植物组织培养复习资料付答案仅供参考docWord下载.docx
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1.基本实验室
（1）准备室
（2）接种室（3）培养室
2.辅助实验室
（1）细胞学实验室
（2）摄影室及暗室（3）生化分析室（无菌操作室、化学实验室、培养室、细胞学观察室、暗室）。
17、植物种质：
物亲代通过生殖细胞或体细胞传递给后代的遗传物质，植物种质资源即为携带各种不同遗传物质的植物总称。
18、玻璃化现象：
指试管苗的一种生长失调症状，当植物材料进行离体繁殖时，有些培养物的嫩茎、叶片往往会出现半透明状和水渍状，这种现象称为玻璃化。
其苗称为玻璃化苗。
19、基本培养基：
包括大量元素和微量元素（无机盐类）、维生素和氨基酸，还有糖和水等。
20、完全培养基：
在基本培养基基础上，根据各种不同试验要求，添加各种植物生长调节物质以及其他复杂有机附加物，包括有些成分尚不完全清楚的天然提取物。
21、外植体褐变：
在组织培养过程中，外植体向培养基中释放褐色的物质（醌类）致使培养基逐渐变成褐色，培养材料也随之变成褐色而逐渐死亡的现象。
22、微体快繁：
利用植物组织培养技术进行的一种营养繁殖方法。
23、微体嫁接：
把极小（小于0.2mm）的茎尖作为接穗嫁接到实生木上，然后将嫁接后的砧木接种到新培养基上培养。
24、敏感植物：
有些植物对病毒极为敏感，一旦感染病毒就会在其叶片乃至全株上表现特殊的病斑，如马铃薯病毒—千日红、黄烟花、心烟叶、毛叶蔓陀罗。
菊花病毒—矮牵牛。
25、固相化的方法：
凝胶包埋、表面吸附、网格及泡沫固定、膜固定。
26、悬浮细胞培养:
将单个游离细胞或小细胞团在液体培养基中进行培养增殖的技术。
27、固相化细胞培养：
把细胞固定在一种惰性基质，如琼脂、藻盐酸、聚丙烯酰胺、纤维或膜上面或里面，细胞不能运动，而营养液可以在细胞间流动，供应其营养。
28、条件培养：
在选用的培养基中，加入一定量以生长过组织或细胞的培养液（离心去除组织或细胞）称条件培养液。
用条件培养液培养细胞，即使接种的细胞密度低于最低有效密度，这些细胞也能生长和分裂。
30、再分化培养：
31、液体培养：
指在进行培养时，培养基中不加琼脂等凝固剂，一般需要通过振荡等方法解决培养基的通气情况。
32、细胞培养：
指从植物体中分离了单细胞，无人工条件下进行培养，使其生长增殖，甚至发育成完整植株的技术。
33、无病毒苗：
指不含该种植物主要危害病毒的苗木。
34、原生质体融合：
指使分离下来的不同亲本的原生质体，在人工控制的条件下，像性细胞受精作用那样互相融合成一体，又称体细胞杂交。
35、胚状体：
体细胞在一定条件下所诱导形成的胚称为体细胞胚，即胚状体
36、原生质体：
指去掉细胞壁的由质膜包裹有生命活力的裸细胞。
37、单倍体植株：
只含有配子体染色体组数的植株。
38人工种子：
指通过组织培养技术，将植物的体细胞诱导在形态上和生理上均与合子胚相似的体细胞胚，然后将它包埋于有一定营养成分和保护功能的介质中，组成便于播种的类似种子的单位。
39、离体授粉：
将未授粉的胚珠或子房从母体上分离下来,进行无菌培养,并以一定的方式授以无菌花粉,使之在试管内实现受精的技术,又称为离体受精或试管受精
40、植物生长调节剂：
植物中调节生长及其他功能的激素类物质。
主要分为三类：
植物生长素类、细胞分裂素类和赤霉素类。
41、器官培养：
指植物的根、茎、叶、花器和幼小果实的无菌培养。
42、植物胚胎培养：
指对植物的胚、胚胎、胚珠和子房的培养。
二、不定项选择（每题2分，共10分）
１、下列不属于生长素类的植物激素是___AD______。
AKt；
BIAA；
CNAA；
DZT
２、影响培养基凝固程度因素有__ABCD____。
A琼脂的质量好坏；
B高压灭菌的时间；
C高压灭菌的温度；
D培养基的PH
３、第一次提出植物细胞具有全能性的理论概念的科学家是：
B
AMorel；
BHaberland；
C
Schleiden；
