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提供CO2;

⑤NaCl:

配制生理盐水及其他不同浓度的盐溶液，可用于测定动物细胞内液浓度或用于提取DNA；

⑥酒精：

用于消毒处理、提纯DNA、叶片脱色及配制解离液；

⑦蔗糖：

配制蔗糖溶液,用于测定植物细胞液浓度或观察质壁分离和复原。

3．高中生物实验方法汇总

（1）制作DNA分子双螺旋结构模型—-构建物理模型法

（2）种群数量增长模型——构建数学模型法

（3）分离各种细胞器——差速离心法

（4）证明DNA进行半保留复制——密度梯度离心法

（5）分离叶绿体中的色素——纸层析法

（6）观察根尖分生组织细胞的有丝分裂—-死体染色法

（7）观察线粒体-—活体染色法

（8）探究酵母菌的呼吸方式—-对比实验法和产物检测法

（9）赫尔希和蔡斯的噬菌体侵染细菌的实验—-同位素标记法

（10）摩尔根证明基因在染色体上——假说—演绎法

（11）萨顿提出“基因位于染色体上"

的假说-—类比推理法

（12）调查土壤中小动物类群的丰富度-—取样器取样法

（13）估算种群密度（运动能力强的生物）——标志重捕法

（14）估算种群密度（运动能力弱的生物）——样方法

4．快速检验细胞内物质、产物或结构的检测方法（指示剂）

①淀粉:

碘液；

②还原糖:

斐林试剂、班氏试剂、本尼迪特试剂；

③CO2：

Ca（OH）2溶液、酸碱指示剂、溴麝香草酚蓝水溶液;

④乳酸:

pH试纸;

⑤有O2：

余烬木条复燃；

无O2:

火焰熄灭；

⑥脂肪:

苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ染液；

⑦蛋白质：

双缩脲试剂；

⑧染色体：

龙胆紫、醋酸洋红溶液；

⑨DNA：

甲基绿；

RNA:

吡罗红;

⑩线粒体：

健那绿。

⑪酒精：

酸性条件下的重铬酸钾溶液。

5.实验结果的显示方法

①光合速率：

O2释放量、CO2吸收量或淀粉产生量;

②呼吸速率：

O2吸收量、CO2释放量或淀粉减少量；

③原子转移途径：

放射性同位素示踪法；

④细胞液浓度大小：

质壁分离；

⑤细胞是否死亡：

质壁分离、亚甲基蓝溶液染色；

⑥甲状腺激素作用:

动物耗氧量、发育速度等;

⑦生长激素作用：

生长速度（体重变化、身高变化）;

⑧胰岛素作用:

动物活动状态。

6．实验条件的控制方法

①增加水中氧气：

泵入空气或吹气或放入绿色植物；

②减少水中氧气：

容器密封或油膜覆盖或用凉开水；

③除去容器中CO2:

密闭实验装置中放入NaOH溶液或KOH溶液；

④除去叶片中原有淀粉：

置于黑暗环境一昼夜；

⑤除去叶片中叶绿素：

酒精加热。

⑥避免光合作用对呼吸作用的干扰：

给植株遮光；

7．实验中控制温度的方法

①还原糖鉴定:

水浴加热煮沸；

②酶促反应：

水浴保温（最适温度或实验给定温度）；

③用酒精溶解叶中的叶绿体色素：

酒精要隔水加热；

④二苯胺试剂鉴定DNA：

水浴煮沸加热；

⑤细胞和组织培养以及微生物培养:

恒温培养。

（四）调查类实验

　一般程序:

确定课题和实验方案―→实施计划―→结果分析―→结论―→建议。

实验名称

调查对象

调查方法

统计方法（计算公式）

种群密度的取样调查

动物

标志

重捕法

＝

植物

样方法

调查人群

中遗传病

人类某种

遗传病

汇总法

发病率＝

×

100%

土壤中小动物类群

丰富度的研究

土壤中的

小动物

取样器

取样法

记名计算法、目测估计法

教材中各类型实验归纳

1。

观察类实验

细胞的状态

染色剂

生物材料

观察DNA、RNA在细胞中的分布

死细胞

甲基绿、

吡罗红

人的口腔

上皮细胞

观察线粒体

活细胞

健那绿

观察细胞的

减数分裂

无（为固

定装片）

蝗虫精母细胞

低温诱导植物染色体数目的变化

改良苯酚

品红染液

洋葱根尖细胞

观察细胞的有丝分裂

龙胆紫（或

醋酸洋红）

观察多种多样的细胞

活或

无（无需

染色）

酵母菌细胞、水绵细胞、叶的保卫细胞、鱼的红细胞等

观察叶绿体

藓类的叶（或菠菜叶、黑藻叶）

观察植物细胞的质壁分离与复原

紫色洋葱鳞片叶表皮细胞

2。

鉴定类实验归类比较

鉴定对象

试剂

颜色

备注

淀粉的鉴定

淀粉

碘液

蓝色

脱色的叶片

无

还原糖的鉴定

还原糖

斐林试剂

砖红色

沉淀

苹果或梨的匀浆等

甲乙液现配现用、水浴加热

脂肪的鉴定

脂肪

苏丹Ⅲ（或Ⅳ）染液

橘黄（或

红）色

花生种子切片

需用高倍镜观察

蛋白质的鉴定

蛋白质

双缩脲试剂

紫色

豆浆、稀蛋清等

先加A液,摇匀后加B液，摇匀

尿糖的检测

葡萄糖

试纸

有色

水、葡萄糖溶液、三份模拟“尿样”

绿叶中色素的提取和分离

四种色素

提取液：

无水乙醇；

分离液：

胡萝卜素：

橙黄色；

叶黄素：

黄色;

叶绿素a：

蓝绿色；

叶绿素b：

黄绿色

新鲜的绿叶（如菠菜叶）

加入二氧化硅是为了研磨得更充分；

碳酸钙可防止研磨中色素被破坏

教材中实验：

实验一：

使用高倍显微镜观察几种细胞（必修一P7-8）

一、实验目的：

1、学会如何使用显微镜观察细胞；

2、了解细胞的结构;

3、学会制作临时装片。

二、实验材料：

（实验材料可换）松针、动物血液、动物神经细胞永久装片

三、实验用具：

载玻片、盖玻片、蒸馏水、滴管、镊子、土豆、刀片、显微镜（物镜5X、10X、40X）

四、方法步骤：

1、制作松针的临时切片：

（1）取干净的载玻片一个平置于试验台上，用滴管在载玻片中央滴一滴蒸馏水。

（2）将土豆切成条状（截面约：

0.5X0。

5cm）取两条,将一根松针夹在两个土豆条之间，用刀片削成尽量薄的薄片，削时，手腕不动，靠大臂带动小臂移动刀片。

切片数次。

从中选取较薄的切片，置于载玻片的水滴上。

（3）从一侧轻轻盖上盖玻片，不要产生气泡。

用吸水纸轻轻吸去盖玻片周围的水滴，即完成临时切片的制作.

2、观察切片：

（1）取出显微镜，置于试验台上靠左的位置，打开光源。

（2）将上步制作好的切片置于显微镜的载物台上,调整载物台位置，使盖玻片对准光源.

（3）使用5X物镜观察切片，使松针切片在视野中心，换成10X物镜，观察松针叶面横切结构.

（4）换成40X物镜观察,注意细胞及细胞内物质结构，画图.

3、动物血液临时装片的制作及观察（除了不用切片，其他类似）

4、动物神经细胞永久装片的观察。

五、考点提示：

1、松针的叶面结构是什么样的？

2、动物细胞的结构是什么样的？

与植物细胞又什么不同?

3、显微镜的物镜倍数愈大，视野的亮度如何?

物体的大小如何？

4、如何调节焦距？

5、如何才能使切片尽量的薄？

切片的厚薄对显微镜下观察的效果有什么影响。

实验二：

检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质（必修一P18）

一、实验目的:

尝试用化学试剂检测生物组织中糖类、脂肪和蛋白质，阐明实验原理-颜色反应，识记和区分用于可溶性还原糖、脂肪、蛋白质鉴定的试剂及产生的特定颜色，初步掌握鉴定上述化合物的基本方法，学会描述实验现象，掌握NaOH溶液和CuSO4溶液的使用方法。

