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磷壁酸

外膜

3.肽聚糖是G+菌细胞壁的主要成分,有青霉素作用位点

4.脂多糖(LPS)是G-菌是内毒素,其构成和作用

由3部分组成:

脂类A(为一种糖磷脂,是内毒素的毒性部分和主要成分,与细菌的致病性无关)

核心多糖(位于脂类A的外层,具有属或组特异性)

特异多糖(决定了细菌种或型的特异性)

5.细菌核糖体是链霉素和红霉素作用位点

6.L型细菌

细菌L型(bacterialLform)

v定义:

细胞壁部分或完全缺陷的细菌称为--。

v形成机制:

自发形成或人工诱发--肽聚糖的结构遭破坏或合成受抑制而形成

vG+菌的L型细菌称为原生质体;

G-菌的L型称原生质球

细菌L型特性

v可以见于细菌、螺旋体、真菌等

v形态改变,呈多形性、球状、杆状、丝状

v大小不一,着色不均

v染色性改变,多为革兰阴性

v仅能在高渗环境中存活

v菌落:

在高渗低琼脂含血清培养基上形成“油煎蛋样”

v仍有致病力,可引起尿路感染、骨髓炎和心内膜炎

v常发生于作用于细胞壁的药物治疗过程中

v常规细菌学检查阴性

7.细菌的特殊结构及其功能

荚膜鞭毛菌毛芽孢

荚膜的功能:

抗吞噬作用

抗有害物质损伤作用

抗干燥作用

粘附作用-有助于细菌的定植

S层协助黏附

鞭毛的功能:

是细菌的运动器官

黏附作用--与致病性有关

抗原性-诱导产生抗体

鉴别细菌—根据动力和抗原性

诱导炎症反应

菌毛普通菌毛:

粘附作用与致病性有关性菌毛:

接合时可传递遗传物质

芽胞的功能:

强大抵抗力--灭菌的标准

芽孢在菌体中的位置、直径大小随菌种不同--用于鉴别细菌

8.细菌的生化反应(糖发酵、IMViC试验)的应用

细菌的生化反应(biochemicalreaction)

检测细菌对各种基质的代谢作用及代谢产物,借以区别和鉴别细菌种类的生化试验,称为细菌的生化反应

对糖的发酵:

VP试验甲基红试验单糖发酵试验

对蛋白质的分解:

吲哚试验硫化氢试验

其他试验:

尿素酶试验枸橼酸利用试验

IMViC:

吲哚(I)甲基红(M)VP(Vi)和枸橼酸盐利用(C)四种试验,常用于鉴定肠道杆菌,合称IMViC试验

9.细菌合成代谢产物及其致病性与治疗作用

v热原质:

细胞壁脂多糖,引起机体发热反应

v毒素和侵袭性酶:

与细菌的致病性有关

v色素:

分脂溶性和水溶性,用于细菌的鉴别

v抗生素:

抑制微生物生长和肿瘤细胞生长

v细菌素:

抑制产生细菌素的亲缘菌生长

v维生素:

如维生素B、维生素K

10.生长繁殖条件、根据对氧的需要分类、生长曲线

(1)充足的营养物质:

基本水、碳源、氮源、无机盐特殊生长因子

(2)适宜的酸碱度:

最适宜为中性或弱碱性(pH7.0~7.6)

特殊如霍乱弧菌在pH8.0~9.2中生长良好

结核分枝杆菌pH为6.5~6.8

(3)合适的温度:

最适宜37℃特殊嗜冷菌在10℃~20℃嗜热菌在50℃~60℃

(4)必要的气体环境:

专性需氧菌、微需氧菌、兼性厌氧菌、专性厌氧菌

生长曲线:

v迟缓期1~4h

v对数增殖期8~18h

细菌形态、染色性、

生理活性最典型

v稳定期

v衰退期

11.细菌的分类与命名

一、表型特征分类

传统分类法依据形态结构、染色性、培养特性、生化反应、抗原性等

数值分类用电泳、色谱、质谱等对细菌生理生化指标进行计算机—数值化分析

二、种系分类

DANG+Cmol%测定;

核酸同源值测定;

核蛋白RNA碱基序列测定

第三章细菌的遗传与变异

1.细菌的变异现象都包括那些?