DWhite
４、下列不属于大量元素的盐是___C______。
ANH4NO3；
BKNO3；
CZn
SO4.7HO2；
DMgSO4.7HO2
５、下列实验中可能获得单倍体植株的是___BCD_____。
A小麦的茎尖培养；
B番茄花药培养；
C玉米胚乳培养；
D玉米花粉培养
6、活性炭在组织培养中的作用有__ABC____。
A吸附有毒物质；
B减少褐变，防止玻璃化；
C创造黑暗环境，增加培养基的通透性，利于根的生长；
D增加培养基中的养分
7、下列具有细胞全能性的细胞是：
_ABCD___。
A成熟的老细胞；
B幼嫩的组织细胞；
C愈伤组织细胞D番茄的受精合子
8、下列培养基中____C___无机盐的浓度最低。
AMS培养基；
BB培养基；
CWhite培养基；
DN6培养基
9、从单个细胞或一块外植体形成典型的愈伤组织，大致经历___ACD__三个时期。
A诱导期；
B潜伏期；
C分化期；
D分裂期
10、植物组织培养的特点是_ABCD__：
A培养条件可人为控制；
B生长周期短，繁殖率高；
C管理方便；
D取材少
11、高温易被破坏分解的植物激素是___ABD___。
AIAA；
BGA；
CNAA；
DZt
12、同一植株下列___B___部位病毒的含量最低。
A叶片细胞；
B茎尖生长点细胞；
C茎节细胞；
D根尖生长点细胞
13、在原生质体的培养中，渗透稳定剂的作用是--A---：
A稳定原生质体的形态而不使其被破坏B支持作用
C提供营养
D调节PH值
14、下列实验中不可能获得单倍体植株的是__AC_____。
A水稻茎尖培养；
B草莓花药培养；
C玉米叶片培养；
D棉花胚乳培养
15、适合花粉培养的最适时期是---B--：
A单核早期B单核靠边期C二核期D三核期
16、IAA需要用___C____法灭菌。
A灼烧灭菌；
B干热灭菌；
C过滤灭菌D高压湿热灭菌
17、能打破种子休眠，促进种子、块茎、鳞茎等提前萌发的激素是---AB----：
AGA；
BIAA；
DZT
18、下列实验中可能获得单倍体植株的是__BCD____。
19、下面属于处于愈伤组织分裂期的特征是__ABCD____。
A细胞分裂加快
B正在分裂的细胞体积小，内无液泡
C细胞的核和核仁增至最大D细胞中的RNA含量减少，而DNA含量保持不变
20、赤霉素（GA）需要用____C_____法灭菌。
21、第一次提出植物细胞具有全能性的理论概念的科学家是___B_____：
AMorel；
BHaberland；
CSchleiden；
DWhite
22下列那种方法不能脱除感染植株体内的病毒AC
①茎段培养；
②微茎尖培养；
③愈伤组织的继代培养；
④珠心胚培养
23．适合外植体材料表面消毒的方法是B
①高压蒸汽；
②适宜浓度的消毒剂浸泡；
③紫外线消毒；
④熏蒸消毒
24、经高温灭菌后。
培养基的pH会A
A降低B升高C不变D不能确定
25、在植物组织培养中，培养基的PH值一般为B
A低于5.0B5.5—5.8C6.0—7.0D高于7.0
26、下列有关细胞全能性的含义，正确的是C
A每个生物体内的所有细胞都具有相同的功能
B生物体内的任何一个细胞可以完成该个体的全部功能
C生物体的每一个活细胞都具有发育成完整个体的潜能
D生物体的每个细胞都经过产生、分裂、分化、生长、衰老、死亡的全过程
27、下列那种方法不能脱除感染植株体内的病毒（AC）
A茎段培养；
B微茎尖培养。
C愈伤组织的继代培养；
D珠心胚培养。
28、下列不属于生长素类的植物激素是___A______。
A6-BA；
DIBA
三、填空题（每空1分，共20分）
1、去除植物病毒的主要方法是_组培法___和_理化法___两种方法，当把二者结合起来脱毒效果最好。
2、原生质体的融合可实现__体细胞___的杂交，其融合的方式分为_自然融合__和_人工诱导融合_两类。
3、在组织培养中，非洲菊是靠__丛生芽____的方式进行繁殖的，而蝴蝶兰是以__原球茎增殖_的方式进行快繁的。
