高中生物生物技术实践知识点填空.docx

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高中生物生物技术实践知识点填空

选修1生物技术实践导学提纲

（一）

☆果酒和果醋和制作

（一）果酒制作

1．原理：

菌种，属于核生物，新陈代谢类型，有氧时，呼吸的反应式为：

；无氧时，呼吸的反应式为：

。

2．条件：

繁殖最适温度，酒精发酵一般控制在。

3．菌种来源：

4．实验设计流程图

挑选葡萄

冲洗

______________

_______________

_______________

果酒果醋

5．实验结果分析与评价：

可通过嗅觉和品尝初步鉴定，并用______________检验酒精存在。

可观察到的现象为

（二）果醋的制作：

1．原理：

菌种：

______________，属于______________核生物，新陈代谢类型为_________

醋酸生成反应式是____________________________。

2．条件：

最适合温度为__________，需要充足的______________。

3．菌种来源：

到______________或______________购买。

4．设计实验流程及操作步骤：

果酒制成以后，在发酵液中加入______________或醋曲，然后将装置转移至

______________0C条件下发酵，适时向发酵液中______________。

如果没有充气装置，可以将瓶盖打开，在瓶盖上纱布，以减少空气中尘土污染。

8．利用微生物发酵制作果酒，该过程利用的微生物是酵母菌，其代谢类型是异养兼性厌氧型，与生产实际相关的反应式是C6H12O62C2H5OH+2CO2+能量，在不灭菌的情况下，如何使酵母菌成为优势菌种?

将混合菌置于缺氧，酸性环境下，利用酵母菌兼性厌氧的特点，而绝大多数其他微生物都无法适应这一环境受到抑制。

9．酵母菌是自然界中常见的一类真菌．

（1）从细胞核的结构看，酵母菌属于真核生物．

（2）酵母菌常进行出芽生殖，在基因工程中，也常用酵母菌作为转入基因的受体细胞，是因为酵母菌繁殖快，遗传物质相对少。

（3）用染料使染色体着色，发现一酵母菌细胞核中有17条染色体，该酵母菌是单倍体．在自然环境中，酵母菌属于生态系统中的分解者成分．

（4）酵母菌体内遗传物质主要在细胞核上，而醋酸菌的遗传物质主要在拟核上．

选修1生物技术实践导学提纲

（二）

☆腐乳的制作

三、学习过程

（一）腐乳制作的原理

1．腐乳的发酵有多种微生物的协同作用，其中起主要作用的是，它是一种核生物，新陈代谢类型是。

2．等微生物产生的蛋白酶可以将豆腐中的分解成小分子的和；脂肪酶可以将水解成和。

3．现代的腐乳生产是在严格的条件下，将优良菌种直接接种在豆腐上，这样可以避免，保证。

（二）腐乳制作的实验流程：

让豆腐长出毛霉→→→密封腌制。

（三）实验材料

含水量70%的豆腐，粽叶，盘子，盐，黄酒，米酒，糖，香辛料等，广口玻璃瓶，高压锅。

（四）实验步骤

1．将豆腐切实3cm×3cm×1cm若干块

2．豆腐块放在铺有干粽叶的盘内，每块豆腐等距离排放，豆腐上再铺干净粽叶，再用保鲜膜包裹。

3．将平盘放在温度为的地方，毛霉逐渐生长，大约5d后，豆腐表面丛生直立菌丝。

4．当毛霉生长旺盛，呈淡黄色时，去除保鲜膜及粽叶，散热及水分，同时散去霉味约36h。

5．豆腐凉透后，将豆腐间的菌丝拉断，整齐排在容器内，准备腌制。

6．长满毛霉的豆腐块（以下称毛坯）分层摆放，分层加盐，并随层高而增加，在瓶口表面铺盐，以防止，约腌制8d。

7．将黄酒、米酒和糖、香辛料等混合制成卤汤。

卤汤酒精含量控制在为宜。

8．广口玻璃瓶刷洗干净，用高压锅在1000C蒸汽灭菌30min，将腐乳成坯摆入瓶中，加入卤汤和辅料后，将瓶口用酒精灯加热灭菌，用胶条密封，常温下，六个月即可以成熟。

6．经过微生物的发酵，豆腐中的蛋白质被分解成小分子的和，脂肪被分解成和，因而更利于消化吸收．豆腐变为腐乳的过程中，有机物总量、有机物种类有何变化？

，毛霉与豆腐之间的关系是。

7．长满毛霉的豆腐块要逐层加盐，随层数的加高加盐量要，接近瓶口表面的盐要铺得厚一些，为什么?