形态结构变异;

毒力变异;

耐药性变异;

菌落变异

2.细菌的遗传物质有那三种?

细菌染色体特点:

双股环状DNA,缠绕成网状

无核膜,附着在横隔中介体上或胞膜上

基因是连续的(无内含子)-p31(转录形成mRNA直接翻译成多肽)

双向复制

功能结构特点:

致病岛

定义:

致病菌染色体上载有编码外毒素、黏附素及侵袭性酶等致病作用的多个毒力基因,称为致病岛或毒力岛

特点:

分子量很大,通常20kb~100kb

可在细菌的种内和种间传递,使其他细菌获得新的致病性

意义:

揭示细菌致病机制的捷径(是研究病原菌功能基因组的重要方法)

质粒的特性:

具有自我复制的能力(严紧型/松散型)

携带的基因编码产物赋予细菌某些新的表型

可以自行丢失与或人工消除--失去所赋予的性状

可通过接合或转导等方式在细菌间转移

分为相容性和不相容性两种质粒

转位因子有那些:

F质粒(fertilityplasmid)致育性,编码性菌毛F+,F-

R质粒(resistanceplasmid)接合性/非接合性

Vi质粒(Virulenceplasmid)编码毒力因子

Col质粒(coliciogenicplasmid,细菌素质粒)编码大肠菌素

代谢质粒--编码相关的代谢酶

&

3.细菌基因转移的方式有哪几种?

细菌的基因转移方式有5种:

转化、接合、转导、溶原性转换和原生质体融合

耐药质粒可经哪些方式传递?

4.噬菌体感染细菌后有哪两种后果

毒性噬菌体:

是能在宿主细胞内复制增殖--使细菌裂解的噬菌体

温和噬菌体:

感染细菌后不增殖,不裂解细菌的噬菌体称为温和噬菌体

5.细菌的遗传变异在医学上的应用

(1)用于疾病的诊断、预防、治疗:

诊断:

注意形态结构生化反应等变异(如L型)

预防:

--疫苗的制备;

治疗:

防止耐药性产生-

--药敏、联合、足量、不滥用;

(2)用于测定致癌物质:

Ames试验

(3)用于流行病学调查:

质粒指纹图谱法

(4)用于基因工程:

生产胰岛素、干扰素、生长素等生物制剂

6.名词概念:

S-R变异:

由光滑型(smooth,S)变为粗糙型(rough,R),称为S-R变异

H-O变异:

有特殊结构的细菌有时失去荚膜、鞭毛或芽孢,但失去的荚膜或鞭毛有的尚可恢复,这种失去鞭毛的变异称H-O变异

R质粒:

可通过细菌间的接合进行传递的,称接合性R质粒

另一类是不能通过接合传递的,称非接合性耐药质粒,但可通过噬菌体传递

F质粒:

编码细菌的性菌毛

Vi质粒:

是与该菌致病性有关的毒力因子(毒力质粒)

转化:

受体菌直接摄取供体菌的游离DNA片段并整合到自己基因组中,从而获得新的遗传性状,称为转化

普遍性转导:

供体菌染色体任何一个基因都有机会被转导,故称为普遍性转导

局限性转导:

溶原性细菌经诱导后,前噬菌体从宿主菌染色体上脱离时发生偏离差,只能将前噬菌体两侧的供体菌染色体上特定基因转移至受体菌的遗传性性状发生改变,称为局限性转导

溶原性转换:

溶原性细菌因染色体上整合有前噬菌体,从而获得新的遗传性状,称为溶原性转换

能在宿主细胞内复制增殖,产生许多子代噬菌体并最终使细菌裂解的噬菌体称为毒性噬菌体

溶菌周期:

在宿主菌内的增殖和裂解细菌的过程称为溶菌周期,包括吸附、穿入、生物合成、成熟与释放等四个阶段

plaque&

PFU:

在固体培养基上,将适量的噬菌体和宿主菌液混合后接种培养后,培养基表面可出现透亮的溶菌空斑,称为噬斑(plaque)

每一个噬斑一般系一个噬菌体复制增殖后形成,若将噬菌体按一定倍数稀释后感染细菌,通过噬斑计数,可测知一定容积内的噬斑形成单位(pfu)

前噬菌体:

整合到宿主菌染色体上的噬菌体基因组称为前噬菌体

溶原状态:

溶原性细菌:

染色体上带有前噬菌体的细菌称为--

条件致死性突变株:

ts突变株

第四章消毒与灭菌

1消毒、灭菌的概念

消毒:

消除和杀灭物体上或环境中的病原微生物及其他有害因子,但不一定能杀死全部非病原微生物的方法

杀菌:

杀死物体上所有微生物的方法,包括杀死芽孢

2不同消毒灭菌方法及其适用对象

物理消毒灭菌法:

热力灭菌法

辐射杀菌法

滤过除菌法

超声波杀菌法

其它物理抑菌或杀菌方法

热力灭菌法:

包括湿热和干热

(一)干热灭菌法

焚烧:

仅适用于具有传染性的废弃物或尸体等

烧灼:

适用于接种针、接种环、试管口和瓶塞等

干烤或干热灭菌器:

160~170℃2h可杀死一切微生物

玻璃和陶瓷器皿等,并可破坏内毒素

红外线:

(0.7~1000μm波长的电磁波)

医疗器械和餐具等

微波:

波长1~300nm,常用2450MHz和915MHz

消毒餐具等

(二)湿热消毒灭菌法

v巴氏消毒法(pasteurization)

▪61.0~62.8℃30min;

或71.7℃15~30s

▪可分别杀死啤酒中、牛奶中的细菌

v煮沸法100℃,5min,食具、注射器等消毒

▪细菌芽胞则需1~2h

▪个别细菌的芽胞需3~5h才能杀死(如肉毒梭菌)

v流通蒸气法:

100℃15-30min杀死细菌繁殖体

▪间歇蒸汽灭菌法(fractionsterilization)100℃15-30min-37℃24h×

3天,可杀死芽胞

v高压蒸气灭菌法:

(灭菌器)

v压力—103.4KPa(1.05Kg/cm2)

v温度—121.3℃

v时间—15-20min

v效果—杀灭包括芽孢在内所有微生物

v应用—所有耐高温、高压、耐湿的物品

v预真空高压灭菌法

v湿热与干热消毒灭菌法比较

v紫外线的杀菌机理和特点,适用对象

v蒸气灭菌法、间歇灭菌法、巴氏消毒法、

高压灭菌特点与应用

v影响消毒灭菌的因素

 

第8章化脓性细菌

1.SPA的定义与应用(p81-82)

葡萄球菌A蛋白(StaphylococcalproteinA,SPA)

课件:

是金黄色葡萄球菌表面蛋白/抗原

可以与IgG抗体的Fc段非特异结合,发挥:

抗调理--抗吞噬作用;

协同凝集试验--用于辅助诊断

书:

90%金黄色葡萄球菌细胞壁上存在的、具有属特异性的单链多肽可与人和动物lgG1、lgG2、lgG3、lgG4的Fc段非特异性结合,从而干扰吞噬细胞的调理吞噬作用。

lgG分子的Fab段仍能同相应抗原发生特异性结合,以SPA德葡萄球菌作为载体的协同凝集试验,已广泛应用于多种微生物抗原的检出。

此外,SPA与lgG结合后的复合物有促细胞分裂、引起超敏反应、损伤血小板等多种生物学活性。

2.致病与非致病性葡萄球菌的区别(p82表8-1)

三种葡萄球菌鉴别的主要性状

主要性状

金黄色葡萄球菌

表皮葡萄球菌

腐生葡萄球菌

菌落色素

金黄色

白色

白色或柠檬色

甘露醇发酵

+

-

血浆凝固酶

α溶血素

耐热核酸酶

A蛋白

致病性

弱或无

新生霉素

敏感

耐药

3.金葡菌的致病性(致病物质及其所致疾病,p82-84)