4、单细胞培养的方法主要有--看护培养--、---微室培养---及---平板培养----。
5、在通过微茎尖培养脱毒时，外植体的大小应以成苗率和脱毒率综合确定，一般以
__0.3—0.5___mm、带__1—2__个叶原基为好。
6、植物组织培养按培养过程中是否需要光，可分为___光___培养和___暗__培养。
7、细胞的再分化有----器官发生---和---体胚发生----两种形式。
8、连续培养有----浊度恒定法----和----化学恒定法----两种方法。
9、通过茎尖培养脱毒苗的过程中，切取茎尖的大小与其成活率成__正比__，而与脱毒效果成_反比__。
10、一个已停止分裂的成熟细胞转变为_____未分化_____状态，并形成__未分化的愈伤组织___的现象称为"
脱分化"
。
11、植物的胚胎培养，包括____胚__培养、___胚乳____培养、____胚珠___培养、子房培养以及离体授粉的。
12、在组织培养中，IAA、ZT和GA必须用____过滤灭菌__法灭菌，而接种室空间采用___紫外线照射_或__甲醛熏蒸__法灭菌。
13、幼胚培养时，其发育过程有____早熟萌发__、__呸性发育____、___形成愈伤___三种方式。
14、原生质体的分离有___机械法___和__酶降解法____两种方法。
15、茎尖培养根据培养目的和取材大小可分为_普通茎尖培养__培养和__茎尖分生组织__培养两种类型。
16、花药培养是___器官__培养，花粉培养属于__细胞___培养，但二者的培养目的一样，都是要诱导花粉细胞发育成单倍体细胞，最后发育成_单倍体植株_。
17、不同的灭菌剂其灭菌的机理一般不一样，次氯酸钙和次氯酸钠都是利用分解产生
___ClO-_______来杀菌的；
升汞是靠__重金属________来达到灭菌目的。
18、一个已停止分裂的成熟细胞转变为__分生__状态，并形成_未分化的愈伤组织__的现象称为"
19、White培养基___无机盐____浓度低，适合生根培养。
20、在无毒苗的组织培养中，外植体的大小与其成活率成_____正比_____，而与脱毒效果成____反比_____。
21、由胚乳培养可以获得___单___倍体植株，经秋水仙素处理可以获得___二_倍体植株。
22、使单倍体植株染色体加倍的途径主要有---自然加倍--、----人工加倍----和---通过愈伤组织再生加倍。
23、细胞悬浮培养有----成批培养---和----连续培养------两种类型。
24、通过植物组织培养获得无病毒苗的方法主要有----茎尖分生组织培养---、---愈伤组织培养-----、---珠心胚培养----及----花药培养----。
25、植物组织培养按培养对象分为-----器官培养----、---组织或愈伤组织培养-----、----细胞培养-----、------植株培养----_等几种类型。
26、1902年德国植物生理学家Haberlandt第一次提出植物细胞全能性的理论概念；
1943
年White提出植物细胞“__全能性___”学说，并出版了《植物组织培养手册》，从而使植
物组织培养成为一门新兴的学科。
27、细胞全能性是指植物的每个细胞都具有该植物的---全部遗传信息-----_和---发育成完整植株---的潜在的能力。
28、6-BA/NAA的高低决定了外植体的发育方向，比值低时促进___根____的生长，这
时___脱分化____占主导地位；
比值高促进____芽____的生长，这时___再分化_____占主导地位。
29、在组织培养中，不耐热的物质用___过滤灭菌__法灭菌，而培养基常用_湿热灭菌_法灭菌。
30、组织培养中有三大不易解决的问题，它们分别是__污染____、____褐变____、__玻璃化_。
31、愈伤组织的形态发生有_器官形态建成_和_胚形态建成__两种情况。
33、在组织培养中，IAA和GA必须用____过滤____法灭菌，而接种室空间采用_70%的酒精_或_2%新洁尔灭喷雾或甲醛熏蒸__法灭菌。
36、根据培养的材料，植物组织培养分：
