医院检验中心DiaMedIDMicroTypingSystem达亚美微量定型系统操作规程Word格式文档下载.docx
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2、特点:
1)结果清楚明确。
凝聚在上层为阳性,沉积在下层为阴性,血型配血结果清晰明了,结果易判定。
2)结果稳定,可保存,可拍照,可存入计算机。
可复检。
3)操作简明。
凝胶卡中已有抗血清,加入样本细胞即可定型。
a)避免因忘加抗血清引起的错误。
4)一卡六管,减少标记,减少错误发生环节。
利于正定反定对比。
5)简化了操作程序,减少接触玻璃用品,提高了操作安全性。
6)达亚美凝胶测试抗人球配血可检出不完全抗体,避免了ABO以外血型抗体引起的输血溶血。
同时达亚美卡不存在抗人球被中和问题,避免了费时费力的洗涤过程和假阴性。
7)达亚美的抗体筛查可检出临床意义抗体,避免了盲目的配血,提高了安全输血水平。
8)样本用量少。
有利于新生儿及少血液量样本的检测。
9)结果重现性好。
血型配血操作可实现标准化。
10)血型配血可自动化。
11)达亚美产品齐全。
用途广泛。
3、注意事项:
(1)血型鉴定
1)每日实验前,先取出小瓶2号稀释液及标准细胞,放置一段时间至室温,以防冷凝集。
2)必须标记卡。
3)DiaMed卡封口已损坏时,管中干涸,或有气泡时,卡不可使用。
4)用2号稀释液保证反应结果可靠,细胞浓度要在5%左右,不可太浓太稀。
5)纤维蛋白可吸附部分红细胞,呈假阳性。
应将血样离心。
6)反定管先加样,以便标准细胞与血清血浆反应。
7)正反定型对照,确定结果及A亚型。
正定型结果若为弱阳性,应怀疑为ABO亚型,可重做完全测试。
正反结果不符时,请设计实验分析。
8)质控(Ctl)为阳性时,请先用生理盐水洗细胞,再做血型。
9)严格按标准程序操作可检出弱抗原,血型亚型。
10)某些药物、疾病可导致弱阳性及正反定型不符。
11)细菌及异常血清蛋白可影响结果。
(2)注意事项:
(交叉配血)
4)必须用2号稀释液保证反应结果可靠,细胞浓度要在0.8%左右,不可太浓太稀。
6)液体应加至卡反应室中。
7)严格按标准程序操作可检出弱抗原抗体反应,弱凝集。
8)某些药物、疾病可导致血液不配合。
9)细菌及异常血清蛋白可影响结果。
4、异常情况分析
1)假阳性发生原因分析:
①干卡;
②过期卡;
③密封不严;
④胶中气泡⑤直接抗球蛋白实验DAT阳性;
⑥凝聚性细胞;
⑦酶引起自身凝聚⑧抗血清交叉污染,加样器问题⑨细胞悬液不正常;
⑩Rouleaux多细胞排列(先细胞重做)Wharton’sJelly
2)疑难结果:
①离心机问题;
②凝胶在反应腔内。
3)假阴性:
①没加血浆血清;
②量相差太大;
③抗体失活,病人抗体极低或无抗体病;
④弱/无凝集素;
⑤弱/无抗原;
⑥细胞污染、失效。
4)双细胞样本:
①输血后样本;
②BMT骨髓移植后样本;
③大量胎儿母亲出血症;
④亚型A3、Am等;
⑤Chimerism嵌合体;
⑥样本污染;
⑦纤维蛋白;
⑧弱化抗原(白血病、新生儿、高龄老人)
1:
⑤⑦⑩温生理盐水洗涤后,用卡重做。
2:
①请与销售人员联系,检查离心机。
②离心可使凝胶复位。
卡应正立放置。
3:
③新鲜样本可避免此现象。
④⑤参阅病历分析。
可能因病理、治疗及年龄原因发生无抗体弱抗体,及弱/无抗原,亚型也可引起弱反应结果。
5)多发性骨髓瘤,慢性髓白血病,淋巴瘤可发生正反定型不符,可在5分钟37℃反应后反定型
5、ABO正反定型和抗-D
1)准备样本。
A1,B细胞室温平衡。
标记达亚美DiaMedID卡。
2)50ulA1,B细胞(0.8%)加入A1,B管中。
50ul血清或血浆加入A1,B管中。
3)样本压积红细胞25ul或50ml全血悬浮于0.5ml2号稀释液(Dil2)溶液中,得到5%样本红细胞。
4)10ul5%样本红细胞加入A,B,D,Ctl管中。
5)离心10分钟。
6)读结果。
7)记录。
6、交叉配血
2)10ul样本压积红细胞悬浮于1ml2号稀释液(Dil2)溶液中,得到0.8%样本红细胞。
3)1号管中(主侧)加入50ul0.8%献血者细胞。
25ul受血者血浆、血清。
4)2号管中(次侧)加入50ul0.8%受血者细胞。
25ul献血者血浆、血清。
5)37℃15分钟。
6)离心10分钟。
7)读结果。
8)记录。
7、抗体筛查
抗体筛查Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ细胞室温平衡。
2)标记达亚美DiaMedID卡。
姓名,病历号。
Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ。
3)抗体筛查Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ细胞各50ul(0.8%)
4)25ul待检样本血浆或血清。
8、BO血型基础
血型
抗原
与抗血清反应
与A1,B细胞反应
抗-A
抗-B
抗-A,抗-B
A1
B
A
反应
--
AB
O
H
抗-A1
抗-H
++++
-
A2
+++
++/+++
1)Rh血型
2)主要抗原:
C,c,E,e,D。
Cde=R1cde=rCDE=R2CcDdee=R1r与抗-D阳性反应的红细胞为Rh+
3)不完全抗体筛查
4)ABO系统抗体以外其他血型抗体可通过抗体筛查来检查。
用O型细胞可检查血浆、血清样本有无其他血型抗体。
5)交叉配血
6)用交叉配血方法可考察细胞与血清血浆的相容性。
不完全抗体可引起输血反应,而传统配血方法不能检出不完全抗体.传统抗人球配血可检出不完全抗体,但操作复杂.
下列情况建议做抗体筛查
1)需大量输血病人
2)反复输血病人
3)血色素很低,红细胞压积比例低,严重贫血病人。
4)有溶血症状病人。