。

【疑难点拨】

1．王致和为什么要撒许多盐，将长毛的豆腐腌起来？

盐在该过程中起什么作用？

盐能防止杂菌污染，避免豆腐腐败。

盐能抑制多种微生物的生长。

2．配制卤汤时，一般将酒精含量控制在12%左右，过高过低都不行，为什么？

酒精含量的高低与腐乳后期发酵时间的长短有很大关系。

酒精含量越高，对蛋白酶的抑制作用也越大，使腐乳成熟期延长；酒精含量过低，蛋白酶的活性高，加快蛋白质的水解，杂菌繁殖快，豆腐易腐败，难以成块。

3.豆腐坯用食盐腌制，其作用是什么？

①渗透盐分，析出水分②给腐乳以必要的咸味

③防止毛霉继续生长和污染的杂菌繁殖④浸提毛霉菌丝上的蛋白酶

4.腐乳在酿造后期发酵中添加多量酒液的目的是什么？

　①防止杂菌污染以防腐

　②与有机酸结合形成酯，由于酒中特别是黄酒中含有酵母茼，经发酵可产生醇，并与有机酸结合形成酯，赋予腐乳风味

③利于后期发酵　

5.卤汤中香辛料的作用是什么？

①调味　　②促进发酵　　③杀菌防腐

解释：

（香辛料如花椒、大蒜、茴香中含有花椒酰胺、蒜辣素、茴香醚及茴香醛等，有极强的杀菌力；又有良好的调味功能；香辛料成分参与发酵过程，合成复杂的酯类，使腐乳形成特有色、香、味。

）

6.你能利用所学的生物学知识，解释豆腐长白毛是怎么一回事？

答：

豆腐上生长的白毛是毛霉的白色菌丝。

严格地说是直立菌丝，在豆腐中还有匍匐菌丝。

7.我们平常吃的豆腐，哪种适合用来做腐乳？

答：

含水量为70%左右的豆腐适于作腐乳。

用含水量过高的豆腐制腐乳，不易成形。

8.吃腐乳时，你会发现腐乳外部有一层致密的“皮”。

这层“皮”是怎样形成的呢？

它对人体有害吗？

它的作用是什么？

答：

“皮”是前期发酵时在豆腐表面上生长的菌丝（匍匐菌丝），它能形成腐乳的“体”，使腐乳成形。

“皮”对人体无害。

选修1生物技术实践导学提纲（三）

制作泡菜并检测亚硝酸盐含量

三、学习过程

选修1生物技术实践导学提纲（四）

果胶酶在果汁生产中的作用

（一）基础知识

（二）实验操作

2．探究pH对果胶酶活性的影响

探讨加酶洗衣粉的洗涤效果

三、学习过程

（一）基础知识

（二）实验操作

1．探究普通洗衣粉和加酶洗衣粉对衣物污渍的洗涤效果

（1）实验遵循的原则：

实验变量为洗涤剂，设计时应遵循原则、原则，有效地控制其他变量，如水的用量、污染物的量、所用实验用布的质地大小、两种洗衣粉的用量，搅拌及洗涤时间。

（2）实验过程

①取两只大烧杯并，用量筒分别量500mL蒸馏水放入其中，放入400C的水浴锅保温。

②将制好的污染布和洗衣粉（一组为和，另一组为和）分别放入两只烧杯中。

③用玻璃棒同时充分搅拌时间，一段时间后搅拌可重复进行。

④过相同的时间后观察洗涤效果，探究加酶洗衣粉使用时的最适温度。

2．不同种类的酶洗衣粉对同一污渍的洗涤效果

（1）实验原理：

不同种类的加酶洗衣粉所加的酶不同，而酶具有，所以对不同污渍的洗涤效果不同。

11．一般洗衣粉不易清除衣物上的血渍或奶渍，但加酶洗衣粉可以．一般加酶洗衣粉袋子上印有以下说明：

用法：

洗涤前先将衣物浸于加有适量洗衣粉的水内数小时；温水效果最佳；切勿用60℃以上的水．

注意：

切勿用于丝质及羊毛衣料；用后彻底清洗双手．

请根据以上资料回答有关问题：

（1）该洗衣粉较易清除衣物上的血渍或奶渍，该洗衣粉加入的是什么酶?

