紫外光度法测定维生素C实验报告文档格式.doc
《紫外光度法测定维生素C实验报告文档格式.doc》由会员分享，可在线阅读，更多相关《紫外光度法测定维生素C实验报告文档格式.doc（5页珍藏版）》请在冰点文库上搜索。
利用紫外吸收光谱进行定量分析，要借助朗伯-比尔定律。
根据维生素C在稀硫酸溶液（维生素C水溶液在pH5～6之间稳定）中，在245nm波长处有最大吸收的特性，建立了紫外分光光度法测定维生素C片含量的方法。
三、实验仪器及试剂
实验仪器：
容量瓶（100ml、1000ml）、移液管（0.5ml、5ml）、烧杯、紫外分光光度计
实验用品：
98%浓硫酸（分析纯，1.84g/ml）、维生素C对照品系以原料药经105℃干燥至恒重（含量为99.7%）、维生素C片（2片）、去离子水
四、实验步骤
1.0.005mol·
L-1硫酸溶液的配制
用0.5ml移液管移取0.27ml98%浓硫酸放入事先已盛有蒸馏水的烧杯中，搅拌，冷却至室温后移入1000ml容量瓶，稀释至刻度，待用。
2.0.5g·
L-1对照品溶液的配制
精密称取105℃干燥至恒重的维生素C对照品50mg置100ml量瓶中，加0.005mol·
L-1硫酸溶液制成0.5g·
L-1对照品溶液。
3.维生素C对照品标准溶液的配制
用5ml移液管精密量取0.5g·
L-1对照品溶液0.5、1.0、1.5、2.0、2.5ml，分别置100ml量瓶中，用0.005mol·
L-1硫酸溶液稀释至刻度，摇匀，待用。
4.测定波长及标准曲线
以0.005mol·
L-1硫酸溶液为空白，测定维生素C在稀硫酸溶液中最大吸收波长，并在此波长处测定维生素C对照品标准溶液的吸光度，以浓度对吸光度作线性回归。
5.样品含量测定
取维生素C片2片，精密称定，研细，精密称取适量（0.06g，约相当于维生素C50mg）置100ml容量瓶中，加0.005mol·
L-1硫酸溶液适量，超声5min使溶解，再加0.005mol·
L-1硫酸溶液至刻度，摇匀，滤过，弃去初滤液，精密量取续滤液2.0ml置100ml量瓶中，加0.005mol·
L-1硫酸溶液至刻度，摇匀，在最大吸收波长处测定吸光度。
6.空白试验
模拟维生素C片处方比例，精密称取辅料适量置100ml量瓶中，与步骤5样品含量测定同法操作，在最大吸收波长处测定吸收度为0。
7.回收率试验
先测得2ml样品溶液的吸光度A1（C1），再取0.0125g/L的VC标液200μl，于2ml已测得吸光度A1的样品溶液中，再测得吸光度A2（C2）。
五、实验数据记录及处理
1.维生素的吸收波长
在紫外可见分光光度计上扫描测定VC标准样品的吸收光谱，结果显示VC在244nm波长处的吸光度值最大。
2.维生素C对照品标准曲线
标准VC浓度（g/L）
0.0025
0.0050
0.0075
0.0100
0.0125
Abs
0.1264
0.2663
0.4079
0.5462
0.6905
y=56.3240x-0.0150R=1.0000
3.样品中维生素C含量测定
样品mVC/g
0.0600
0.0580
0.5482
0.5426
0.5257
样品VC浓度（g/L）
0.0099
0.0096
样品中VC含量（%）
83.33
82.50
82.76
平均值（%）
82.86
RSD（%）
0.5147
4.回收率试验
1
2
3
A1
C1
加入V（0.0125g/L）/mL
0.2000
A2
0.6093
0.6016
0.5912
C2
0.0111
0.0109
0.0108
回收率（%）
95.42
92.21
102.32
平均回收率（%）
96.65
5.17
六、实验结果及讨论
1.维生素C还原性很强，在空气中易被氧化，在酸性介质中氧化作用减慢，水溶液在pH=5～6之间稳定，故本实验选用0.005mol·
L-1硫酸溶液（pH=5.2）为溶剂，维生素C稳定性好。
2.标准曲线R=1.0000，且测定的未知样品的吸光度均落在标准曲线有效的范围内，实验结果表明，维生素C在0.0025-0.0125g/L范围内与吸光度呈良好的线性关系。
3.由于对加标回收率的原理及概念模糊，导致实验在这一环节消耗较多的时间。
本实验测得维生素C的平均回收率为96.65%，相对标准偏差为5.17%。
4.利用紫外分光光度法测定维生素C片维生素C的含量，该法操作简便，快速，准确，所用试剂价格低廉、易得，适合维生素C片剂含量测定的快速分析。
升级会员 