黑马羊繁育及高效养殖技术研究与示范项目验收报告Word格式文档下载.docx
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2.6.2品种群结构及整齐度得到优化43
2.6.3黑马羊生产性能显著提高43
2.6.4黑马羊导入努比亚羊、简阳大耳羊血液可取得较好杂交效果44
2.6.5高效养殖配套技术集成示范取得显著效果44
2.6.6项目取得显著经济、社会及生态效益44
3结论部分45
3.1摸索出了黑马羊的生长发育、扩群繁育规律45
3.2初步掌握了黑山羊、黑马羊、无角间性羊的基因型存在形式46
3.3初步得出颌下髯、颈部肉垂等外观性状在群体中所占比例46
3.4初步得出了主要影响生长和繁殖性状的基因46
3.5培育黑马羊具有较好的经济价值并丰富了生物的多样性46
3.6关于无角与合下髯、颈部肉垂等外观特征的遗传机理研究47
3.7熟化了一套高寒山区高效养殖配套技术47
插图清单
图1黑马羊0-60月龄生长曲线18
图2黑马羊各时间段日增重走势19
图3黑马羊基因组DNA电泳结果23
图4GDF9基因PCR扩增结果23
图5BMP15基因PCR扩增结果23
图6ESR基因PCR扩增结果24
图7ADAMTS1基因PCR扩增结果24
图8GHSR基因PCR扩增结果24
图9CIS基因PCR扩增结果25
图10STAT5A基因PCR扩增结果25
图11测序胶图26
图12测序胶图26
图13测序胶图26
图14测序胶图27
图15测序胶图27
图16测序胶图27
图17测序胶图28
图18测序胶图28
附表清单
表1项目示范规模12
表2项目种草、圈改示范规模12
表3种羊初步选择标准14
表4选育后体重与地方标准对照16
表5不同杂交方式后代基因型表现形式20
表6前20名种公羊育种值排名22
表7变异位点的位置和突变的碱基类型28
表8某黑马羊基因型频率和等位基因频率31
表9某黑马羊体温、呼吸、脉搏变化对照39
表10舍饲、放牧条件下角膜炎、口疮、腐蹄病、内科病对照40
1引言
某黑马羊是从某黑山羊中分化出来的一个新的品系，分布于赫章、威宁、纳雍等县，现存栏3万只左右[1]。
经长期的黑马羊基地建设，其中形成了以赫章县古达乡为中心，威奢、兴发、达依等周边乡镇为辐射区域的黑马羊核心产区。
上世纪90年代初以来，某市牧科所在上述区域一直从事黑马羊的基地建设、选育提高、无角间性性状的研究，前期取得了一些研究成果，初步掌握了无角性状、间性性状的遗传机理，掌握了其生长速度、繁殖性能水平，并优越于有角羊。
其生产性能及马头、合下髯、颈部肉垂、黑色毛被等独特的外观特征，为品种的形成奠定了坚实基础，遗传特性稳定。
但从整体水平来看，黑马羊在生产性能、扩群繁育、角性状的分化、合下髯和颈部肉垂遗传机理、无角纯合个体测交、养殖配套技术等方面还存在问题，这是项目的研究目的。
本项目紧紧围绕这些问题，开展了黑马羊的扩群繁育、BLUP动物模型估测种公羊个体育种值、生长及繁殖性状相关基因的多态性检测、导入同色毛被高产外血的杂交试验及养殖配套技术的研究与示范等工作。
项目的研究，初步掌握了黑山羊、黑马羊、无角间性羊的基因型存在形式；
初步得出颌下髯、颈部肉垂等遗传特征在群体中所占的比例；
摸索出了黑马羊的生长发育、扩群繁育规律；
把BLUP模型估测种公畜个体育种值的方法应用到黑马羊的选育上，并形成了一套某黑马羊高效生产养殖配套技术。
本项目的研究内容除本课题外，在国内未见相关报道。
2主体部分
2.1主要研究内容
2.2主要考核指标
2.3技术路线与实施方法
2.3.1技术路线
采取切实可行的开放式选育路线。
为加大选择差，把核心群农户中生产的、经培育的青年后备公羊推广到基础群中去，而选育点基础群农户中的优秀公羊又可引进到核心群农户中来，保证了选育群体优良基因的双向流动。
