营养琼脂培养基配方及使用说明Word文档格式.doc

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　　营养琼脂培养基用途：

　　营养琼脂培养基NA用于细菌总数测定、保存菌种及纯培养，也可用于消毒效果测定（GB/T4789.28-2003中4.7，GB/T4789.2-2003，GB15979-2002和GB15981-1995，ISO标准）。

　　营养琼脂培养基检测原理：

　　蛋白胨和牛肉膏粉提供氮源、维生素、氨基酸和碳源;

氯化钠能维持均衡的渗透压;

琼脂是培养基的凝固剂。

　　营养琼脂培养基配方（每升）：

　　蛋白胨10g

　　牛肉膏粉3g

　　氯化钠5g

　　琼脂15g

最终pH7.3±

0.2

　　培养基使用方法：

　　1、称取营养琼脂培养基NA33g，加入蒸馏水或去离子水1L，搅拌加热煮沸至完全溶解，分装三角瓶，121℃高压灭菌15min，备用。

　　2、（食品）以无菌操作称取检样25克（或25mL），放入含有225mL灭菌生理盐水或其他稀释液的玻璃三角瓶中（瓶内预置适当数量的玻璃珠），充分振摇，即为1：

10的均匀稀释液。

依次做1：

100，1：

1000……稀释液。

　　3、根据对样品污染情况的估计，选择2—3个合适的稀释度，分别在做10倍稀释的同时，吸取1mL稀释液于灭菌平皿中，每个稀释度做2个平皿。

　　4、稀释液移入平皿后应及时将凉至46℃左右的培养基注入平皿约15mL，并转动平皿使混合均匀，同时将营养琼脂培养基倾入加有1mL稀释液的灭菌平皿内作空白对照。

待琼脂凝固后，倒置于36±

1℃温箱中培养48±

2h。

　　5、观察结果。

　　6、菌落计数方法：

　　做平板菌落计数时，可用肉眼观察，必要时用放大镜检查，以防遗漏，在计下各平板的菌落数后，求出同稀释度的各平板平均菌落总数。