说明理由．

蛋白酶；因酶具有专一性，血渍、奶渍的主要成分是蛋白质，蛋白酶可将其分解

（2）为什么洗涤前需先将衣物浸于加有适量洗衣粉的水内数小时?

如何缩短衣物浸泡时间?

是为了使洗衣粉中的蛋白酶充分分解衣物中的蛋白质污渍；用温水浸泡衣物，是因为酶的催化作用需要适宜的温度

（3）为什么袋上的用法指明切勿在60℃以上的水中使用该洗衣粉?

因为温度过高会使酶失去活性

（4）试解释为什么此洗衣粉不能用于丝质及羊毛衣料．

因为丝质及羊毛衣料中含蛋白质，这样会损坏衣物

（5）试解释为什么用后须彻底清洗双手．

因为皮肤细胞中有蛋白质，如不清洗耳恭听双手，会使手的皮肤受到腐蚀

课题5DNA的粗提取与鉴定

《DNA的粗提取与鉴定》

一、提取DNA的方法

提取生物大分子的基本思路是。

对于DNA的粗提取而言，就是要利用、等在物理和化学性质方面的差异，提取DNA，去除其他成分。

1）DNA的溶解性DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的中溶解度不同，利用这一特点，选择适当的盐浓度就能使充分溶解，而使杂质沉淀，或者相反，以达到分离目的。

此外，DNA不溶于溶液，但是细胞中的某些蛋白质则溶于酒精。

利用这一原理，可以将DNA与蛋白质进一步的分离。

2）DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性蛋白酶能水解，但是对没有影响。

大多数蛋白质不能忍受60—80oC的高温，而DNA在以上才会变性。

洗涤剂能够瓦解，但对DNA没有影响。

3）DNA的鉴定在条件下，DNA遇会被染成色，因此二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂。

二、实验设计

1）实验材料的选取凡是含有的生物材料都可以考虑，但是使用的生物组织，成功的可能性更大。

在下面的生物材料中选取适合的实验材料：

鱼卵、猪肝、菜花（花椰菜）、香蕉、鸡血、哺乳动物的红细胞、猕猴桃、洋葱、豌豆、菠菜、在液体培养基的大肠杆菌

2）破碎细胞，获取含DNA的滤液动物细胞的破碎比较容易，以鸡血细胞为例，在鸡血细胞液中加入一定量的，同时用搅拌，过滤后收集滤液即可。

如果实验材料是植物细胞，需要先用溶解细胞膜。

例如，提取洋葱的DNA时，在切碎的洋葱中加入一定的和，进行充分的搅拌和研磨，过滤后收集研磨液。

3）去除滤液中的杂质

4）DNA的析出与鉴定

将处理后的溶液过滤，加入与滤液体积、冷却的，静置，溶液中会出现，这就是粗提取的DNA。

用玻璃棒搅拌，卷起丝状物，并用滤纸吸取上面的水分。

取两支20ml的试管，各加入物质的量浓度为的NaCl溶液5ml，将丝状物放入其中一支试管中，用玻璃棒搅拌，使丝状物溶解。

然后，向两支试管中各加入4ml的

。

混合均匀后，将试管置于中加热5min，待试管冷却后，比较两支试管溶液颜色的变化，看看溶解有DNA的溶液是否变。

三、操作提示

以血液为实验材料时，每100ml血液中需要加入3g，防止。

加入洗涤剂后，动作要、，否则容易产生大量的泡沫，不利于后续步骤地操作。

加入酒精和用玻璃棒搅拌时，动作要，以免，导致DNA分子不能形成絮状沉淀。

二苯胺试剂要，否则会影响鉴定的效果。

四、结果分析与评价

【疑难点拨】

1．为什么加入蒸馏水能使鸡血细胞破裂？

答：

蒸馏水对于鸡血细胞来说是一种低渗液体，水分可以大量进入血细胞内，使血细胞胀裂，再加上搅拌的机械作用，就加速了鸡血细胞的破裂（细胞膜和核膜的破裂），从而释放出DNA。