同时，基础群农户中培育出的优良后代又向周边乡镇农户辐射，开展应用推广。
2.3.2实施方法
1、把好核心群的组建关。
对各个点的无角羊进行抽样测定，制定适宜的核心群种羊初步选择标准，符合标准的进入核心群，低于标准的进入基础群。
2、把好种羊的日常鉴定关。
根据黑马羊的生长发育水平和繁殖性能制订不相关性状的综合选择指数，作好种畜的鉴定工作。
3、把好核心种畜的调换关。
为避免近亲交配，不定期交换种公羊。
为强化选种选配，血缘较近不配，非优质种公羊不配，等级低公羊与等级高母羊不配，幼龄公母羊不陪，老龄公母羊不配。
4、把好“两期一培育”补饲育羔技术关。
“两期一培育”系指加强母羊妊娠后期2个月和哺乳前期2个月补饲管理和羔羊培育。
主要解决传统养殖条件下，饲养管理粗放，饲料结构单一，营养不全，维生素、微量元素缺乏等引起的羔羊代谢性疾病。
同时提高羔羊初生重、母羊泌乳量及体质，以解决羔羊死亡率高、母羊产后恢复慢和发情晚的问题。
5、把好“三定”保健技术关。
“三定”指定期防疫驱虫，定期消毒圈舍，定期强化健胃补饲，降低发病率和死亡率。
根据某地区近年来发生的疫病和寄生虫感染情况，研究制定出某高寒山区黑山羊传染病防疫技术操作规程和预防性驱虫技术操作规程，为山羊健康养殖提供保证。
6、开展技术培训和咨询、指导，以提高农户的饲养管理水平和疾病防治能力，为农村培养了一支永久型的技术队伍。
7、不定期召开课题日常工作会，检查督促上次安排的工作任务，分析解决课题实施过程中出现的各种问题，深入讨论需攻关的一些技术问题，安排部署当前工作。
8、整合《某黑山羊选育成果转化与高效养殖技术示范》（2012GB2F200408）项目资金配套，弥补项目资金的不足。
2.4考核指标完成情况
2.4.1实施地点
项目示范点选择在赫章县的古达、威奢2个乡镇及某市科创畜牧开发有限责任公司。
2.4.2示范规模
1、项目实施三年，初步建立某黑马羊纯繁体系，三个示范点建立黑马羊繁育示范户305户、示范规模4643只，其中核心群（含扩繁群）102户、示范规模1596只，商品生产群203户、示范规模3047只。
累计推广种羊5102只、商品羊13320只。
表1项目示范规模
示范点
核心群（含扩繁群）
商品生产群
合计
示范户（户）
示范规模（只）
推广规模（只）
古达
85
1342
3926
149
2233
10259
234
3575
14185
威奢
13
186
1018
50
737
2645
63
923
3663
科创
4
68
158
77
416
8
145
574
102
1596
5102
203
3047
13320
305
4643
18422
2、推广人工种草150亩，开展天然草地改良400亩，指导养殖户改造圈舍1530㎡（表2）。
表2项目种草、圈改示范规模
人工种草（亩）
草地改良（亩）
圈舍改造（㎡）
-
1200
400
330
150
1530
2.4.3生产性能
项目实施三年，示范点核心群（含扩繁群）周岁公、母羊体重比地方标准指标提高13.69%、19.59%，成年公、母羊体重比地方标准指标提高12.42%、16.91%；
商品生产群周岁公、母羊体重比地方标准指标提高39.63%、42.85%，成年公、母羊体重比地方标准指标提高24.74%、22.36%。
产羔率达151.42%，比某黑山羊地方标准平均值122%（108%-136%）提高24.11%。
周岁公羊屠宰率达48.50%，比某黑山羊地方标准45%提高7.78%，比合同指标高0.5个百分点。
2.4.4自主知识产权
1、申请国家专利2件，其中发明专利1件、实用新型专利1件。
一种绵羊、山羊品种的提纯复壮方法，2012年6月4日申请国家发明专利1件，申请号201210179674.3，处于实审阶段。
