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3、维生素B6

4、维生素B2(核黄素)

5、维生素C(包被)

五、氨基酸检测----------------------------------------------------------------------------------10

1、赖氨酸硫酸盐含量的测定

2、苏氨酸的检测

3、赖氨酸

4、DL-蛋氨酸

六、抗生素测定----------------------------------------------------------------------------------12

七、氮(N)含量的测定(鱼粉)---------------------------------------------------------12

一、实验室常用溶液、试剂的配制

表一 

名称

(分子式)

比重

(g/ml)

含量

(w/w%)

近似摩尔浓度

(mol/L)

欲配溶液的摩尔浓度(mol/L)

6

3

2

1

配制1L溶液所用的ml数(或g)

盐酸(HcL)

1.18~1.19

36~38

12

500

250

167

83

硝酸(HNO3)

1.39~1.40

65~68

15

381

191

128

64

硫 

酸(H2SO4)

1.83~1.84

95~98

18

84

42

28

14

冰醋酸(Hac)

1.05

99.9

17

253

177

118

59

磷 

酸(H3PO4)

1.69

85

39

19

氨水(NH3·

0.90~0.91

400

200

134

77

氢氧化钠(NaOH)

(240)

(120)

(80)

(40)

氢氧化钾(KOH)

(339)

(170)

(113)

(56.5)

表二 

常用酸碱指示剂

指示剂

PKHIn

变色范围pH

酸色

碱色

配制方法

百里酚蓝(麝香草酚蓝)

1.65

12.~2.8

0.1%的20%乙醇溶液

甲基橙

3.4

3.1~4.4

橙黄

0.05%水溶液

溴甲酚绿

4.9

3.8~5.4

0.1%的20%乙醇溶液或者

0.1g指示剂溶于2.9ml0.05mol/LNaOH加水稀释至100ml

甲基红

5.0

4.4~6.2

0.1%的60%乙醇溶液

溴百里酚蓝(麝香草酚蓝)

7.3

6.2~7.3

中性红

7.4

6.8~8.0

黄橙

百里酚蓝(第二变色范围)

9.2

8.0~9.6

酚酞

9.4

8.0~10.0

无色

0.5%的90%乙醇溶液

百里酚酞

10.0

9.4~10.6

0.1%的90%乙醇溶液

表三 

混合酸碱指示剂

指示剂组成(体积比)

变色点pH

备注

一份0.1%甲基橙水溶液

一份0.25%靛蓝二磺酸钠水溶液

4.1

绿

灯光下可滴定

一份0.02%甲基橙水溶液

一份0.1溴甲酚绿钠盐水溶液

4.3

蓝绿

PH3.5黄色

PH4.05绿黄

PH4.3浅绿

三份0.1%溴甲酚绿20%乙醇溶液

一份0.2%甲基红60%乙醇溶液

5.1

酒红

颜色变化极鲜明

一份0.2%甲基红乙醇溶液

一份0.1%次甲基蓝乙醇溶液

5.4

红紫

PH5.2红紫

PH5.4暗蓝

PH5.6绿色

一份0.1%溴甲酚绿钠盐水溶液

一份0.1%绿酚红钠盐水溶液

6.1

黄绿

蓝紫

PH5.6蓝绿

PH5.8蓝色

PH6.0浅紫

PH6.2蓝紫

一份0.1%溴甲酚紫钠盐水溶液

一份0.1溴百里酚蓝钠盐水溶液

6.7

紫蓝

PH6.2黄紫

PH6.6紫

PH6.8蓝紫

一份0.1中性红乙醇溶液

一份0.1次甲基蓝乙醇溶液

7.0

PH7.0为蓝绿

必须保存在棕色瓶中

一份0.1甲酚红钠盐水溶液

三份0.1%百里酚蓝钠盐水溶液

8.3

PH8.2玫瑰色

PH8.4紫色

一份0.1%百里酚蓝50%乙醇溶液

三份0.1酚酞50%乙醇溶液

9.0

PH9.0绿色

表四 

基准物质

干燥温度和时间

碳酸钠(NaCO3)

500~650℃,40-50min

氯化物(NaCl)

500-650℃,干燥40-50min

草酸钠(H2C2O4)

150-200℃,1-1.5h

硝酸银(AgNO3)

室温,硫酸干燥器中至恒温

草酸(H2C2·

2H2O)

室温,空气干燥2-4h

碳酸钙(CaCO3)

120℃,干燥至恒重

硼砂(Na2B2O·

10H2O)

室温,在NaCl和蔗糖饱和液的干燥器中,4h

氧化锌(ZnO)

800℃灼烧至恒重

邻苯二甲酸氢钾(KHC6H4O4)

100-120℃干燥至恒重

锌(Zn)

室温,干燥器24h以上

重铬酸钾(K2Cr2O7)

