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影响酶活性的因素实验报告

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影响酶活性的因素实验报告

  篇一:

实验报告-不同因素对酶的影响

  实验报告

  课程名称:

生物化学实验(甲)指导老师:

成绩:

实验名称:

酶的基本性质实验——底物专一性剂、激活剂和抑制、最适温度

  实验类型:

分离鉴定实验同组学生姓名:

一、实验目的和要求(必填)

  三、主要仪器设备(必填)

  五、实验数据记录和处理

  七、讨论、心得二、实验内容和原理(必填)四、操作方法和实验步骤六、实验结果与分析(必填)

  Ⅰ.酶的基本性质——底物专一性

  一、实验目的和要求

  1.了解酶的专一性。

2.掌握验证酶的专一性的基本原理及方法。

3.学会排除干扰因素,设计酶学实验。

二、实验基本原理酶是一种具有催化功能的蛋白质。

酶蛋白结构决定了酶的功能——酶的高效性,酶催化的

  反应(酶促反应)要比相应的没有催化剂的反应快103-1017倍。

酶催化作用的一个重要特点是具有高度的底物专一性,即一种酶只能对某一种底物或一类底物起催化作用,对其他底物无催化反应。

根据各种酶对底物的选择程度不同,它们的专一性可以分为下列几种:

  1.相对专一性一种酶能够催化一类具有相同化学键或基团的物质进行某种类型的反应。

2.绝对专一性:

有些酶对底物的要求非常严格只作用于一种底物,而不作用于任何其他物质。

如脲酶只能催化尿素进行水解而生成二氧化碳和氨。

如麦芽糖酶只作用于麦芽糖而不作用其它双糖,淀粉酶只作用于淀粉,而不作用于纤维素。

3.立体异构专一性有些酶只有作用于底物的立体异构物中的一种,而对另一种则全无作用。

如酵母中的糖酶类只作用于D-型糖而不能作用于L-型的糖。

本实验以唾液淀粉酶、蔗糖酶对淀粉、蔗糖水解反应的催化作用来观察酶的专一性。

采用benedict试剂检测反应产物。

  benedict试剂是碱性硫酸铜溶液,具有一定的氧化能力,能与还原性糖的半缩醛羟基发生氧化还原反应,生成砖红色氧化亚铜沉淀。

na2co3+2h2o2naoh+h2co3cuso4+

  2+na2so4还原糖(—choor—c=o)+2cu(oh)2cu2o(砖红色或黄色)+2h2

  与benedict试剂无呈色反应。

淀粉被淀粉酶水解,产物为葡萄糖;蔗糖和棉子糖被蔗糖酶水解,其产物为果糖和葡萄糖,它们都为具有自由半缩醛羟基的还原糖,与benedict试剂共热,即产生红棕色cu2o沉淀。

本实验以此颜色反应观察淀粉酶、蔗糖酶对淀粉和蔗糖的水解作用。

  三、实验材料与试剂

  1、实验材料⑴蔗糖酶(样品Ⅳ);⑵新鲜唾液(含唾液淀粉酶);2、实验试剂⑴蔗糖酶液蔗糖酶液(样品Ⅳ)加蒸馏水适当稀释,备用;⑵唾液淀粉酶液(学生自制)取0.5mL唾液至25ml量筒中,用蒸馏水(稀释)到25ml,用棉花过滤备用。

唾液稀倍数因人而异,可稀释50~

  400倍,甚至更高;⑶5%蔗糖(A.R.)溶液;⑷0.5%淀粉溶液(含0.3%nacl);⑸benedict试剂;四、实验器材与仪器

  1.漏斗,2.脱脂棉花;3.恒温水浴(37℃,100℃);4.量筒;5.试管;6.烧杯;7.吸量管。

  五、实验操作方法和步骤

  ㈠检查试剂取3支试管,按下表操作:

  注:

1、检查目的:

试剂是否有干扰因素存在。

2、也可对蔗糖酶液、唾液淀粉酶液进行检查是否也有干扰因素存在,请自己设计。

㈡淀粉酶的专一性

  取三支试管,按下表操作:

  注:

可增加一组唾液淀

  粉酶液经100℃加热3min

  处理后的样品对照组。

㈢蔗糖酶的专一性取三支试管,按下表操作:

  注:

可增加一组蔗糖酶液经100℃加热3min处理后的样品对照组。

  六、结果分析讨论

  各试管观察结果依次是:

  

(一):

1号蓝绿色,2号蓝色,3号蓝色

  benedict试剂是碱性硫酸铜溶液,具有一定的氧化能力,能与还原性糖的半缩醛羟基发生氧化还原反应,生成砖红色氧化亚铜沉淀。

3只试管都为蓝色说明几只试管中都没有果糖和葡萄糖,说明在不加酶时,淀粉和蔗糖不易水解。

试剂无干扰因素的存在。

(1号试管是蓝绿色可能是因为有少部分的淀粉水解)

  

(二):

1号土黄色,2号黄绿色,3号蓝色

  加入唾液淀粉酶,1号试管底物是淀粉,所以很容易水解成葡萄糖,与benedict试剂共热,即产生红棕色cu2o沉淀。

所以1号颜色变化比较大。

(2号可能是因为蔗糖在37℃恒温水浴中也有少部分水解,所以颜色变化,但变化不明显。

)总的来看可以看出唾液淀粉酶只对淀粉有催化活性,不能催化蔗糖水解,具有对淀粉的底物专一性。

3号是对照。

  (三):

1号蓝色,2号红棕色,3号蓝色

  加入蔗糖酶,2号试管底物是蔗糖,所以很容易水解成果糖和葡萄糖,与benedict试剂共热,即产生红棕色cu2o沉淀。

所以2号颜色变化比较大。

(1号可能是因为淀粉在37℃恒温水浴中也有部分水解,所以有颜色变化,但变化不明显。

)从这三支试管看出蔗糖酶只对蔗糖的水解有催化作用,对淀粉无催化作用,具有对蔗糖的底物专一性。

3号是对照。

  七、思考题1.观察酶专一性实验为什么要设计这3组实验?

每组各有何意义?

蒸馏水有何用?

第一组作为整个实验的空白对照组,检测benedict试剂对实验结果的颜色有何影响,排除干扰因素的存在。

第二组作为检测淀粉酶的专一性实验组,第三组作为检测蔗糖酶的专一性的实验组。

蒸馏水作为每一个组中的空白对照,与组内其余两组进行对照。

  2.将酶液煮沸10min后,重做二、三的操作,观察有何结果?

  各试管都为蓝色,因为酶在煮沸过程中已经变性,失去催化活性,故不能催化各自对应底物的水解反应。

  3.在此实验中,为什么要用0.5%淀粉(0.3%nacl)溶液?

0.3%nacl的作用是什么?

  0.3%nacl中的cl是作为激活剂激活唾液淀粉酶的活性,使实验结果不至于因为唾液淀粉酶的活性不足而导致不同。

  八、注意事项1.试管要干净,所有试剂加量准确,加好试剂后要摇匀。

2.使用试剂时不要人为造成试剂间的互相污染;试剂用好瓶盖要立即盖好,防止试剂间的互相污染。

以免实验结果的错误。

  -

  Ⅱ.影响酶活性的因素——激活剂和抑制剂

  一、实验目的和要求

  1.了解激活剂和抑制剂对酶促反应速度的影响。

2.学习检定激活剂和抑制剂影响酶促反应速度的原理和方法。

二、实验基本原理

  在酶促反应过程中,酶的活性常受某些物质的影响,有些物质能使酶的活性增加,称为激活剂;某些物质它们并不引起酶蛋白变性,但能使酶分子上的某些必需基团(主要是指酶活性中心上的一些基团)发生变化,因而引起酶活力下降,甚至丧失,致使酶反应速度降低,称为酶的抑制剂。

  酶的激活剂种类:

1、一些简单的无机离子,如mg2+、cl-等;2、一些中等大小的有机分子,如抗坏血酸等也是激活剂,它们对某些含巯基的酶具有激活作用;3、有些酶的催化作用易受某

  些抑制剂的影响,因而能除去抑制剂的物质也可称为激活剂,如eDTA能除去重金属,因而能解除重金属对酶的抑制作用。

4、具有蛋白质性质的大分子物质,这些激活剂是指可对某些无活性的酶原起作用的酶。

酶的抑制剂有许多种:

如重金属离子(Ag+、hg2+、pb2+、cu2+等)、co、氯化物、h2s、砷化物、氟化物、生物碱、有机磷农药等都是抑制剂。

少量的激活剂或抑制剂就能影响酶的活性,而且常具有特异性。

值得注意的是激活剂和抑制剂不是绝对的,各种激活剂对酶的作用是不同的。

本实验利用淀粉被水解的不同阶段产物与碘有不同颜色反应,定性观察唾液淀粉酶在酶促反应中激活或抑制现象。

淀粉经酶促水解为葡萄糖的不同阶段的产物与碘作用的颜色反应如下:

  本实验中,cl-为唾液淀粉酶的激活剂;cu2+为唾液淀粉酶的抑制剂。

  利用淀粉被水解的不同阶段产物与碘有不同的呈色反应,定性观察唾液淀粉酶在酶促反应中激活和抑制现象。

  淀粉+碘

  蓝色

  淀粉+淀粉酶水解产物+颜色变化

  水解的程度是通过水解混合物遇碘溶液所呈现的颜色之变化来判断的。

  三、实验材料与试剂

  1、实验材料新鲜唾液2、实验试剂⑴唾液淀粉酶(学生自制)取唾液1ml至25ml量筒中,用蒸馏水稀释至25ml,用棉花过滤备用。

唾液稀释倍数因人而异,可稀释50~400倍,甚至更高。

⑵0.1%淀粉溶液⑶1.0%氯化钠溶液⑷1.0%硫酸铜溶液⑸1.0%硫酸钠溶液⑹碘化钾-碘液四、实验器材与仪器

  1.试管及试管架2.量筒3.漏斗4.脱脂棉花5.点滴板6.吸量管7.恒温水浴(37℃)五、实验操作方法和步骤

  取试管4支,按下表操作:

  注意:

⑴找出准确的保温时间,是本实验是实验能否成功的关键步骤之一,唾液淀粉酶液浓度可根据个人情况而定,通过37℃水浴溶保温计时,反应时间最好在8~15min以内,只有确定准确的保温时间才能进行实验。

(2)加入酶液后,务必充分摇匀,保证酶与全部淀粉液接触的

  反应才能得到理想的颜色梯度变化结果。

(3)碘化钾–碘液不要过早地加到点滴板上,以免碘液挥发,影响显色效果。

  六、结果分析讨论1号试管为蓝紫色,2号为浅黄色,3号为褐色,4号为浅褐色。

  试管1中颜色最深,说明cuso4可以抑制淀粉酶的活性;试管2中颜色最浅,基本呈碘色,故淀粉酶活性最高,说明nacl可以激活淀粉酶的活性;试管3、4中颜色基本一致,且深浅居于试管1、2之间,淀粉酶活性一般,说明na+、so42-对淀粉酶活性都没有影响。

故总体上看,可以得出cl-是唾液淀粉酶的激活剂,cu2+是唾液淀粉酶的抑制剂。

  七、思考题1.激活剂可分哪几类?

本实验中nacl、硫酸铜是属于哪种类型?

  激活剂可分为:

简单无机离子、中等大小有机分子、能除去抑制剂的物质、具有蛋白质性质的大分子物质等。

nacl属于简单无机离子;cuso4属于重金属抑制剂。

  2.本实验中,1,2,3,4管各有何用意?

为什么要设计第3管和第4管?

  1管可观察抑制剂对反应影响的现象,2管可观察激活剂对反应影响的现象,第3管可以将1管中的na和2管中的so4对反应的影响去除,4管作为空白对照。

  3.抑制剂与变性剂有何不同?

试举例说明。

  抑制剂只改变酶的催化活性,并不使蛋白质变性,其影响是可逆的;变性剂破坏了蛋白质的高级结构,使蛋白质变性,并且多数变性剂的影响是不可逆的。

如:

cu是唾液淀粉酶的抑制剂,但如果将cu去除淀粉酶的活性又可以变为正常水平。

八、注意事项1.试管要干净,所有试剂加量准确,加好试剂后要摇匀。

2.使用试剂时不要人为造成试剂间的互相污染,以免实验结果的错误。

3.试剂用好瓶盖要立即盖好,防止试剂间的互相污染。

4.两种淀粉不要弄错。

5.激活剂抑制剂实验中,注意运用点滴板(显色板)来控制保温时间;如1,2,3,4管颜色反应无明显差别,可能是唾流淀粉酶活力太高或太低,若酶活性太高可将酶稀释后重做;若酶活性太低,可延长保温时间或增加酶的浓度。