一种适用于羊防疫驱虫及个体鉴定的工作台，2016年6月8日获国家实用新型专利授权。
2、省级以上期刊发表论文28篇，其中SCI期刊1篇、中文核心期刊10篇、优秀期刊17篇；
参编专著2部；
参编技术手册1本。
2.4.5人才培养
协助培养博士1名（2011.09-2014.06）、在读博士1名（2012.09-2016.12）、农推硕士1名（2012.04-2016.06），中级晋升副高2名（2014.12、2015.12），初级晋升中级5名（2012.12、2013.11、2014.11、2015.11），某省动物遗传育种与繁殖重点实验室短期培训1名（2013.05-08）。
支持参加国际国内学术交流会4次，其中国际1次、国内3次，共计参加人员5人。
2.4.6技术培训
提高农户的饲养管理水平和疾病防治能力，三年来共开展技术培训、咨询指导532人次。
2.4.7经济指标
项目实施三年，通过提纯复壮、扩群繁育，建立黑马羊示范群4643只，累计推广种羊5102只、商品羊13320只；
推广人工种草150亩，开展天然草地改良400亩；
指导养殖户新修和改造圈舍1530㎡。
养殖户累计实现经济效益1233.36万元，新增纯收入394.04万元，人均新增3229.84元（见经济效益分析报告）。
2.4.8资金使用情况
项目总资金65.7万元，其中省科技计划拨款30万元、自筹资金35.7万元。
根据审计报告显示，项目整合配套资金36.67万元，专项资金支出30.23万元，合计使用66.9万元。
2.5研究内容完成情况
2.5.1某黑马羊扩群繁育研究取得进展
1、生产性能研究
（1）初步选择标准选择
根据实际测定数据和参考某黑山羊地方标准制订初步选择标准，以组建核心群（含扩繁群）和商品生产群。
（表3）。
表3种羊初步选择标准
年龄
性别
体重（kg）
体长（cm）
体高（cm）
胸围（cm）
成年
公
32
55
52
65
母
29
周岁
22
47
60
18
6月龄
16
45
42
14
（2）综合选择指数法选择
制订不相关性状综合选择指数，严格选种选配，并做到无角种公羊的异地调换工作，严格控制近交程度。
制定综合选择指数，对核心群进行选择留种、整群扩繁，是做好种畜的鉴定工作的重要参考指标。
选择的目的不仅是要提高当代畜群的生产水平，更重要的是提高未来畜群的生产水平，即要求种畜能产生优良的后代。
但是由于种畜本身的表型不能完全表示它产生优良后代的能力，因此，种畜的选择必须考虑其血统和性状的遗传特点。
故，为加快选育的遗传进展，制订综合选择指数选择留种比较准确，现根据黑山羊的生长发育水平和繁殖性能制订不相关性状的综合选择指数，生长发育水平以外形评分性状表示，繁殖性能以产羔率性状表示。
①计算必要的数据：
畜群均数（Pi）由本地区黑山羊的统计资料计算；
性状遗传力（hi）参考有关育种文献而得；
经济重要性（Wi）根据各种性状在育种工作中的重要性确定。
现将有关数据列出：
产羔率：
P1=1.40h21=0.3W1=0.70
外形评分：
P2=70分h22=0.3W2=0.30
②制订综合选择指数：
∑Wihi²
=0.70×
0.3+0.30×
0.3=0.30
Wihi²
Pi×
1000.70×
0.3×
1000.30×
100
Ⅰ=∑=P1+P2
Pi∑Wihi²
1.36×
0.370×
0.3
=51.47P1+0.4286P2
③制订标准：
根据产羔率为136%（某黑山羊地方标准上限）[2]、外形评分为70分以上的个体才能达入选条件，则制订的综合选择指数I=51.47×
1.36+0.4286×
70=100.00。
因此，凡个体的综合选择指数达100.00的则进入核心群，低于指标100.00的淘汰进入商品群。
（3）生产性能变化
①生长性能