2．加入洗涤剂和食盐的作用分别是什么？

答：

洗涤剂是一些离子去污剂，能溶解细胞膜，有利于DNA的释放；食盐的主要成分是NaCl，有利于DNA的溶解。

3．如果研磨不充分，会对实验结果产生怎样的影响？

答：

研磨不充分会使细胞核内的DNA释放不完全，提取的DNA量变少，影响实验结果，导致看不到丝状沉淀物、用二苯胺鉴定不显示蓝色等。

4．此步骤获得的滤液中可能含有哪些细胞成分？

答：

可能含有核蛋白、多糖和RNA等杂质。

5．为什么反复地溶解与析出DNA，能够去除杂质？

答：

用高盐浓度的溶液溶解DNA，能除去在高盐中不能溶解的杂质；用低盐浓度使DNA析出，能除去溶解在低盐溶液中的杂质。

因此，通过反复溶解与析出DNA，就能够除去与DNA溶解度不同的多种杂质。

6．方案二与方案三的原理有什么不同？

答：

方案二是利用蛋白酶分解杂质蛋白，从而使提取的DNA与蛋白质分开；方案三利用的是DNA和蛋白质对高温耐受性的不同，从而使蛋白质变性，与DNA分离。

7.DNA的溶解度与NaCl溶液浓度的关系：

当NaCl溶液浓度低于0.14mol/L时，随浓度的升高，DNA的溶解度降低；当NaCl溶液浓度高于0.14mol/L时，随浓度升高，DNA的溶解度升高。

8.制备鸡血细胞液时，要在新鲜的鸡血中加入柠檬酸钠的原因

制备鸡血细胞液时，要在新鲜的鸡血中加入抗凝剂——柠檬酸钠，防止血液凝固。

其原理是柠檬酸钠能与血浆中Ca2+发生反应，生成柠檬酸钙络合物，血浆中游离的Ca2+大大减少，血液便不会凝固，因为鸡血红细胞，白细胞都有细胞核，DNA主要存在于细胞核中，所以在离心或静置沉淀后，要弃出上层清液——血浆。

9．提取DNA的第一步是材料的选取，其目的是一定要选取DNA含量较高的生物材料，否则会由于实验过程中或多或少的损失而造成检测的困难；第二步是DNA的释放和溶解，这一步是实验成功与否的关键，要尽可能使细胞内的DNA全部溶解；第三步是DNA的纯化，即根据DNA的溶解特性、对酶及高温的耐受性的不同等特性，最大限度地将DNA与杂质分开；最后一步是对DNA进行鉴定，这是对整个实验的结果的检测。

10．在DNA的析出的步骤中用到玻璃棒搅拌时，注意动作要轻缓，以免加剧DNA分子的断裂，导致DNA分子不能形成絮状沉淀。

11．盛放鸡血细胞液的容器，最好是塑料容器。

鸡血细胞破碎以后释放出的DNA，容易被玻璃容器吸附，由于细胞内DNA的含量本来就比较少，再被玻璃容器吸附去一部分，提取到的DNA就会更少。

因此，实验过程中最好使用塑料的烧杯和试管，这样可以减少提取过程的DNA的损失。

《血红蛋白的提取和分离》

基础知识

1．凝胶色谱法

凝胶色谱法也称做，是根据分离蛋白质的有效方法。

凝胶实际上是一些由构成的多孔球体，在小球体内部有许多贯穿的通道，相对分子质量不同的蛋白质分子通过凝胶时速度不同，相对分子质量较小的蛋白质进入凝胶内部的通道，路程，移动速度；而相对分子质量的蛋白质无法进入凝胶内部的通道，只能在移动，路程，移动速度。

相对分子质量不同的蛋白质分子因此得以分离。

2．缓冲溶液

缓冲溶液的作用是。

缓冲溶液通常由溶解于水中配制而成的。

生物体内进行的各种生物化学反应都是在一定的pH下进行的，例如：

血浆的pH是，要在实验条件下准确模拟生物体内的过程，必须保持体外的pH与体内的基本一致。

3．电泳

电泳是指。

许多重要的生物大分子，如多肽、核酸等都具有可解离的基团，在一定的pH下，这些基团会带上。

在电场的作用下，这些带电分子会向着与其所带电荷的电极移动。

电泳利用了待分离样品中各分子以及分子本身的、的不同，使带电分子产生不同的，从而实现样品中各种分子的分离。

两种常用的电泳方法是和，在测定蛋白质分子量时通常使用。

蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶中的迁移率取决于以及等因素。

4．蛋白质的提取和分离

蛋白质的提取和分离一般分为四步：

、、和。

5．样品处理

血液由和组成，其中红细胞最多。

红细胞具有的特点。

红细胞中有一种非常重要的蛋白质，其作用是，血红蛋白有个肽链组成，包括，其中每条肽链环绕一个，磁基团可携带。

血红蛋白因含有呈现红色。

红细胞的洗涤洗涤红细胞的目的是，采集的血样要及时采用分离红细胞，然后用胶头吸管吸出上层透明的，将下层暗红色的倒入烧杯，再加入，缓慢搅拌，低速短时间离心，如此重复洗涤三次，直至，表明红细胞已洗涤干净。