  2+2++2-

  Ⅲ.影响酶活性的因素——温度,最适温度测定

  一、实验目的和要求

  1.了解温度对酶活力的影响;2.学习测定最适温度的原理和方法;

  二、实验基本原理

  酶的催化反应受温度影响很大,每一种酶所催化的反应,在一定条件下,仅在某一温度范围内表现出最大的活力,即反应速度最大时的温度,这个温度称为该酶促反应的最适温度,高于或低于最适温度时,反应速度逐渐下降。

因此,酶促反应与温度的关系,用酶活力对温度作图,通常具有钟罩形曲线特征。

温度与酶活力的关系测定是选择一定的条件,把底物浓度、酶浓度、反应时间、ph等固定在最适状态下,然后在一系列不同温度条件下,进行反应初速度测定,以酶反应初速度对温度作图,可以得一个钟罩形的曲线,即为温度—酶活性曲线,在某温度有一酶活力最大值,这个温度即为最适温度。

  实验①利用唾液淀粉酶为试验对象,在0℃~65℃之间选择不同的温度,进行酶活力测定。

根据淀粉被唾液淀粉酶水解的程度的不同,遇碘呈现颜色的变化来判断酶活力的大小及最适温度。

实验②采用蔗糖酶为试验对象,在室温至75℃之间选择不同温度进行酶活力测定。

蔗糖酶的活力常以其反应产物还原糖(葡萄糖)的生成量来表示。

测定还原糖的方法很多,本实验选择3,5–二硝基水扬酸法测定还原糖量。

在碱性条件下,3,5–二硝水杨酸与还原糖溶液共热后被还原成红色氨基化合物,并在一定浓度范围内,还原糖的量与反应溶液所呈棕红色物质颜色

  篇二:

实验七探究影响酶活性的因素

  实验七探究影响酶活性的因素

  一、教材分析

  本节教材选自人教版必修一第五章第一节的内容,由于学生已经在理论课学习了酶的概念以及酶的特性,知道了:

细胞中几乎所有的化学反应都是由酶来催化的。

酶对化学反应的催化效率称为酶的活性。

细胞都生活在一定的环境中,环境条件的改变会影响细胞内酶的活性。

影响酶活性的因素有:

温度、ph、反应物的浓度、酶的浓度、激活剂和抑制剂等因素。

对于高中可开展的实验而言:

温度、ph因素。

而其他因素由于条件限制或学生接受能力,一般不宜在高中开展实验教学。

在此基础上,教师引导学生设计实验,提出预期,让学生分组进行实验探究,观察思考,进行讨论。

本次实验通过探究温度和ph对酶的活性的影响,有助于以后的教学的过程,通过亲身体验,让学生获得感性经验,对知识有更深入的理解同时也可以培养学生的创新能力,自主学习能力和动手实践能力等。

因此,本节内容在在酶的学习过程中具有不可忽视的重要地位。

二、学情分析

  在本次实验之前,学生已经学习了关于酶的概念,酶的本质和特性等方面的知识,对酶有了一定的了解。

有助于学对问题的分析,对实验的设计,对现象的描述。

同时高一学生对生活中的一些现象有强烈的好奇心,也会利用储备的知识对问题进行观察,分析,并提出解决问题的方案。

创新思维比较强。

同时,在本次实验之前,学生已经做过“检测生物组织中的糖类,脂肪和蛋白质”和“比较过氧化氢在不同条件下的分解”两个实验,对实验探究的方法和过程有了一定的了解,为本次实验打好了基础。

因为本次实验开放性比较强,要求学生自主设计,可以激发学生的学习热情,发散学生的思维,培养学生的能力。

三、教学目标1.知识目标

  

(1)通过实验探究,能理解影响酶活性的因素。

(2)能简述探究性实验的基本步骤2.能力目标

  

(1)能自主设计实验,培养学生的自主学习能力

  

(2)掌握一些实验方法:

变量,因变量的控制,对照组的设置等。

3.情感态度与价值观目标。

  

(1)具有探索精神和协作意识,对生物科学的兴趣和热爱,学会用发现的

(2)眼光探索生活中的问题,将所学理论知识运用到实际生活中,初步形(3)成实事求是和严谨的科学态度。

四、教学重难点1.教学重点:

  

(1)探究实验的基本方法

(2)温度、ph对酶活性的探究2.教学难点:

  

(1)自主设计探究实验五、材料用具

  1.实验材料:

新鲜唾液、质量分数5%hcl、质量分数5%naoh溶液,热水、蒸馏水、冰块、碘液、新配置的斐林试剂、新鲜的猪肝肝脏、3%过氧化氢溶液。

2.实验器具:

试管、量筒、小烧杯、大烧杯、滴管、试管夹、酒精灯、三脚架、石棉网、温度计、火柴和玻璃棒、标签六、教学策略选择与设计

  1.教学方法:

教师引导学生探究、讨论和归纳。

  本节课通过学生熟知的生活常识引入课题,在引导讨论学习的过程中,让学生学会探究性实验的步骤和方法,然后提供材料,让学生自己选择材料设计实验。

2.教学流程:

  发现问题一提出问题一设计实验一(包括选择实验材料、选择实验器具、确定实验步骤、设计实验记录表格)一实施实验一分析与结论一表达与交流七、实验指导和实施

  

(一)课前准备

  

(1)准备好数量相当的冰块,向学生介绍唾液淀粉酶的制备方法

(2)检测质量分数5%hcl和质量分数为5%naoh溶液的ph。

  (3)材料准备:

新鲜唾液、质量分数5%hcl、质量分数5%naoh溶液,热水、蒸馏水、冰块、碘液、新配置的斐林试剂。

  (4)器具:

试管、量筒、小烧杯、大烧杯、滴管、试管夹、酒精灯、三脚架、石棉网、温度计、火柴和玻璃棒、标签

  

(二)教学过程

  1.设置探究情景,提出探究课题设置探究情景:

提出问题——正常人的体温一般是多少?

能不能升高或降低?

开展实验:

设三个温度梯度(0℃、37℃、100℃)观察不同温度下唾液淀粉酶对淀粉的分解情况。

据此可知温度会影响唾液淀粉酶活性的发挥,即高温和低温都会使唾液淀粉酶失去活性,并为学生提出探究课题:

自主设计一个探究温度对唾液淀粉酶影响过程,并确定最适温度。

从温度这一因素,进一步提出另一个问题——人体血液、胃酸、唾液的酸碱度是否相同?

ph的改变会不会影响唾液淀粉酶的活性?

开展实验:

方法同做温度相似。

  2.介绍科学探究的方法,引导学生设计探究实验方案教师要明确地把科学探究的步骤告诉学生:

提出问题→作出假设→设计实验→实验探究→阐述和交流实验结果与结论。

有利于学生按照正确的研究的思路去分析和解决问题,使学生更好地学习科学方法。

引导学生根据课题进行思考,影响酶活性的因素有哪些,如何去验证,控制单一变量。

学会设计实验方案并绘制数据记录表。

  介绍对照实验的方法,即研究某一因素(如温度)对某一特定反应(或事物)的影响时,要在其他因素相同的条件下进行,观察该因素的不同情况(如不同的温度)对特定反应(或事物)的影响,以便对实验结果进行科学的分析。

  3.学生分组讨论、设计实验方案学生在讨论、设计实验方案时,教师要进行指导。

各小组完成设计方案后,教师组织全班进行交流。

(三)实验开展

  1.温度对酶活性的影响

  篇三:

影响酶活性的因素

(1)

  “探究影响酶活性的因素”实验教学课例

  及分析

  高中生物

  蒋雪

  “探究影响酶活性的因素”实验教学课例

  及分析

  内容摘要:

探究实验教学能培养学生的动手动脑能力、实验思维能力,培养学生分析问题、解决问题的能力。

  关键词:

探究温度ph酶

  1、教材分析

  本节课是在学习酶的发现、酶的概念以及酶的特性的基础上进行的实验教学,主要内容是让学生在教师引导下自主设计实验、提出预期,让学生分组进行实验探究,观察思考并进行讨论,由学生自己总结出结论,例如影响酶活性的因素:

温度和ph值。

这样的教学设计能体现学生自主、探究、合作的学习方式,有利于培养学生科学的思维方法和研究方法,提高学生的生物科学素养。

  2、教学目标

  2.1知识目标

  ⑴学会控制自变量,观察和检测因变量的变化及设置对照组和实验组。

  ⑵概述温度和ph影响酶的活性。

  2.2能力目标

  ⑴学会设计实验,运用语言、文字完善实验步骤,分析和解释实验中产生的现象,并得出正确的实验结论。

  ⑵通过实验、探究等教学活动,激发学生的学习兴趣和学习的主动性,形成客观的、实事求是的科学态度,培养学生的观察能力、实验能力、思维能力和合作能力,以及初步的研究能力和创新能力。

  2.3情感态度与价值观目标

  ⑴通过探究活动,培养学生的创新精神和合作精神。

  ⑵培养学生实事求是和严谨求实的科学态度以及探索精神。

⑶激发学生对生物科学的兴趣和热爱,培养学生理论联系实际的能力。

  3、教学重点与难点

  3.1教学重点

  ⑴掌握酶活性受哪些因素影响。

  ⑵学会控制自变量,观察和检测因变量的变化及设置对照组和实验组。

  ⑶实验报告的规范书写。

  3.2教学难点

  ⑴实验中对照组的设立,以及让学生分辨出哪组才是对照组。

⑵实验中操作步骤多,且对外界条件要求高,加入的试剂量应尽量精确。

  4、教学方法

  探索性教学法:

学生自主学习,以小组为单位进行探究活动,在

  全班交流探究结论,活跃课堂气氛,体现学生是教学的主体。

  5、课前准备

  实验材料的准备:

①制作两种猪肝研磨液:

新鲜猪肝研磨液和煮熟的新鲜猪肝研磨液。

②质量分数为5%的盐酸,质量分数为5%的naoh溶液等等。

  6、教学过程设计

  6.1情境导入

  教师引导:

  教师多媒体演示加酶洗衣粉的包装袋的注意事项:

要倒入低于60℃的水中,引导学生得出温度是影响酶活性的因素。

  教师提问:

当大家发烧时,是不是不思饮食,这是为什么呢?

由学生亲身感受来体验温度对酶活性的影响。

  教师提出问题:

把新鲜猪肝研磨液煮熟,过氧化氢酶是否还有活性?

接着做演示实验:

把煮熟的猪肝脏研磨液和新鲜的猪肝脏研磨液分别滴入两组过氧化氢溶液中,结果加入煮熟的猪肝脏研磨液的一组没有气泡的产生,另一组有气泡产生。

学生据此展开讨论,推知高温使过氧化氢酶失去活性,从而联想低温是否影响酶的活性,引导学生提出探究课题:

设计一个探究温度影响过氧化氢酶活性的实验。

从温度这一因素,进一步提出另一探究课题:

ph对酶活性的影响。

  教师指导学生阅读课本83页,提出问题:

唾液的酸碱度是多少?

胃液和小肠液是多少?

用什么方法可以测定?

  6.2自主学习

  让每位学生都带着问题阅读83—84页,如结合课本内容自己按照探究实验的顺序来进行实验设计。

  6.3实验探究

  将全班分成4人一个小组,亲身体验“影响酶活性的因素”的探究,体验科学探究的乐趣,将本组的发现通过交流告诉大家。

  7.实验过程

  7.1教师活动

  教师在教室来回走动,根据各组的实际情况给予及时指导,比如说:

对于温度影响酶的活性的课题,应设定哪几个温度?

怎样将不同溶液的温度分别调到设定的数值?

对于ph对酶活性的影响的课题,应设定哪几个ph?

怎样排除ph和其他因素对实验结果的干扰  

?

设计实验方案并绘制数据记录表。

无关变量应怎么控制等等实验注意事项。

  7.2学生活动

  各小组根据自己所选的课题完成设计方案后,教师组织全班进行交流。

教师适当的指出其中几种方案的不足和可行性。

并且引导学生写出实验预期结果。

通过讨论后,各小组完善各自的实验方案。

教师展示优秀的表格设计。

  温度对酶活性的影响

  

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