示范点核心群（含扩繁群）周岁公、母羊体重比地方标准指标提高13.69%、19.59%，成年公、母羊体重提高12.42%、16.91%；
商品群周岁公、母羊体重提高39.63%、42.85%，成年公、母羊体重提高24.74%、22.36%（表4）。
表4选育后体重与地方标准对照
类别
地方标准（二级种羊）[2]
扩群选育后
体重范围（kg）
平均体重（kg）
比地方标准提高
核
心
群
♂
26
29.56±
4.35
13.69%
♀
26.31±
4.58
19.59%
38
42.72±
5.51
12.42%
33
38.58±
5.72
16.91%
商品生产
16-22
19
26.53±
4.12
39.63%
15-18
16.5
23.57±
5.20
42.85%
29-33
31
38.67±
5.73
24.74%
26-29
27.5
33.65±
5.54
22.36%
②繁殖性能
通过选种选配，产羔率达151.42%，比某黑山羊地方标准平均值122%（108%-136%）[2]提高24.11%；
宋德荣等报道某黑山羊胎产羔率为148.81%[3]，黑马羊产羔率比其高2.61个百分点。
③肉用性能
选择生长速度快的公、母羊留种，以提高胴体重量。
据屠宰测定，周岁公羊屠宰率达48.50%，比某黑山羊地方标准45%高出7.78%，比合同指标高0.5个百分点；
宋德荣等（2003）报道，周岁某黑山羊屠宰率为46.36%[3]，黑马羊屠宰率高出4.62%；
李孟年等（1994）报道周岁羯羊屠宰率48.68%[4]，比同龄某黑山羊羯羊高出4.74%；
成年羯羊屠宰率51.61%[4]，比同龄某黑山羊羯羊高出6.28%。
黔北麻羊是某三大地方山羊品种之一，罗卫星等（2010）报道，对黔北麻羊屠宰测定，2-3岁羯羊屠宰率为45.05%、周岁母羊屠宰率为37.68%[5]，比同龄黑马羊低。
说明黑马羊具有较好的产肉性能。
2、生长发育规律研究
（1）生长发育曲线
根据月龄、体重作出的累积生长曲线可见，某黑马羊1～9月龄生长较快，其中1～3月龄最快，3～6月龄次之，6～9月龄稍缓，直到9月龄成为公、母羊的生长拐点。
过了拐点，公羊9～48月龄、母羊9～36月龄均呈直线生长。
黑马羊的这一生长发育规律，对羔羊3月龄断奶成活、9～12月繁殖初配、母羊补饲、肉羊育肥有着指导作用（图1）。
图1黑马羊0-60月龄生长曲线
（2）各年龄段公母羊日增重
据测定数据统计，公、母羊日增重，0～3月龄分别为129.56g、126.33g，0～6月龄分别为88.12g、84.59g，0～9月龄分别为72.16g、63.85g，0～12月龄分别为73.64g、61.62g，0～24月龄分别为46.00g、36.66g，0～36月龄分别为36.75g、30.37g，0～48月龄分别为33.60g、22.27g，0～60月龄母羊为15.25g。
公、母羊日增重速度，0～3月龄最快，0～6月龄次之，0～9月龄与0～12月龄下降稍缓且相当，0～24月龄、0～36月龄、0～48月龄、0～60月龄逐渐下降，公羊日增重速度比母羊快（图2）。
表明肥羔生产最佳出栏时间为6～9月龄，为加快肉羊周转，提高出栏率，提供了理论依据。
图2黑马羊各时间段日增重走势
3、放牧行为及鲜草采食量研究
（1）放牧行为观察
对10只成年黑马羊进行放牧行为观察，连续观察5天，全天放牧8.5个小时。
结果表明，每只羊采食时间占61.75%，游走时间占13.17%，卧息时间占11.83%，彷徨时间占13.00%，哺乳时间占0.13%，饮水时间占0.12%。
（2）鲜草采食量测定
在秋季放牧条件下，每天随机对10只成年黑马羊进行鲜草采食量测定试验，结果表明，成年黑马羊日采食鲜草量为4.96kg，占体重14.59%，鲜草折合成风干物质0.89kg，占其体重的2.62%。