二、实验原理：

某些化学试剂能使生物组织中的有关有机化合物，产生特定的颜色反应。

1、生物组织中普遍存在的可溶性糖类较多，有葡萄糖、果糖、麦芽糖和蔗糖。

前三种糖的分子内都含有游离的具还原性的半缩醛羟基,因此叫做还原糖；

蔗糖分子内没有,为非还原糖.实验中所用的斐林试剂，只能鉴定生物组织中可溶性还原糖，而不能鉴定可溶性非还原糖。

可溶性还原糖（如葡萄糖、果糖、麦芽糖）与斐林试剂发生作用，可生成砖红色的Cu2O沉淀。

如：

葡萄糖+2Cu2++4OH— 

加热 

葡萄糖酸+Cu2O↓（砖红色）+H2O

即Cu2+被还原成Cu2O，葡萄糖被氧化成葡萄糖酸.

用斐林试剂鉴定还原糖时，溶液变化过程为：

浅蓝色→棕色→砖红色沉淀

淀粉遇碘变蓝色（直链）或紫（红）色（支链）.

2、脂肪和类脂（磷脂、糖脂、固醇脂等）统称为脂类。

它是构成人体组织的正常成分,不溶于水而易溶于酒精、乙醚、氯仿等脂溶剂中。

在化学组成上，脂类属于脂肪酸的酯或与这些酯有关的物质。

脂类的主要功能是氧化供能。

脂肪主要存积于脂肪组织中,并以油滴状的微粒存在脂肪细胞浆内。

在病理检验中，脂类染色法最常用以证明脂肪变性,脂肪栓子以及肿瘤的鉴别。

脂类染色使用最广泛的染料是苏丹染料，最常用的有苏丹Ⅲ，苏丹Ⅳ，苏丹黑及油红O等。

脂肪被染色，实际上是苏丹染料被脂肪溶解吸附而呈现染料的颜色.经研究认为组织中脂质在液态或半液态时,对苏丹染料着色效果最好。

根据这一原理，适当提高温度（37℃-60℃）对组织切片染色效果是有好处的。

脂类染色，用冰冻或石蜡切片,以水溶性封固剂封固，如甘油、明胶和阿拉伯糖胶等。

脂肪可以被苏丹Ⅲ染液染成橘黄色或橙红色（或被苏丹Ⅳ染液染成红色），胆脂素呈淡红色，脂肪酸不着色，细胞核呈蓝色。

3、蛋白质与双缩脲试剂发生作用,产生紫色反应。

（蛋白质分子中含有很多肽键,在碱性NaOH溶液中能与双缩脲试剂中的Cu2+作用，产生紫色反应。

）

三、实验材料:

1、做可溶性还原性糖鉴定实验，应选含糖高,颜色为白色的植物组织，如苹果、梨.（因为组织的颜色较浅，易于观察.）经试验比较，颜色反应的明显程度依次为苹果、梨、白色甘蓝叶、白萝卜。

2、做脂肪的鉴定实验。

应选富含脂肪的种子,以花生种子为最好，实验前一般要浸泡3～4小时（也可用蓖麻种子）.

3、做蛋白质的鉴定实验，可用富含蛋白质的黄豆或鸡蛋清。

4、淀粉的鉴定：

马铃薯匀浆。

四、实验用具：

双面刀片、试管（最好用刻度试管）、试管夹、试管架、大小烧杯、小量筒、滴管、酒精灯、三脚架、石棉网、火柴、载玻片、盖玻片、毛笔、吸水纸、显微镜

五、实验试剂：

1．斐林试剂（包括甲液:

质量浓度为0.1g/mLNaOH溶液和乙液：

质量浓度为0。

05g/mLCuSO4溶液）

2．苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ染液

3．双缩脲试剂（包括A液：

质量浓度为0.1g/mLNaOH溶液和B液：

01g/mLCuSO4溶液）

4．体积分数为50％的酒精溶液

5．碘液

6．蒸馏水

六、方法步骤：

一、可溶性糖的鉴定

操作方法

注意问题

解释

制备组织样液。

（去皮、切块、研磨、过滤）

苹果或梨组织液必须临时制备.

因苹果多酚氧化酶含量高，组织液很易被氧化成褐色，将产生的颜色掩盖.

