏动恢复正常后进行下一项物质的灌流。

2结果

2.1在体蛙心实验

图1-1在体蛙心滴加常温任氏液的心电图

图1-2在体蛙心滴加50℃有钙任氏液的心电图

在体蛙心滴加50℃有钙任氏液后，心跳频率变大。

图1-3在体蛙心滴加4℃有钙任氏液的心电图

在体蛙心滴加4℃有钙任氏液后，心跳频率变缓变小。

2.2离体蛙心灌流实验

2.2.1离体蛙心正常心电图

图2-1离体蛙心正常心电图

离体蛙心正常心电图，心跳频率为42次/分

2.2.2离子的影响

图2-2离体蛙心滴加1%KCl溶液的心电图

离体蛙心滴加1%KCl溶液后，搏动曲线的幅度变小，心跳频率变大。

图2-3离体蛙心滴加2%CaCl2溶液的心电图

离体蛙心滴加2%CaCl2溶液后，心跳频率渐渐变大。

图2-4离体蛙心滴加5%CaCl2溶液的心电图

离体蛙心滴加5%CaCl2溶液后，心跳频率迅速变大。

图2-5离体蛙心滴加5%NaCl溶液的心电图

离体蛙心滴加5%NaCl溶液后，心跳频率变化不大。

2.2.3递质的影响

图2-6离体蛙心滴加1:

10000肾上腺素心电图

离体蛙心滴加1:

10000肾上腺素后，心跳频率变大。

图2-7离体蛙心滴加1:

10000乙酰胆碱心电图

10000乙酰胆碱后，心跳频率变小。

2.2.4温度的影响

图2-8离体蛙心滴加50℃任氏液心电图

离体蛙心滴加50℃任氏液后，心跳频率变大。

图2-9离体蛙心滴加4℃任氏液心电图

离体蛙心滴加4℃任氏液后，心跳频率变小。

2.2.4酸碱的影响

图2-10离体蛙心滴加1%乳酸后加入2.5%NaHCO3溶液中和的心电图

离体蛙心滴加1%乳酸溶液后，心跳频率逐渐变小，加入2.5%NaHCO3溶液中和后，心脏搏动逐渐恢复正常，说明H+会抑制心跳，使心脏舒张能力减小，从而使搏动曲线幅度变小。

3讨论与结论

离体心脏灌流是研究心脏功能的重要手段之一，广泛应用于医学、生物学、药学等教学和科研工作中。

采用离体心脏灌流系统可以直观地观察心脏的活动，研究心脏舒缩功能，心率和节律变化，前后负荷及各种体液因素等对心脏功能的影响[1]。

进行离体心脏灌流实验，首先需要保证心脏在体外较长时间存活，然后根据实验目的进行灌流和施加实验因素[2]。

　蛙心灌流实验的关键就在“蛙心插管”，这是一个相对较难的实验操作,往往因为插管不顺利或失败导致整个实验的失败。

插管失败的常见原因主要有：

①插管进入左主动脉后，难以将管尖插入心室，导致反复插管，或久插不进,易发生心脏瓣膜及心肌损伤,使心律失常发生率增高或蛙心搏动减弱，导致实验失败；

②插管前，阻断心脏的血流,使心脏短时间内停止收缩射血，血液聚集于心腔使心脏过分膨大,妨碍蛙心插管并可能影响心肌的活性；

③在腔静脉结扎时，误将静脉窦与腔静脉血管一起结扎，致使心脏停止跳动；

④由于插管不顺利，耽误时间较长，未能及时将蛙心管和蛙心内的血液冲洗干净，致血液凝固堵塞管口，使插管失败[3]。

本实验中采用了不同条件对蛙心的影响，如不同温度、不同递质、不同离子以及酸碱作用。

在一定温度范围内，高温使心跳加快，而低温使心跳减慢。

肾上腺素使心脏的兴奋性增强了，促进的心脏的搏动；

乙酰胆碱使信号传递变慢了，从而抑制了心脏的搏动。

Ca离子对心跳有一定的促进作用，增强心脏的收缩能力；

K离子对心跳有一定的抑制作用，会减弱心脏的收缩能力；

Na离子和Cl离子对心跳影响不大。

乳酸会使心跳频率迅速下降，若不及时加入NaHCO3中和，会导致蛙心停止搏动。

实验表明不同的条件及物质对蛙心的心跳频率有不同的影响。

参考文献

[1]黄敏，冬冬主编.医学机能实验学[M].北京:

科学出版社,2002.48-50.

[2]林平，潘慧，苏付荣，祝世功中国病理生理杂志，2005,21（7）:

1455-1456

[3]黄庆洲，邓义桂，肖兴才，等.“离体蛙心灌流实验”的几点改进措施[J].四川畜牧兽医学院学报,2000,14

（2）:

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