致病物质:

凝固酶、葡萄球菌溶血素、杀白细胞素、肠毒素、表皮剥夺毒素、毒性休克综合症毒素—1、其他酶类;

所致疾病:

1侵袭性疾病:

主要引起化脓性炎症

2毒素性疾病:

(1)食物中毒

(2)假膜性肠炎(3)烫伤样皮肤综合症(4)毒性休克综合症

4.凝固酶阴性的葡萄球菌(CNS)的致病性及特点(p84)

CNS是人体皮肤、粘膜的正常菌群

*可引起医源性感染

*耐药菌株日益增多

*感染多见于:

泌尿系感染、手术后感染、

败血症等-仅次于E.coli

*常见的菌种有表皮葡萄球菌

腐生葡萄球菌

人葡萄球菌

溶血葡萄球菌

5.链球菌属的分类

(1)根据溶血性分类

⏹甲型溶血性链球菌(α)

⏹不完全溶血,为甲型(α)溶血,形成草绿色溶血环

⏹又称草绿色链球菌,多为条件致病

⏹乙型溶血性链球菌(β)

⏹完全溶血,为乙型(β)溶血,形成透明溶血环

⏹又称溶血性链球菌,致病性强

⏹可以引起化脓性炎症,又称化脓性链球菌

⏹丙型链球菌(γ)

⏹不溶血,又称不溶血性链球菌,一般不致病

(2)根据抗原结构分类

⏹按多糖抗原(C抗原)-分群/组(Group)

⏹将链球菌分为A~H、K~T、U、V共20个群

⏹对人致病的主要是A群

⏹B、C、D、G群偶尔致病

⏹按表面蛋白抗原(M抗原)-分型(Type)

⏹可将A群链球菌分为100多个型

⏹B群分为4个型

⏹C群分为13个型

6.A群链球菌的致病性(致病物质及其所致疾病)

抗O试验原理及意义

⏹A群链球菌的致病性

⏹致病物质

⏹细胞壁成分

⏹链球菌溶血素

⏹致热外毒素

⏹侵袭性酶类

A群链球菌的引起的疾病

⏹1.化脓性疾病:

⏹常见咽炎、淋巴管炎、淋巴结炎等

⏹还有产褥热、坏死性筋膜炎(-皮肤伤口--皮下组织—广泛性肌肉和脂肪坏死—蜂窝织炎—坏疽—全身衰竭-死亡)

⏹2.毒素性疾病:

⏹呼吸道感染--引起小儿猩红热

⏹3.超敏反应性疾病:

⏹风湿热--风湿性关节炎、风湿性心脏病等

⏹急性肾小球肾炎

抗链球菌溶血素O实验(ASO):

是一种体外毒素抗毒素中和实验测定病人血清中的ASO含量辅助诊断风湿热和肾小球肾炎

7.甲型溶血性链球菌、B群、D群链球菌所致疾病(p87-88)

(1)甲型溶血性链球菌

为口腔、上呼吸道的正常菌群,

引起龋齿、亚急性细菌性心内膜炎

(2)B群链球菌--(乙型链球菌B群)

学名无乳链球菌(S.Agalactiae)

为鼻咽部、直肠和阴道的正常菌群,

可引起皮肤感染、产后感染、新生儿败血症、化脓性脑膜炎、肺炎等

(3)D群链球菌:

正常寄居在皮肤、上呼吸道、消化道和泌尿生殖道,多引起尿路感染、化脓性腹部感染、败血症和心内膜炎

8.肺炎链球菌的形态培养特性及其与甲型链球菌的区别

肺炎链球菌致病性

⏹形态G+矛头状双球菌(尖端向外),有荚膜

⏹培养与生化血平板生长良好,形成草绿色溶血环

可产生自溶酶-被胆汁、胆盐激活-溶解细菌

可分解菊糖

⏹与甲型链球菌鉴别:

用胆汁溶解试验

或菊糖发酵试验

9.脑膜炎、淋病奈瑟菌的形态,培养特性,致病性

脑膜炎奈瑟菌

(1)形态与染色

G-肾型双球菌在患者脑脊液中多位于中性粒细胞内

(2)培养与生化

营养要求高—需要血清,用巧克力色血平板培养

专性需氧

能产生自溶酶

(3)致病性

(一)致病物质

菌毛-与受体结合

荚膜-抗吞噬

内毒素-最重要,内毒素血症---发热---血管内皮损伤、栓塞、出血---中毒性休克,DIC

(二)所致疾病

传播途径:

呼吸道传播

传染源:

病人、带菌者

感染过程:

在鼻咽部定植引起局部炎症—“上感”—绝大多数

菌血症,重者发生败血症-发热、出血性皮疹为特征

细菌到脑脊髓膜—引起化脓性脑膜炎(流行性脑脊髓膜炎)

重者-爆发性脑膜炎-内毒素休克-DIC-死亡,病死率40%~60%

淋病奈瑟氏球菌

1.形态与染色与脑膜炎双球菌相似;

G-肾形双球菌;

有荚膜,有菌毛;

多位于中性粒细胞内

2.培养与生化

专性需氧,需5-10%CO2

营养要求高

巧克力色平板生长良好

氧化酶试验阳性

1.致病物质:

菌毛--粘附牢固,荚膜和外膜蛋白--抗吞噬

IgAl酶--破坏IgAl—促进细菌的黏附定植

内毒素-局部化脓性炎症

(二)所致疾病--淋病

⏹传染源病人和带菌者

⏹传播途径性传播、垂直传播、其他途径

⏹男性尿道炎、前列腺炎、附睾炎

⏹女性尿道炎、宫颈炎、盆腔炎等

⏹可导致不育症

⏹淋病性结膜炎

⏹新生儿-脓漏眼--产道感染

10.绿脓杆菌、肠球菌、卡它布兰汉菌的致病性及特点

⏹一、铜绿假单胞菌(绿脓杆菌)

形态染色:

为G-小杆菌

能产生水溶性荧光色素—青脓素和绿脓素

致病性:

正常菌群,条件致病,皮肤、黏膜受损或医原性因素引起局部化脓性炎症或全身感染,甚至入血引起败血症

防治:

本菌为天然多重耐药菌株

可选用多粘菌素和庆大霉素等

二、肠球菌

⏹1.形态G+卵圆形球菌

2.分布存在于人和动物肠道

3.致病医院内感染的常见菌群

引起尿路感染

腹腔术后感染

免疫低下者可致败血症

三、卡它布兰汉菌

又名粘膜炎布兰汉菌

1.形态G-球菌,痰液中呈肾形双球菌

-应注意与脑膜炎双球菌区别

2.分布存在于人和哺乳动物呼吸道

3.致病是医院内呼吸道感染的重要菌群

可引起黏膜卡它炎症、咽喉炎、

支气管炎、肺炎、中耳炎、脑膜炎等

第九章消化道感染细菌

1.肠杆菌科的共性

(1)形态:

中等大小(1~6µ

m),G﹣杆菌

(形态学--均一性)

(2)生化反应:

非致病菌发酵乳糖,致病菌不发酵乳糖

(生化反应—特殊性)

(3)抗原结构:

有O、H、vi、K抗原、菌毛抗原

(抗原结构--复杂性)

(4)抵抗力:

弱,60℃30min死亡,对氯等消毒剂敏感

有些菌对胆盐、煌绿抵抗力强,--制备

选择/鉴别培养基--分离鉴定细菌

(抵抗力—可鉴别性)

(5)变异:

肠道微环境—密切接触-容易发生基因转移,

(变异株-多样性)

2.大肠埃希氏菌的致病性、分类及在卫生细菌学的检测中的应用

(一)致病物质

1.菌毛--黏附作用

2.肠毒素--外毒素,质粒介导,包括2种:

(1)不耐热肠毒素(heatlabileenterotoxin,LT)

LT与霍乱肠毒素有75%同源性,因此致病机制相似:

活化腺苷环化酶cAMPH2O、Na+、Cl-分泌腹泻一般不引起组织炎性反应及病变

(2)耐热肠毒素(heatstableenterotoxin,ST)

活化鸟苷环化酶cGMP---分泌-吸收腹泻

(3)Vero毒素(VT)

可使Vero细胞坏死,故称--;

也称志贺氏样毒素-可被志贺抗毒素中和掉;

是外毒素-作用于核糖体-终止蛋白质合成-使肠上皮细胞死亡脱落。

(4)其它致病因子

溶血素-溶解红细胞及其他组织细胞

内毒素-

K抗原-抗吞噬

1.肠道外感染:

化脓性炎症为主,泌尿道感染为多见

机会性感染可引起:

胆囊炎、腹膜炎、肺炎、

脑膜炎、败血症等

2.肠道内感染-引起腹泻的E.coli

(分为5组p102)

肠产毒性大肠埃希菌(ETEC);

肠侵袭性大肠埃希菌(EIEC);

肠致病性大肠埃希菌(EPEC);

肠出血性大肠埃希菌(EHEC);

肠粘附性大肠埃希菌(EAEC)

微生物学检查

(1)肠道外感染:

涂片镜检:

脓汁、痰、分泌物涂片G染色镜捡;

分离培养与鉴定:

菌落形态

IMViC实验++--

系列生化反应--最后鉴定

泌尿道感染做细菌计数,>

10万/ml才有诊断意义

(2)肠道内感染:

做血清型鉴定、测定肠毒素或毒力检测

如用senery试验-检测EIEC的侵袭力(接种豚鼠眼结膜)

(3)卫生细菌学检查:

大肠菌群指37OC24h内发酵乳糖产酸产气的肠道杆菌,是粪便污染的指标

大肠菌群指数(coli-index)是指1000ml被检样品中大肠菌群数

我国的标准:

饮水中允许值≤3个/L

饮料中≤5个/100ml?

不得检出!

3.志贺菌属分型、致病性

抗原结构及分类--根据O抗原分类

菌种

亚型

痢疾志贺菌

A

1~10

福氏志贺菌

B

1~6,X,Y变种

鲍氏志贺菌

C

1~15

宋内志贺菌

D

1

(一)致病物质

1.侵袭力:

菌毛--黏附-介导细菌侵入肠上皮细胞

(菌毛为140MD质粒编码的蛋白产物)

2.内毒素肠粘膜通透性内毒素入血发热休克等

作用于破坏细胞形成溃疡脓血便

肠壁植物神经扩约肌痉挛里急后重

3.志贺毒素(ST):

是外毒素也称Vero毒素

具有肠毒素作用—致水样腹泻

具有细胞毒素作用--致细胞坏死、阻止吸收

具有神经毒素作用--引起神经麻痹、昏迷等

急性细菌性痢疾(菌痢)

•急性典型:

发热、腹痛、脓血粘液便、里急后重

•急性非典型:

易误诊,导致带菌和慢性

中毒性痢疾:

小儿高热昏迷、DIC,病死率高

慢性细菌性痢疾:

病程迁移两个月以上

带菌者

4.沙门氏菌属的抗原构造、所致疾病、免疫性、微生物学检测

抗原结构

1.O抗原:

LPS(脂多糖),耐100℃数小时

是分组的依据,A~E组对人致病

刺激机体产生IgM抗体

2.H抗原:

为蛋白质,65℃10min破坏

是分型依据

刺激机体产生IgG抗体

3.Vi抗原:

是表面抗原,有抗吞噬作用

检测出低效价抗体即有诊断意义--?

所致疾病:

沙门菌病(salmonellosis)

肠热症-----两次菌血症

包括胃肠炎(食物中毒)

败血症

带菌者—占患者的1~5%

--胆囊内可持续带菌﹥1年

—传染

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