取1支试管，向试管内注入2mL组织样液。

3.向试管内注入1mL新制的斐林试剂,振荡。

应将组成斐林试剂的甲液、乙液分别配制、储存,使用前才将甲、乙液等量混匀成斐林试剂；

切勿将甲液、乙液分别加入苹果组织样液中进行检测。

斐林试剂很不稳定，甲、乙液混合保存时，生成的Cu（OH）2在70~900C下分解成黑色CuO和水;

甲、乙液分别加入时可能会与组织样液发生反应，无CuOH生成.

4。

试管放在盛有50—650C温水的大烧杯中，加热约2分钟，观察到溶液颜色：

浅蓝色→棕色→砖红色（沉淀）

最好用试管夹夹住试管上部，使试管底部不触及烧杯底部，试管口不朝向实验者.

也可用酒精灯对试管直接加热.

防止试管内的溶液冲出试管，造成烫伤;

缩短实验时间。

二、脂肪的鉴定

花生种子浸泡、去皮、切下一些子叶薄片，将薄片放在载玻片的水滴中，用吸水纸吸去装片中的水。

干种子要浸泡3～4小时，新花生的浸泡时间可缩短.

因为浸泡时间短,不易切片；

浸泡时间过长，组织较软,切片不易成形.切片要尽可能薄些，便于观察.

在子叶薄片上滴2～3滴苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ染液，染色1分钟。

染色时间不宜过长。

用吸水纸吸去薄片周围染液，用50％酒精洗去浮色，吸去酒精。

酒精用于洗去浮色，不洗去浮色,会影响对橘黄色脂肪滴的观察.同时，酒精是脂溶性溶剂，可将花生细胞中的脂肪颗粒溶解成油滴.

用吸水纸吸去薄片周围酒精，滴上1~2滴蒸馏水,盖上盖玻片.

滴上清水可防止盖盖玻片时产生气泡。

低倍镜下找到花生子叶薄片的最薄处，可看到细胞中有染成橘黄色或红色圆形小颗粒.

装片不宜久放。

时间一长,油滴会溶解在乙醇中。

三、蛋白质的鉴定

制备组织样液。

（浸泡、去皮研磨、过滤.）

黄豆浸泡1至2天，容易研磨成浆，也可购新鲜豆浆以节约实验时间。

鉴定.加样液约2ml于试管中，加入双缩脲试剂A,摇匀；

再加入双缩脲试剂B液3~4滴，摇匀，溶液变紫色。

A液和B液也要分开配制，储存。

鉴定时先加A液后加B液.

CuSO4溶液不能多加。

先加NaOH溶液，为Cu2+与蛋白质反应提供一个碱性的环境。

A、B液混装或同时加入，会导致Cu2+变成Cu（OH）2沉淀,而失效。

否则CuSO4的蓝色会遮盖反应的真实颜色。

可用蛋清代替豆浆。

蛋清要先稀释。

如果稀释不够,在实验中蛋清粘在试管壁,与双缩脲试剂反应后会粘固在试管内壁上，使反应不容易彻底，并且试管也不易洗干净。

附：

淀粉的检测和观察

用试管取2ml待测组织样液，向试管内滴加2滴碘液，观察颜色变化。

碘液不要滴太多

以免影响颜色观察

七、考点提示：

1、常见还原性糖与非还原性糖有哪些？

答:

葡萄糖、果糖、麦芽糖都是还原性糖;

淀粉、蔗糖、纤维素都是非还原性糖。

2、还原性糖植物组织取材条件?

答：

含糖量较高、颜色为白色或近于白色，如：

苹果、梨、白色甘蓝叶、白萝卜等。

3、研磨中为何要加石英砂？

不加石英砂对实验有何影响?

加石英砂是为了使研磨更充分.不加石英砂会使组织样液中还原性糖减少，使鉴定时溶液颜色变化不明显。

4、斐林试剂甲、乙两液的使用方法？

混合的目的？

为何要现混现用？

混合后使用；

产生氢氧化铜；

氢氧化铜不稳定。

5、还原性糖中加入斐林试剂后，溶液颜色变化的顺序为?

浅蓝色棕色砖红色。

6、花生种子切片为何要薄？

只有很薄的切片，才能透光，而用于显微镜的观察。

7、转动细准焦螺旋时，若花生切片的细胞总有一部分清晰,另一部分模糊，其原因一般是什么？

切片的厚薄不均匀。

8、脂肪鉴定中乙醇作用？

洗去浮色。

9、双缩脲试剂A、B两液是否混合后用？

先加A液的目的怎样通过对比看颜色变化?