100-110℃,干燥3-4h

氧化镁(MgO)

表五 

0.2mol/LKCl(ml)

50

0.2mol/LHCl(ml)

97.0

64.3

41.5

26.3

16.6

10.6

水(ml)

53.0

85.5

108.5

123.7

133.4

139.4

143.3

PH(20℃)

1.0

1.2

1.4

1.6

1.8

2.0

2.2

2、 

0.2mol/LKHC6H4O4(ml)

46.70

32.95

20.32

9.90

2.63

103.30

117.05

129.68

140.10

147.37

2.6

3.0

3.8

3、 

0.40

7.50

17.70

29.95

39.85

149.60

142.50

132.20

120.05

110.15

4.0

4.4

4.8

5.2

5.6

4、 

0.2mol/LHAc(ml)

185

164

126

80

0.2mol/LNaAc(ml)

36

74

120

158

181

3.6

5、 

0.2mol/LKH2PO4(ml)

0.2mol/LNaOH(ml)

3.72

8.60

17.80

29.63

39.50

45.20

146.26

141.20

120.37

110.50

104.80

5.8

6.2

6.6

7.8

6、 

0.2mol/L硼砂(ml)

90

70

60

40

10

20

30

9.35

9.48

9.66

9.94

11.04

12.32

7、 

0.2mol/LNH3·

H2O(ml)

8

32

0.2mol/LNH4Cl(ml)

8.0

8.58

9.1

9.8

10.4

11.0

8、 

常用缓冲溶液的配制

PH

配制方法

NaAc·

3H2O8g,溶于适量水中,加6mol/LHAc134ml,稀释至500ml

3H2O20g 

溶于适量水中,加6mol/LHAc134ml,稀释至500ml

4.5

3H2O32g 

溶于适量水中,加6mol/LHAc 

68ml,稀释至500ml

3H2O50g 

34ml,稀释至500ml

NH4Cl 

50g 

溶于适量水中,加15mol/LNH3·

H2O 

3.5ml,稀释至500ml

8.5

40g 

8.8ml,稀释至500ml

35g 

24ml,稀释至500ml

9.5

30g 

65ml,稀释至500ml

27g 

197ml,稀释至500ml

二、实验室常用标准溶液的配制及其标定

配制:

称取硝酸银17.5g,溶于1000ml水中,摇匀,溶液保存于棕色瓶中。

标定:

称取基准氯化钠(NaCl)0.2g(110℃高燥至恒重)(精确到0.0002g),加水50ml溶解,

再加2%淀粉(不含Cl-)溶液5ml,碳酸钙(CaCO3)0.1g与荧光黄指示剂8滴,用配制

好的硝酸银溶液滴定至溶液由黄绿色变成微红色。

即为终点。

计算:

CAgNO3=m(NaCl) 

V(AgNO3)×

58.44×

1000

C-----硝酸银溶液的浓度,mol/L;

m-----氯化钠的质量,g;

V----消耗硝酸银溶液的体积,ml;

58.44----每mol氯化钠的克数。

2、碘(CI2=0.1mol/L)标准溶液的配制

配制:

称取13g碘及35g碘化钾,溶于100ml水中,稀释至1000ml,摇匀,保存于棕色瓶中。

标定:

称取0.15g基准三氧化二砷于碘量瓶中,加4ml氢氧化钠(1mol/L)溶解,加50ml水,

2滴酚酞指示剂(10g/L),用硫酸(1mol/L)中和,加碳酸氢钠(NaHCO3)3g及3ml淀

粉(5g/L),用配制好的碘液滴定至溶液为浅蓝色,同时作空白试验。

CI2=m 

(V1-V2)×

0.04946

C---碘溶液的浓度,mol/L;

V1----试验组消耗碘溶液的体积,ml;

V2----空白组消耗碘溶液的体积,ml;

m----三氧化二砷的质量,g。

3、硫代硫酸钠(CNa2S2O3=0.1mol/L)标准溶液的配制

配制:

称取26gNa2S2O3·

5H2O或16gNa2S2O3,溶于1000ml水中,缓缓煮沸10min,冷却,

放置两周后过滤备用。

标定:

称取0.15g(精确到0.0001g)于120℃烘至恒重的基准重铬酸钾,置于碘量瓶中,溶于

25ml水,加2g碘化钾及20ml硫酸(20%),摇匀,于暗处放置10min,加150ml水,

用配制好的Na2S2O3(0.1mol/L)滴定,近终点时加3ml淀粉指示剂(5g/L),继续滴

定至溶液由蓝色变为亮绿色,同时作空白试验。

计算:

CNa2S2O3=m 

0.04903

C------Na2S2O3标准溶液的摩尔浓度,mol/L;

V1-----试验组消耗Na2S2O3溶液的体积,ml;