血红蛋白的释放在和作用下，红细胞破裂释放出血红蛋白。

分离血红蛋白溶液将搅拌好的混合溶液离心后，试管中的溶液分为4层。

第一层为无色透明的，第2层为白色薄层固体，是，第3层是红色透明液体，这是，第4层是其他杂质的暗红色沉淀物。

将试管中的液体用滤纸过滤，除去之溶性沉淀层，于分液漏斗中静置片刻后，分出下层的红色透明液体。

透析取1mL的血红蛋白溶液装入中，将透析袋放入盛有300mL的物质的量的浓度为20mmol/L的中，透析12h。

透析可以去除样品中的杂质，或用于更换样品的。

6．凝胶色谱操作

第一步要制作，第二步要，因为，所以装柱前需要根据色谱柱的内体积计算所需要的凝胶量。

在装填凝胶柱时，不得有存在。

因为气泡会，降低分离效果。

第三步是。

[疑难点拨]

1．凝胶色谱法分离蛋白质的原理

凝胶色谱法也称为分配色谱法，它是根据分子量的大小分离蛋白质的方法之一。

所用的凝胶实际上是一些微小的多孔球体，这些小球体大多数是由多糖类化合物构成，小球体内部有许多贯穿的通道，当一个含有各种分子的样品溶液缓慢流经时，各分子在色谱柱内进行两种不同的运动，即垂直向下的运动和无规则的扩散运动，相对分子质量较大的蛋白质分子不能进入凝胶颗粒内部，只能分布在颗粒之间，通过的路程较短，移动速度较快；相对分子质量较小的蛋白质分子比较容易进入凝胶内的通道，通过的路程较长，移动速度较慢。

因此，样品中相对分子质量较大的蛋白质先流出，相对分子质量中等的分子后流出，相对分子质量最小的分子最后流出，这种现象又叫分子筛现象。

此外，凝胶本身具有三维网状结构，相对分子质量大的分子通过这种网状结构上的空袭时阻力大，而相对分子质量小的分子通过时阻力小，因此不同分子量的蛋白质分子可以获得分离。

2．与其他真核细胞相比，红细胞的特点及这一特点对进行蛋白质的分离的意义

哺乳动物及人的成熟的红细胞是双面凹圆饼状，没有细胞核和细胞器。

其含有的血红蛋白是有色蛋白，因此在凝胶色谱分离时可以通过观察颜色来判断什么时候应该收集脱液。

这使血红蛋白的分离过程非常直观，大大简化了实验操作。

3．电泳的作用及其原理

电泳是指带电粒子在电场的作用下发生迁移的过程。

许多重要的生物大分子，如氨基酸、多肽、蛋白质、核苷酸、核酸等都具有可解离基团，它们在某个特定的pH下会带上正电或负电；在电场的作用下，这些带电分子会向着与其所带电荷相反的电极方向移动。

电泳技术就是在电场的作用下，利用待分离样品中各种分子带电性质以及分子本身大小、形状等性质的差异，使带电分子产生不同的迁移速度，从而达到对样品进行分离、鉴定或提纯的目的。

4.你能从凝胶色谱的分离原理分析为什么凝胶的装填要紧密、均匀吗？

答：

凝胶实际上是一些微小的多孔球体，小球体内部有许多贯穿的通道。

相对分子质量较大的蛋白质分子不能进入凝胶颗粒内部，只能分布在颗粒之间，通过的路程较短，移动速度较快；相对分子质量较小的蛋白质分子比较容易进入凝胶内的通道，通过的路程较长，移动速度较慢。