不能混合;

先加A液的目的是使溶液呈碱性；

先留出一些大豆组织样液做对比。

实验三：

观察DNA和RNA在细胞中的分布（必修一P26）

一、实验原理:

1、真核细胞的DNA主要分布在细胞核内，RNA主要分布在细胞质中.

2、甲基绿和吡罗红两种染色剂对DNA和RNA的亲和力不同,甲基绿对DNA亲和力强,使DNA显现出绿色，而吡罗红对RNA的亲和力强,使RNA呈现出红色。

用甲基绿、吡罗红的混合染色剂将细胞染色,可同时显示DNA和RNA在细胞中的分布。

3、盐酸的作用

①盐酸能改变细胞膜的通透性，加速染色剂的跨膜运输；

②盐酸使染色体中的DNA与蛋白质分离，便于DNA与染色剂的结合

人的口腔上皮细胞、洋葱鳞片叶表皮细胞

大小烧杯、温度计、滴管、消毒牙签、载玻片、盖玻片、铁架台、

石棉网、火柴、酒精灯、吸水纸、显微镜

1、取材

①滴：

在洁净的载玻片上滴一滴质量分数为0.9％的NaCl溶液;

②刮：

用消毒牙签在口腔内侧壁上轻轻地刮几下；

③涂：

将牙签上的碎屑涂抹在载玻片的生理盐水中；

④烘：

将涂有口腔上皮细胞的载玻片在酒精灯的火焰上烘干。

2、水解

①解：

将烘干的载玻片放入装有30ml质量分数为8％的盐酸的小烧杯中,进行材料的水解；

②保：

将小烧杯放入装有30℃温水的大烧杯中保温5分钟.

3、冲洗涂片

①冲：

用缓缓的蒸馏水冲洗载玻片10秒钟；

②吸:

用吸水纸吸去载玻片上的水分。

4、染色

①染:

用2滴吡罗红甲基绿混合染色剂滴在载玻片上，染色5分钟；

②吸：

吸去多余染色剂；

③盖:

盖上盖玻片.

5、观察

①低：

在低倍物镜下，寻找染色均匀,色泽浅的区域，移至视野中央，将物像调节清晰；

②高：

转到高倍物镜,调节细准焦螺旋，观察细胞核和细胞质的染色情况。

1、取口腔上皮细胞之前，应先漱口，以避免装片中出现太多的杂质；

2、取洋葱表皮细胞时，尽量避免材料上带有叶肉组织细胞；

3、冲洗载玻片时水的流速要尽量慢，切忌直接用水龙头冲洗；

4、用酒精灯烘烤载玻片时,不要只集中于材料处，而应将载玻片在火焰上来回移动，使载玻片均匀受热，以免破裂；

5、烘烤后的载玻片不要马上放入盛有稀盐酸的烧杯中，最好先自然冷却1分钟。

实验四：

体验制备细胞膜的方法（必修一P40）

细胞膜的流动性和半透性

猪（或牛、羊、人）的新鲜的红细胞稀释液（血液加适量的生理盐水）

蒸馏水、试管、吸水纸、载玻片、盖玻片、显微镜

四、方法步骤:

1、用试管吸取少量红细胞稀释液，滴一小滴在载玻片上，盖上盖玻片，制成临时装片

2、在高倍镜下观察，待观察清晰时，在盖玻片的一侧滴一滴蒸馏水，同时在另一侧用吸水纸小心吸引，注意不要把细胞吸跑.上述操作均在载物台上进行，并持续观察细胞的变化。

可以看到近水的部分红细胞发生变化；

凹陷消失,细胞体积增大,很快细胞破裂，内容物流出。

1、选择动物细胞进行实验的原因：

动物细胞无细胞壁。

2、选择哺乳动物成熟红细胞进行实验的原因:

人和其他哺乳动物成熟红细胞无细胞核和众多的细胞器（膜），可以得到较纯净的细胞膜。

3、细胞破裂后,用什么方法获得较纯的细胞膜：

将涨破的细胞溶液,经过离心分离得到细胞膜。

4、如何获得植物细胞膜：

先用纤维素酶和果胶酶将植物细胞壁水解得到原生质体；

再将原生质体放入清水中,水自由扩散进入,原生质体涨破;

最后经过离心分离得到植物细胞膜。

5、稀释及稀释的时候用生理盐水的原因：

稀释后，可以减少血液中的血浆蛋白等杂物。

用生理盐水是为了保持渗透压，防止在稀释的时候就发生细胞破裂.