V2----空白组消耗Na2S2O3溶液的体积,ml;

m-----重铬酸钾的质量,g。

0.04903-------与1.00mlNa2S2O3标准溶液相当的以g表示的重铬酸钾的质量。

4、高氯酸(CHClO4=0.1mol/L)标准溶液的配制

量取8.5ml高氯酸,在搅拌下注入500ml冰乙酸中,混匀。

在室温下滴加20ml乙酸酐,

搅拌至溶液均匀。

冷却后用冰乙酸稀释至1000ml,摇匀。

称取0.6g于105-110℃烘至恒重的基准邻苯二甲酸氢钾(精确到0.0001g),置于干燥的

锥形瓶中,加入50ml冰乙酸,温热溶解。

加2-3滴结晶紫指示剂(5g/L),用配好的高

氯酸溶液滴定至溶液由紫色变为蓝色(微带紫色)。

(注:

本溶液使用前标定,标定高氯

酸标准溶液时的温度应与使用该标准溶液滴定时的温度相同。

计算:

C=m 

/V×

0.2042

C------高氯酸标准溶液的浓度,mol/L;

V-----消耗高氯酸溶液的体积,ml;

m-----邻苯二甲酸氢钾的质量,g。

5、盐酸(CHCl=0.1mol/L)标准溶液的配制

量取9.0ml盐酸,注入1000ml水,摇匀。

称取于270-300℃灼烧至恒重的基准无水碳酸钠0.2g(精确到0.0001g),溶于50ml水

中,加10滴溴甲酚绿-甲基红混合指示剂,用配好的盐酸溶液滴定至溶液由绿色变为暗

红色,煮沸2min,冷却后继续滴定至溶液再呈暗红色。

同时作空白。

 

C= 

0.05299

C-----盐酸标准溶液的浓度,mol/L;

m-----无水碳酸钠的质量,g;

V1----试验组消耗盐酸溶液的体积,ml;

V2----空白组消耗盐酸溶液的体积,ml;

6、乙二胺四乙酸二钠(CEDTA=0.1mol/L)标准溶液的配制

称取40g乙二胺四乙酸二钠,加热溶于1000ml水中,冷却,摇匀。

称取0.25g于800℃灼烧至恒重的基准氧化锌(精确到0.0001g),用少量水润湿,加2ml

盐酸溶液(20%)使样品溶解,加100ml水用氨水溶液(10%)中和至PH7-8,加10ml

氨-氯化铵缓冲溶液甲(PH≈10)及5滴铬黑体指示剂(5g/L),用配好的乙二胺四乙酸

二钠(0.1mol/L)溶液滴定至溶液由紫色变为纯蓝色。

C= 

0.08138

C-----乙二胺四乙酸二钠标准溶液的浓度,mol/L;

V1----试验组消耗乙二胺四乙酸二钠溶液的体积,ml;

V2----空白组消耗乙二胺四乙酸二钠溶液的体积,ml;

m----氧化锌的质量,g。

7、高锰酸钾(CK2MnO4=0.1mol/L)标准溶液的配制

称取3.3g高锰酸钾,溶于1050ml水中,缓缓煮沸15min,冷却后置于暗处保存两周,

过滤于干燥的棕色瓶中。

称取0.2g于105-110℃烘至恒重的基准草酸钠(精确到0.0001g),溶于100ml硫酸溶液

(8+92),用配好的高锰酸钾溶液滴定,近终点时加热至65℃,继续滴定至溶液呈粉红色

保持30秒,同时作空白。

CK2MnO4= 

0.06700

C-----高锰酸钾标准溶液的浓度,mol/L;

V1----试验组消耗高锰酸钾溶液的体积,ml;

V2----空白组消耗高锰酸钾溶液的体积,ml;

m----草酸钠的质量,g。

8、氢氧化钠(CNaOH=1mol/L)标准溶液的配制

称取100g氢氧化钠,溶于100ml水中,摇匀,注入聚乙烯容器中,密闭放置至溶液清

亮。

用塑料管虹吸取52ml上清液,注入1000ml无二氧化碳的水中,摇匀。

称取于105-110℃烘至恒重的基准邻苯二甲酸氢钾6g(精确到0.0001g),溶于80ml无

二氧化碳的水中,加2滴酚酞指示剂(10g/L),用配好的氢氧化钠溶液滴定至溶液呈粉

红色,同时作空白试验。

CNaOH=m 

/(V1-V2)×

C-----氢氧化钠标准溶液的浓度,mol/L;

V1----试验组消耗氢氧化钠溶液的体积,ml;

V2----空白组消耗氢氧化钠溶液的体积,ml;

m----邻苯二甲酸氢钾的质量,g。

实验:

称取试样1.5g(精确到0.0002g)于

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