___愈伤组织培养__、
___器官培养__、
__细胞培养___、
__原生质培养___
等类型。
37、组织培养植株再生的途径：
__直接产生不定芽___和_通过愈伤组织形成不定芽____。
38、植物组织培养的发展分为三个阶段：
___萌芽阶段__、__奠基阶段___和_快速发展和应用阶段____阶段。
40、外植体污染原因从病源分面主要有
真菌
和
细菌
两大类
41、糖在植物组织培养中是不可缺少的，它不但作为离体组织赖以生长的
碳源
，而且还能维持
培养基渗透压
42、外植体灭菌一般先用
酒精
，再用
升汞
浸泡
43、由愈伤组织后成大致经历诱导期、分裂期、分化期、三个时期。
由愈伤组织再生植株有两条途径
45、常用的生长素有
IAA
、
2，4-D
、IBANAA
等，常用的细胞分裂素
KT
ZT
6-BA
46、防褐变的措施：
选取适宜的外植体和培养条件
剪切时尽量减少伤口面积
剪切口尽量平整
连续转移（继代培养）
加入抗氧化剂
47、植物常用脱毒方法：
热处理脱毒原理
茎尖培养脱毒原理
化学药剂处理
冷处理原理
原生质体，愈伤组织培养法、花药培养、株心胚培养脱毒
48、实验室必须满足三个基本的需要：
___试验准备__、___无菌操作__、__控制培养___。
49植物组织培养的难题是褐变、玻璃化和污染及变异现象
50植物组培获得单倍体植株的方法是进行,而获得三倍体的方法是进行
52、生长素与细胞分裂素比值高有利根生长，比值低有利芽生长，比例合适诱导愈伤组织
53、植物组织培养按培养基的物理状态分为__固体_____培养和____液体___培养半固体培养基
四、判断题（对的画“√”；
错题画“×
”。
每题1分，共5分）
１、2，4—D可用0．1mol／L的HCl助溶，再加蒸馏水定容。
（x）
２、幼年细胞和组织比成年细胞和组织诱导愈伤组织容易。
（√）
３、在MS的培养基成分中，MgSO4·
7HO属于微量元素。
（x）
4、一般来说，光照强度较强，幼苗容易徒长，光照强度较弱幼苗生长粗壮。
５、由性细胞发育而成的胚叫做胚状体，而由体细胞发育而成的胚叫做合子胚。
6、一个已分化的细胞若要表现其全能性，首先要经历脱分化过。
7、由性细胞发育而成的胚叫做胚状体，而由体细胞发育而成的胚叫做合子胚。
8、用于外植体、手、超净台等的表面消毒酒精浓度越大，消毒效果越好越好。
9、经过花药培养所获得的植株都是单倍体。
10、幼嫩的组织比成熟的老组织脱分化难。
11、通过子房的培养，即可能等到单倍体植株，也有可能得到二倍体植株。
12、兰花可以通过芽丛分离的组培途径快繁，非洲菊通过原球茎增殖的途径快繁。
13、单细胞培养可以采用发酵罐进行培养。
１4、6-BA可用0.1mol／L的HCl助溶，再加蒸馏水定容。
（√）
15、环境的相对湿度过低易使培养基丧失大量水分，湿度过高时，则易造成污染。
16、一个已分化的细胞若要表现其全能性，首先要经历脱分化过程。
17、环境的相对湿度可以影响培养基的水分蒸发，一般要求80％-90％的相对湿度。
18、通过花药培养，即可能等到单倍体植株，也有可能得到二倍体、三倍体甚至更多倍体植株。
19、单体细胞比二倍倍体细胞容易诱导愈伤组织。
（x）
20、固体培养基可加进活性炭来增加通气度，以利于发根。
21、2，4-D可用0．1mol／L的NaOH或KOH助溶，而后加无菌水定容。
22．某些植物通过愈伤组织培养可以获得无病毒苗（√）
23．细胞分裂素/生长素的比值较高时，利于愈伤组织和芽的诱导X
24．细胞的全能性，可以通过成熟细胞的脱分化和再分化过程体现√
25．铁盐，常用乙二胺四乙酸铁螯合物，以防被氧化为不溶的氢氧化铁.√
26.用茎尖分生组织脱毒培养时，茎尖外植体大小与脱毒效果成反比。
X
30对于含有琼脂糖的培养基而言，在pH值高于6.5时，培养基不能很好地凝固；
低于5.0时，培养基会变硬.X
31由性细胞发育而成的胚叫做胚状体，而由体细胞发育而成的胚叫做合子胚X
五、简答题（每题5分，共15分）
1、培养基一般包括哪些基本成分?
