医院检验中心DiaMedIDMicroTypingSystem达亚美微量定型系统操作规程Word格式文档下载.docx

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2、特点:

1)结果清楚明确。

凝聚在上层为阳性,沉积在下层为阴性,血型配血结果清晰明了,结果易判定。

2)结果稳定,可保存,可拍照,可存入计算机。

可复检。

3)操作简明。

凝胶卡中已有抗血清,加入样本细胞即可定型。

a)避免因忘加抗血清引起的错误。

4)一卡六管,减少标记,减少错误发生环节。

利于正定反定对比。

5)简化了操作程序,减少接触玻璃用品,提高了操作安全性。

6)达亚美凝胶测试抗人球配血可检出不完全抗体,避免了ABO以外血型抗体引起的输血溶血。

同时达亚美卡不存在抗人球被中和问题,避免了费时费力的洗涤过程和假阴性。

7)达亚美的抗体筛查可检出临床意义抗体,避免了盲目的配血,提高了安全输血水平。

8)样本用量少。

有利于新生儿及少血液量样本的检测。

9)结果重现性好。

血型配血操作可实现标准化。

10)血型配血可自动化。

11)达亚美产品齐全。

用途广泛。

3、注意事项:

(1)血型鉴定

1)每日实验前,先取出小瓶2号稀释液及标准细胞,放置一段时间至室温,以防冷凝集。

2)必须标记卡。

3)DiaMed卡封口已损坏时,管中干涸,或有气泡时,卡不可使用。

4)用2号稀释液保证反应结果可靠,细胞浓度要在5%左右,不可太浓太稀。

5)纤维蛋白可吸附部分红细胞,呈假阳性。

应将血样离心。

6)反定管先加样,以便标准细胞与血清血浆反应。

7)正反定型对照,确定结果及A亚型。

正定型结果若为弱阳性,应怀疑为ABO亚型,可重做完全测试。

正反结果不符时,请设计实验分析。

8)质控(Ctl)为阳性时,请先用生理盐水洗细胞,再做血型。

9)严格按标准程序操作可检出弱抗原,血型亚型。

10)某些药物、疾病可导致弱阳性及正反定型不符。

11)细菌及异常血清蛋白可影响结果。

(2)注意事项:

(交叉配血)

4)必须用2号稀释液保证反应结果可靠,细胞浓度要在0.8%左右,不可太浓太稀。

6)液体应加至卡反应室中。

7)严格按标准程序操作可检出弱抗原抗体反应,弱凝集。

8)某些药物、疾病可导致血液不配合。

9)细菌及异常血清蛋白可影响结果。

4、异常情况分析

1)假阳性发生原因分析:

①干卡;

②过期卡;

③密封不严;

④胶中气泡⑤直接抗球蛋白实验DAT阳性;

⑥凝聚性细胞;

⑦酶引起自身凝聚⑧抗血清交叉污染,加样器问题⑨细胞悬液不正常;

⑩Rouleaux多细胞排列(先细胞重做)Wharton’sJelly

2)疑难结果:

①离心机问题;

②凝胶在反应腔内。

3)假阴性:

①没加血浆血清;

②量相差太大;

③抗体失活,病人抗体极低或无抗体病;

④弱/无凝集素;

⑤弱/无抗原;

⑥细胞污染、失效。

4)双细胞样本:

①输血后样本;

②BMT骨髓移植后样本;

③大量胎儿母亲出血症;

④亚型A3、Am等;

⑤Chimerism嵌合体;

⑥样本污染;

⑦纤维蛋白;

⑧弱化抗原(白血病、新生儿、高龄老人)

1:

⑤⑦⑩温生理盐水洗涤后,用卡重做。

2:

①请与销售人员联系,检查离心机。

②离心可使凝胶复位。

卡应正立放置。

3:

③新鲜样本可避免此现象。

④⑤参阅病历分析。

可能因病理、治疗及年龄原因发生无抗体弱抗体,及弱/无抗原,亚型也可引起弱反应结果。

5)多发性骨髓瘤,慢性髓白血病,淋巴瘤可发生正反定型不符,可在5分钟37℃反应后反定型

5、ABO正反定型和抗-D

1)准备样本。

A1,B细胞室温平衡。

标记达亚美DiaMedID卡。

2)50ulA1,B细胞(0.8%)加入A1,B管中。

50ul血清或血浆加入A1,B管中。

3)样本压积红细胞25ul或50ml全血悬浮于0.5ml2号稀释液(Dil2)溶液中,得到5%样本红细胞。

4)10ul5%样本红细胞加入A,B,D,Ctl管中。

5)离心10分钟。

6)读结果。

7)记录。

6、交叉配血

2)10ul样本压积红细胞悬浮于1ml2号稀释液(Dil2)溶液中,得到0.8%样本红细胞。

3)1号管中(主侧)加入50ul0.8%献血者细胞。

25ul受血者血浆、血清。

4)2号管中(次侧)加入50ul0.8%受血者细胞。

25ul献血者血浆、血清。

5)37℃15分钟。

6)离心10分钟。

7)读结果。

8)记录。

7、抗体筛查

抗体筛查Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ细胞室温平衡。

2)标记达亚美DiaMedID卡。

姓名,病历号。

Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ。

3)抗体筛查Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ细胞各50ul(0.8%)

4)25ul待检样本血浆或血清。

8、BO血型基础

血型

抗原

与抗血清反应

与A1,B细胞反应

抗-A

抗-B

抗-A,抗-B

A1

B

A

反应

--

AB

O

H

抗-A1

抗-H

++++

-

A2

+++

++/+++

1)Rh血型

2)主要抗原:

C,c,E,e,D。

Cde=R1cde=rCDE=R2CcDdee=R1r与抗-D阳性反应的红细胞为Rh+

3)不完全抗体筛查

4)ABO系统抗体以外其他血型抗体可通过抗体筛查来检查。

用O型细胞可检查血浆、血清样本有无其他血型抗体。

5)交叉配血

6)用交叉配血方法可考察细胞与血清血浆的相容性。

不完全抗体可引起输血反应,而传统配血方法不能检出不完全抗体.传统抗人球配血可检出不完全抗体,但操作复杂.

下列情况建议做抗体筛查

1)需大量输血病人

2)反复输血病人

3)血色素很低,红细胞压积比例低,严重贫血病人。

4)有溶血症状病人。

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