周寿荣等（1985）测定，成都麻羊日采食鲜草量为4.94-5.20kg，占体重12.70%-15.80%[6]；
杨秀歧等（1987）报道沿河山羊日采食量，春季为5.64kg，秋季为5.35kg，平均为5.50kg，日采食量占体重15.70%-19.11%[7]。
黑马羊日采食鲜草量与成都麻羊相近，低于沿河山羊，可能与品种、年龄的分组不同有关。
4、有角、无角黑山羊基因型分析
山羊无角性状是常染色体显性无角基因P引起（免疫遗传学分析）。
间性羊的遗传基础为雌性，间性基因与无角基因相连锁，存在同一条常染色体上，间性基因纯合表现不育。
间性基因用一对I、i表示，一旦ii纯合，表示山羊间性不育[8]。
依据有角、无角羊正反交试验及无角羊相互杂交试验分析，山羊的基因型存在多种形式，其中有角山羊存在ppII一种形式，正常无角山羊存在PPII、PPIi和PpII、PpIi四种形式、间性羊存在PPii、Ppii两种形式（表5）。
表5不同杂交方式后代基因型表现形式
项目
有角羊基因型
无角羊基因型
间性羊基因型
有角♂×
无角♀
ppII
PpII、PpIi
无角♂×
有角♀
PPII、PPIi、PpII、PpIi
PP（ii）、Pp（ii）
5、颌下髯、颈部肉垂特征遗传分析
据对166只19个群体的黑马羊观察统计，有颌下髯占群体比例为80.72%，其中新田村为100%，科创公司为16.67-100%，新田村稍高；
有肉垂个体占群体比例为19.28%，其中新田村为30.00%-38.89%，科创公司为0-33.33%，科创公司稍低。
山羊的胡须是显性的性连锁遗传。
山羊的肉垂由一个外显率完全的显性常染色体基因W控制，但表型有变异。
不同品种的基因频率差别很大。
张沅（2001）报道有肉垂（WW或Ww）的母羊的多产性比无肉垂的母羊（ww）大约高7%。
颌下髯、颈部肉垂随着有目的的选育而上升，当无角亲本有颌下髯、颈部肉垂时，后代产生颌下髯、颈部肉垂的几率就高[9]。
赫章县古达乡新田村黑马羊肉垂比例比某市科创公司高，是由于新田村黑马羊选育基地建立的时间较长。
关于极少部分有角羊也有肉垂，是不是有肉垂的无角母羊与有角公羊的杂交后代，还需继续观察。
关于无角与肉垂是否存在连锁关系及遗传机理也有待进一步研究。
无角、颌下髯、颈部肉垂等表型性状作为培育黑马羊品种的典型外貌特征，育种中具有非常重要的意义。
2.5.2建立了BLUP动物模型并应用于公羊个体育种值的估测
建立公羊单性状BLUP模型，估测种公羊个体育种值，优选继代种公羊。
根据赫章县古达、威奢等选育点52只黑马种公羊261只子女的周岁体重鉴定记录，应用BLUP方法对可能影响黑马羊周岁体重的出生类型（单羔、双羔）、性别、出生年份和出生地点进行方差分析，设计出估测周岁重性状的BLUP线性模型为y=Xb+Za+e。
式中：
y为各性状观察值向量；
b为固定效应；
a为个体加性遗传效应；
e为残差效应向量；
X、Z分别为固定效应、个体加性效应的结构矩阵。
利用建立的y=Xb+Za+e线性模型计算出了52只种公羊育种值，按优劣次序排序，并选择前20名公羊作为核心群继代种羊（表6）。
表6前20名种公羊育种值排名
羊号
育种值
排序
公羊4
6.1824
1
公羊27
1.664
11
公羊20
5.6868
2
公羊28
1.4295
12
公羊49
4.2808
3
公羊3
1.3637
公羊26
3.8984
公羊48
1.3385
公羊19
3.6977
5
公羊50
1.2231
15
公羊38
3.2592
6
公羊32
1.0833
公羊8
2.9552
7
公羊5
0.5898
17
公羊7
2.2629
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