答：
培养基的成份有：
（1）无机营养：
包括：
氧（O）、碳（C）、氢（H）、氮（N）、钾（K）、磷（P）、镁（Mg）、硫（S）和钙（Ca）等大量元素；
铁（Fe）、铜（Cu）、锌（Zn）、锰（Mn）、钼（Mo）、硼（B）、碘（I）、钴（Co）、氯（Cl）、钠（Na）等微量元素
（2）有机营养：
氨基酸、天然提取物、维生素、糖类（3）植物生长调节物质：
主要包括生长素类和细胞分裂素类。
（4）其他：
包括水、活性炭、琼脂等。
2、培养基、培养器皿和植物材料通常怎样灭菌?
培养基一般采用湿热灭菌，如果培养基中的有些成分高温易分解，则可采用过滤灭菌.培养器皿可采用湿热灭菌或干热灭菌。
植物材料一般采用药剂浸泡灭菌，具体操作如下：
（1）外植体的预处理，对植物组织进行修整，去掉不需要的部分，并将外植体用流水冲洗干净。
（2）用70%的酒精浸润材料30s左右。
（3）用灭菌剂浸泡灭菌，灭菌时不时搅动，使植物材料与灭菌剂有良好的接触，若灭菌
过程中加入数滴吐温，则灭菌效果更好。
（4）植物材料用无菌水冲洗3--5次，以除去灭菌剂。
3、提高商品化生产效率：
1.节约能源2.减少劳务开支3.扩大生产规模4.节约生产材料补：
降低商业化生产成本提高经济效益：
4、针对试管苗生产所需的费用，应采取相应措施降低生产成本，增强产品竞争力，提高试管苗经济效益。
5、诱导体胚的条件:
1．外植体：
①产生部位：
尤其胚、下胚轴、幼根、花序轴组织、未成熟的子房等；
②生理状态：
采用外植体增殖能力较强时候的状态；
③基因型。
2.培养基：
特别重要的是培养基中的生长素和N源。
N源：
还原态氮/硝态氮适宜比值。
3.生长调节剂：
①生长素：
所有生长素中，2,4-D被证明是极有效的。
体胚发生2个阶段：
胚的分化，胚性细胞的形成（需2,4-D）；
胚状体的发育（低或去除2,4-D）。
2,4-D会诱导乙烯的产生，导致纤维素酶等活性升高，引起胚性细胞团的破坏。
②细胞分裂素：
细胞分裂素与生长素配合促进诱导体胚形成。
③赤霉素和脱落酸：
GA、ABA抑制体胚形成，但ABA可促进胚状体的正常发育，防止畸形胚的产生，尤其是对体胚成熟特别重要。
细胞再分化：
是指脱分化的分生细胞重新恢复分省能力，沿着正常的发育途径形成具有特定结构和功能的细胞。
6、组培实验室的组成，基本设备和功能
组织培养实验室基本组成：
（1）无菌操作室
（2）化学实验室（3）培养室（4）细胞学观察室（5）暗室（6）驯化移栽室；
无菌操作室基本设备有超净工作台、紫外灯、小搁架。
无菌操作用的器具，主要进行无菌操作；
化学实验室基本设备有干燥箱、电子天平、量筒、吸管、烧杯、高压灭菌装置等，主要用于配置好培养基；
培养室设备有固定式培养架、旋转式培养架、转床、摇床、控温、控光设备，是将接种到试管等的培养材料进行培养生长的场所。
细胞学观察室有显微镜、解剖镜、及照相设备，用于观察，记录培养材料的生长情况及结果；
暗室用于实验室材料的摄影记录，有
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