因此，样品中相对分子质量较大的蛋白质先流出，相对分子质量中等的分子后流出，相对分子质量最小的分子最后流出，从而使各种相对分子质量不同的分子得以分离。

如果凝胶装填得不够紧密、均匀，就会在色谱柱内形成无效的空隙，使本该进入凝胶内部的样品分子从这些空隙中通过，搅乱洗脱液的流动次序，影响分离的效果。

菊花组织培养

要点1　植物组织培养的理论基础

当植物细胞脱离了原来所在植物体的器官或组织而处于离体状态时，在一定的营养物质、激素和其他外界条件的作用下，就可能表现出全能性，发育成完整的植株（即细胞全能性）。

要点2　植物组织培养的基本过程

（1）基本过程

（2）基本概念

细胞分化：

植物的个体发育过程中，细胞在形态、结构和生理功能上都会出现稳定性的差异，形成这些差异的过程叫做细胞分化。

愈伤组织：

离体的植物组织或细胞，培养一段时间后，会通过细胞有丝分裂，形成愈伤组织。

愈伤组织的细胞排列疏松而无规则，是一种高度液泡化的呈无定形状态的薄壁细胞。

脱分化（去分化）：

由高度分化的植物组织或细胞产生愈伤组织的过程，称为植物细胞的脱分化，或者叫做去分化。

再分化：

脱分化产生的愈伤组织继续进行培养，又可以重新分化成根或芽等器官，这个过程叫做再分化。

（3）植物体细胞发育成完整植株（表现出全能性）的条件。

脱离原来所在植物体（离体）、营养供给、激素控制、无菌条件、适宜的温度、PH和光照等。

要点3　影响植物组织培养的因素

（1）材料因素的影响

不同的植物组织，培养的难易程度差别很大，容易进行无性繁殖的植物也容易进行组织培养。

同一种植物材料，材料的年龄、保存时间的长短也有影响。

幼龄、保存时间短的植物材料容易培养成功。

菊花的组织培养，一般选择未开花植株的茎上部新萌生的侧芽。

（2）营养因素的影响

需要配置适宜的培养基，常用的一种培养基是MS培养基，其主要成分包括：

大量元素，如N、P、K、Ca、Mg、S；微量元素，如B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、Co；有机物，如甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素，以及蔗糖等。

（3）激素的影响

在配置好的MS培养基中，常常需要添加植物激素。

植物激素中生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素。

植物激素的浓度、使用的先后顺序以及用量的比例等，都会影响实验结果。

①按照不同的顺序使用这两类激素，会得到不同的实验结果。

使用顺序

实验结果

先使用生长素，后使用细胞分裂素

有利于细胞分裂，但细胞不分化

先使用细胞分裂素，后使用生长素

细胞既分裂又分化

同时使用

分化率提高

②当同时使用这两类激素时，两者用量的比例影响植物细胞的发育方向。

生长素用量比细胞分裂素用量

植物细胞的发育方向

比值高时

有利于根的分化、抑制芽的形成

比值低时

有利于芽的分化、抑制根的形成

比值适中时

促进愈伤组织的生长

（4）pH、温度、光照等条件的影响

不同的植物对各种条件的要求往往不同。

进行菊花的组织培养，一般将pH控制在5.8左右，温度控制在18～22℃，并且每日用日光灯照射12h。

要点4　植物组织培养技术的优点

植物组织培养技术可以实现优良品种的快速繁殖，保持遗传性状的一致；可以实现花卉的连续生产，不受开花季节的限制。

课题2月季的花药培养

【导学诱思】

1．被子植物的花粉发育

被子植物花粉的发育要经历、和等阶段。

花粉是由花粉母细胞经过而形成的，因此花粉是。

2．产生花粉植物的两种途径

通过花药培养产生花粉植株的两种途径：

①

②

思考：

（1）花药培养产生花粉植株的两种途径的差别主要取决于什么？

（2）什么是体细胞胚？

（3）单倍体性细胞产生的花粉胚，也可发育成为单倍体植株，这和植物的体细胞克隆有区别吗？

3．影响花药培养的因素

诱导花粉植株能否成功及诱导成功率的高低，受多种因素影响，其中与

是主要的影响因素；也是提高诱导成功率的重要因素；另外亲本植株的生长条件、以及等对诱导成功率都有一定影响。

思考：

（1）为什么选择合适的花粉发育期是诱导花药培养成功率的重要因素？

（2）为什么花药的培养要选择完全未开放的花蕾？

4．实验操作

（1）材料的选取

选择花药时，一般要通过来确定其中的花粉是否处于适宜的发育期。

确定花粉发育时期的方法有和。

（2）材料的消毒：

材料消毒过程中用的0.1%的氯化汞溶液,实验完毕应如何处理?

（3）接种和培养：

剥离花药时，应注意哪些问题？

花药培养过程中应注意哪些问题？

【疑难点拨】

1．为什么花瓣松