实验五：

用高倍显微镜观察叶绿体和线粒体（必修一P47）

一、实验原理：

1、叶肉细胞中的叶绿体，呈绿色、扁平的椭球形或球形，散布于细胞质中,可以在高倍显微镜下观察它的形态。

2、线粒体普遍存在于动物细胞和植物细胞中，健那绿染液能使活细胞中的线粒体呈现蓝绿色。

通过染色，可以在高倍显微镜下观察到处于生活状态的线粒体的形态有短棒状、圆球状、线形、哑铃形等。

新鲜的藓类的叶、人的口腔上皮细胞、新配制的质量分数为1%的健那绿染液（将0.5g健那绿溶解于50mL生理盐水中，加温到30-40摄氏度,使其充分溶解）

三、实验用具:

显微镜、载玻片、盖玻片、滴管、镊子、消毒牙签

1、观察叶绿体

低倍镜下找到叶片细胞→低倍镜下找到叶片细胞→高倍镜下观察.

2、观察线粒体

染色→制片→低倍镜下找到口腔上皮细胞→高倍镜下观察。

五、考点提示:

1、观察叶绿体时选择藓类叶的原因:

藓类属于低等植物,叶片是绿色的单层细胞，不需加工即可进行观察。

2、临时装片中的材料要随时保持有水状态的原因:

保证细胞器的正常形态并能悬浮在细胞质基质中,否则，细胞失水收缩,将影响细胞器形态的观察。

实验六:

植物细胞的吸水和失水（必修一P61）

1、学会使用显微镜观察植物细胞质壁分离和复原.（与前面的知识：

显微镜的使用联系）

2、观察不同浓度的溶液对细胞吸水失水的影响，掌握此种方法的具体应用。

3、通过观察植物细胞的吸水和失水，明确渗透系统的组成以及具体应用。

1、成熟的植物细胞放到一定浓度的溶液中构成一个渗透系统。

当细胞大量失水时原生质层与细胞壁的伸缩程度不同，导致原生质层和细胞壁分离.

2、当外界溶液浓度大于细胞液浓度时，根据扩散作用原理,水分会由细胞液中渗出到外界溶液中,通过渗透作用失水;

由于细胞壁和原生质层的伸缩性不同，细胞壁伸缩性较小，而原生质层性较大，从而使二者分开;

反之,外界溶液浓度大于细胞液浓度，则细胞通过渗透作用吸水,分离后的质和壁又复原。

三、实验材料：

紫色特别深的洋葱外表皮、质量浓度为0。

3g/ml的蔗糖溶液、清水

显微镜、镊子、刀片、载玻片、盖玻片、滴管、吸水纸

五、方法步骤：

1、用刀片在洋葱鳞片叶的外表面划一个小方块，用镊子撕取这一小块洋葱表皮，在洋葱的外表皮上，用刀片划一些方块，用镊子轻轻撕取一小块（撕取的仅仅是外表皮,不要撕得太厚，仍然作为一个问题留给学生）。

在取标本时，可以将洋葱的内表皮朝外，外表皮朝里进行对折,不要太用力，然后取其外表皮作为材料，将它平展地放在载玻片中央的清水滴中，并盖上盖玻片。

2、用低倍镜观察洋葱表皮细胞中紫色的中央液泡大小，以及原生质层的位置.

3、从盖玻片的一侧滴入0.3g/ml的蔗糖溶液，在盖玻片的另一侧用吸水纸吸引。

这样重复几次，洋葱表皮细胞就侵润在蔗糖溶液中。

注意重复3—4次。

4、再用低倍镜观察洋葱表皮细胞中紫色的中央液泡大小，以及原生质层的位置。

5、从盖玻片的一侧滴入清水，在盖玻片的另一侧用吸水纸吸引